检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 1996年第6期16卷 463-467页

作者：陈斌袁建刚潘美辉俞耀庭强伯勤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室南开大学分子生物学研究所

本文对差异显示反转录ＰＣＲ（ＤＤＲＴ－ＰＣＲ）的一系列条件进行了探索和改进，建立了有效的ＤＤＲＴ－ＰＣＲ方法。特别是单锚定碱基引物Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）＿（１２）Ｍ（Ｍ＝Ａ，Ｇ，Ｃ）的应用，不但得到了十分良好的实验结果，... 详细信息

本文对差异显示反转录ＰＣＲ（ＤＤＲＴ－ＰＣＲ）的一系列条件进行了探索和改进，建立了有效的ＤＤＲＴ－ＰＣＲ方法。特别是单锚定碱基引物Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）＿（１２）Ｍ（Ｍ＝Ａ，Ｇ，Ｃ）的应用，不但得到了十分良好的实验结果，而且在很大程度上降低了实验成本和工作量。

关键词：差异显示反转录聚合酶链反应

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乙型肝炎病毒X基因的分析与在大肠杆菌中的表达

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生物化学杂志 1996年第1期12卷 22-26页

作者：曾明黄秉仁蔡良琬潘国宗中国协和医科大学中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京协和医院

以ＨＢＶ－ＮＣｌＤＮＡ为材料研究了其中的Ｘ基因，首先确定了此Ｘ基因的顺序，即用ＡＢＩ自动萤光测序议测序证明了此Ｘ基因的３８５位核苷酸后缺失１９个核苷酸，从而引起移码突变，使此Ｘ基因共有５１９个核苷酸，编码１７２个氨基... 详细信息

以ＨＢＶ－ＮＣｌＤＮＡ为材料研究了其中的Ｘ基因，首先确定了此Ｘ基因的顺序，即用ＡＢＩ自动萤光测序议测序证明了此Ｘ基因的３８５位核苷酸后缺失１９个核苷酸，从而引起移码突变，使此Ｘ基因共有５１９个核苷酸，编码１７２个氨基酸，比另一种ａｄｒ型Ｘ蛋白多１８个氨基酸。在其第五位氨基酸上有一ＡＴＧ起始密码，也与另一Ｘ基因不同。经重组后获得在大肠杆菌中的热诱导表达，用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ方法证明确为Ｘ蛋白，并有多态性。

关键词：乙型肝炎病毒 X基因序列分析体外表达

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HBV－NC1株X基因在真核细胞中表达，基因调控与致癌作用的初探

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生物化学杂志 1996年第1期12卷 27-30页

作者：曾明黄秉仁蔡良琬潘国宗中国协和医科大学中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京协和医院

报道了ＨＢＶ－ＮＣ１株的Ｘ基因进入真核细胞表达载体ｐＸＴ１质粒的ＴＫ启动子之后，转染细胞及表达Ｘ基因成功。即发现包装病毒感染ＮＩＨ／３Ｔ３细胞后有Ｘ基因表达，用斑点杂交又证明此Ｘ基因已整合到细胞的基因组中，当与有ｐＭ... 详细信息

报道了ＨＢＶ－ＮＣ１株的Ｘ基因进入真核细胞表达载体ｐＸＴ１质粒的ＴＫ启动子之后，转染细胞及表达Ｘ基因成功。即发现包装病毒感染ＮＩＨ／３Ｔ３细胞后有Ｘ基因表达，用斑点杂交又证明此Ｘ基因已整合到细胞的基因组中，当与有ｐＭＳＨ报告基因的质粒共同感染真核细胞后确有激活转录调控现象出现。应用反义的ＸＲＮＡ表达载体感染肝癌细胞发现有接触抑制作用出现。

关键词：肿瘤乙型肝炎病毒 X基因基因调控病理

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人免疫缺陷病毒Tat基因及LTR调控元件对基因表达的影响

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自然科学进展（国家重点实验室通讯） 1996年第2期6卷 229-235页

作者：于小兵袁建刚陈菊凤强伯勤中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

构建了不同长度人免疫缺陷病毒LTR启动子的荧光酶报告基因(Luc)表达质粒;瞬时转染Jurkat细胞;同时与含tat基因的表达质粒pCVI共转染;通过荧光酶活性的测定,分析Tat与LTR对基因表达的作用机制。实验结果表明LTR—158上游区有负调控元件... 详细信息

构建了不同长度人免疫缺陷病毒LTR启动子的荧光酶报告基因(Luc)表达质粒;瞬时转染Jurkat细胞;同时与含tat基因的表达质粒pCVI共转染;通过荧光酶活性的测定,分析Tat与LTR对基因表达的作用机制。实验结果表明LTR—158上游区有负调控元件的存在;证实了Tat的反式激活作用可以大大提高LTR指导的基因表达水平;研究结果揭示LTR中的增强子序列及其结合蛋白NF—kB在高水平的LTR转录以及Tat的反式激活作用中可能起重要作用。

关键词：人免疫缺陷病毒 LTR 基因表达 Tat基因调控元件

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基因治疗与伦理学

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中国优生与遗传杂志 1996年第S1期4卷 4-6页

作者：刘德培梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

基因治疗与伦理学中国医学科学院基础医学研究所（北京，１００００５）中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室刘德培，梁植权一、基因治疗与伦理学讨论的必要性与超前性在医学发展史中，每一项医学生物学新技术的产... 详细信息

基因治疗与伦理学中国医学科学院基础医学研究所（北京，１００００５）中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室刘德培，梁植权一、基因治疗与伦理学讨论的必要性与超前性在医学发展史中，每一项医学生物学新技术的产生和即将应用于临床，都要经过伦理学...

关键词：基因治疗生殖细胞基因转移技术伦理学问题受体细胞医学生物学基因操作早期胚胎转移基因染色体基因

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β-珠蛋白基因簇表达调控的反式作用因子

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国外医学（分子生物学分册） 1996年第6期18卷 264-267页

作者：纪新军刘德培中国医学科学院基础医学研究所生化室中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

β-珠蛋白基因簇是研究真核基因表达调控的良好模型,其基因表达具有红系组织特异性和不同发育阶段特异性。这些特异性的产生依赖于组织特异性表达的和发育阶段特异性表达的反式作用因子与顺式作用元件间的相互作用。

关键词： β-珠蛋白基因反式作用因子基因调控

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PNH患者红细胞膜乙酰胆碱酯酶缺失的研究

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中华血液学杂志 1995年第8期16卷 396-398页

作者：许彩民卢红吕照江潘华珍张之南中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京协和医院

用间接免疫荧光流式细胞术测定阵发性睡眠性血红蛋白尿症（ＰＮＨ）患者和正常人红细胞乙酰胆碱酯酶（ＡｃｈＥ）表达量，发现ＰＮＨ的ＡｃｈＥ表达远远低于正常，而且蛇毒溶血试验与ＡｃｈＥ的缺失呈正相关。由于ＰＮＨ正常和异常血细... 详细信息

用间接免疫荧光流式细胞术测定阵发性睡眠性血红蛋白尿症（ＰＮＨ）患者和正常人红细胞乙酰胆碱酯酶（ＡｃｈＥ）表达量，发现ＰＮＨ的ＡｃｈＥ表达远远低于正常，而且蛇毒溶血试验与ＡｃｈＥ的缺失呈正相关。由于ＰＮＨ正常和异常血细胞同时并存，为进一步研究ＰＮＨ的ＡｃｈＥ（－）红细胞，采用ＰｒｏｔｅｉｎＡＳｅｐｈａｒｏｓｅ６ＭＢ结合ＡｃｈＥ单抗亲和层析法分离出ＰＮＨ的ＡｃｈＥ（－）红细胞。用￣３Ｈ－肌醇标记实验证明，正常红细胞膜在区带４．１有较高放射活性，而ＰＮＨ红细胞膜放射活性极低，ＰＮＨ的ＡｃｈＥ（－）红细胞膜完全无放射活性；用免疫印渍实验证明区带４．１是ＡｃｈＥ存在部位。用酶联免疫方法直接检测ＰＮＨ患者和正常人血浆中ＡｃｈＥ含量，结果发现ＰＮＨ患者血浆中有ＡｃｈＥ存在，而正常人未能检出。

关键词：阵发性白红蛋白尿症红细胞膜乙酰胆碱酯酶

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中国人FRAXAC_2多态性及在连锁分析中的应用

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中华医学遗传学杂志 1995年第3期12卷 146-149页

作者：柴精华沈岩赵时敏施惠平吴冠芸中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京协和医院儿科

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增脆性Ｘ智力低下基因（ＦＭＲ－１）５′侧的二核苷酸重复序列（ｆｒａｇｉｌｅＸＡＣ２ｒｅｐｅａｔ，ＦＲＡＸＡＣ２），通过聚丙烯酰胺凝胶电泳及放射自显影的方法检测扩增产物。结果表明：ＦＲＡＸＡ... 详细信息

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增脆性Ｘ智力低下基因（ＦＭＲ－１）５′侧的二核苷酸重复序列（ｆｒａｇｉｌｅＸＡＣ２ｒｅｐｅａｔ，ＦＲＡＸＡＣ２），通过聚丙烯酰胺凝胶电泳及放射自显影的方法检测扩增产物。结果表明：ＦＲＡＸＡＣ２重复序列在我们所检测的中国人群中共有７种等位片段，其频率分布为０．００４８～０．６０６３。最大多态信息量（ＰＩＣ）为５８％。应用该位点对４个家系进行了单体型连锁分析，表明该方法可用于脆性Ｘ综合征基因诊断和遗传关系研究。

关键词：脆性X综合征二核苷酸重复序列 FRLP 连锁分析

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一例性反转畸形SRY基因片段的扩增、克隆和核苷酸序列分析

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生物化学杂志 1995年第6期11卷 660-663页

作者：马素参黄秉仁陈虹史轶蘩中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室首都儿科研究所北京协和医院内分泌科

在哺乳动物中，位于Ｙ染色体上的指导雄性性别分化的基因被命名为睾丸决定因子（Ｔｅｓｔｉｓ－ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇｆａｃｔｏｒ，ＴＤＦ）１９９０年６月分离获得的ＳＲＹ基因（Ｓｅｘ－ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇｒｅｇｉｏｎｏｆｔ... 详细信息

在哺乳动物中，位于Ｙ染色体上的指导雄性性别分化的基因被命名为睾丸决定因子（Ｔｅｓｔｉｓ－ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇｆａｃｔｏｒ，ＴＤＦ）１９９０年６月分离获得的ＳＲＹ基因（Ｓｅｘ－ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇｒｅｇｉｏｎｏｆｔｈｅＹ）被认为是ＴＤＦ基因最好的候选者［１－４］。ＳＲＹ基因为单拷贝，位于Ｙ染色体短臂末端１Ａ１Ａ区，靠近假常染色体配对区（ＰＡＰＲ）的交界处，其部分顺序编码８０个保守性氨基酸组成的多肽。本实验使用与ＳＲＹ基因相应的引物，利用ＰＣＲ技术以一例性反转畸形病人的基因组ＤＮＡ为模板分离ＳＲＹ基因保守区顺序，并将特异扩增出的此ＳＲＹ基因片段重组到质粒ｐＵＣ１２中，得到含有ＳＲＹ基因片段的克隆。经测序表明其ＳＲＹ基因保守顺序上有Ｔ→Ｃ（Ｓｅｒ→Ｐｒｏ）突变。ＳＲＹ基因的存在及其突变可能是导致性反转畸形发病的原因。

关键词：遗传病性反转畸形 SRY基因分子克隆序列分析

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外源性野生型p53基因对人喉癌等肿瘤细胞生长抑制的实验研究

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高技术通讯 1995年第10期5卷 51-54页

作者：陈晓巍刘德培王直中刘庆辉梁植权中国医学科学院北京协和医院耳鼻咽喉科中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

以反转录病毒Ｎ２Ａ为载体，使携带自身正调控序列的野生型ｐ５３基因反向插入Ｎ２Ａ两端ＬＴＲ间的ＸｈｏＩ位点，获得了野生型ｐ５３基因反转录病毒重组体，建立了产病毒的ＰＡ３１７细胞系。用该细胞系产生的新鲜病毒颗粒感染有ｐ５... 详细信息

以反转录病毒Ｎ２Ａ为载体，使携带自身正调控序列的野生型ｐ５３基因反向插入Ｎ２Ａ两端ＬＴＲ间的ＸｈｏＩ位点，获得了野生型ｐ５３基因反转录病毒重组体，建立了产病毒的ＰＡ３１７细胞系。用该细胞系产生的新鲜病毒颗粒感染有ｐ５３基因异常的人喉癌细胞系（Ｈｅｐ２）和纤维肉瘤细胞系（ＭＤＡＨ０４１），Ｓｏｕｔｈｅｒｎ－ｂｌｏｔ分析证实野生型ｐ５３基因反转录病毒前病毒能稳定整合在受体细胞染色体基因组上并有表达。感染病毒后的肿瘤细胞恶性表型发生了逆转，在裸鼠体内形成生长缓慢的移植瘤或不形成移植瘤。

关键词： p53基因喉癌肿瘤细胞生长抑制

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