检索结果-内蒙古大学图书馆

生态学报 2010年第4期30卷 958-968页

作者：石蕾严善春金虎孟昭军东北林业大学林学院林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室哈尔滨150040

为研究不同损伤因子及其不同损伤程度对落叶松游离氨基酸组分及其含量的影响,用剪叶和落叶松毛虫(Dendrolimussuperans)取食损伤兴安落叶松(Larixgmelinii)幼苗,使用HPLC柱前***衍生法测定针叶内游离氨基酸的组成及含量的变化。结果表明... 详细信息

为研究不同损伤因子及其不同损伤程度对落叶松游离氨基酸组分及其含量的影响,用剪叶和落叶松毛虫(Dendrolimussuperans)取食损伤兴安落叶松(Larixgmelinii)幼苗,使用HPLC柱前***衍生法测定针叶内游离氨基酸的组成及含量的变化。结果表明,松针中含有17种游离氨基酸,以苯丙氨酸含量最高,损伤15d后,剪叶4枝比对照增加36.6%,虫害4枝增加的百分率达到98.3%。剪叶4枝15d后及虫害4枝5d后,损伤25%与50%之间氨基酸总含量差异显著(P<0.05),且昆虫取食4枝25%、50%、75%后松针内游离氨基酸总含量的变化趋势与剪叶处理后总氨基酸含量的变化一致,均在处理10d后呈现较高的含量,虽虫害后的氨基酸总含量高于剪叶损伤后的总含量,但二者之间差异不显著。剪叶4枝、8枝、12枝3个损伤程度后针叶内的游离氨基酸含量无显著差异,说明剪叶4枝即能超过落叶松的耐受阈值,达到防御诱导效应。两种处理下多种游离氨基酸的含量均有下降,其中8种氨基酸含量存在显著差异(P<0.05),即丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、脯氨酸、半胱氨酸、赖氨酸和苯丙氨酸。表明人工模拟剪叶的损伤方式与虫害都可诱导松树氨基酸组分及含量的变化,而间接影响害虫的生长发育。

关键词：兴安落叶松游离氨基酸剪叶损伤昆虫取食

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西伯利亚蓼Tau类谷胱甘肽转移酶基因的克隆与表达分析

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农业生物技术学报 2009年第1期17卷 98-106页

作者：刘明坤刘关君阎秀峰刘昌财魏志刚刘桂丰杨传平东北林业大学林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室

用RACE技术从西伯利亚蓼(Polygonum sibiricum Laxm.)中克隆了谷胱甘肽转移酶(PsGSTU1)基因完整编码区cDNA序列,长度669 bp,编码222个氨基酸。经与谷胱甘肽转移酶家族其它成员的氨基酸序列比对和系统进化分析,初步确定PsGSTU1属于谷胱... 详细信息

用RACE技术从西伯利亚蓼(Polygonum sibiricum Laxm.)中克隆了谷胱甘肽转移酶(PsGSTU1)基因完整编码区cDNA序列,长度669 bp,编码222个氨基酸。经与谷胱甘肽转移酶家族其它成员的氨基酸序列比对和系统进化分析,初步确定PsGSTU1属于谷胱甘肽转移酶Tau家族。利用荧光定量RT-PCR分析表明,PsGSTU1在西伯利亚蓼的叶、茎和地下茎中均有表达,茎中表达量最高,叶和地下茎次之;3%NaHCO3胁迫后,此基因在叶和茎中的最大表达量出现在胁迫后48 h,而茎在72 h;去胁迫后,此基因在不同部位的表达量表现为:地下茎>叶>茎。将PsGSTU1完整的cDNA片段连接至pET28a质粒以构建原核表达载体,并导入大肠杆菌(Escherichia coli),经IPTG诱导后表达了分子量为26 kD的目的蛋白,表达PsGSTU1的大肠杆菌显著提高了耐受NaHCO3胁迫的能力。

关键词：西伯利亚蓼谷胱甘肽转移酶基因克隆 RT-PCR 表达分析

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外源激素与温度对花楸树种子萌发的影响

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植物生理学通讯 2009年第6期45卷 555-560页

作者：杨玲崔晓涛沈海龙东北林业大学林学院林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室哈尔滨150040

三种外源激素和萌发温度对花楸树种子萌发影响的研究结果表明,25℃(16h光/8h暗,10d)-5℃(暗110d)变温可极显著提高种子发芽率和种子发芽势,但极显著延迟发芽初始时间。200mg·L-16-BA溶液中吸胀2d后经历25℃-5℃变温可使种子发芽初... 详细信息

三种外源激素和萌发温度对花楸树种子萌发影响的研究结果表明,25℃(16h光/8h暗,10d)-5℃(暗110d)变温可极显著提高种子发芽率和种子发芽势,但极显著延迟发芽初始时间。200mg·L-16-BA溶液中吸胀2d后经历25℃-5℃变温可使种子发芽初始时间最短(33d),发芽率(62.25%)和发芽势(57.88%)最高。GA3或ABA与温度的结合处理对种子萌发的促进作用小于6-BA与温度的综合处理。

关键词：花楸树种子萌发外源激素温度

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人工干燥和冷层积过程中的花楸树种子中内源激素含量变化

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植物生理学通讯 2008年第4期44卷 682-688页

作者：杨玲沈海龙梁立东刘春苹东北林业大学林学院林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室哈尔滨150040

用高效液相色谱技术检测人工干燥和冷层积中花楸树种子中内源激素含量和平衡变化的结果表明:在人工干燥过程中种皮和胚内的GA3/ABA比值显著增高;2～5℃冷层积过程中的种皮内ABA含量显著下降,种皮和胚内各种促进生长类物质的相对含量(尤... 详细信息

用高效液相色谱技术检测人工干燥和冷层积中花楸树种子中内源激素含量和平衡变化的结果表明:在人工干燥过程中种皮和胚内的GA3/ABA比值显著增高;2～5℃冷层积过程中的种皮内ABA含量显著下降,种皮和胚内各种促进生长类物质的相对含量(尤其是GA3/ABA比值)明显增加。

关键词：花楸树种子休眠冷层积内源激素

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Expression analysis of ThGLP, a new germin-like protein gene, in Tamarix hispida

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Journal of Forestry Research 2010年第3期21卷 323-330,397,398页

作者：李慧玉姜静王珊刘菲菲东北林业大学林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室哈尔滨15040

Germin and Germin-like protein （GLP） have various proposed roles in plant developmental stages and stress- related processes. A novel GLP cDNA clone was isolated from a cDNA library of Tamarix hispida. ThGLP, coded 225aa, possesses conserved motif of plant germin and Germin-like protein. ThGLP belongs to true germin subfamily through phylogenetic analyses. Gene expression profiles in roots and leaves were evaluated using real-time quantitative RT-PCR. The results show that the gene was highly induced by drought, salt, low temperature, CdCl2 and abscisic acid treatments. Our results demonstrate that the ThGLP gene is expressed in leaves and roots, is involved in different abiotic stress re-sponses and controlled by an ABA-dependent signaling pathway.

关键词： germin-like protein (GLP) Tamarix hispida abiotic stress gene expression

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转星星草金属硫蛋白基因烟草的获得及其抗重金属镉能力分析

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植物生理学通讯 2009年第4期45卷 318-322页

作者：王雷曲跃军杜人杰吴丽丽王玉成姜廷波东北林业大学林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室哈尔滨150040

用农杆菌介导法将星星草金属硫蛋白基因(MT)转化烟草,PCR及PCR-Southern检测的结果表明,该基因已导入烟草中。Real-Time PCR检测显示,该基因在转基因后代中的转录水平高于非转基因植株。Cd2+胁迫下,转基因植株能够正常生长,鲜重、株高... 详细信息

用农杆菌介导法将星星草金属硫蛋白基因(MT)转化烟草,PCR及PCR-Southern检测的结果表明,该基因已导入烟草中。Real-Time PCR检测显示,该基因在转基因后代中的转录水平高于非转基因植株。Cd2+胁迫下,转基因植株能够正常生长,鲜重、株高、叶绿素含量、Cd2+含量和SOD活性均高于非转基因植株,表明MT基因的过量表达可提高转基因烟草的抗Cd2+能力。

关键词：烟草金属硫蛋白转基固

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烟草内源铁蛋白NtFer1和NtFer2的相互作用

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植物生理学通讯 2010年第8期46卷 824-828页

作者：周博如吴丽丽丁宝健姜廷波东北林业大学林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室哈尔滨150040

以2个烟草铁蛋白基因全长序列(NtFer1和NtFer2,GenBank登录号:AY083924和AY141105)为基础,利用细菌双杂交系统分析不同烟草铁蛋白亚基之间及相同铁蛋白亚基之间的互作关系,并利用Northern杂交分析2个铁蛋白基因的特异表达。结果表明,铁... 详细信息

以2个烟草铁蛋白基因全长序列(NtFer1和NtFer2,GenBank登录号:AY083924和AY141105)为基础,利用细菌双杂交系统分析不同烟草铁蛋白亚基之间及相同铁蛋白亚基之间的互作关系,并利用Northern杂交分析2个铁蛋白基因的特异表达。结果表明,铁蛋白基因NtFer1和NtFer2在叶片中均有表达,同时2种亚基之间存在很强的互作关系,说明在叶片中组成铁蛋白的24个亚基可能有3种类型,或来自单一的NtFer1亚基,或来自单一的NtFer2亚基,也可能来源于不同的铁蛋白亚基。在烟草根部组织中只有铁蛋白NtFer1基因大量表达,而NtFer2基因的表达非常微弱,所以根部的铁蛋白大分子可能由单一的铁蛋白NtFer1亚基聚合而成的。

关键词：烟草铁蛋白蛋白质互作基因表达

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簸箕柳×三蕊柳种特异性KASP标记开发及种间杂交子代鉴别

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林业科学 2024年第4期60卷 119-126页

作者：戴晓港魏铭辰林木遗传育种全国重点实验室、南方现代林业协同创新中心、林木遗传与生物技术教育部重点实验室、江苏省林木遗传和高效培育重点实验室、南京林业大学林学院南京210037

【目的】开发簸箕柳和三蕊柳种特异性KASP引物,为开展簸箕柳和三蕊柳杂交选育速生、抗虫新种质的真实性鉴定提供参考。【方法】利用簸箕柳和三蕊柳重测序数据,开展全基因组SNP位点分析,筛选出种特异性的SNP位点并设计KASP引物,利用SeqHu... 详细信息

【目的】开发簸箕柳和三蕊柳种特异性KASP引物,为开展簸箕柳和三蕊柳杂交选育速生、抗虫新种质的真实性鉴定提供参考。【方法】利用簸箕柳和三蕊柳重测序数据,开展全基因组SNP位点分析,筛选出种特异性的SNP位点并设计KASP引物,利用SeqHunter2检测设计引物在簸箕柳中的通用性,并利用簸箕柳和三蕊柳自然群体材料对合成的引物进行实验验证,筛选出簸箕柳和三蕊柳种特异性KASP引物,并对它们的杂交子代进行真实性鉴别。【结果】将三蕊柳和簸箕柳重测序的数据比对到三蕊柳基因组,共获得个6598144个SNPs。经过筛选,最终在簸箕柳中检测到674144个和三蕊柳相比为纯合突变的位点。从每条染色体上随机选取100个位点用于KASP引物设计,在1900个SNPs位点中,750个SNP位点可以成功设计出KASP引物。从每条染色体上选取2组,共选取38组引物,通过SeqHunter2检测得到11组引物在簸箕柳中是通用的。利用簸箕柳和三蕊柳自然群体DNA对合成的10组通用引物进行种内保守和种间差异性检测,获得4组在簸箕柳、三蕊柳和种间杂交子代中聚类明显的引物。引物Stri08_82809、Stri14_11602、Stri14_12274和Stri17_10731在簸箕柳自然群体中分别扩增出纯合G/G、T/T、A/A和T/T位点,在三蕊柳自然群体分别扩增出纯合A/A、C/C、G/G和C/C位点,而在真实杂交子代中分别扩增出G/A、T/C、A/G和T/C杂合位点。利用上述4组引物对簸箕柳×三蕊柳的杂交子代进行鉴定,发现在31个杂交子代中,29个个体扩增出杂合位点,说明同时遗传了2个亲本的特征位点,为真实的种间杂交子代。有2个个体扩增的位点为纯合且和母本相同,说明这2个子代为簸箕柳花粉污染的子代。【结论】本研究获得了簸箕柳和三蕊柳种间特异性KASP标记4组,可以准确快速的开展簸箕柳和三蕊柳种间杂交子代的真实性鉴别,为进一步簸箕柳和三蕊柳种间杂交及回交创制抗虫新品种提供了技术支持。

关键词：簸箕柳三蕊柳种间杂交物种特异性KASP引物种间杂交分子鉴别

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杨属派间5个种特异性InDel引物及在派间杂交子代鉴别中的应用

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林业科学 2024年第2期60卷 78-86页

作者：戴晓港韩峭子尹佟明林木遗传育种全国重点实验室、南方现代林业协同创新中心、林木遗传与生物技术教育部重点实验室、江苏省林木遗传和高效培育重点实验室、南京林业大学林学院南京210037

【目的】远缘杂交可以实现有利基因的聚合,是种质创新的重要手段。杨属有些派间杂交困难,且杂交子代从形态学难以区分,本研究开发杨属不同派间的特异性引物,为派间杂交创制新种质的真实性鉴定提供技术支撑。【方法】利用在美洲黑杨和小... 详细信息

【目的】远缘杂交可以实现有利基因的聚合,是种质创新的重要手段。杨属有些派间杂交困难,且杂交子代从形态学难以区分,本研究开发杨属不同派间的特异性引物,为派间杂交创制新种质的真实性鉴定提供技术支撑。【方法】利用在美洲黑杨和小叶杨中种特异性InDel位点设计引物,并利用SeqHunter2依次比对胡杨、山杨、小叶杨和大叶杨基因组,再用杨属5个派的自然群体材料进行种内保守及种间多态引物的试验验证,筛选出杨属不同派的特异性引物序列,对杨属不同派间杂交子代进行真实性鉴别。【结果】将从美洲黑杨基因组设计的5000对InDel引物依次分别比对胡杨、山杨、小叶杨和大叶杨基因组,最后筛选出341对引物在上述5个种中是通用的。从不同染色体上共选取48对引物并合成,利用5个树种各1个DNA检测得到43对引物是通用的,其中19对引物在不同种中扩增条带单一且存在差异。利用自然群体混合DNA对试验验证的19对通用引物进行种间多态性和种内保守性检测,初步获得4对多态性引物。最后再用自然群体DNA对这4对引物进行扩增检测,发现引物Chr12_4341229和Chr13_10582756在美洲黑杨、小叶杨、山杨、大叶杨和胡杨中均只能扩增出一个位点,引物Chr12_4341229扩增条带分别为148、152、113、152和159 bp,引物Chr13_10582756扩增条带分别为140、144、116、140和159 bp。利用上述2对引物对小胡杨2号、黑胡杨和黑小杨进行鉴定,发现所有杂交子代个体均能检测它们2个亲本的特征带。引物Chr12_4341229和Chr13_10582756一起使用,可以用于美洲黑杨、小叶杨、山杨、大叶杨和胡杨任意组合杂交子代的真实性鉴别。【结论】本研究获得了杨属5个派间的5个种的特异性InDel引物2对,可以有效地进行杨属不同派5个种之间任意组合种间杂交子代的真实性鉴别,为进一步开展杨树派间杂交创制新种质提供了技术支持。

关键词：杨属远缘杂交物种特异性引物种间杂交分子鉴别

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PdbSPL28基因过量表达提高山新杨对叶斑病的抗性

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林业科学 2024年第10期60卷 56-66页

作者：韩峭子陈文文陈赢男尹佟明林木遗传育种国家重点实验室现代南方林业协同创新中心林木遗传与生物技术教育部重点实验室江苏省林木遗传和高效培育重点实验室南京林业大学南京210037

【目的】SPL(SQUAMOSA promoter-binding protein-like)是植物特有的一类转录因子,对植物生长发育以及天然免疫反应至关重要。本研究通过在山新杨中过表达PdbSPL28基因,分析比较野生型和转基因山新杨在抗病方面的表型差异,探究PdbSPL28... 详细信息

【目的】SPL(SQUAMOSA promoter-binding protein-like)是植物特有的一类转录因子,对植物生长发育以及天然免疫反应至关重要。本研究通过在山新杨中过表达PdbSPL28基因,分析比较野生型和转基因山新杨在抗病方面的表型差异,探究PdbSPL28基因的生物学功能及其对杨树抗病性的影响,为深入解析该基因调控杨树抗病性的分子机制提供基础。【方法】利用同源克隆获得山新杨PdbSPL28基因完整ORF序列,并利用DNA人工合成技术对该基因ORF中的miR156作用位点进行序列改造,采用酶切、连接反应分别将改造前和改造后的PdbSPL28基因序列构建过表达载体;采用Gateway技术构建亚细胞定位载体,利用烟草叶片瞬时转化系统分析PdbSPL28蛋白亚细胞定位;利用农杆菌介导的叶盘转化法获得PdbSPL28基因过量表达的转基因山新杨,基于刺伤接种法和石蜡切片技术,观察野生型和转基因山新杨对2种间座壳属病原菌(Diaporthe nobilis和***)的抗性差异及叶片解剖结构变化并测定病情指数;制备病原菌***孢子悬浮液,接种野生型和2个过表达株系的离体叶片,在接种后不同时间点采集样品,通过液质联用方法检测茉莉酸含量变化。【结果】山新杨PdbSPL28基因ORF全长1341 bp,序列中含有1个miR156作用位点;PdbSPL28蛋白含有保守的SBP结构域,定位于细胞核。对PdbSPL28基因ORF中miR156作用位点改造后,成功获得6个该基因过量表达的转基因株系。与野生型相比,PdbSPL28过表达山新杨对2种间座壳属病原菌的抗性明显增强。茉莉酸测定结果显示:在接种前,PdbSPL28过表达株系叶片中茉莉酸含量高于WT;但在接种96 h时,过表达株系茉莉酸含量极显著低于WT。【结论】对miR156作用位点进行序列改造,可以提高获得PdbSPL28基因过量表达转基因山新杨的概率;PdbSPL28基因过表达可以提高山新杨对间座壳属真菌引起的叶斑病抗性,茉莉酸信号途径可能在过表达株系响应***侵染过程中发挥重要作用。

关键词：山新杨 SPL28基因过量表达叶斑病间座壳属

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