检索结果-内蒙古大学图书馆

现代肿瘤医学 2018年第23期26卷 3713-3716页

作者：孙舟彤何妍彦张红艳中国医科大学七年制临床医学系辽宁沈阳110122 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110122

目的:探讨G蛋白信号转导调节蛋白5(RGS5)在人乳腺癌细胞系中的表达。方法:提取人正常乳腺上皮细胞HBL100,人乳腺癌细胞系MCF-7,ZR-75-1,ZR-75-30,MDA-MB-231,HCC1937的总蛋白和总RNA,提取细胞的总蛋白和总RNA进行蛋白免疫印迹和实时定量... 详细信息

目的:探讨G蛋白信号转导调节蛋白5(RGS5)在人乳腺癌细胞系中的表达。方法:提取人正常乳腺上皮细胞HBL100,人乳腺癌细胞系MCF-7,ZR-75-1,ZR-75-30,MDA-MB-231,HCC1937的总蛋白和总RNA,提取细胞的总蛋白和总RNA进行蛋白免疫印迹和实时定量PCR检测RGS5的表达。共聚焦激光扫描显微镜观察RGS5胞内定位;免疫组化检测RGS5在乳腺肿瘤组织中表达情况。结果:MDA-MB-231细胞系中RGS5基因表达上调,MCF7和ZR-75-1细胞系中RGS5蛋白表达提高。结论:RGS5在乳腺癌细胞的高表达可能参与其生长和转移,揭示RGS5可能是人乳腺肿瘤的治疗靶点。

关键词： RGS5 乳腺癌蛋白表达

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hβ-arrestin2基因重组质粒构建及蛋白表达和定位

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现代肿瘤医学 2015年第9期23卷 1198-1200页

作者：刘彩红毛琪郭文东朱亚勤中国医科大学基础医学院细胞病理生物学研究室细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001 哈尔滨医科大学大庆校区医学检验与技术学院免疫教研室黑龙江大庆163319

目的:构建p EGFP-C1-β-arrestin2融合蛋白表达载体,并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法:以p GEX-5X-1-β-arrestin2为模板,PCR法扩增hβ-arrestin2编码序列,亚克隆至p EGFP-C1中,p EGFP-C1-β-arrestin2经双酶切初步鉴定再送测... 详细信息

目的:构建p EGFP-C1-β-arrestin2融合蛋白表达载体,并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法:以p GEX-5X-1-β-arrestin2为模板,PCR法扩增hβ-arrestin2编码序列,亚克隆至p EGFP-C1中,p EGFP-C1-β-arrestin2经双酶切初步鉴定再送测序公司检测正确后瞬时转染人胚肾细胞HEK293,Western blot检测融合蛋白表达。激光扫描共聚焦显微镜观察融合蛋白在HEK293细胞中的分布。结果:hβ-arrestin2编码序列被成功克隆至p EGFP-C1中,Western blot检测到融合蛋白表达,分子量约为77k Da,p EGFP-C1-β-arrestin2定位于HEK293细胞的细胞质中。结论:成功构建hβ-arrestin2基因真核表达载体,证实了融合蛋白定位在HEK293的细胞质中。

关键词： hβ-arrestin2基因蛋白质印记绿色荧光蛋白

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HDAC2在肝细胞肝癌中对MMP9表达的影响

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现代肿瘤医学 2019年第3期27卷 390-393页

作者：尹中波王春玉赵越南通市第六人民医院病理科江苏南通226011 中国医科大学基础医学院染色质生物学研究室.教育部医学细胞生物学重点实验室.卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的:明确组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)在肝细胞肝癌(HCC)中对基质金属蛋白酶9(MMP9)表达的影响。方法:利用mRNA表达谱芯片数据进行统计分析,确定HDAC2和MMP9的mRNA在HCC组织中的表达情况及相关性;实时定量PCR检测HDAC2过表达对MMP9转录的... 详细信息

目的:明确组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)在肝细胞肝癌(HCC)中对基质金属蛋白酶9(MMP9)表达的影响。方法:利用mRNA表达谱芯片数据进行统计分析,确定HDAC2和MMP9的mRNA在HCC组织中的表达情况及相关性;实时定量PCR检测HDAC2过表达对MMP9转录的影响;蛋白免疫印迹检测HDAC2过表达对MMP9蛋白表达的影响。结果:HDAC2和MMP9的mRNA在HCC肿瘤组织中均表达升高并呈正相关性;在Hep G2细胞中,HDAC2促进MMP9的转录及蛋白表达。结论:HDAC2在HCC中促进MMP9的表达,可能在HCC转移过程中发挥作用。

关键词：组蛋白去乙酰化酶2 基质金属蛋白酶9 肝细胞肝癌肿瘤转移

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限制性片段长度多态性结合微流控芯片电泳检测大肠癌K-ras基因点突变

限制性片段长度多态性结合微流控芯片电泳检测大肠癌K-ras基因点...

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中华医学会医学细胞生物学分会第三届全国学术会议

作者：张惠丹宋瑾任辉徐章润王晓楠方瑾中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室医学细胞生物学教育部重点实验室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳 110001 沈阳市肛肠医院大肠外科沈阳 110002 东北大学分析科学研究中心沈阳 110004

目的 K-ras基因点突变发生于早期腺瘤向中期腺瘤的转变阶段,可能是大肠癌恶变的始动基因.微流控芯片技术是近年迅速发展起来的新的微型分析系统,具有微型化、自动化、集成化及便携化的特点.本研究以K-ras基因点突变作为检测对象,将限制... 详细信息

目的 K-ras基因点突变发生于早期腺瘤向中期腺瘤的转变阶段,可能是大肠癌恶变的始动基因.微流控芯片技术是近年迅速发展起来的新的微型分析系统,具有微型化、自动化、集成化及便携化的特点.本研究以K-ras基因点突变作为检测对象,将限制性片段长度多态性(RFLP)与微流控芯片相结合,建立将样品进样、分离、检测和记录等步骤连续自动处理的基因突变检测平台.方法 PCR扩增含有K-ras基因第一外显子的第12位密码子的片段,并进行Mva Ⅰ酶切,酶切产物以微流控电泳系统进行检测.采用光刻及高温封接技术制作通道为十字交叉形的玻璃微流控芯片,结合激光诱导荧光检测系统,建立微流控毛细管电泳技术平台.采用该平台对6种已知突变类型的大肠癌细胞系及98例大肠癌石蜡包埋组织中的K-ras基因突变进行检测.同时将大肠癌K-ras基因野生型细胞株HT29和纯合突变细胞株SW480以不同比例混合,研究系统的检测灵敏度.结果 RFLP结合微流控芯片电泳平台可在5 min内实现对K-ras基因的高效检测,6种大肠癌细胞系中K-ras基因的纯合突变、杂合突变及野生型均被准确检出.对不同比例野生型/纯合突变型混合细胞的检测显示系统的检测灵敏度可达1/10 000.该系统对98例石蜡包埋组织标本中K-ras的突变检出率为28.6％(28/98),显著高于测序的检出率13.3％(13/98).结论本研究建立的RFLP结合微流控芯片电泳平台能够对K-ras基因突变进行高效检测,具有灵敏度高、特异性强、快速和低成本等优势,为快速进行肿瘤基因突变筛查及早期诊断提供了新的技术平台.

关键词：微流控芯片限制性片段长度多态性大肠癌 K-ras基因点突变

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肝癌SMMC-7721细胞系HSF4调控的靶基因图谱分析

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生命科学研究 2018年第3期22卷 201-207页

作者：马汝海王天骄潘忠诚赵雨杰何群中国医科大学公共基础学院化学教研室中国辽宁沈阳110122 中国医科大学基础医学院教育部细胞生物学重点实验室中国辽宁沈阳110122

热休克转录因子4(heat shock transcription factor 4,HSF4)是热休克转录因子HSF家族成员,近年发现HSF4除发挥调控热休克蛋白(heat shock protein,HSP)表达的功能外,亦直接或间接调节许多非热休克基因的表达,参与细胞生长发育多种生理... 详细信息

热休克转录因子4(heat shock transcription factor 4,HSF4)是热休克转录因子HSF家族成员,近年发现HSF4除发挥调控热休克蛋白(heat shock protein,HSP)表达的功能外,亦直接或间接调节许多非热休克基因的表达,参与细胞生长发育多种生理病理过程。现通过染色质免疫共沉淀联合测序(chromatin immunoprecipitation sequencing,ChIP-Seq)方法对HSF4潜在的靶基因进行检测,并用GO(gene ontology)分析方法对这些靶基因进行分析,以探求HSF4发挥的生物学功能。ChIP-Seq结果显示:在肝癌SMMC-7721细胞系基因组DNA中共有1 726个HSF4结合区域,其中102个在启动子区。GO分析结果显示:这些潜在的靶基因分别参与细胞发育、增殖和对外部刺激应答的生物过程,具有与核酸和蛋白质结合及蛋白质激活的分子功能,参与药物和有害异物代谢以及化学致癌的信号传导通路。此外,MEME4.12.0软件推测出在SMMC-7721细胞系中HSF4与DNA启动子区结合的6种模式。分析HSF4在肝癌SMMC-7721细胞系中可能调控的靶基因图谱为进一步研究HSF4在肝癌发生机制中的作用提供了有效的实验数据和理论基础。

关键词：热休克转录因子4(HSF4) 肝肿瘤染色质免疫共沉淀联合测序(ChIP-Seq) 靶基因 GO分析

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细胞紧密连接的结构组成及其调控的研究进展

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解剖科学进展 2010年第1期16卷 71-74页

作者：马怡然尚德淑方文刚陈誉华中国医科大学基础医学院卫生部细胞生物学重点实验室发育生物学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学附属第一医院输血科辽宁沈阳110001

紧密连接(tight junction)位于相邻细胞间隙的顶端侧面,对于维持表皮和内皮细胞的选择渗透性屏障功能是非常关键的。紧密连接有两个主要功能:渗透性调节功能、维持细胞极性。本文综述了最新研究的紧密连接的蛋白质组成、紧密连接组装的... 详细信息

紧密连接(tight junction)位于相邻细胞间隙的顶端侧面,对于维持表皮和内皮细胞的选择渗透性屏障功能是非常关键的。紧密连接有两个主要功能:渗透性调节功能、维持细胞极性。本文综述了最新研究的紧密连接的蛋白质组成、紧密连接组装的信号调节、组成蛋白间的相互作用调控机制以及在生命活动中意义,为寻找某些疾病的治疗方案提供一定的理论基础。

关键词：细胞紧密连接结构组成调控蛋白质组成信号调节细胞间隙屏障功能内皮细胞

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应用凝集素芯片检测细胞膜表面糖链种属特异性

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中国医药生物技术 2011年第1期6卷 24-28页

作者：马汝海王天骄潘忠诚何群中国医科大学基础医学院化学教研室沈阳110001 中国医科大学基础医学院生物芯片中心/教育部细胞生物学重点实验室沈阳110001

目的应用凝集素芯片检测小鼠和兔不同组织细胞膜表面的糖链类型,探求不同物种间相同组织细胞膜表面糖复合物在种群免疫和细胞功能中的作用。方法选择22种凝集素,利用生物芯片点样仪制备芯片,选用牛血清白蛋白(BSA)为阴性质控,马铃薯凝集... 详细信息

目的应用凝集素芯片检测小鼠和兔不同组织细胞膜表面的糖链类型,探求不同物种间相同组织细胞膜表面糖复合物在种群免疫和细胞功能中的作用。方法选择22种凝集素,利用生物芯片点样仪制备芯片,选用牛血清白蛋白(BSA)为阴性质控,马铃薯凝集素(STL)为阳性质控。分别用胶原酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ消化小鼠和兔的肾、脾、肝组织,制备细胞悬液,并加入吖啶橙荧光标记细胞。将细胞悬液分别滴加至凝集素芯片中,利用凝集素与糖链的特异亲和性捕获细胞,激光扫描仪检测芯片中各凝集素位点的荧光信号强度,行常规HE染色后于荧光显微镜下观察各凝集素位点所捕获的细胞形态,并分析不同胶原酶消化对检测结果的影响。结果小鼠和兔相同组织的细胞膜表面糖链类型基本相同,仅个别位点略有不同。在GNA、LTL、HHL、NPL位点,兔脾细胞均为阴性,小鼠脾细胞均为阳性。在BPL、WFA位点,兔肾细胞均为阴性,小鼠肾细胞均为阳性;在MAL-I位点,兔肾细胞为阳性,小鼠肾细胞为阴性。MPL、WBA、LTL、SBA、BPL、WFA、MAL-I、AAL、BCL位点,兔肝细胞均为阳性,小鼠肝细胞均为阴性;在NPL位点,小鼠肝细胞为阳性,兔肝细胞为阴性。DSL、STL位点,小鼠和兔各组织细胞检测结果均为阳性;在EEL、DBA位点,小鼠和兔各组织细胞检测结果均为阴性。在GNA位点,兔脾组织经胶原酶Ⅱ消化后可见极少量细胞,经其他2种胶原酶消化后则未见捕获细胞。兔肾组织以及小鼠的脾和肾组织经3种胶原酶消化后,检测结果无明显差异。在BCL位点,兔肝组织经胶原酶IV消化后捕获细胞最多,其次为胶原酶Ⅱ,胶原酶Ⅰ最少。结论通过制备的凝集素芯片成功检测了小鼠和兔不同组织细胞膜表面的糖链特异性。小鼠和兔相同组织的细胞膜表面具有相同类型糖链,但不同组织之间细胞膜糖链类型也存在其特异性,这可能与组织分化及其功能密切相关。

关键词：细胞膜凝集素类动物实验

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3D打印技术在医学领域中的应用

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解剖科学进展 2016年第3期22卷 351-354,358页

作者：于敏张曙光邵海波中国医科大学基础医学院分子细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110122 中国医科大学附属第一医院胸外科沈阳110001 中国医科大学附属第一医院介入科沈阳110001

3D打印技术是新型的快速打印技术,它结合了三维扫描、计算机辅助数字化成型等技术,实现高精度、高效率、低费用地打印立体结构。在医学领域,3D打印通过对骨骼、肌肉、血管、神经等解剖结构进行高仿真地精确打印,用于辅助解剖学、病理学... 详细信息

3D打印技术是新型的快速打印技术,它结合了三维扫描、计算机辅助数字化成型等技术,实现高精度、高效率、低费用地打印立体结构。在医学领域,3D打印通过对骨骼、肌肉、血管、神经等解剖结构进行高仿真地精确打印,用于辅助解剖学、病理学教学、临床实习生的手术模拟、医生术前讨论与手术方案制定,也被作为植入体用于患者缺损组织的修补。通过将活细胞与仿生材料相结合进行的3D生物打印,可用于药物筛选、药效评价,还可实现组织器官再造、器官移植等。

关键词：医学领域临床实习生三维扫描器官移植仿生材料手术模拟植入体病理学教学药物筛选药效评价

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白蛋白纳米粒的制备及内耳跨膜给药的初步研究

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国际生物医学工程杂志 2013年第6期36卷 324-327,343,I0008页

作者：于湛于敏周志敏张之宝杜博张哲熊青青孙建军海军总医院全军耳鼻咽喉中心北京100037 第二炮兵总医院耳鼻喉科北京100088 中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室医学细胞生物学教育部重点实验室细胞生物学教研室沈阳110001 中国医学科学院北京协和医学院生物医学工程研究所天津300192

目的目前在临床上国内外尚无对内耳病局部用药的缓释剂,本研究旨在探讨能否将白蛋白纳米粒载体材料作为鼓室跨膜给药缓释剂.方法采用去溶剂化法制备空白白蛋白纳米粒并进行系统表征和细胞毒性评价.为便于观察,选取一种红色荧光染料即... 详细信息

目的目前在临床上国内外尚无对内耳病局部用药的缓释剂,本研究旨在探讨能否将白蛋白纳米粒载体材料作为鼓室跨膜给药缓释剂.方法采用去溶剂化法制备空白白蛋白纳米粒并进行系统表征和细胞毒性评价.为便于观察,选取一种红色荧光染料即罗丹明B（RhB）作为模型药物,以物理吸附方式与空白白蛋白纳米粒结合形成载药白蛋白纳米粒,测定其载药量、包封率及体外药物释放曲线,同时采用小动物活体成像技术观察其注入豚鼠听泡内跨圆窗膜转运扩散情况.结果制备的白蛋白纳米粒为实心球形,表面光滑,平均粒径大小为476 nm,Zeta电位为15.4 mV.体外药物释放结果表明,该纳米粒具有缓释效果.经戊二醛交联固定的白蛋白纳米粒具有一定的细胞毒性;而经热变性处理的白蛋白纳米粒具有较好的细胞相容性.小动物活体成像实验可以看到RhB在听泡内滞留扩散,而后经解剖观察,证明白蛋白纳米粒可在圆窗膜表面附着并穿越圆窗膜实现跨膜向耳蜗内转运.结论制备的白蛋白纳米粒结构完整,制备方法简单、无毒性,可以很好地包载药物并具有缓释功能,为进一步制备可注射跨圆窗膜定向缓释纳米凝胶奠定了坚实的基础.

关键词：牛血清白蛋白纳米粒缓释载体圆窗膜内耳

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低磷酸盐血症性佝偻病PHEX基因突变分析

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国际遗传学杂志 2011年第3期34卷 123-126页

作者：曹丽华麻宏伟王述森王琳罗阳中国医科大学基础医学院医学基因组学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室中国医科大学附属盛京医院发育儿科

目的鉴定一个低磷酸盐血症性佝偻病家系的致病基因突变。方法采集患者外周静脉血,提取基因组DNA。PCR扩增PHEX基因22个外显子及外显子/内含子交界区序列,进行DNA测序分析。结果 DNA测序结果表明患儿PHEX基因第20内含子受体位点突变,IVS2... 详细信息

目的鉴定一个低磷酸盐血症性佝偻病家系的致病基因突变。方法采集患者外周静脉血,提取基因组DNA。PCR扩增PHEX基因22个外显子及外显子/内含子交界区序列,进行DNA测序分析。结果 DNA测序结果表明患儿PHEX基因第20内含子受体位点突变,IVS20-1G>T。结论 PHEX基因新剪接突变IVS20-1 G>T导致该家系低磷酸盐血症性佝偻病的发生。

关键词：低磷酸盐血症性佝偻病 PHEX 受体位点剪接突变

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