检索结果-内蒙古大学图书馆

p-AKT-mTOR-P70S6K信号通路在多倍体子宫颈癌细胞放射治疗中的作用

肿瘤研究与临床 2024年第8期36卷 569-575页

作者：周丽阎英孟繁杰赵松刘硕孙凌燕于卉影北部战区总医院基础医学实验室沈阳110003 北部战区总医院放疗科沈阳110016

目的探讨p-AKT-mTOR-P70S6K信号通路在多倍体子宫颈癌细胞放射治疗中的作用。方法取人子宫颈癌HeLa细胞株,使用7 Gy的6 MV X线照射HeLa细胞,诱导第5天后用倒置显微镜观察细胞的形态变化。将细胞分为7 Gy组(经7 Gy X线照射且未经转染的... 详细信息

目的探讨p-AKT-mTOR-P70S6K信号通路在多倍体子宫颈癌细胞放射治疗中的作用。方法取人子宫颈癌HeLa细胞株,使用7 Gy的6 MV X线照射HeLa细胞,诱导第5天后用倒置显微镜观察细胞的形态变化。将细胞分为7 Gy组(经7 Gy X线照射且未经转染的多倍体Hela细胞)和对照组(未经放射诱导且未经转染的Hela细胞)。另外分别将载有pcDNA3阴性对照序列的质粒和载有pcDNA3-TT-AKT序列的质粒转染至HeLa细胞中,转染48 h后经7 Gy X线照射诱导,记为pcDNA3+7 Gy组、pcDNA3-TT-AKT+7 Gy组。采用CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期,线粒体膜电位法检测细胞凋亡能力,蛋白印迹法检测细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡和细胞自噬相关蛋白的相对表达情况。结果7 Gy组HeLa细胞在放射诱导第5天大部分正常细胞已死亡,少部分存活的细胞体积增大,细胞核呈多个核状态。蛋白印迹法检测结果显示,7 Gy组HeLa细胞p-AKT、p-mTOR、p-P70S6K的相对表达水平均低于对照组(均P<0.05)。CCK-8法检测结果显示,pcDNA3+7 Gy组和pcDNA3-TT-AKT+7 Gy组在培养48、72 h后,吸光度(A)值分别为0.45±0.06、0.65±0.06和0.75±0.05、1.05±0.02,差异均有统计学意义(均P<0.05),pcDNA3-TT-AKT+7 Gy组均高于pcDNA3+7 Gy组。流式细胞术检测结果显示,pcDNA3+7 Gy组、pcDNA3-TT-AKT+7 Gy组G_(0)/G_(1)期、G_(2)/M期细胞比例分别为(29.2±3.6)%、(26.7±1.7)%和(29.6±1.6)%、(30.3±0.6)%,差异均无统计学意义(均P>0.05);S期细胞比例分别为(10.2±0.9)%、(14.6±1.5)%,差异有统计学意义(t=2.86,P=0.043)。线粒体膜电位法检测显示,pcDNA3+7 Gy组、pcDNA3-TT-AKT+7 Gy组的绿色荧光比例分别为(23.1±2.5)%、(14.3±1.9)%,差异有统计学意义(t=4.82,P=0.009)。蛋白质印迹法检测结果显示,pcDNA3-TT-AKT+7 Gy组p-cdc25c(Ser216)的相对表达水平高于pcDNA3+7 Gy组(P<0.001);Bak、LC3Ⅱ/Ⅰ的相对表达水平均低于pcDNA3+7 Gy组(均P<0.05)。结论p-AKT-mTOR-P70S6K信号通路可能参与调控放射诱导的多倍体HeLa细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡。

关键词：宫颈肿瘤多倍性细胞增殖细胞周期细胞凋亡

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间充质干细胞来源的外泌体在放射性肺损伤中的保护作用

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中国辐射卫生 2025年第1期34卷 13-20页

作者：王丽丽杨紫恩欧阳明玥邢思宁赵松于卉影北部战区总医院基础医学实验室辽宁沈阳110016

目的探究间充质干细胞(MSCs)来源的外泌体在放射性肺损伤(RILI)中的作用及相关作用机制。方法分离培养人脐带来源的MSCs,提取并鉴定MSCs来源的外泌体(exosomes,EXO)。18只SD雄性大鼠随机分为Control组、RILI组、RILI+外泌体组(EXO组)... 详细信息

目的探究间充质干细胞(MSCs)来源的外泌体在放射性肺损伤(RILI)中的作用及相关作用机制。方法分离培养人脐带来源的MSCs,提取并鉴定MSCs来源的外泌体(exosomes,EXO)。18只SD雄性大鼠随机分为Control组、RILI组、RILI+外泌体组(EXO组),每组6只。除Control组外,其余各组接受单次X射线照射右肺30 Gy。照射后立即采用尾静脉推注方式给予EXO组2×10^(9)个/kg外泌体;Control组和RILI组给予等体积生理盐水。照射后8周,处死大鼠,收集肺组织和外周静脉血。HE和Masson染色检测肺组织病理和纤维化改变,ELISA法检测血清炎性因子IL-6、IFN-γ、TNF-α、IL-10水平,RT-qPCR检测肺组织中IL-1β、IL-6、Cdh1、Col1a1 mRNA表达,免疫组织化学染色检测肺组织中Vimentin和TGF-β1表达,Western blot检测肺组织中AMPK、p-AMPK、TGF-β1蛋白表达水平。结果成功提取并鉴定了MSCs与外泌体。与RILI组相比,EXO组肺组织炎症病理改变和胶原纤维沉积明显减轻;血清炎性因子IL-6、INF-γ、TNF-α水平显著降低(P <0.05),抗炎因子IL-10水平显著升高(P <0.01);肺组织IL-1β、IL-6和Col1a1 mRNA表达明显降低(P <0.05或P <0.01),Cdh1 mRNA表达明显增加(P <0.05或P <0.01);肺组织Vimentin和TGF-β1蛋白表达明显减少,p-AMPK蛋白表达明显升高(P <0.05)。结论 MSCs来源的外泌体可能通过抑制炎症反应及调节AMPK/TGF-β1信号通路介导的EMT减轻RILI。

关键词：放射性肺损伤间充质干细胞外泌体 AMPK/TGF-β1信号通路

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放射诱导的多倍体结肠癌SW1116细胞及其子代细胞增殖、侵袭和迁移能力的改变及相关机制研究

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肿瘤研究与临床 2023年第3期35卷 161-166页

作者：周丽阎英孟繁杰赵松刘硕孙凌燕于卉影北部战区总医院基础医学实验室沈阳110016 北部战区总医院放疗科沈阳110016

目的探讨放射诱导的多倍体结肠癌SW1116细胞及其子代细胞增殖、迁移和侵袭的相关特性。方法采用含10%胎牛血清的Leibovitz's L-15培养液常规培养结肠癌SW1116细胞。采用7 Gy X线照射对数生长期的SW1116细胞,分别在放射诱导后第3、5... 详细信息

目的探讨放射诱导的多倍体结肠癌SW1116细胞及其子代细胞增殖、迁移和侵袭的相关特性。方法采用含10%胎牛血清的Leibovitz's L-15培养液常规培养结肠癌SW1116细胞。采用7 Gy X线照射对数生长期的SW1116细胞,分别在放射诱导后第3、5、10、19天用倒置显微镜观察细胞形态变化。根据细胞形态变化,将放射诱导后第3天的细胞为多倍体肿瘤细胞(PGCC)组,以第19天的细胞为PGCC子代组,以未经放射诱导的SW1116细胞作为对照组。采用流式细胞术检测对照组、PGCC组、PGCC子代组细胞倍性,CCK-8法检测3组细胞增殖能力,分别采用细胞划痕实验和Transwell实验检测3组细胞迁移和侵袭能力,蛋白质印迹法检测3组细胞周期、增殖相关蛋白和上皮间质转化(EMT)相关标志物N-钙黏蛋白(N-cad)的表达情况。结果在放射诱导后第3、5、10天SW1116细胞体积逐渐变大,在第19天细胞体积恢复正常。对照组、PGCC组、PGCC子代组的多倍体(DNA含量>4N)细胞亚群比例分别为(2.3±1.1)%、(23.1±8.1)%、(3.2±0.5)%,差异有统计学意义(F=18.52,P<0.05),其中,PGCC组多倍体细胞亚群比例高于对照组(t=5.38,P<0.01),PGCC子代组多倍体细胞亚群比例与对照组间差异无统计学意义(t=0.22,P>0.05)。培养72 h后,对照组、PGCC组、PGCC子代组细胞增殖率分别为(100.0±4.1)%、(73.5±0.7)%、(123.9±3.5)%,差异有统计学意义(F=190.27,P<0.001)。细胞划痕48 h后,对照组、PGCC组、PGCC子代组划痕愈合率分别为(38.0±2.7)%、(41.5±4.0)%、(63.7±4.2)%,差异有统计学意义(F=43.05,P<0.001)。培养24 h后,对照组、PGCC组、PGCC子代组侵袭细胞数分别为(12.9±1.2)个、(3.4±0.6)个、(23.7±1.5)个,差异有统计学意义(F=63.64,P<0.001)。PGCC组中细胞周期相关蛋白P-cdc25c、cdc25c、cdc2相对表达量均低于对照组(均P<0.05),转录因子相关蛋白E2F-2、E2F-3和EMT标志物N-cad相对表达量亦均较对照组下调(P<0.05);PGCC子代组中P-cdc25c、cdc25c、cdc2、E2F-2、E2F-3、N-cad蛋白相对表达量均高于对照组(均P<0.05)。结论放射线能够诱导结肠癌SW1116细胞产生多倍体,可能再经不对称有丝分裂产生子代细胞并获得新生,进而促进结肠癌的复发和转移。

关键词：结肠肿瘤细胞增殖细胞运动肿瘤侵润多倍性上皮细胞-间充质细胞转换

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外周血淋巴细胞亚群在儿童EB病毒感染中的变化及临床意义

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中国免疫学杂志 2023年第10期39卷 2217-2221,2226页

作者：杨冀魏兵于颖于卉影(指导) 北部战区总医院基础医学实验室沈阳110016 北部战区总医院新生儿科沈阳110016

目的:探讨外周血淋巴细胞亚群在儿童EB病毒(EBV)感染诊断中的临床意义。方法:选取EBV感染患儿48例作为观察组,另选取急性支气管肺炎患儿23例和肺炎支原体(MP)感染患儿48例作为对照组。流式细胞术检测患儿外周血淋巴细胞亚群,并收集患儿... 详细信息

目的:探讨外周血淋巴细胞亚群在儿童EB病毒(EBV)感染诊断中的临床意义。方法:选取EBV感染患儿48例作为观察组,另选取急性支气管肺炎患儿23例和肺炎支原体(MP)感染患儿48例作为对照组。流式细胞术检测患儿外周血淋巴细胞亚群,并收集患儿临床资料。比较观察组与对照组、观察组传染性单核细胞增多症(IM)与非IM、肝功能异常与肝功能正常患儿淋巴细胞亚群变化。线性相关分析法分析观察组淋巴细胞亚群与血清EBV-DNA载量的相关性。受试者工作特征(ROC)曲线评估淋巴细胞亚群的诊断效能。结果:EBV感染患儿外周血淋巴细胞数量、T细胞数量和比例、CD8^(+)T细胞数量和比例升高(均P<0.05),CD4^(+)T细胞比例、B细胞比例及CD4^(+)/CD8^(+)降低(均P<0.05)。EBV感染患儿外周血淋巴细胞改变与EBV-DNA载量相关。与非IM和肝功能正常患儿相比,IM和肝功能异常患儿淋巴细胞数量(均P<0.001)、T细胞数量(均P<0.001)和比例(P<0.001;P=0.002)、CD8+T细胞数量(均P<0.001)和比例(均P<0.001)、NK细胞数量(P<0.001;P=0.001)升高更为显著,而B细胞数量(P<0.001;P=0.049)和比例(均P<0.001)及CD4^(+)/CD8^(+)(P=0.001;P<0.001)降低更为显著。淋巴细胞亚群诊断效能分析显示,外周血淋巴细胞计数、CD3^(+)T细胞计数、CD3^(+)CD8^(+)T细胞计数、NK细胞计数、CD3^(+)T细胞比例和CD3^(+)CD8^(+)T细胞比例对EBV感染具有较好的检验效能(AUC分别为0.750、0.773、0.826、0.689、0.718和0.779,均P<0.05)。结论:淋巴细胞亚群能够反映机体免疫状态,对EBV感染诊断及疾病进展和预后评估有重要意义。

关键词： EB病毒淋巴细胞亚群 EBV-DNA载量传染性单核细胞增多症肝功能

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MSCs来源的外泌体在放射性肺损伤中的保护作用

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中国辐射卫生 2024年

作者：王丽丽杨紫恩欧阳明玥邢思宁赵松于卉影北部战区总医院基础医学实验室

[目的] 探究间充质干细胞（MSCs）来源的外泌体在放射性肺损伤（RILI）中的保护作用。[方法] 分离培养人脐带来源的MSCs，提取并鉴定MSCs来源的外泌体（exosomes，EXO）。18只SD雄性大鼠随机分为Control组、RILI组、RILI+外泌体组（EXO... 详细信息

[目的] 探究间充质干细胞（MSCs）来源的外泌体在放射性肺损伤（RILI）中的保护作用。[方法] 分离培养人脐带来源的MSCs，提取并鉴定MSCs来源的外泌体（exosomes，EXO）。18只SD雄性大鼠随机分为Control组、RILI组、RILI+外泌体组（EXO组），每组6只。除Control组外，其余各组接受单次X射线照射右肺30Gy。照射后立即采用尾静脉推注方式给予EXO组2×109个/kg外泌体；Control组和RILI组给予等体积生理盐水。照射后8周，处死大鼠，收集肺组织和外周静脉血。HE和Masson染色检测肺组织病理和纤维化改变，ELISA法检测血清炎性因子IL-6、IFN-γ、TNF-α、IL-10水平，RT-qPCR检测肺组织中IL-1β、IL-6、Cdh1、Col1a1 mRNA表达，免疫组织化学染色检测肺组织中Vimentin和TGF-β1表达，Western blot检测肺组织中AMPK、p-AMPK、TGF-β1蛋白表达水平。[结果] 成功提取并鉴定了MSCs与外泌体。与RILI组相比，EXO组肺组织炎症病理改变和胶原纤维沉积明显减轻；血清炎性因子IL-6、INF-γ、TNF-α水平显著降低（P<0.05），抗炎因子IL-10水平显著升高（P<0.01）；肺组织IL-1β、IL-6和Col1a1 mRNA表达明显降低（P<0.05或P<0.01），Cdh1 mRNA表达明显增加（P<0.05或P<0.01）；肺组织Vimentin和TGF-β1蛋白表达明显减少，p-AMPK蛋白表达明显升高（P<0.05）。[结论] MSCs来源的外泌体可能通过抑制炎症反应及调节AMPK / TGF-β1信号通路介导的EMT减轻RILI。

关键词：放射性肺损伤间充质干细胞外泌体 AMPK/TGF-β1信号通路

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人脐带间充质干细胞及其条件培养液对非小细胞肺癌多倍体A549细胞增殖、迁移和凋亡的影响

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肿瘤研究与临床 2022年第1期34卷 8-14页

作者：欧阳明玥王丽丽邢思宁赵松刘硕于卉影北部战区总医院基础医学实验室沈阳110016

目的探讨人脐带间充质干细胞(hUC‑MSC)及其条件培养液对人非小细胞肺癌多倍体A549细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法取对数生长期的A549细胞,采用1μmol/L多西他赛诱导24 h后,更换为含10%胎牛血清的DMEM/F12培养液继续培养3 d,建立多倍... 详细信息

目的探讨人脐带间充质干细胞(hUC‑MSC)及其条件培养液对人非小细胞肺癌多倍体A549细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法取对数生长期的A549细胞,采用1μmol/L多西他赛诱导24 h后,更换为含10%胎牛血清的DMEM/F12培养液继续培养3 d,建立多倍体A549细胞模型。分离与培养hUC‑MSC,制备hUC‑MSC条件培养液。正常培养的多倍体A549细胞作为对照组;条件培养液培养的多倍体A549细胞为条件培养液组;hUC‑MSC与多倍体A549细胞共培养,细胞总数比分别为2∶1(MSC 1组)和5∶1(MSC 2组)。各组细胞继续培养48 h或72 h。流式细胞术检测多倍体A549细胞增殖和凋亡情况,Transwell实验检测细胞迁移能力,蛋白质印迹法检测迁移和凋亡相关蛋白的表达情况。结果成功建立多倍体A549细胞模型,分离培养出hUC‑MSC。流式细胞术检测细胞增殖结果示,培养48 h时对照组、条件培养液组、MSC 1组、MSC 2组平均荧光强度分别为1695±305、2020±85、1259±35、1356±33,差异有统计学意义(F=14.00,P<0.05);72 h时分别为1052±77、1309±24、864±201、1103±237,差异无统计学意义(F=3.90,P>0.05)。Transwell实验结果显示,培养48 h时对照组、条件培养液组、MSC 1组、MSC 2组迁移细胞数分别为(52±9)个、(57±12)个、(68±8)个、(75±11)个,差异有统计学意义(F=32.16,P<0.05);各实验组迁移细胞数均高于对照组(均P<0.05)。对照组、条件培养液组、MSC 1组、MSC 2组凋亡细胞比例分别为(15.53±4.27)%、(13.77±1.75)%、(3.60±0.50)%、(2.33±0.06)%,差异有统计学意义(F=182.36,P<0.05);条件培养液组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);MSC 1组和MSC 2组分别与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。蛋白质印迹法检测结果显示,与对照组比较,条件培养液组、MSC 1组和MSC 2组中迁移相关蛋白基质金属蛋白酶9(MMP‑9)表达上调,促凋亡蛋白bax表达下调,抗凋亡蛋白bcl‑xL表达上调。结论hUC‑MSC可提高多倍体A549细胞的迁移和抗凋亡能力,在化疗损伤修复过程中hUC‑MSC可能会影响肿瘤细胞的存活。

关键词：间质干细胞培养液,条件性癌,非小细胞肺细胞增殖细胞凋亡

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3D培养的非小细胞肺癌多倍体巨细胞模型构建及其生物学特性的研究

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中国临床实用医学 2024年第4期15卷 46-52页

作者：孙佳欧阳明玥赵松王丽丽于卉影北部战区总医院基础医学实验室沈阳110016

目的探索三维(3D)人非小细胞肺癌多倍体巨细胞与二维(2D)模型的基因表达差异。方法人非小细胞肺癌细胞系NCI-H1299购自中国科学院上海细胞库。培养非小细胞肺癌NCl-H1299细胞球体,加入多西紫杉醇(Doc)2.5μmol/L、5.0μmol/L、10.0μmo... 详细信息

目的探索三维(3D)人非小细胞肺癌多倍体巨细胞与二维(2D)模型的基因表达差异。方法人非小细胞肺癌细胞系NCI-H1299购自中国科学院上海细胞库。培养非小细胞肺癌NCl-H1299细胞球体,加入多西紫杉醇(Doc)2.5μmol/L、5.0μmol/L、10.0μmol/L诱导,24 h后取出药物继续在新鲜培养基中培养72 h,收集细胞,另设未加药组作为对照组。Hochest染色观察细胞核的变化,活-死细胞染色试剂盒观察细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞倍性,RT-PCR检测上皮间充质转化相关基因以及干性相关基因的表达差异。结果3D培养的NCl-H1299细胞经Doc处理后细胞核增大,Calcein AM/PI染色显示Doc处理组细胞的死亡情况与加药浓度成正相关。5μmol/L组细胞多倍体细胞比例(35.2±5.88)明显高于对照组(17.26±2.26),3D培养的Doc处理组的早期凋亡[(9.06±1.24)%]低于对照组[(16.2±1.82)%],晚期凋亡[(19.73±1.98)%]低于对照组[(26.13±1.36)%],2D培养的Doc处理组早期凋亡[(23.96±1.82)%]高于对照组[(0.94±0.41)%],晚期凋亡[(23.91±0.96)%]高于对照组[(2.66±0.84)%],差异均有统计学意义(P<0.05)。3D多倍体肿瘤巨细胞模型上皮间质转化相关基因相较2D模型表达降低,3D培养细胞干性相关基因经Doc处理后与在2D培养中趋势相反。结论本研究成功构建了非小细胞肺癌多倍体巨细胞3D培养模型,并证明其在上皮间充质转化与干性相关基因表达与2D培养模型上有一定的差异,该模型可更好地模拟体内肿瘤的发展变化。

关键词：非小细胞肺癌 3D细胞培养细胞球体多倍体肿瘤巨细胞

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人脐带间充质干细胞和脂肪间充质干细胞对淋巴细胞亚群增殖和免疫调节作用的研究

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中国临床实用医学 2024年第4期15卷 53-58页

作者：刘军德杨冀宋爽于颖邢思宁于卉影北部战区总医院基础医学实验室沈阳110016

目的探讨人脐带间充质干细胞(UC-MSCs)和人脂肪间充质干细胞(ADSCs)对人外周血单个核细胞(PBMCs)的免疫调节作用。方法PBMCs来源于北部战区总医院基础医学实验室临床检测标本健康人外周血,ADSCs来源于北部战区总医院整形科行吸脂术后产... 详细信息

目的探讨人脐带间充质干细胞(UC-MSCs)和人脂肪间充质干细胞(ADSCs)对人外周血单个核细胞(PBMCs)的免疫调节作用。方法PBMCs来源于北部战区总医院基础医学实验室临床检测标本健康人外周血,ADSCs来源于北部战区总医院整形科行吸脂术后产生的废弃脂肪黏液,UC-MSCs来源于北部战区总医院妇产科健康产妇。分别采用种植法和酶消化法从人脐带和吸脂黏液中分离出UC-MSCs和ADSCs,培养至第3代,分别对两种MSCs进行表型鉴定和诱导分化。CFSE标记PBMCs,分为对照组(单独培养PBMC s)、PBMCs+UC-MSCs组、PBMCs+ADSCs组,通过流式细胞术检测淋巴细胞的增殖情况,并检测辅助性T细胞(Th)以及调节性T细胞(Treg)的表达变化。结果ADSCs抑制淋巴细胞的增殖能力比UC-MSCs强。UC-MSCs抑制Th1和Th17,增强Th2细胞亚群,ADSCs在与PBMCs共培养中也出现了抑制Th1和Th17,增强Th2细胞亚群的趋势。同时,UC-MSCs促进Treg的生成比ADSCs强。结论UC-MSCs比ADSCs具有更强的免疫抑制作用,抑制Th1和Th17,促进Th2和Treg的表达。

关键词：免疫调节间充质干细胞脐带间充质干细胞脂肪间充质干细胞外周血单个核细胞淋巴细胞亚群

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多西他赛诱导的非小细胞肺癌NCI-H1299多倍体肿瘤巨细胞衰老、干性和再增殖的特征研究

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国际肿瘤学杂志 2024年第11期51卷 673-677页

作者：赵松王丽丽欧阳明玥邢思宁杨紫恩于卉影北部战区总医院基础医学实验室沈阳110000

目的探讨多西他赛(Doc)诱导的非小细胞肺癌多倍体肿瘤巨细胞细胞衰老、肿瘤干细胞和细胞增殖特征,分析多倍体肿瘤巨细胞在肿瘤复发中的潜在作用。方法二甲基亚砜(DMSO)或100 nmol/L Doc处理非小细胞肺癌NCI-H1299细胞24 h,更换新鲜的完... 详细信息

目的探讨多西他赛(Doc)诱导的非小细胞肺癌多倍体肿瘤巨细胞细胞衰老、肿瘤干细胞和细胞增殖特征,分析多倍体肿瘤巨细胞在肿瘤复发中的潜在作用。方法二甲基亚砜(DMSO)或100 nmol/L Doc处理非小细胞肺癌NCI-H1299细胞24 h,更换新鲜的完全培养基继续培养3 d,分别记为对照组和Doc组。显微镜观察细胞生长状态,免疫荧光染色检测细胞核形态,流式细胞术检测DNA含量,台盼蓝染色统计细胞密度,衰老相关的β-半乳糖苷酶染色检测β-半乳糖苷酶活性,实时荧光定量PCR检测转录因子Krüppel样因子4(KLF4)和NANOG的mRNA表达水平,Doc组细胞长期培养观察多倍体肿瘤巨细胞生长情况。结果Doc处理NCI-H1299后,细胞体积变大,细胞核体积变大。Doc组多倍体百分比为45.80%±1.73%,明显高于对照组的4.83%±0.72%,差异具有统计学意义(t=-29.01,P<0.001)。Doc组细胞密度为(8.18±0.54)×10^(4)/cm^(2),明显高于对照组的(0.75±0.08)×10^(4)/cm^(2),差异具有统计学意义(t=23.55,P<0.001)。Doc组细胞衰老相关的β-半乳糖苷酶活性增加,统计阳性染色(蓝色)细胞百分比为56.21%±3.38%,明显高于对照组的4.20%±0.79%,差异具有统计学意义(t=-47.37,P<0.001)。与对照组(1.00±0.16)相比,Doc组KLF4的mRNA表达水平(2.47±0.18)较高,差异具有统计学意义(t=-10.74,P<0.001)。与对照组(0.99±0.07)相比,Doc组NANOG的mRNA表达水平(5.58±0.26)较高,差异具有统计学意义(t=-30.09,P<0.001)。Doc组细胞继续培养5 d,细胞保持大细胞状态,视野内细胞较少;继续培养7 d,大细胞周围出现小的子代细胞,视野内细胞仍较少;继续培养13 d,子代细胞数量明显增多;继续培养15 d,子代细胞最终占满整个视野。结论Doc诱导非小细胞肺癌NCI-H1299细胞产生多倍体肿瘤巨细胞,表现出衰老、干性和再增殖特征,可能促进肿瘤复发。

关键词：肺肿瘤多倍体细胞衰老肿瘤干细胞细胞增殖肿瘤复发

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罗米地辛对肺癌多倍体肿瘤巨细胞生物学行为的影响

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中国临床实用医学 2023年第1期14卷 12-17页

作者：杨紫恩邢思宁王丽丽刘硕孙凌燕于卉影北部战区总医院基础医学实验室沈阳110016

目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂罗米地辛对肺癌多倍体肿瘤巨细胞(PGCC)生物学行为的影响。方法人非小细胞肺癌细胞系NCI-H1299购自中国科学院上海细胞库。用100 nmol/L多西他赛处理NCI-H1299细胞24 h,建立肺癌PGCC模型,作为PGCC组;用10... 详细信息

目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂罗米地辛对肺癌多倍体肿瘤巨细胞(PGCC)生物学行为的影响。方法人非小细胞肺癌细胞系NCI-H1299购自中国科学院上海细胞库。用100 nmol/L多西他赛处理NCI-H1299细胞24 h,建立肺癌PGCC模型,作为PGCC组;用100 nmol/L罗米地辛处理PGCC组细胞48 h,记为PGCC+罗米地辛组;将二甲基亚砜(DMSO)处理组细胞记为DMSO组。采用流式细胞术检测细胞DNA含量;细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖;Transwell法检测细胞迁移能力;流式细胞术检测线粒体膜电位;Western blot检测细胞中存活素蛋白(Survivin)、骨髓细胞瘤病毒癌基因同源物蛋白(c-Myc)、波形蛋白(Vimentin)、B细胞淋巴瘤/白血病-x基因长片段蛋白(Bcl-xl)和B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平。结果流式细胞术检测细胞DNA含量结果显示,PGCC组PGCC亚群(DNA含量>4 N)百分比[(60.53±9.92)%]明显高于DMSO组[(2.08±0.62)%],差异有统计学意义(P<0.05)。CCK-8检测结果表明,随着罗米地辛药物浓度逐渐增加,其对细胞抑制率也逐渐增高,同时,罗米地辛处理肺癌PGCC 48 h对细胞抑制率高于24 h,差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell检测结果显示,PGCC+罗米地辛组细胞迁移数[(13±1)个]明显少于PGCC组[(51±2)个];FACScantoⅡ流式细胞仪检测样本结果显示,PGCC+罗米地辛组的红色荧光/绿色荧光比值(2.31±0.10)明显低于PGCC组(4.55±0.52);Westernblot检测结果显示,与PGCC组相比,PGCC+罗米地辛组中Survivin、c-Myc、Vimentin和Bcl-xl表达水平明显下调,Bax表达上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论罗米地辛能够抑制肺癌PGCC增殖和迁移能力,并促进肺癌PGCC凋亡。

关键词：肺癌多倍体肿瘤巨细胞罗米地辛

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