检索结果-内蒙古大学图书馆

基于试纸条核酸提取和重组聚合酶扩增技术的HPV 16型DNA纸基电化学发光快速检测方法

中国实验诊断学 2023年第9期27卷 1009-1015页

作者：陈钰任伟绮刘仲明王捷中国人民解放军南部战区总医院、基础医学实验室广东广州510010 广东省第二人民医院检验医学部广东广州510317

目的建立一种人乳头瘤病毒(HPV)高危16亚型快速、灵敏、特异的检测方法。方法采用前期构建的试纸条法提取样本HPV DNA,并以其为模板,使用电化学发光试剂(酯化钌)标记上游引物,生物素标记下游引物,进行重组聚合酶恒温扩增,通过亲和素化... 详细信息

目的建立一种人乳头瘤病毒(HPV)高危16亚型快速、灵敏、特异的检测方法。方法采用前期构建的试纸条法提取样本HPV DNA,并以其为模板,使用电化学发光试剂(酯化钌)标记上游引物,生物素标记下游引物,进行重组聚合酶恒温扩增,通过亲和素化的磁微球将生物素标记的扩增产物,在磁场的作用下富集,通过纸基电极-电化学发光检测技术,获得有酯化钌标记的待测物的浓度信息。结果酯化钌与上游引物以20∶1的摩尔比可以获得更高的标记效率和发光强度,该法最低检出限为50copies/mL,比实时荧光PCR的灵敏度高16倍;批内检测相对标准偏差低于5%,单个样本从核酸提取到获得扩增结果所需时间小于1h,具有较好的特异性、灵敏度和重复性。结论该法检测快速、灵敏、特异、操作简单,具有一定的临床应用价值。

关键词：人乳头瘤病毒纸基核酸提取重组聚合酶扩增电化学发光

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快速褪黑色素方法在免疫组织化学染色中的应用

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中国组织化学与细胞化学杂志 2021年第2期30卷 182-184页

作者：赖续文王蔚仝桂慧朱铭谊赖晃文王卓才张伟南部战区总医院病理科广州510010 南部战区总医院基础医学实验室广州510010

目的探讨在恶性黑色素瘤组织中如何快速褪除黑色素,便于进行免疫组织化学检测和观察。方法选取20例恶性黑色素瘤组织石蜡切片,分别应用0.5%高锰酸钾水浴法、0.25%高锰酸钾溶液滴入法、15%过氧化氢浸泡法和传统过氧化氢脱色法进行褪黑色... 详细信息

目的探讨在恶性黑色素瘤组织中如何快速褪除黑色素,便于进行免疫组织化学检测和观察。方法选取20例恶性黑色素瘤组织石蜡切片,分别应用0.5%高锰酸钾水浴法、0.25%高锰酸钾溶液滴入法、15%过氧化氢浸泡法和传统过氧化氢脱色法进行褪黑色素处理,处理过的切片分别进行免疫组织化学和HE染色,比较染色结果。结果以0.25%高锰酸钾溶液滴入法处理后的效果较为理想:HE染色显示切片完整,色素颗粒完全去除,组织形态和细胞形态清晰;免疫组织化学染色结果清晰易判读,具有较强的敏感性和特异性。结论0.25%高锰酸钾溶液滴入法可作为恶性黑色素瘤去除色素颗粒的有效方法。

关键词：免疫组织化学黑色素高锰酸钾草酸过氧化氢

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应用MHC肽四聚体技术检测类风湿性关节炎患者CCP抗原特异性T细胞及初步临床应用

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中国医药科学 2022年第19期12卷 38-41页

作者：房国祥虞伟江苏省常州市德安医院检验科江苏常州213000 东部战区总医院基础医学实验室江苏南京210000

目的应用MHC肽四聚体技术检测类风湿性关节炎(RA)患者的环瓜氨酸肽(CCP)抗原特异性T淋巴细胞(CCP/AST)。方法选取东部战区总医院2018年4—11月住院及门诊就诊的患者,包括RA组35例,疾病对照组19例,健康对照组30名,分离外周血淋巴细胞,使... 详细信息

目的应用MHC肽四聚体技术检测类风湿性关节炎(RA)患者的环瓜氨酸肽(CCP)抗原特异性T淋巴细胞(CCP/AST)。方法选取东部战区总医院2018年4—11月住院及门诊就诊的患者,包括RA组35例,疾病对照组19例,健康对照组30名,分离外周血淋巴细胞,使用流式细胞仪结合肽四聚体技术检测,用于特异性CCP/AST的研究。结果RA组患者的CD4+CD8-tetramer-CCP阳性细胞比率、CD4+CD8-tetramer-CCP阳性细胞比率与CD4+CD8-tetramer-hCLIP阳性细胞比率的差值(CCP/AST)均高于疾病对照组、健康对照组(P<0.05)。RA组中,抗CCP抗体阳性组的CD4+CD8-tetramer-CCP阳性细胞比率、CCP/AST均高于抗CCP抗体阴性组(P<0.05)。应用流式细胞仪结合肽四聚体技术检测的CCP/AST细胞比率用于诊断RA时ROC曲线下面积(AUC^(ROC))为0.823,95%可信区间为0.695~0.954。CCP/AST比率为0.63%时用于RA诊断的敏感度为0.788,特异性为0.882,达到最高的诊断效能。依据CCP/AST的细胞比率是否大于0.63%而将RA患者分为CCP/AST细胞比率非增高与增高两组,两组的肿痛关节数、破坏关节数、红细胞沉降率(ESR)及C反应蛋白(CRP)的数据差异无统计学意义(P>0.05),CCP/AST升高组的类风湿因子(RF)高于CCP/AST非升高组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论流式细胞仪结合肽四聚体技术可用于RA患者的CCP/AST研究,且方法敏感、特异、稳定,作为RA的潜在诊断用指标与传统指标联合应用可提高RA的临床诊断水平。

关键词：环瓜氨酸肽类风湿性关节炎四聚体染色抗原特异性T淋巴细胞

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异基因造血干细胞移植后慢性移植物抗宿主病相关肾病的长期随访报告并文献复习

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临床血液学杂志 2021年第5期34卷 358-362页

作者：罗正茂赖晃文李勇华南部战区总医院肾脏病科广州510010 南部战区总医院基础医学实验室南部战区总医院血液科

目的:探讨异基因造血干细胞移植术后慢性移植物抗宿主病(cGVHD)相关肾病的临床病理特征及远期临床结局。方法:回顾性分析3例异基因造血干细胞移植术后晚期并发肾病患者的临床、实验室、病理及长期随访资料。结果:例1临床表现为肾病综合... 详细信息

目的:探讨异基因造血干细胞移植术后慢性移植物抗宿主病(cGVHD)相关肾病的临床病理特征及远期临床结局。方法:回顾性分析3例异基因造血干细胞移植术后晚期并发肾病患者的临床、实验室、病理及长期随访资料。结果:例1临床表现为肾病综合征,肾脏病理表现为膜性肾病,符合典型cGVHD相关肾病表现。例2临床表现为血尿合并蛋白尿,肾脏病理证实为IgA肾病。例3主要表现为血尿,临床诊断出血性膀胱炎,肾脏病理为膜性肾病,提示存在隐匿性cGVHD相关肾病。3例患者对抗cGVHD治疗反应良好,长期随访均未进展为慢性肾功能衰竭。结论:异基因造血干细胞移植术后cGVHD可累及肾脏,临床表现可多样,肾脏病理有助于诊断及鉴别诊断,糖皮质激素为基础的联合方案治疗有效,预后大多良好。

关键词：异基因造血干细胞移植肾脏移植物抗宿主病

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干细胞在毛发再生中的应用进展

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中国美容医学 2023年第12期32卷 207-211页

作者：杨前李敏王刚刁波(综述) 刘跃平(审校) 中国人民解放军中部战区总医院基础医学实验室湖北武汉430000 中枢神经系统肿瘤发生与干预湖北省重点实验室湖北武汉430000

现代生活节奏快、压力大等原因,使得越来越多的人受到病理性脱发的困扰。目前脱发的治疗方法仍存在多种挑战,例如药物疗效、副作用、患者依从性、毛囊移植的不利结局等因素。近年来,再生医学和毛发组织工程领域的显著进步,为脱发的干细... 详细信息

现代生活节奏快、压力大等原因,使得越来越多的人受到病理性脱发的困扰。目前脱发的治疗方法仍存在多种挑战,例如药物疗效、副作用、患者依从性、毛囊移植的不利结局等因素。近年来,再生医学和毛发组织工程领域的显著进步,为脱发的干细胞疗法带来了新希望。基于干细胞的治疗方法,可以在实验室环境中产生毛发样结构或操纵其天然生态位中的细胞以重建毛囊。现阶段基于干细胞的脱发治疗可分为三类:干细胞移植、干细胞条件培养基的使用及干细胞外泌体的使用。本文主要总结使用基于干细胞的方法进行脱发治疗的最新进展。

关键词：毛囊干细胞生态位毛囊移植脱发

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CD1d通过信号调节蛋白α抑制核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3等炎性因子的表达

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中国组织工程研究 2022年第24期26卷 3826-3832页

作者：向明芝袁紫林王刚程洁刁波刘跃平武汉科技大学医学院湖北省武汉市430081 中部战区总医院基础医学实验室湖北省武汉市430070 中枢神经系统肿瘤发生与干预湖北省重点实验室湖北省武汉市430070 南方医科大学第一临床医学院广东省广州市510515

背景:核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)炎性因子被证实与多种炎症性疾病相关,调控其表达将成为治疗相关疾病的关键。目的:验证CD1d参与了调控NLRP3炎性因... 详细信息

背景:核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)炎性因子被证实与多种炎症性疾病相关,调控其表达将成为治疗相关疾病的关键。目的:验证CD1d参与了调控NLRP3炎性因子表达,并且进一步证明CD1d是通过信号调节蛋白α(signal regulatory protein-α,SIRPα)来达到调控目的。方法:①使用Flag-CD1d、HA-SIRPα慢病毒过表达载体转染293T细胞进行免疫共沉淀实验,验证CD1d与SIRPα的相互作用;②使用Flag-CD1d慢病毒过表达载体转染RAW264.7细胞,RT-qPCR检测NLRP3等基因表达;③使用HA-SIRPα慢病毒过表达载体转染RAW264.7细胞,在脂多糖刺激后RT-qPCR、Western blot检测NLRP3等基因和蛋白表达;④使用SIRPα慢病毒RNAi载体转染RAW264.7细胞,在脂多糖刺激后RT-qPCR、Western blot检测NLRP3等基因和蛋白表达。结果与结论:①免疫共沉淀实验证实CD1d与SIRPα存在相互作用;②过表达CD1d基因后,NLRP3、pro-IL-1β、pro-IL-18基因表达明显低于正常组(P<0.05);③在脂多糖刺激后过表达SIRPα组NLRP3基因表达明显低于正常组(P<0.05);pro-IL-1β、pro-IL-18基因表达与正常组差异无显著性意义(P>0.05);过表达SIRPα组p38、p-p38、NLRP3、pro-IL-1β、pro-IL-18蛋白表达明显低于SIRPα干扰组(P<0.01);④脂多糖刺激后干扰SIRPα组NLRP3、pro-IL-1β、pro-IL-18基因表达明显高于正常组(P<0.05);干扰SIRPα组p38、p-p38、NLRP3、pro-IL-1β、pro-IL-18蛋白表达明显高于过表达SIRPα组(P<0.01);⑤结果表明,CD1d与细胞膜上SIRPα形成复合物,通过SIRPα抑制下游p38MAPK/NF-κB通路,最终达到抑制NLRP3等炎性因子表达的目的。

关键词： CD1d 信号调节蛋白α NLRP3 炎性因子 p38MAPK NF-κB 通路

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转运RNA衍生的小RNA在乳腺癌中的作用及研究进展

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中国医刊 2023年第4期58卷 374-378页

作者：李小晴朱传东陈芳芳东部战区总医院检验医学研究所基础医学实验室江苏南京210002 南京中医药大学附属南京医院(南京市第二医院)肿瘤科江苏南京210003

乳腺癌是女性最常见恶性肿瘤之一,严重威胁患者的生命安全,探索乳腺癌的发病机制对乳腺癌的诊治至关重要。转运RNA衍生的小RNA(tRNA-derived small RNAs,tsRNAs)是近年来发现的由成熟tRNA或tRNA前体通过特殊的作用机制衍生而来的一类非... 详细信息

乳腺癌是女性最常见恶性肿瘤之一,严重威胁患者的生命安全,探索乳腺癌的发病机制对乳腺癌的诊治至关重要。转运RNA衍生的小RNA(tRNA-derived small RNAs,tsRNAs)是近年来发现的由成熟tRNA或tRNA前体通过特殊的作用机制衍生而来的一类非编码RNA。tsRNAs发挥生物学作用的主要途径为与蛋白质或信使RNA相互作用来抑制翻译,调控基因表达、细胞周期、染色质和表观遗传修饰等。tsRNAs与多种恶性肿瘤的发生、发展密切相关,基于此,本文将对tsRNAs在乳腺癌发生、发展中的作用及研究进展进行综述,以期为临床乳腺癌的诊断与治疗提供新方向。

关键词：转运RNA衍生的小RNA 乳腺癌诊断治疗生物标志物

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化学发光免疫分析技术和量子点免疫荧光组织化学检测新型冠状病毒特异性抗体及其应用评价

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华南国防医学杂志 2021年第9期35卷 630-634页

作者：刘莹刁波何泽民薛燕南黄前川丁进亚中部战区总医院检验科湖北武汉430070 中部战区总医院基础医学实验室湖北武汉430070

目的分别采用化学发光免疫分析技术(chemiluminescence immunoassay,CLIA)和量子点免疫荧光组织化学(quantum dot-based immunohistochemistry,QD-IHC)检测新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)特异性抗体免疫球蛋白M(immunoglobulin M,IgM)和免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG),比较并探讨其在新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)诊断、预防及控制中的应用价值。方法对234例COVID-19确诊、疑似和排除组患者分别用CLIA和QD-IHC法进行抗体检测,并进行统计分析。结果(1)两种方法检测SARS-CoV-2抗体在COVID-19患者中灵敏度、特异度和准确度较高,能满足临床需要。与核酸检测相比较,两种方法的一致性高。(2)SARS-CoV-2抗体与COVID-19的严重程度有一定的相关性。(3)间断观察9例确诊组患者发现,1例SARS-CoV-2抗体于发病100天内转阴;3例患者于100~180天内转阴。结论抗体检测能提高COVID-19患者的确诊率,适合作为COVID-19的初筛及疑似病例的辅助诊断,对于疾病的严重程度、转归、流行病学调查和疫苗应用的有效周期具有重要意义,CLIA优于QD-IHC法。

关键词：新型冠状病毒新型冠状病毒肺炎化学发光免疫分析技术量子点免疫荧光组织化学抗体

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腹腔穿刺引流对重症急性胰腺炎大鼠肠道TLR4表达的影响及意义

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解放军医学杂志 2020年第12期45卷 1215-1221页

作者：黄尚卿文艺王冰李帅原小惠孙红玉汤礼军西南交通大学医学院成都610031 西部战区总医院全军普通外科中心/四川省胰腺损伤与修复重点实验室成都610083 西部战区总医院基础医学实验室成都610083

目的探讨早期腹腔穿刺引流(APD)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肠道Toll样受体4(TLR4)表达的影响及意义。方法雄性SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、SAP组和APD组,每组15只。采用5%牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射法建立SAP大鼠模型,在此基础上于大... 详细信息

目的探讨早期腹腔穿刺引流(APD)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肠道Toll样受体4(TLR4)表达的影响及意义。方法雄性SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、SAP组和APD组,每组15只。采用5%牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射法建立SAP大鼠模型,在此基础上于大鼠右下腹置入引流管建立APD模型。建模后24h采集血样、小肠和胰腺组织,HE染色观察小肠组织和胰腺组织的病理学变化,采用全自动生化仪检测血清淀粉酶和脂肪酶活性,鲎试剂法检测血清内毒素水平,紫外比色法检测血清二胺氧化酶(DAO)活性,ELISA法检测小肠组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平以及血清D-乳酸水平,TUNEL法检测肠黏膜上皮细胞凋亡情况,RT-PCR检测小肠组织TLR4 mRNA的表达水平,免疫组化和Western blotting检测TLR4信号通路关键分子和凋亡相关蛋白的表达。结果与SAP组比较,APD组大鼠小肠和胰腺组织病理损伤明显减轻,病理评分明显降低(P<0.05),血清淀粉酶、脂肪酶和DAO活性以及TNF-α、IL-6、D-乳酸和内毒素水平也明显降低(P<0.05)。与SAP组比较,APD组小肠组织TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、核因子-κB(NF-κB)p65、TNF-α和IL-6的表达明显降低(P<0.05)。此外,APD组小肠黏膜上皮细胞凋亡指数、cleavedcaspase-3和Bax的表达较SAP组明显降低,Bcl-2的表达明显升高(P<0.05)。结论早期实施APD能显著降低SAP大鼠肠道TLR4的表达,抑制下游炎症信号通路的激活,进而减少肠黏膜上皮细胞凋亡的发生,发挥肠道保护作用。

关键词：重症急性胰腺炎腹腔穿刺引流肠道损伤 Toll样受体4

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胎盘间充质干细胞对重症急性胰腺炎大鼠肺损伤的保护作用及机制

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解放军医学杂志 2020年第12期45卷 1222-1229页

作者：李帅黄启林王冰原小惠孙红玉汤礼军西南交通大学医学院成都610031 西部战区总医院全军普外科中心/四川省胰腺损伤与修复重点实验室成都610083 西部战区总医院基础医学实验室成都610083

目的探讨胎盘间充质干细胞(P-MSCs)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺损伤的保护作用及机制。方法健康成年雄性SD大鼠36只,采用随机数字表法分为对照组、SAP组与P-MSCs组,每组12只。采用4%牛磺胆酸钠胆胰管逆行注射法构建SAP大鼠模型。造模后... 详细信息

目的探讨胎盘间充质干细胞(P-MSCs)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺损伤的保护作用及机制。方法健康成年雄性SD大鼠36只,采用随机数字表法分为对照组、SAP组与P-MSCs组,每组12只。采用4%牛磺胆酸钠胆胰管逆行注射法构建SAP大鼠模型。造模后6 h,经尾静脉注射P-MSCs(1×106个/100 g)。P-MSCs输注后12 h和24 h,处死大鼠,收集血清、胰腺组织及肺组织。测定肺湿干重比,显微镜下计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中中性粒细胞、白细胞和巨噬细胞数;HE染色评估胰腺组织、肺组织损伤程度并进行病理评分;ELISA法测定血清炎性因子、淀粉酶、脂肪酶浓度;采用髓过氧化物酶(MPO)检测试剂盒测定胰腺组织与肺组织MPO活性;RT-qPCR检测肺组织中TNF-α、IL-1βmRNA的表达水平;免疫荧光染色观察肺巨噬细胞极化情况。结果与SAP组比较,P-MSCs组大鼠肺湿干重比明显下降,BALF中中性粒细胞、白细胞与巨噬细胞数均明显减少(P<0.001)。HE染色结果显示,与SAP组比较,P-MSCs组胰腺组织、肺组织病理损伤明显减轻(P<0.001)。ELISA检测结果显示,与SAP组比较,P-MSCs组血清淀粉酶、脂肪酶浓度以及IL-1β、IL-6、TNF-α水平明显降低,IL-10水平明显升高(P<0.001)。MPO活性测定结果显示,与SAP组比较,P-MSCs组胰腺组织与肺组织MPO活性均明显降低(P<0.001)。RT-qPCR检测结果显示,与SAP组比较,P-MSCs组肺组织中TNF-α、IL-1βmRNA表达水平明显降低(P<0.001)。免疫荧光染色结果显示,P-MSCs组肺组织中M1巨噬细胞数明显减少,M2巨噬细胞数明显增加。结论P-MSCs可减轻SAP大鼠肺组织炎性损伤,其保护机制可能与诱导肺巨噬细胞向M2型极化有关。

关键词：间充质干细胞重症急性胰腺炎肺损伤肺巨噬细胞极化

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