检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物化学与分子生物学报 2002年第2期18卷 191-196页

作者：罗阳张学刘莹姜莉刘兴元于秉治中国医科大学基础医学院生物化学教研室沈阳110001 中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110001

为了研究牛精浆 (bovineseminalplasma ,BSP)蛋白及其相关蛋白在受精及受精卵发育中的重要作用 ,寻找BSP蛋白相关新基因 .采用cDNA末端快速扩增 (RACE)技术 ,克隆了一个BSP蛋白相关基因的cDNA序列 .应用辐射杂种细胞系 (RH)技术进行了... 详细信息

为了研究牛精浆 (bovineseminalplasma ,BSP)蛋白及其相关蛋白在受精及受精卵发育中的重要作用 ,寻找BSP蛋白相关新基因 .采用cDNA末端快速扩增 (RACE)技术 ,克隆了一个BSP蛋白相关基因的cDNA序列 .应用辐射杂种细胞系 (RH)技术进行了基因染色体定位 .通过RT PCR检测了该基因在人体各组织中的表达情况 .并将该基因编码的蛋白进行了原核表达 .新基因的cDNA长度为 10 5 2bp ,其开放阅读框架 (ORF)编码了一个含 2 2 3个氨基酸残基的蛋白质 ,氨基酸序列中含有 4个纤连蛋白Ⅱ结构域 ,与BSP蛋白在结构上具有一定的相似性 ,称其为人BSP相关蛋白 (humanBSP relatedproteins ,HBRP) .该基因定位于染色体 19q13,在大肠杆菌中表达为 5 2kD的融合蛋白 .研究结果提示 ,应用RACE方法克隆了一种新的人类与BSP蛋白相关的基因 ,推测其编码蛋白是与BSP蛋白功能相关的结合蛋白 ,通过基因重组技术大量获得表达蛋白 ,对进一步研究新蛋白的生物学功能具有重要的意义 .

关键词：人牛精浆蛋白相关新基因 cDNA克隆定位表达

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雌激素受体在甲状腺癌中作用的研究进展

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生命科学 2017年第5期29卷 489-494页

作者：宋诗平赵越王春玉中国医科大学七年制沈阳110122 中国医科大学基础医学院卫生部细胞生物学重点实验室教育部医学细胞生物学重点实验室染色质生物学研究室沈阳110122

近年来,越来越多的研究报道了雌激素受体在甲状腺癌发生发展过程中的作用。与正常甲状腺组织和结节性增生组织相比,不同亚型的雌激素受体在甲状腺癌中的表达有不同的改变:乳头状甲状腺癌中雌激素受体的表达与Ki67、突变型P53和VEGF这些... 详细信息

近年来,越来越多的研究报道了雌激素受体在甲状腺癌发生发展过程中的作用。与正常甲状腺组织和结节性增生组织相比,不同亚型的雌激素受体在甲状腺癌中的表达有不同的改变:乳头状甲状腺癌中雌激素受体的表达与Ki67、突变型P53和VEGF这些重要肿瘤标志物有关;ERα与IQGAP1相互作用促进甲状腺癌进展;ERα在甲状腺癌中上调Hsp27表达,等等。这些研究结果确定了雌激素受体对甲状腺癌增殖、侵袭和转移等病理过程的影响,但不同亚型的雌激素受体对甲状腺癌影响尚不完全明确。现就雌激素受体在甲状腺癌中的相关研究进行综述。

关键词：甲状腺癌雌激素受体肿瘤生长肿瘤转移

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PPARα在肝脏相关疾病中作用的研究进展

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生命科学 2017年第5期29卷 479-484页

作者：朱书彤赵越中国医科大学七年制沈阳110122 中国医科大学基础医学院卫生部细胞生物学重点实验室教育部医学细胞生物学重点实验室染色质生物学研究室沈阳110122

过氧化物酶体增殖物激活受体α(perixisome proliferation-activated receptor alpha,PPARα)是核受体超家族成员,是参与肝脏β氧化的主要调控蛋白,通过诱导下游靶基因转录,从而发挥其重要的生物学功能。近年来,肝脏相关疾病的研究备受... 详细信息

过氧化物酶体增殖物激活受体α(perixisome proliferation-activated receptor alpha,PPARα)是核受体超家族成员,是参与肝脏β氧化的主要调控蛋白,通过诱导下游靶基因转录,从而发挥其重要的生物学功能。近年来,肝脏相关疾病的研究备受关注,肝癌(主要以肝细胞性肝癌为主)也呈年轻化趋势。PPARα的活化能够降低高脂喂养小鼠肝脏中甘油三酯的含量或脂肪的生成量。此外,PPARα通过调控细胞增殖与凋亡进程等多种机制参与肝癌进程。现综述PPARα在非酒精性脂肪肝、酒精性脂肪肝和肝细胞性肝癌进程中的作用。

关键词： PPARα 转录调控非酒精性脂肪肝酒精性脂肪肝肝细胞性肝癌

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巨噬细胞炎症蛋白1α促进6T-CEM细胞穿过人脑微血管内皮细胞单层

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细胞生物学杂志 2006年第6期28卷 883-887页

作者：尚德淑马怡然赵伟东方文刚朱莉陈誉华宋今丹中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110001

有研究表明,T细胞可能参与阿尔茨海默氏病(AD)免疫过程,但T细胞如何穿过血脑屏障内皮细胞紧密连接,到达脑内还不清楚。我们研究曾发现,AD病人外周血T淋巴细胞穿过人脑微血管内皮细胞(HBMEC)单层能力高于同龄正常人,其T淋巴细胞巨噬细胞... 详细信息

有研究表明,T细胞可能参与阿尔茨海默氏病(AD)免疫过程,但T细胞如何穿过血脑屏障内皮细胞紧密连接,到达脑内还不清楚。我们研究曾发现,AD病人外周血T淋巴细胞穿过人脑微血管内皮细胞(HBMEC)单层能力高于同龄正常人,其T淋巴细胞巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1α)表达明显增高。为进一步在体外研究促使T淋巴细胞穿过HBMEC单层的机制,选取重组人MIP-1α(rhMIP-1α)作用于HBMEC,同时选用高表达MIP-1α的人急性白血病T淋巴细胞(6T-CEM)作为模式细胞,与HBMEC共同温育。发现rhMIP-1α可促进6T-CEM细胞穿过HBMEC单层,并使HBMEC单层紧密连接结构发生改变。在6T-CEM细胞或rhMIP-1α与HBMEC单层单独温育过程中,均引起HBMEC单层CCR5表达变化。提示MIP-1α可能通过与HBMEC单层上CCR5相互作用介导T淋巴细胞穿过HBMEC单层。

关键词：巨噬细胞炎症蛋白1α 人脑微血管内皮细胞紧密连接蛋白ZO-1 CC趋化因子受体5

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联合应用高分辨率熔解曲线和多重连接依赖探针扩增技术对PAH基因突变筛查研究

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中华医学遗传学杂志 2011年第6期28卷 649-653页

作者：季春燕孙莉莉曹丽华胡煜黄宏王述森罗阳中国医科大学基础医学院医学基因组学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室沈阳110001 沈阳市妇女儿童保健中心

目的联合应用高分辨率熔解曲线（highresolutionmelting，HRM）和多重连接依赖探针扩增（multiplexligation—dependentprobeamplification，MLPA）技术检测苯丙酮尿症（phenylketonuria，PKU）患者基因突变，并探讨两种技术联合运用对于突变筛查的价值。方法采用HRM和MLPA技术对26例临床诊断为PKU的患者苯丙氨酸羟化酶基因（phenylalaninehydroxylase，PAH）进行检测，并通过测序验证；针对未报道的基因改变进行聚合酶链反应一限制性片段长度多态性分析。结果在52个等位基因中检测到44个突变等位基因（共21种不同突变），包括第4外显子拷贝数的增加，总检出率达84．62％（44／52），其中C．584—585insA和IVSl0＋1G〉T突变在国内外未见报道。此外，R243Q（25％）突变为中国最常见的突变种类。结论应用HRM和MLPA技术相对提高了PAH基因突变筛查的检出率，检测结果丰富了基因突变数据库，并为临床诊断与产前诊断提供实验室依据。

关键词：苯丙酮尿症苯丙氨酸羟化酶基因突变高分辨率熔解曲线多重连接依赖探针扩增

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全氟辛烷磺酰基化合物(PFOS)对脑血管内皮细胞的损伤作用

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中国现代医学杂志 2006年第11期16卷 1646-1648,1650页

作者：王昕陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物教研室卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的探讨全氟辛烷磺酰基化合物(PFOS)对脑血管内皮细胞的损伤作用。方法以不同浓度的PFOS处理脑血管内皮细胞(HBMEC),30min后观察细胞形态;用免疫荧光染色的方法观察细胞骨架微管蛋白α-tubulin的表达;不同剂量PFOS连续腹腔内注射14d观... 详细信息

目的探讨全氟辛烷磺酰基化合物(PFOS)对脑血管内皮细胞的损伤作用。方法以不同浓度的PFOS处理脑血管内皮细胞(HBMEC),30min后观察细胞形态;用免疫荧光染色的方法观察细胞骨架微管蛋白α-tubulin的表达;不同剂量PFOS连续腹腔内注射14d观察大鼠行为学改变。结果随着PFOS浓度的增高细胞形态发生变化,细胞变圆、部分细胞不再贴壁、细胞骨架微管解聚细胞形态变圆,微管逐渐向细胞核周围聚集;动物实验表明高浓度PFOS可导致大鼠脑损伤、出现偏瘫的体征。结论全氟辛烷磺酰基化合物(PFOS)对脑血管内皮细胞有损伤作用。

关键词：人脑微血管内皮细胞(FIBMEC) PFOS 微管蛋白 α-tubulin

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血管内皮生长因子及其受体在鼠成骨细胞分化中的作用

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中华实验外科杂志 2004年第7期21卷 852-854,F003页

作者：李长有宋今丹原银栋范广宇中国医科大学第一临床学院骨科沈阳110001 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室卫生部重点实验室

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)在鼠成骨细胞分化过程中的作用。方法利用鼠原代FRC细胞培养系统(第0、5、9、14天)和取材新生鼠颅盖骨组织(5例),采用反转录聚合酶链反应(RTPCR)和免疫组织化学染色方法,检测VEGF及其受体Flt1和KDR/Flk1... 详细信息

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)在鼠成骨细胞分化过程中的作用。方法利用鼠原代FRC细胞培养系统(第0、5、9、14天)和取材新生鼠颅盖骨组织(5例),采用反转录聚合酶链反应(RTPCR)和免疫组织化学染色方法,检测VEGF及其受体Flt1和KDR/Flk1在FRC细胞分化、矿化过程中mRNA和在新生鼠颅盖骨组织中蛋白质的表达。结果在控制培养条件下,FRC细胞出现明显的成骨特性。结合FRC细胞分化特性,RTPCR检测发现VEGF及其受体Flt1和KDR/Flk1在FRC细胞中从分化到矿化过程中,mRNA表达逐渐增强。特别是在矿化后第9天和第14天表达水平明显增强。免疫组织化学染色证实了RTPCR结果,新生鼠颅盖骨中的成骨细胞同时表达VEGF及其受体Flt1和KDR/Flk1。结论VEGF及其受体Flt1和KDR/Flk1在成骨细胞分化和矿化过程中表达逐渐增强。作为一种重要的血管性因子,VEGF的自分泌作用方式在成骨细胞的分化中起重要作用。

关键词：血管内皮生长因子受体鼠成骨细胞自分泌作用免疫组织化学

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小鼠3D3／LYRIC基因重组质粒构建及蛋白表达和定位

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中国医科大学学报 2011年第8期40卷 684-687页

作者：代炜李彦姝李妍孙长伏中国医科大学附属口腔医院口腔颌面外科教研室口腔颌面头颈外科沈阳110002 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室细胞生物学卫生部重点实验室沈阳110001

目的构建小鼠3D3/LYRIC真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法提取小鼠乳腺上皮细胞系C127的mRNA,反转录为cDNA。PCR扩增m3D3/LYRIC全长编码基因,亚克隆至pEGFP-C1表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到腺样囊性癌... 详细信息

目的构建小鼠3D3/LYRIC真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法提取小鼠乳腺上皮细胞系C127的mRNA,反转录为cDNA。PCR扩增m3D3/LYRIC全长编码基因,亚克隆至pEGFP-C1表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到腺样囊性癌细胞系ACC-2中,提取细胞蛋白进行Western blot检测。利用免疫荧光显微镜观察pEGFP-m3D3/LYRIC在腺样囊性癌ACC-2细胞内的定位。结果 m3D3/LYRIC全长基因序列克隆到真核表达载体pEGFP-C1中,酶切鉴定片段大小为1 740 bp。Western blot检测到融合蛋白GFP-m3D3/LYRIC表达,分子量约为91 kDa。pEGFP-C1-m3D3/LYRIC主要在细胞质内定位,在细胞核内未见表达。结论成功构建了m3D3/LYRIC全长基因真核表达载体,pEGFP-m3D3/LYRIC蛋白主要定位于细胞质内。

关键词： 3D3/LYRIC 腺样囊性癌 AEG-1

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血管内皮生长因子在人类和鼠成骨细胞中的选择性剪接表达

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中华实验外科杂志 2005年第7期22卷 835-836页

作者：李长有宋今丹原银栋范广宇中国医科大学附属第一医院骨科沈阳110001 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室卫生部重点实验室

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)各种转录本亚型在成骨细胞分化中的作用。方法应用特殊设计的引物,逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测VEGFmRNA在人类成骨细胞样细胞SaOS2和MG63和胎鼠颅盖骨细胞(FRC)在第0、5、9、14天不同分化阶段中的选... 详细信息

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)各种转录本亚型在成骨细胞分化中的作用。方法应用特殊设计的引物,逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测VEGFmRNA在人类成骨细胞样细胞SaOS2和MG63和胎鼠颅盖骨细胞(FRC)在第0、5、9、14天不同分化阶段中的选择性剪接表达。结果人类成骨细胞样细胞SaOS2和MG63表达所有的VEGFmRNA亚型,其中以VEGF121和VEGF165表达最强。鼠FRC细胞表达3种VEGFmRNA亚型(即VEGF120,VEGF144和VEGF164),其中以VEGF120和VEGF164表达最强。伴随着FRC细胞的增殖、分化和矿化,这些亚型的表达逐渐增强,并且在结节矿化后达到最高水平。结论小分子的VEGF121/120和VEGF165/164在成骨细胞的分化过程中表达增强,可能起重要的血管源性调节作用。

关键词：选择性剪接血管内皮生长因子(VEGF) 人类成骨细胞样细胞 SaOS-2 VEGF165 成骨细胞分化聚合酶链反应颅盖骨细胞方法应用 mRNA 细胞表达表达增强分化过程调节作用血管源性 A亚型转录本逆转录 FRC C细胞高水平

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GST/HIF-1α融合蛋白表达载体的构建及其在大肠埃希菌中的表达

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中国医科大学学报 2009年第10期38卷 721-723,729页

作者：佟宇鑫李丹妮邵阳光李妍李丰中国医科大学第90期生物科学与生物技术系沈阳110001 中国医科大学第94期临床医学系沈阳110001 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110001

目的构建GST/HIF-1α融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌(***)中诱导表达。方法以质粒pcDNA3.1-HIF-1α为模板,用PCR法扩增HIF-1α全长及各个截短片段,通过BamHI和NotI酶切位点将HIF-1α全长及各个截短突变体定向插入pGEX-4T-2中,构建原... 详细信息

目的构建GST/HIF-1α融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌(***)中诱导表达。方法以质粒pcDNA3.1-HIF-1α为模板,用PCR法扩增HIF-1α全长及各个截短片段,通过BamHI和NotI酶切位点将HIF-1α全长及各个截短突变体定向插入pGEX-4T-2中,构建原核表达质粒pGEX-4T-2-HIF-1α及其截短突变体,并转化*** DH5α,筛选阳性重组子,限制性内切酶酶切鉴定和DNA序列测定正确后,转入*** BL21中,异丙基硫代β-D半乳糖苷诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果酶切及测序结果证明,成功构建了原核表达质粒pGEX-4T-2-HIF-1α及其截短突变体,并用Western blot方法证实了GST/HIF-1α全长及各个截短突变体融合蛋白的表达。结论成功构建了HIF-1α原核表达载体及其截短突变体,并证实了融合蛋白的表达,为进一步纯化HIF-1α蛋白和研究HIF-1α的生物学功能奠定了基础。

关键词：缺氧诱导因子1α 截短突变体质粒原核表达

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