检索结果-内蒙古大学图书馆

中国临床实用医学 2023年第1期14卷 18-24页

作者：马诗涵王丽丽杨紫恩欧阳明玥赵松邢思宁刘硕于卉影北部战区总医院基础医学实验室沈阳110016

目的探究乙醛脱氢酶1(ALDH1)酶活性变化对肺癌多倍体肿瘤巨细胞(PGCC)血管生成和迁移的影响。方法常规培养的非小细胞肺癌细胞(A549、H1299细胞)为常规组,10 mmol/L的4-(N,N二乙基)氨基苯甲醛(DEAB)处理细胞12 h,撤除药物后在完全培养... 详细信息

目的探究乙醛脱氢酶1(ALDH1)酶活性变化对肺癌多倍体肿瘤巨细胞(PGCC)血管生成和迁移的影响。方法常规培养的非小细胞肺癌细胞(A549、H1299细胞)为常规组,10 mmol/L的4-(N,N二乙基)氨基苯甲醛(DEAB)处理细胞12 h,撤除药物后在完全培养基中继续培养细胞至第3天为DEAB组;1 mmol/L多西他赛处理细胞24 h,撤除药物后在完全培养基中培养至第3天为多西他赛组;10 mmol/L的DEAB预处理细胞12 h后,1 mmol/L多西他赛处理24 h,撤除药物后在完全培养基中培养至第3天为多西他赛+DEAB组。流式细胞术检测细胞DNA含量;乙醛脱氢酶(ALDH)测定试剂盒测定ALDH1活性;细胞划痕实验检测迁移能力;血管生成拟态(VM)实验和小管形成实验检测血管生成能力;蛋白印迹法(WB)检测细胞中N-cadherin、Vimentin、血管内皮生长因子(VEGF)A抗体和VE-cadherin蛋白表达水平。结果多西他赛组A549细胞、H1299细胞PGCC亚群比例高于常规组;多西他赛组A549细胞、H1299细胞ALDH1酶活性高于常规组;多西他赛+DEAB组A549细胞、H1299细胞ALDH1酶活性低于多西他赛组;差异均有统计学意义(P<0.05)。多西他赛+DEAB组A549细胞、H1299细胞的细胞迁移率低于多西他赛组,差异有统计学意义(P<0.05)。多西他赛+DEAB组A549细胞分支点数量和小管总长度降低,差异有统计学意义(P<0.05)。多西他赛组A549细胞、H1299细胞N-cadherin、Vimentin的表达高于常规组;多西他赛+DEAB组A549细胞、H1299细胞N-cadherin、Vimentin的表达低于多西他赛组,差异有统计学意义(P<0.05)。HUVEC(多西他赛+DEAB组A549细胞条件培养基处理)形成的小管分支点数量和总长度均低于HUVEC(多西他赛组A549细胞条件培养基处理);HUVEC(多西他赛+DEAB组H1299细胞条件培养基处理)形成的小管分支点数量和总长度均低于HUVEC(多西他赛组H1299细胞条件培养基处理),差异有统计学意义(P<0.05)。多西他赛组A549细胞VE-cadherin、VEGFA抗体表达水平高于常规组,多西他赛+DEAB组A549细胞VE-cadherin、VEGFA抗体的表达水平低于多西他赛组;多西他赛组H1299细胞VEGFA抗体表达水平高于常规组,多西他赛+DEAB组H1299细胞VEGFA抗体表达水平低于多西他赛组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论多西他赛能诱导A549、H1299细胞产生PGCC,并伴随ALDH1酶活性增高,ALDH1酶活性升高参与PGCC迁移和血管生成,但对PGCC的产生无影响。

关键词：非小细胞肺癌多倍体肿瘤巨细胞乙醛脱氢酶1 血管形成迁移

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调控自噬对放射诱导多倍体宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

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中国临床实用医学 2023年第1期14卷 5-11页

作者：周丽阎英孟繁杰赵松刘硕孙凌燕于卉影北部战区总医院基础医学实验室沈阳110016 北部战区总医院放疗科沈阳110016

目的研究调控自噬对放射诱导多倍体宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法人宫颈癌细胞系Hela购自中国科学院上海细胞库。将未经照射的宫颈癌细胞系Hela作为对照组,经7 Gy剂量X线照射的Hela细胞、氯喹(50μmol/L)预处理1 h后经7 Gy剂... 详细信息

目的研究调控自噬对放射诱导多倍体宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法人宫颈癌细胞系Hela购自中国科学院上海细胞库。将未经照射的宫颈癌细胞系Hela作为对照组,经7 Gy剂量X线照射的Hela细胞、氯喹(50μmol/L)预处理1 h后经7 Gy剂量X线照射的Hela细胞分别记为7 Gy组和7 Gy+氯喹组。流式细胞术检测细胞倍性,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖率,划痕实验和Transwell侵袭试验分别检测细胞迁移和侵袭能力,Western blot检测细胞自噬、周期相关蛋白和上皮间质转化相关标志物的表达水平。结果倍性分析结果显示,对照组、7 Gy组、7 Gy+氯喹组的多倍体细胞亚群(DNA含量>4 N)比例[(5.30±0.46)%、(32.27±2.48)%、(26.37±0.90)%]比较,差异有统计学意义(P<0.05)。CCK-8法检测结果显示,培养24 h后,对照组、7 Gy组、7 Gy+氯喹组的细胞增殖率[(97.50±2.43)%、(73.27±5.86)%、(55.70±13.05)%]比较,差异有统计学意义(P<0.05);培养48 h后,对照组、7 Gy组、7 Gy+氯喹组的细胞增殖率[(158.84±1.62)%、(113.64±7.02)%、(75.42±4.33)%]比较,差异有统计学意义(P<0.05)。划痕实验结果显示,划痕24 h后,对照组、7 Gy组、7 Gy+氯喹组的划痕愈合面积百分率[(68.68±1.73)%、(51.79±2.53)%、(40.40±8.81)%]比较,差异有统计学意义(P<0.05);划痕48 h后,对照组、7 Gy组、7 Gy+氯喹组的划痕愈合面积百分率[100%、(77.11±5.96)%、(46.611±0.82)%]比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell实验结果显示,对照组、7 Gy组、7 Gy+氯喹组的侵袭细胞数[(184.33±20.03)个、(73.00±11.14)个、(24.33±3.51)个]比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测结果显示,对照组、7 Gy组、7 Gy+氯喹组的自噬微管相关蛋白轻链3-Ⅱ/自噬微管相关蛋白轻链3-Ⅰ、P-cdc25c(ser216)、cdc25c(5H9)、E钙黏蛋白(E-Cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论调控自噬能够抑制多倍体肿瘤细胞的产生,降低放射诱导宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,提示自噬可能在宫颈癌细胞的放射抵抗中起着重要的作用。

关键词：宫颈癌多倍体肿瘤细胞自噬增殖迁移侵袭

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细胞融合在多倍体肿瘤巨细胞形成中的作用

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中国临床实用医学 2023年第1期14卷 1-4页

作者：邢思宁杨紫恩王丽丽于卉影北部战区总医院基础医学实验室沈阳110016

多倍体肿瘤巨细胞(polyploid giant cancer cell,PGCC)是指具有多个细胞核或单个巨核内含多组染色体的肿瘤细胞。与常规二倍体细胞相比,PGCC的大小可达常规二倍体细胞的10~20倍,具有四倍体或更高的DNA含量。PGCC的形成机制可能与创伤修... 详细信息

多倍体肿瘤巨细胞(polyploid giant cancer cell,PGCC)是指具有多个细胞核或单个巨核内含多组染色体的肿瘤细胞。与常规二倍体细胞相比,PGCC的大小可达常规二倍体细胞的10~20倍,具有四倍体或更高的DNA含量。PGCC的形成机制可能与创伤修复和组织再生有相似之处。

关键词：二倍体细胞创伤修复组织再生细胞融合 DNA含量多倍体巨细胞肿瘤

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间充质干细胞来源的外泌体在肿瘤治疗中的研究进展

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中国临床实用医学 2023年第3期14卷 71-74页

作者：宋爽孟繁杰于卉影北部战区总医院基础医学实验室沈阳110016

间充质干细胞(MSC)是一种具有分化为不同细胞类型潜力的多能细胞。由于其免疫抑制和抗炎特性,被广泛用于再生医学。MSC会产生大量可以影响肿瘤发展的外泌体。与MSC类似,MSC来源的外泌体(MSC-Exo)可以发挥抗肿瘤或促肿瘤作用。因此,MSC-... 详细信息

间充质干细胞(MSC)是一种具有分化为不同细胞类型潜力的多能细胞。由于其免疫抑制和抗炎特性,被广泛用于再生医学。MSC会产生大量可以影响肿瘤发展的外泌体。与MSC类似,MSC来源的外泌体(MSC-Exo)可以发挥抗肿瘤或促肿瘤作用。因此,MSC-Exo与肿瘤之间的关系仍然存在争议。外泌体作为天然囊泡,可以作为优良的药物载体,并显示出在靶向肿瘤治疗中的应用前景。本文对MSC-Exo的特征和潜力,以及MSC-Exo在癌症治疗中的应用进行概述,随后总结了MSC-Exo的给药方法和优点,以及MSC-Exo作为药物载体的进展。

关键词：间充质干细胞外泌体间充质干细胞来源的外泌体肿瘤

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间充质干细胞来源的外泌体通过抑制核因子κB信号通路减轻放射性肺纤维化的机制研究

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创伤与急危重病医学 2024年第5期12卷 295-300页

作者：王丽丽刘宇杨紫恩欧阳明玥邢思宁尹宗涛于卉影北部战区总医院基础医学实验室辽宁沈阳110016 北部战区总医院心血管外科辽宁沈阳110016

目的探讨间充质干细胞来源的外泌体(MSCs-EXO)对放射性肺纤维化(RIPF)的作用机制。方法将15只雄性SD大鼠随机分为对照组、放射(irradiation,IR)组、IR+MSCs-EXO(IR+EXO)组,每组5只。IR组及IR+EXO组大鼠右肺给予单次照射,剂量为30 Gy。IR... 详细信息

目的探讨间充质干细胞来源的外泌体(MSCs-EXO)对放射性肺纤维化(RIPF)的作用机制。方法将15只雄性SD大鼠随机分为对照组、放射(irradiation,IR)组、IR+MSCs-EXO(IR+EXO)组,每组5只。IR组及IR+EXO组大鼠右肺给予单次照射,剂量为30 Gy。IR+EXO组分别于照射后1 h、14 d两个时间点,采用尾静脉推注方式给予每千克1×109个的外泌体;对照组和IR组大鼠同步尾静脉推注等体积的生理盐水。于照射后12周处死各组大鼠,收集大鼠右侧新鲜肺组织。采用HE和Masson染色检测肺组织病理损伤和胶原纤维沉积情况,采用免疫组织化学染色和RT-qPCR检测肺组织中纤维化相关分子α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和I型胶原蛋白alpha 1链(COL1A1)的表达,采用Western blot检测肺组织中核因子κB(NF-κB)信号通路相关分子表达。结果照射后12周,与IR组相比,IR+EXO组大鼠肺组织病理受损明显减轻,Ashcroft score评分明显降低(P<0.001);IR+EXO组肺组织中胶原纤维沉积明显减少,胶原容积分数显著低于IR组,差异有统计学意义(P<0.001);IR+EXO组中α-SMA和COL1A1蛋白阳性表达水平明显低于IR组,α-SMA和COL1A1 mRNA表达水平也均明显低于IR组,差异有统计学意义(P<0.01);与IR组相比,IR+EXO组p-NF-κB p65(Ser536)蛋白表达明显下调,差异有统计学意义(P<0.01),α-SMA和COL1A1蛋白表达也明显下调,差异有统计学意义(P<0.01)。结论MSCs-EXO可能通过抑制NF-κB信号通路减轻放射性肺纤维化。

关键词：放射性肺纤维化间充质干细胞外泌体 NF-κB信号通路

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负载小鼠脂肪干细胞的甲壳素/透明质酸/胶原水凝胶的制备及其对大鼠全层皮肤缺损创面愈合的作用

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中华烧伤与创面修复杂志 2024年第1期40卷 50-56页

作者：刘颖程凤王泽薇金红旭曹滨验游平飞胡安史秀云杜娟苑志新北部战区总医院急诊医学科沈阳110016 吉林省人民医院急危重症科研与转化实验室长春130021 吉林省人民医院急诊医学科长春130021

目的制备负载小鼠脂肪干细胞的甲壳素/透明质酸/胶原水凝胶并探讨其对大鼠全层皮肤缺损创面愈合的作用。方法该研究为实验研究。通过酸水解碱的方法提取甲壳素纳米纤维,将提取物与透明质酸和胶原混合制备甲壳素/透明质酸/胶原水凝胶(以... 详细信息

目的制备负载小鼠脂肪干细胞的甲壳素/透明质酸/胶原水凝胶并探讨其对大鼠全层皮肤缺损创面愈合的作用。方法该研究为实验研究。通过酸水解碱的方法提取甲壳素纳米纤维,将提取物与透明质酸和胶原混合制备甲壳素/透明质酸/胶原水凝胶(以下简称水凝胶),另制备负载小鼠脂肪干细胞的水凝胶。将30只雄性12周龄豚鼠按照随机数字表法分为阴性对照组、阳性对照组和水凝胶组(每组10只),分别在豚鼠背部两侧涂抹乙醇、4-氨基苯甲酸乙酯、前述制备的不含细胞的水凝胶进行诱导接触和激发接触,于激发接触后24、48 h观察皮肤水肿和红斑形成情况。将小鼠脂肪干细胞分为行常规培养的正常对照组和用前述制备的不含细胞的水凝胶培养的水凝胶组,培养3 d,采用蛋白质印迹法检测血小板衍生生长因子-D(PDGF-D)、胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)、转化生长因子β1(TGF-β1)的蛋白表达(样本数均为3)。取8只雄性8周龄SD大鼠,在其背部两侧各制备1个圆形全层皮肤缺损创面,分别作为空白对照组(不进行任何处理)和水凝胶组(涂抹前述制备的负载脂肪干细胞的水凝胶)。伤后0(即刻)、2、4、8、10 d,观察创面愈合情况并计算伤后2、4、8、10 d的创面愈合率。取伤后10 d创面组织,行苏木精-伊红染色观察新生组织形成情况,采用酶联免疫吸附测定法检测白细胞介素1α(IL-1α)、IL-6、IL-4和IL-10的浓度,行免疫组织化学染色观察CD16、CD206阳性细胞表达并计算阳性细胞百分比。动物实验样本数均为8。结果激发接触后24 h,3组豚鼠皮肤均无水肿形成,仅阳性对照组7只豚鼠皮肤出现轻微红斑。激发接触后48 h,阳性对照组8只豚鼠皮肤出现红斑,4只豚鼠皮肤出现水肿;其余2组豚鼠皮肤无明显红斑或水肿。培养3 d,水凝胶组脂肪干细胞中PDGF-D、IGF-Ⅰ和TGF-β1的蛋白表达水平均明显高于正常对照组(t值分别为12.91、11.83、7.92,P<0.05)。伤后0~10 d,2组创面面积均逐渐缩小,水凝胶组创面于伤后10 d基本愈合。伤后4、8、10 d,水凝胶组创面愈合率分别为(38±4)%、(54±5)%、(69±6)%,分别明显高于空白对照组的(21±6)%、(29±7)%、(31±7)%(t值分别为3.82、3.97、4.05,P值均<0.05)。伤后10 d,与空白对照组比较,水凝胶组创面表皮更加完整,毛囊、血管和其他皮肤附件增多。伤后10 d,水凝胶组创面组织中IL-1α、IL-6浓度均较空白对照组明显降低(t值分别为8.21、7.99,P<0.05),IL-4、IL-10浓度均较空白对照组明显升高(t值分别为6.57、9.03,P<0.05);水凝胶组创面组织中CD16阳性细胞百分比较空白对照组明显降低(t=8.02,P<0.05),CD206阳性细胞百分比较空白对照组明显升高(t=7.21,P<0.05)。结论负载小鼠脂肪干细胞的水凝胶无致敏性,能促进脂肪干细胞中生长因子分泌,促进大鼠全层皮肤缺损创面组织中巨噬细胞向M2型极化,减轻炎症反应,从而促进创面愈合。

关键词：生物相容性材料水凝胶炎症巨噬细胞脂肪干细胞创面修复

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脐带间充质干细胞来源外泌体对大鼠放射性肺损伤作用及机制研究

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创伤与急危重病医学 2024年第4期12卷 216-221,226页

作者：杨紫恩欧阳明玥王丽丽刘硕孙凌燕阎英刘宇于卉影北部战区总医院基础医学实验室辽宁沈阳110016 北部战区总医院放射治疗科辽宁沈阳110016 北部战区总医院心血管外科辽宁沈阳110016

目的探讨人脐带间充质干细胞来源外泌体(hUCMSC-Exo)对大鼠放射性肺损伤(RILI)的作用及机制。方法流式细胞术检测人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)表面标志物;蛋白免疫印迹法、纳米粒子跟踪分析及透射电子显微镜鉴定hUCMSC-Exo。根据随机数... 详细信息

目的探讨人脐带间充质干细胞来源外泌体(hUCMSC-Exo)对大鼠放射性肺损伤(RILI)的作用及机制。方法流式细胞术检测人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)表面标志物;蛋白免疫印迹法、纳米粒子跟踪分析及透射电子显微镜鉴定hUCMSC-Exo。根据随机数字表法将15只健康SD大鼠分为对照组、照射组和照射+Exo组,每组各5只,照射+Exo组大鼠在辐照后立即注射100μl的hUCMSC-Exo(剂量为1×10^(7)个/μl),其余两组注射100μl生理盐水,照射后4周处死大鼠并取材;苏木精-伊红(HE)和Masson染色法观察肺组织病理学变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和干扰素γ(INF-γ)表达;蛋白免疫印迹法检测大鼠右肺组织中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、转化生长因子-β1(TGF-β1)和IL-1β蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测E-cadherin、Vimentin、IL-1β和IL-6的mRNA表达;免疫组织化学染色检测大鼠右肺组织中E-cadherin、Vimentin、TGF-β1和磷酸化Smad同源物(p-Smad)蛋白表达。结果与照射组相比较,照射+Exo组炎性细胞浸润减少,胶原沉积和纤维组织增生减少(P<0.05);血清中促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α及INF-γ表达减少(P<0.05);肺组织中E-cadherin蛋白表达增加,Vimentin、TGF-β1、p-Smad和IL-1β蛋白表达减少(P<0.05);肺组织中E-cadherin的mRNA表达增加,Vimentin、IL-1β及IL-6的mRNA表达减少(P<0.05)。结论hUCMSC-Exo能够通过减少促炎因子分泌及抑制纤维化进展缓解RILI。

关键词：人脐带间充质干细胞来源外泌体放射性肺损伤促炎因子纤维化

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间充质干细胞条件培养基对多西紫杉醇诱导多倍体肺癌细胞衰老表型的研究

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中国临床实用医学 2022年第2期13卷 23-30页

作者：赵松王丽丽欧阳明玥邢思宁于卉影北部战区总医院基础医学实验室沈阳110016

目的探讨间充质干细胞条件培养基对多西紫杉醇(Doc)诱导的多倍体肺癌细胞衰老表型的影响。方法人非小细胞肺癌1 299细胞株细胞分为3组, 常规组、Doc(24 h)组和Doc(24 h)+3 d组。常规组为二甲基亚砜处理细胞24 h;Doc(24 h)组为100 nmol/L... 详细信息

目的探讨间充质干细胞条件培养基对多西紫杉醇(Doc)诱导的多倍体肺癌细胞衰老表型的影响。方法人非小细胞肺癌1 299细胞株细胞分为3组, 常规组、Doc(24 h)组和Doc(24 h)+3 d组。常规组为二甲基亚砜处理细胞24 h;Doc(24 h)组为100 nmol/L的Doc处理细胞24 h;Doc(24 h)+3 d组为100 nmol/L的Doc处理细胞24 h, 更换新鲜的含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基, 继续培养3 d。Doc(24 h)+3 d组细胞分为2组, Doc组和Doc+CM组。Doc组为含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基中培养4 d;Doc+CM组为含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基和hUC-MSC-CM(1∶1)的混合培养基中培养4 d。Hoechst 33342染色观察细胞核形态, 流式细胞术分析细胞DNA含量、线粒体膜电位及DNA损伤应答信号分子磷酸化组蛋白H2A.X(γ-H2A.X)的表达, 衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测β-半乳糖苷酶活性, 实时定量聚合酶链式反应(RTQ-PCR)检测衰老相关的炎性细胞因子白细胞介素6(IL-6)与白细胞介素8(IL-8)的信使核糖核酸(mRNA)表达水平。结果 Doc(24 h)组和Doc(24 h)+3 d组细胞核体积增大、DNA含量增加, 常规组、Doc(24 h)组和Doc(24 h)+3 d组多倍体细胞百分比分别为(12.27±3.29)%、(27.13±6.02)%和(43.60±4.26)%, Doc(24 h)组和Doc(24 h)+3 d组细胞百分比明显高于常规组, 差异有统计学意义(F=33.91, P=0.001)。常规组、Doc(24 h)组与Doc(24 h)+3 d组细胞密度分别为(8.18±0.54)×10^(4)/cm^(2)、(3.78±0.54)×10^(4)/cm^(2)及(0.75±0.08)×10^(4)/cm^(2), Doc(24 h)组与Doc(24 h)+3 d组细胞密度显著低于常规组, 差异有统计学意义(F=212.55, P=0.001)。常规组细胞β-半乳糖苷酶无活性, 细胞染色阴性, Doc(24 h)组与Doc(24 h)+3 d组中观察到有呈蓝色的阳性染色细胞, β-半乳糖苷酶活性增强。流式细胞术分析线粒体膜电位, 常规组、Doc组与Doc+CM组的JC-1单体百分比分别为(1.7±1.2)%、(48.2±12.9)%及(46.6±12.0)%, Doc组与Doc+CM组低电势细胞百分比明显高于常规组, 差异有统计学意义(F=20.15, P=0.002), Doc组细胞与Doc+CM组细胞线粒体膜电位比较, 差异无统计学意义(F=20.15, P=0.854)。常规组、Doc组与Doc+CM组中γ-H2A.X表达阳性的细胞百分比分别为(54.9±3.2)%、(58.9±4.0)%及(60.6±5.4)%, 差异无统计学意义(F=1.40, P=0.317)。Doc组与Doc+CM组γ-H2A.X荧光信号强度明显高于常规组, 荧光信号右移, Doc组与Doc+CM组γ-H2A.X荧光信号强度没有差异, 荧光信号没有偏移。Doc组IL-6与IL-8的mRNA表达水平是常规组的(7.22±0.34)倍及(157.64±7.49)倍, 差异有统计学意义(t=1.00, P=0.001)。Doc+CM组IL-6与IL-8的mRNA表达水平是Doc组的(48±6)%及(43±3)%, 差异有统计学意义(t=1.00, P=0.001)。结论 Doc诱导人非小细胞肺癌1 299细胞株细胞产生多倍体肿瘤细胞, 即多倍体肺癌细胞, 多倍体肺癌细胞表现多种衰老表型特征, hUC-MSC-CM不改变Doc诱导的多倍体肺癌细胞衰老表型, 但显著降低了炎性因子IL-6和IL-8的mRNA表达水平。

关键词：间充质干细胞条件培养基线粒体膜电位 DNA损伤应答炎性细胞因子多倍体肿瘤细胞

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间充质干细胞条件培养基增强肺癌多倍体肿瘤巨细胞化学治疗药物敏感性的研究

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中国临床实用医学 2022年第2期13卷 17-22页

作者：王丽丽邢思宁杨紫恩欧阳明玥赵松刘硕孙凌燕于卉影北部战区总医院基础医学实验室沈阳110016

目的探讨间充质干细胞条件培养基(MSCs-CM)对肺癌多倍体肿瘤巨细胞(PGCC)化学治疗药物敏感性的影响。方法使用1 μmol/L多西他赛处理A549细胞24 h(多西他赛A组), 撤除药物后继续在完全培养基中培养至第3天(多西他赛B组), 建立肺癌PGCC模... 详细信息

目的探讨间充质干细胞条件培养基(MSCs-CM)对肺癌多倍体肿瘤巨细胞(PGCC)化学治疗药物敏感性的影响。方法使用1 μmol/L多西他赛处理A549细胞24 h(多西他赛A组), 撤除药物后继续在完全培养基中培养至第3天(多西他赛B组), 建立肺癌PGCC模型, 使用MSCs-CM培养PGCC 48 h(PGCC+MSCs-CM组), 以正常培养的A549细胞(A549组)或PGCC(PGCC组)作为对照, 流式细胞术检测细胞DNA含量, 细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测A549细胞和PGCC对不同浓度多西他赛和顺铂的敏感性以及MSCs-CM对PGCC耐药性的影响, Western blot法检测相关蛋白表达。结果多西他赛B组细胞体积明显增大, 细胞核呈多核状态, PGCC亚群(DNA含量>4 N)比例均明显高于DMSO组和多西他赛A组(P<0.05), 成功建立肺癌PGCC模型, 将多西他赛B组作为PGCC细胞。CCK-8检测结果显示, 多西他赛对A549细胞和PGCC的IC50值分别为(0.20±0.04)μmol/L和(11.15±2.47)μmol/L, 差异有统计学意义(P<0.05), 顺铂对A549细胞和PGCC的IC50值分别为(14.87±3.72)μmol/L和(30.03±4.59)μmol/L, 差异有统计学意义(P<0.05), PGCC对多西他赛和顺铂的耐药指数分别为55.75倍和2.02倍。与PGCC组相比, PGCC+MSCs-CM+多西他赛组吸光度值明显下降(P<0.05), 且明显低于PGCC+多西他赛组和PGCC+MSCs-CM组(P<0.05)。与PGCC组相比, PGCC+MSCs-CM+顺铂组吸光度值明显下降(P<0.05), 且明显低于PGCC+顺铂组和PGCC+MSCs-CM组(P<0.05)。Western blot检测结果显示, 与A549组相比, PGCC组自噬微管相关蛋白轻链3A/B(LC3A/B)-Ⅰ/LC3A/B-Ⅱ、B淋巴细胞瘤-2基因(BCL-2)、多药耐药性相关蛋白1(MPR1)表达明显上调(P<0.05), 兔抗人选择性自噬接头蛋白1(SQSTM1/P62)、BCL-2相关X蛋白(BAX)表达明显下调(P<0.05);与PGCC组相比, PGCC+MSCs-CM组LC3A/B-Ⅰ/LC3A/B-Ⅱ、BCL-2、MRP1表达明显下调(P<0.05), SQSTM1/P62、BAX表达明显上调(P<0.05), 且MRP1表达水平显著低于A549组(P<0.05)。结论肺癌PGCC对化学治疗药物的耐药性明显增强, MSCs-CM可能通过抑制自噬而增加肺癌PGCC对化学治疗药物的敏感性。

关键词：间充质干细胞肺癌多倍体巨癌细胞化学治疗药物敏感性

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多烯紫杉醇诱导的卵巢癌SK-OV-3多倍体肿瘤巨细胞增殖、迁移和凋亡的特性研究

引用

现代肿瘤医学 2021年第16期29卷 2759-2764页

作者：欧阳明玥王丽丽赵松邢思宁于卉影北部战区总医院基础医学实验室辽宁沈阳110016

目的:探讨多烯紫杉醇(Docetaxel,Doc)诱导的卵巢癌SK-OV-3多倍体肿瘤巨细胞增殖、迁移和凋亡的特性。方法:0.8μmol/L Doc处理SK-OV-3细胞16 h,更换为完全培养液继续培养细胞至第3天和第5天。免疫荧光染色法观察细胞形态和增殖,流式细... 详细信息

目的:探讨多烯紫杉醇(Docetaxel,Doc)诱导的卵巢癌SK-OV-3多倍体肿瘤巨细胞增殖、迁移和凋亡的特性。方法:0.8μmol/L Doc处理SK-OV-3细胞16 h,更换为完全培养液继续培养细胞至第3天和第5天。免疫荧光染色法观察细胞形态和增殖,流式细胞术检测细胞倍性、周期和凋亡,划痕实验检测细胞迁移能力,Western blot检测凋亡相关蛋白表达。结果:Doc处理后SK-OV-3细胞体积变大,细胞核增多,细胞增殖能力降低。Doc(3 day)组和Doc(5 day)组多倍体细胞(>4 N)百分比高于对照组(P<0.01)。Doc诱导Doc(16 h)组发生细胞周期阻滞。Doc(5 day)组细胞迁移能力低于对照组(P<0.01)。Doc(3 day)组和Doc(5 day)组早期凋亡细胞百分比高于对照组(P<0.05)。Doc(16 h)组、Doc(3 day)组和Doc(5 day)组促凋亡蛋白表达逐渐上调,抗凋亡蛋白表达下调。结论:Doc诱导卵巢癌SK-OV-3细胞形成多倍体肿瘤巨细胞,SK-OV-3多倍体肿瘤巨细胞增殖和迁移能力降低,早期凋亡增加,这为探索多倍体肿瘤巨细胞特性提供了研究基础。

关键词：多烯紫杉醇多倍体肿瘤巨细胞 SK-OV-3 凋亡

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