检索结果-内蒙古大学图书馆

解剖科学进展 2010年第1期16卷 39-41,44页

作者：马怡然郭大文孙伟方文刚中国医科大学附属第一医院输血科辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院卫生部细胞生物学重点实验室发育生物学教研室辽宁沈阳110001

目的研究活化的小胶质细胞对β淀粉样蛋白吞噬能力的影响。方法以Aβ1-42直接作用于小胶质细胞系细胞BV-2,NO检测试剂盒检测培养液中NO含量;CyQuent增殖试剂盒检测小胶质细胞BV-2的增殖情况,以及共聚焦显微镜观察小胶质细胞BV-2的Aβ吞... 详细信息

目的研究活化的小胶质细胞对β淀粉样蛋白吞噬能力的影响。方法以Aβ1-42直接作用于小胶质细胞系细胞BV-2,NO检测试剂盒检测培养液中NO含量;CyQuent增殖试剂盒检测小胶质细胞BV-2的增殖情况,以及共聚焦显微镜观察小胶质细胞BV-2的Aβ吞噬能力。结果在Aβ1-42作用下,小胶质细胞BV-2释放的NO增加,小胶质细胞BV-2增殖能力增强,并且小胶质细胞BV-2的Aβ吞噬能力增强。结论Aβ沉积诱导小胶质细胞BV-2NO释放和细胞增殖,从而使其从静止态转为活化状态,最终导致活化的小胶质细胞Aβ吞噬能力增强。

关键词：小胶质细胞BV-2 β淀粉样蛋白吞噬

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RNF8在前列腺癌细胞中的表达与定位

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现代肿瘤医学 2013年第5期21卷 980-983页

作者：尹中波霍云龙周婷婷王春玉赵越阜新市矿业集团总医院病理科辽宁阜新123000 中国医科大学盛京医院病理科辽宁沈阳110004 中国医科大学基础医学院染色质生物学研究室教育部医学细胞生物学重点实验室卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的:构建Flag-RNF8真核表达质粒,证实融合蛋白在前列腺癌细胞内的表达与定位。方法:提取人前列腺癌细胞CWR22RV1总RNA,反转录为cDNA。PCR扩增RNF8全长编码区cDNA序列,亚克隆至含有Flag标签的真核表达载体中。将构建的重组质粒测序并转... 详细信息

目的:构建Flag-RNF8真核表达质粒,证实融合蛋白在前列腺癌细胞内的表达与定位。方法:提取人前列腺癌细胞CWR22RV1总RNA,反转录为cDNA。PCR扩增RNF8全长编码区cDNA序列,亚克隆至含有Flag标签的真核表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到前列腺癌细胞CWR22RV1中,提取细胞蛋白进行Western blot检测,同时利用共聚焦激光扫描显微镜观察Flag-RNF8在CWR22RV1细胞内定位。使用免疫沉淀的方法纯化RNF8蛋白。结果:RNF8蛋白全长编码区cDNA克隆到了真核表达载体pcDNA3-Flag中,酶切鉴定片段约为1500bp。Western blot检测到了融合蛋白Flag-RNF8的表达,分子量约为57kDa。Flag-RNF8在CWR22RV1细胞中表达并定位在细胞核中。成功纯化RNF8蛋白。结论:成功构建了Flag-RNF8全长编码区cDNA的真核表达质粒;鉴定了Flag-RNF8融合蛋白的表达并纯化RNF8蛋白;在CWR22RV1细胞中,Flag-RNF8蛋白主要定位在细胞核中。为进一步研究RNF8的生物学特性及其功能奠定了基础。

关键词： RNF8 Western blot 免疫沉淀

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基质金属蛋白酶-9基因多态性与脑梗死相关性的Meta分析

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解剖学研究 2016年第3期38卷 182-186页

作者：刘旭朱瑞霞张健李瞿何志义中国医科大学附属第一医院神经内科辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院细胞生物教研室教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110122

目的评价基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)基因-1562C>T多态性与脑梗死发病的相关性。方法对2015年10月前公开发表的关于脑梗死MMP-9基因-1562C>T多态性的病例对照研究进行Meta分析。结果共纳入12个病例对照... 详细信息

目的评价基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)基因-1562C>T多态性与脑梗死发病的相关性。方法对2015年10月前公开发表的关于脑梗死MMP-9基因-1562C>T多态性的病例对照研究进行Meta分析。结果共纳入12个病例对照研究。Meta分析结果表明,MMP-9基因-1562C>T多态性与脑梗死的发病相关,具有显著的统计学意义(显性遗传模型:OR=1.29,95%CI:1.12-1.48,P<0.01;隐性遗传模型:OR=2.20,95%CI:1.55-3.12,P<0.01)。敏感性分析显示结果稳定。倒漏斗图及Egger回归分析提示不存在发表性偏倚。结论 MMP-9基因-1562C>T多态性与脑梗死发病相关,可能是脑梗死发病的危险因素。

关键词： MMP-9 基因多态性脑梗死 Meta分析

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铅对星形胶质细胞谷氨酸代谢的影响及其机制的研究

铅对星形胶质细胞谷氨酸代谢的影响及其机制的研究

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中国生理学会第24届全国会员代表大会暨生理学学术大会

作者：林琳廖英俊中国医科大学基础医学院细胞生物学卫生部重点实验室染色质生物学研究室中国医科大学基础医学院生理学教研室

铅是具有很强神经毒性的重金属污染物。迄今为止,铅对学习记忆损害方面的研究主要以神经元作为研究对象,而以神经胶质细胞作为研究对象的相关研究却少有报道。星形胶质细胞(astrocyte,AS)是脑内数量最多、分布最广的一类细胞,它对神经... 详细信息

铅是具有很强神经毒性的重金属污染物。迄今为止,铅对学习记忆损害方面的研究主要以神经元作为研究对象,而以神经胶质细胞作为研究对象的相关研究却少有报道。星形胶质细胞(astrocyte,AS)是脑内数量最多、分布最广的一类细胞,它对神经元起支持、营养及促进神经再生与修复等作用。谷氨酸(glutamate,Glu)是主要的兴奋性神经递质。细胞外液中过量Glu的累积,将导致谷氨酸能受体的过度刺激,引起神经元的兴奋性毒性损伤。AS上表达两种高亲和力的谷氨酸转运体GLAST(Glutamate/Aspartate transporter)和GLT-1(Glutamate transporter-1),同时AS内具有谷氨酰胺合成酶(Glutamine Synthetase,GS)。因此,AS不仅能快速清除突触间隙的Glu,而且能对摄入的Glu进行代谢转化。本研究主要探讨铅暴露对AS谷氨酸代谢的影响及其可能机制。实验以原代培养的AS为研究对象,经细胞纯度鉴定后,进行铅暴露72 h。实验结果显示,随铅暴露浓度的增加细胞形态发生改变,且各铅暴露组的AS活力均显著降低。各铅暴露组AS内GS活力与对照组相比均明显下降;GLT-1和GS蛋白表达呈下降趋势,但GLAST蛋白表达无显著性差异;GLT-1和GS的m-RNA水平与蛋白表达趋势一致。各铅暴露组转运体功能与对照组相比均显著下降。实验结果提示铅对GLT-1蛋白表达的影响可能是导致AS对Glu转运能力下降的主要原因,铅对GLT-1和GS蛋白表达的影响可明显抑制突触间隙Glu的转运与代谢,导致Glu在突触间隙的蓄积。

关键词：铅星形胶质细胞谷氨酸转运体 GLT-1

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小鼠肝癌与肝正常细胞系ST3Gal和ST6Gal家族mRNA表达差异研究

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生命科学研究 2011年第4期15卷 323-327页

作者：马汝海王冬青潘忠诚王天骄何群赵雨杰中国医科大学基础医学院化学教研室中国辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院教育部细胞生物学重点实验室生物芯片中心中国辽宁沈阳110001

探讨肝癌细胞系Hepa1-6与肝正常细胞系BNL CL.2唾液酸糖基转移酶ST3Gal和ST6Gal家族mRNA表达的差异以及与细胞膜唾液酸含量的关系,采用RT-PCR方法检测ST3Gal唾液酸转移酶家族6个成员以及ST6Gal唾液酸转移酶家族2个成员mRNA表达差异,用... 详细信息

探讨肝癌细胞系Hepa1-6与肝正常细胞系BNL CL.2唾液酸糖基转移酶ST3Gal和ST6Gal家族mRNA表达的差异以及与细胞膜唾液酸含量的关系,采用RT-PCR方法检测ST3Gal唾液酸转移酶家族6个成员以及ST6Gal唾液酸转移酶家族2个成员mRNA表达差异,用凝集素芯片检测细胞膜表面唾液酸表达情况,结果显示:与正常细胞系BNL CL.2相比,hepa1-6细胞内唾液酸转移酶ST3GalⅠ、ST3GalⅣ、ST3GalⅥ呈现高表达,ST3GalⅤ低表达,ST3GalⅡ、ST3GalⅢ表达无显著性差异,两细胞系内均为检测出ST6GalⅠ表达,ST6GalⅡ表达无显著差异;hepa1-6细胞膜α2-3和α2-6连接唾液酸含量均显著增加;提示ST3GalⅠ、ST3GalⅣ、ST3GalⅤ、ST3GalⅥ可能与肝癌发生过程相关,ST3GalⅠ、ST3GalⅣ、ST3GalⅥ可能与肝癌细胞膜α2-3唾液酸含量增加相关,ST6Gal家族对细胞膜α2-6连接唾液酸含量增加无贡献.

关键词：唾液酸糖基转移酶肝癌细胞膜糖基化

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小鼠3D3/LYRIC基因重组质粒构建及蛋白表达和定位

小鼠3D3/LYRIC基因重组质粒构建及蛋白表达和定位

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第六次中国国际暨第九次全国口腔颌面外科学术会议

作者：代炜李彦姝李妍孙长伏中国医科大学中国医科大学附属口腔医院口腔颌面外科教研室口腔颌面头颈外科中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室细胞生物学卫生部重点实验室

目的:构建小鼠3D3/LYRIC真核表达载体并证实融合蛋白在涎腺腺样囊性癌细胞内的表达及定位。方法:提取小鼠乳腺上皮细胞系C127的mRNA,反转录为cDNA。PCR扩增m3D3/L,YRIC全长编码基因,亚克隆至pEGFP-C1表达载体中。将构建的重组质粒测序... 详细信息

目的:构建小鼠3D3/LYRIC真核表达载体并证实融合蛋白在涎腺腺样囊性癌细胞内的表达及定位。方法:提取小鼠乳腺上皮细胞系C127的mRNA,反转录为cDNA。PCR扩增m3D3/L,YRIC全长编码基因,亚克隆至pEGFP-C1表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到人腺样囊性癌细胞ACC-2中,提取细胞蛋白进行Westernblot检测。利用免疫荧光显微镜观察

关键词： 3D3/LYRIC 涎腺腺样囊性癌 AEG-1

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hLMO3基因真核表达载体的构建及蛋白的表达和定位

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解剖科学进展 2011年第4期17卷 347-350页

作者：顾卉佟宇鑫刘彤李妍李丹妮袁正伟中国医科大学附属盛京医院实验研究中心辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院细胞生物教研室细胞生物学教育部卫生部重点实验室辽宁沈阳110001 中国医科大学临床医学系辽宁沈阳110001

目的构建hLMO3真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法以人胎脑文库cDNA为模板,PCR扩增hLMO3基因cDNA全长,亚克隆至pEGFP表达载体中。将构建的重组质粒进行酶切测序鉴定,并转染到人上皮细胞HEK293细胞中,提取细胞蛋白进... 详细信息

目的构建hLMO3真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法以人胎脑文库cDNA为模板,PCR扩增hLMO3基因cDNA全长,亚克隆至pEGFP表达载体中。将构建的重组质粒进行酶切测序鉴定,并转染到人上皮细胞HEK293细胞中,提取细胞蛋白进行Western blot检测。利用激光扫描共聚焦显微镜观察pEGFP-hLMO3在HEK293细胞内的定位。结果 hLMO3基因cDNA全长克隆到了真核表达载体pEGFP中,酶切鉴定片段为440bp;Western blot检测到融合蛋白在HEK293细胞表达,分子量约为42kDa,pEGFP-LMO3在人HEK293细胞中主要定位于细胞核内。结论成功构建了hLMO3基因cDNA全长的真核表达载体,pEGFP-LMO3蛋白在HEK293细胞中主要定位于细胞核内。

关键词： hLMO3基因质粒构建基因表达与定位人HEK293细胞

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基于微流控芯片的温度梯度毛细管电泳系统对大肠癌中K-ras基因点突变的检测

基于微流控芯片的温度梯度毛细管电泳系统对大肠癌中K-ras基因点...

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第二届中国医学细胞生物学学术大会暨细胞生物学教学改革会议

作者：张惠丹宋瑾王晓楠徐章润戴敬方瑾中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室东北大学分析科学研究中心沈阳建筑大学信息与控制工程学院

K-ras基因点突变发生于早期腺瘤向中期腺瘤的转变阶段,可能是大肠癌恶变的始动基因。微流控芯片技术是近年迅速发展起来的新的微型分析系统,具有微型化、自动化、集成化及便携化的特点。本研究以K-ras基因点突变作为检测对象,将温度梯... 详细信息

K-ras基因点突变发生于早期腺瘤向中期腺瘤的转变阶段,可能是大肠癌恶变的始动基因。微流控芯片技术是近年迅速发展起来的新的微型分析系统,具有微型化、自动化、集成化及便携化的特点。本研究以K-ras基因点突变作为检测对象,将温度梯度毛细管电泳(TGCE)系统

关键词：微流控芯片温度梯度毛细管电泳大肠癌K-ras 基因点突变

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壳聚糖多孔明胶微球温敏凝胶载药体的建立与评价

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解剖科学进展 2016年第5期22卷 490-492页

作者：于湛于敏贾宏光顾湘张丽川黄小兵刘娅孙建军魏永祥首都医科大学附属北京安贞医院耳鼻咽喉头颈外科北京100029 海军总医院全军耳鼻咽喉中心北京100048 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110122

目的寻找有效的跨圆窗膜载药体,制备多孔明胶微球结合壳聚糖/β-GP溶液的温敏特点,制备新型可注射、可降解、无毒副作用并具有缓释效应的药物载体,为后续动物实验提供研究基础。方法利用化学反应合成碳酸钙（CaCO_3）模板,采用W/O型乳... 详细信息

目的寻找有效的跨圆窗膜载药体,制备多孔明胶微球结合壳聚糖/β-GP溶液的温敏特点,制备新型可注射、可降解、无毒副作用并具有缓释效应的药物载体,为后续动物实验提供研究基础。方法利用化学反应合成碳酸钙（CaCO_3）模板,采用W/O型乳化-固化法制备了明胶-碳酸钙复合微球,用EDTA处理除去碳酸钙,得到多孔的明胶微球。并以环境扫描电子显微镜对多孔明胶微球进行表征。利用壳聚糖与β-GP合成溶液物理混合形成壳聚糖多孔明胶微球温敏凝胶载药体。结果扫描电镜显示,明胶微球表面呈多孔结构,粒径在2~4um之间。壳聚糖/β-GP冻干后呈多孔网络状。壳聚糖/β-GP具有温敏性,且两者共混后温敏性不变。结论壳聚糖/β-GP溶液共混可制备成具有温敏效果的凝胶载药体,为跨膜药物转运的研究提供基础。

关键词：壳聚糖明胶微球碳酸钙温敏凝胶

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小分子化合物G-052抑制胃癌细胞侵袭及其分子机制

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解剖科学进展 2016年第3期22卷 279-281页

作者：张健刘奇王健由良浩李丹妮李丰中国医科大学基础医学院细胞生物教研室教育部医学细胞生物学重点实验室沈阳110122 沈阳药科大学制药工程学院沈阳110016 中国医科大学附属第一医院肿瘤内科沈阳110001

目的研究小分子化合物G-052对于人胃癌细胞增殖和侵袭的影响及可能分子机制。方法用MTT检测不同浓度小分子化合物G-052对胃癌细胞BGC823和MKN-45增殖能力的影响。分别用0、20、40、60μmol/L浓度的G-052处理BGC823和MKN-45两种胃癌细胞... 详细信息

目的研究小分子化合物G-052对于人胃癌细胞增殖和侵袭的影响及可能分子机制。方法用MTT检测不同浓度小分子化合物G-052对胃癌细胞BGC823和MKN-45增殖能力的影响。分别用0、20、40、60μmol/L浓度的G-052处理BGC823和MKN-45两种胃癌细胞,应用Transwell小室检测其对上述胃癌细胞侵袭能力的抑制作用,Western Blot检测化合物对金属基质蛋白酶2(MMP2)表达及丝切蛋白(Cofilin)磷酸化水平的影响。结果化合物G-052以剂量依赖的方式抑制BGC823和MKN-45细胞的侵袭能力,但对增殖能力无明显影响。Western Blot结果显示G-052下调胃癌细胞BGC823中MMP2的表达及Cofilin的磷酸化水平。结论 G-052抑制胃癌细胞BGC823、MKN-45的侵袭可能与下调MMP2的表达及Cofilin磷酸化水平相关。

关键词： G-052 胃癌侵袭 MMP2 Cofilin

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