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中国生物化学与分子生物学报 2022年第12期38卷 1671-1680页

作者：肖亦舒梁俊杰许兰刘春亚李冬娜任立成海南医学院生物学教研室海口571199

细胞凋亡机制的探索对于急性早幼粒细胞白血病治疗至关重要。B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)基因家族是调控细胞凋亡的关键基因。拮抗和促进细胞凋亡的动态平衡决定细胞的命运。本研究通过对凋亡相关基因的表达水平与细胞生长... 详细信息

细胞凋亡机制的探索对于急性早幼粒细胞白血病治疗至关重要。B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)基因家族是调控细胞凋亡的关键基因。拮抗和促进细胞凋亡的动态平衡决定细胞的命运。本研究通过对凋亡相关基因的表达水平与细胞生长趋势的分析表明,高三尖杉酯碱与全反式维甲酸联合处理细胞可以更有效地促进早幼粒细胞凋亡(P<0.05)。随着药物浓度变化,Bcl-2与相关基因的表达呈现先升高后降低的趋势(P<0.05)。低浓度药物处理时,抗凋亡蛋白质Bcl-2表达升高,阻止细胞凋亡(P<0.05)。随药物浓度的升高,Bcl-2表达降低,细胞凋亡率提高,进入深度凋亡期(P<0.05)。荧光显微镜观察与流式细胞术的方法验证了细胞凋亡的情况。本研究进一步阐明了高三尖杉酯碱联合全反式维甲酸诱导早幼粒细胞凋亡过程中,Bcl-2及细胞凋亡与增殖的相关基因表达水平的变化与分子机制,为深入探索药物联合诱导凋亡提供可靠支持,为临床治疗做出基础理论的补充。

关键词： B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2) 细胞凋亡早幼粒细胞高三尖杉酯碱全反式维甲酸

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细胞与分子基础实验课程“情景式”教学模式探索

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生物学杂志 2025年第2期42卷 112-117页

作者：钱美睿缪金林黄婉陈志南蒋建利空军军医大学基础医学院细胞生物学教研室国家分子医学转化中心

细胞与分子基础整合课程开设配套实验课程目的是提高学生对所学重难点的融会贯通和对实践能力的灵活应用，培养学生提出问题和解决问题的创新科研思维。文章分析该课程实验教学现状，包括教学方式模式化、教学内容冗余且连续性差、实验... 详细信息

细胞与分子基础整合课程开设配套实验课程目的是提高学生对所学重难点的融会贯通和对实践能力的灵活应用，培养学生提出问题和解决问题的创新科研思维。文章分析该课程实验教学现状，包括教学方式模式化、教学内容冗余且连续性差、实验内容陈旧以及教学效果评价维度单一等问题，并从课程设计，实验内容和考核目标3个方面探讨具体的实验教学改革实践，按照新时代背景下高校大学生创新创业能力培养，以临床病例为导向进行“情景式”实验课教学设计；基于科研思维培养教学模式重构实验内容；以科研思维为主、实验技能为辅建立多重维度考核方式，提升教学设计的实效性和创新性，促进细胞与分子基础课程建设，有效培养学生创新科研思维和科研素养，为培养具有科研创新精神和实践能力的医学人才提供新的思路和实践依据。

关键词：细胞与分子基础实验教学改革实践 “情景式”实验课教学设计创新科研思维

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松萝酸对A549和NCI-H358细胞增殖、凋亡及自噬的影响

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安徽医科大学学报 2025年第3期60卷 455-462页

作者：李新伟王延婷李瑞雪白慧敏刘锦龙包头医学院免疫学教研室

目的探究松萝酸（UA）对肺癌A549和NCI-H358细胞增殖、细胞周期、凋亡和自噬的影响。方法 CCK-8法检测UA对两种肺癌细胞增殖抑制作用。流式细胞术检测UA对两种肺癌细胞周期阻滞作用。DCFH-DA探针法和流式细胞术检测UA诱导两种肺癌细胞... 详细信息

目的探究松萝酸（UA）对肺癌A549和NCI-H358细胞增殖、细胞周期、凋亡和自噬的影响。方法 CCK-8法检测UA对两种肺癌细胞增殖抑制作用。流式细胞术检测UA对两种肺癌细胞周期阻滞作用。DCFH-DA探针法和流式细胞术检测UA诱导两种肺癌细胞生成活性氧（ROS）。Western blot检测两种肺癌细胞经UA及UA+ROS抑制处理后凋亡相关蛋白Bax、Caspase-3和Cleaved-Caspase-3及自噬相关蛋白LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ的表达情况。结果（1） UA降低了两种细胞存活率，且抑制A549细胞增殖能力强于NCI-H358细胞。（2） UA将A549细胞阻滞在G0/G1期，NCI-H358细胞阻滞在G2/M期和S期。（3） UA诱导两种细胞ROS含量增加，NCI-H358细胞ROS增加量多于A549细胞，ROS抑制剂会减少UA诱导的细胞内ROS增多。（4） UA引起了两种肺癌细胞凋亡相关蛋白Bax和Cleaved-caspase-3高表达及自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高，其对A549促凋亡和自噬作用强于NCI-H358;抑制ROS后，两种肺癌细胞的Bax和Cleaved-Caspase-3表达量和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均降低，其中NCI-H358细胞降低更多。结论 UA抑制肺癌A549和NCI-H358细胞增殖，诱导细胞周期阻滞，并引起癌细胞发生细胞凋亡与自噬，且UA对A549细胞抑制杀伤作用强于NCI-H358细胞。这其中诱生细胞ROS参与了UA对两种肺癌细胞的作用，相比A549细胞，ROS可能更多介导UA诱导NCI-H358细胞凋亡和自噬发生。

关键词： UA A549 NCI-H358 细胞周期活性氧凋亡自噬

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miR-207调控结核分枝杆菌在巨噬细胞内存活的机制研究

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中国比较医学杂志 2024年第12期34卷 41-49页

作者：杜文雅代禹美乐林芝马涛吴利先大理大学基础医学院微生物学与免疫学教研室云南大理671000

目的miR-207在许多疾病中存在差异性表达,探究miR-207过表达对调控结核分枝杆菌(H37Ra)在巨噬细胞内存活的机制研究,为结核病的靶向治疗提供理论基础。方法将实验分为4组:空白组(Ana-1细胞)、对照组(感染H37Ra的细胞)、mi组(感染H37Ra... 详细信息

目的miR-207在许多疾病中存在差异性表达,探究miR-207过表达对调控结核分枝杆菌(H37Ra)在巨噬细胞内存活的机制研究,为结核病的靶向治疗提供理论基础。方法将实验分为4组:空白组(Ana-1细胞)、对照组(感染H37Ra的细胞)、mi组(感染H37Ra并转染miRNA-207 mimics)和mi-NC组(感染H37Ra并转染mimics NC)。使用H37Ra感染Ana-1细胞建立结核感染模型,使用脂质体转染法将miRNA-207 mimics和mimics NC转入Ana-1细胞。结核菌落形成单位计数评估miR-207对胞内分枝杆菌负荷的影响以及对胞外残留分枝杆菌的清除作用。采用流式细胞术检测细胞总凋亡率。实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测miR-207、细胞凋亡基因、焦亡基因、炎症基因及自噬基因相对表达量。Western blot检测细胞凋亡蛋白、焦亡蛋白、自噬蛋白的相对表达量。采用荧光显微镜及多功能酶标仪检测细胞内ROS的荧光强度,以及检测细胞内LDH的含量。结果显微镜下观察成功建立感染模型,qPCR检测发现对照组miR-207表达量低于空白组(P<0.01),表明miR-207在空白组和对照组中差异性表达,mi组miR-207表达量显著高于mi-NC组(P<0.0001),表明成功建立转染模型。菌落形成单位计数发现mi组的菌落数高于mi-NC组和对照组(P<0.001)。流式细胞术检测发现mi组总凋亡高于mi-NC组和对照组(P<0.05)。qPCR及Western blot检测发现对照组凋亡基因和凋亡蛋白相对表达量高于空白组(P<0.05),mi组高于mi-NC组(P<0.05)。对照组炎症基因相对表达量高于空白组(P<0.001),mi组高于mi-NC组(P<0.05),对照组焦亡基因和焦亡蛋白相对表达量高于空白组(P<0.01),mi组高于mi-NC组(P<0.05)。自噬正调节基因LC3和Beclin1在对照组的相对表达量高于空白组(P<0.0001),mi组低于mi-NC组(P<0.05)。负调节自噬基因相对表达量与自噬正调节基因趋势相反。自噬相关蛋白相对表达量与自噬基因趋势一致。ROS荧光强度检测发现对照组的荧光强度高于空白组(P<0.05),mi组高于mi-NC组(P<0.001)。LDH检测发现对照组细胞内LDH含量高于空白组(P<0.01),mi组与mi-NC组含量无统计学意义(P>0.05)。结论miR-207过表达促进细胞凋亡、细胞焦亡及炎症、抑制自噬,有利于H37Ra的存活,为结核病的治疗提供新的方向。

关键词：结核分枝杆菌 H37Ra miR-207 自噬巨噬细胞凋亡焦亡

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基于雨课堂及微课的BOPPPS教学模式在医学微生物学课程中的设计与应用

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微生物学通报 2024年第12期51卷 5240-5248页

作者：乐率饶贤才周晶赵岩王竞李刚李明卢曙光陆军军医大学基础医学院微生物学教研室重庆400038

在教育数字化转型时代背景下,利用信息化工具与数字化资源进行混合式教学,对于提升教学质效意义重大。针对医学微生物学课程教学中存在的内容复杂、教学方法手段单一、学员参与度不够、教学效果不佳等问题,通过在导入-目标-前测-参与式... 详细信息

在教育数字化转型时代背景下,利用信息化工具与数字化资源进行混合式教学,对于提升教学质效意义重大。针对医学微生物学课程教学中存在的内容复杂、教学方法手段单一、学员参与度不够、教学效果不佳等问题,通过在导入-目标-前测-参与式教学-后测-总结(bridge-in,objective,pre-assessment,participatory learning,post-assessment,and summary,BOPPPS)教学模式下整合雨课堂的在线互动教学平台与微课的短视频教学资源,构建了一种新型线上线下混合式教学模式,在医学微生物学课程中进行了应用实践,并通过问卷调查、成绩对比等方法对教学效果进行评估。结果表明,基于雨课堂及微课的BOPPPS教学模式显著提升了学员的学习兴趣和课堂参与度,同时也提高了学生的成绩。本研究证明了该教学模式在提升教学质量和学生学习效果方面的有效性,为医学教育领域的教学改革提供了有益参考。

关键词：雨课堂微课 BOPPPS教学模式医学微生物学教学设计与应用

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过表达ASAP1增强A549对结核分枝杆菌H37Ra的易感性

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山西大学学报(自然科学版) 2025年

作者：崔佳温炟孟超群陈广信吴长新长治医学院微生物学教研室山西大学生物医学研究院

ASAP1(ADP核糖基化因子（ADP ribosylation factor,Arf）GTP酶激活蛋白含SH3结构域、锚蛋白重复序列和PH结构域1,Arf-GTPase activating protein with an SH3 domain, ankyrin repeat, and PH domain 1)在全基因组关联研究（Genome wide association study,GWAS）中被发现与结核病易感性有关，本研究旨在探讨过表达ASAP1对结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis）感染肺上皮细胞的影响。以肺上皮细胞系A549作为结核分枝杆菌感染的体外细胞模型，利用慢病毒技术在A549细胞中对ASAP1进行过表达处理，免疫印迹法（western blot）检测过表达效果。通过荧光共聚焦显微镜分析与平板涂布法检测结核分枝杆菌H37Ra感染后细胞内细菌载量。荧光染色法初步探究过表达ASAP1对A549细胞骨架的影响。划痕实验评价过表达ASAP1对A549细胞迁移能力的影响。结果显示，过表达ASAP1使得A549细胞内H37Ra载量增加。此外，过表达ASAP1改变了A549细胞骨架排布，并且增强了细胞迁移能力，推测这可能是ASAP1在A549细胞中影响分枝杆菌易感性的机制。总之，本研究发现过表达ASAP1可能通过调控细胞骨架和迁移能力增强A549对结核分枝杆菌H37Ra的易感性。

关键词： ASAP1 过表达结核分枝杆菌 A549 细胞骨架迁移

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基于fMOST高分辨率3D重建系统的C57BL/6小鼠模型内脏神经系统的形态学观察

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解剖学报 2025年第1期56卷 114-119页

作者：冷历歌杨冠雄王泽恩陈椅乔治良胡庆中王明炎田风厦门大学医学院解剖学教研室厦门361102

目的应用荧光显微光学切片断层成像(fMOST)高分辨率3D重建系统,探讨其用于肠道神经系统形态学研究的可能性,建立该系统进行肠道神经系统形态学研究的方法。方法应用fMOST高分辨率3D重建系统对C57BL/6小鼠肠神经系统进行了详细的形态学研... 详细信息

目的应用荧光显微光学切片断层成像(fMOST)高分辨率3D重建系统,探讨其用于肠道神经系统形态学研究的可能性,建立该系统进行肠道神经系统形态学研究的方法。方法应用fMOST高分辨率3D重建系统对C57BL/6小鼠肠神经系统进行了详细的形态学研究,基于此方法探索单细胞水平的小动物模型内脏神经系统形态学研究方法。结果小鼠的小肠和大肠具有较为丰富的肠神经系统,但小鼠小肠的肠神经系统不同于大肠,缺乏典型的肌间(Auerbach)神经丛,黏膜深层(Henley)神经丛和黏膜下浅(Meissner)神经丛。结论为C57BL/6小鼠肠道神经系统的解剖结构提供了更加清晰的展示,更加明确了该动物模型的肠道神经系统与人类解剖结构的异同,为其在消化系统疾病研究中的合理应用提供了实验依据。基于fMOST高分辨率3D重建系统的形态学研究可以不局限于中枢神经系统,完全可以扩展到多个内脏神经系统的形态学研究中。

关键词：肠神经系统黏膜层肌间神经丛黏膜下神经丛荧光显微光学切片断层成像技术小鼠

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双重核酸纸条快速检测单核细胞增生李斯特菌的prfA和hly毒素基因

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南方医科大学学报 2025年第2期45卷 387-394页

作者：刘岩杨建宇周钰娇丁文博张先宇高林然潘蓓珍杨继飞赵云冬北华大学医学技术学院临床生化及分子生物学检验教研室吉林吉林132013

目的基于聚合酶链反应和胶体金技术相结合的双重核酸试纸条方法快速检测单核细胞增生李斯特菌prfA和hly两种毒素基因。方法采用加热煮沸法提取单核细胞增生李斯特菌DNA,以单核细胞增生李斯特菌的prfA和hly为靶基因,分别用6-FAM标记prfA... 详细信息

目的基于聚合酶链反应和胶体金技术相结合的双重核酸试纸条方法快速检测单核细胞增生李斯特菌prfA和hly两种毒素基因。方法采用加热煮沸法提取单核细胞增生李斯特菌DNA,以单核细胞增生李斯特菌的prfA和hly为靶基因,分别用6-FAM标记prfA上游引物5'端,Biotin标记prfA下游引物5'端,Digoxin标记hly上游引物5'端和Biotin标记hly下游引物5'端,建立单核细胞增生李斯特菌的毒素基因检测方法,通过克隆转化、测序分析,克隆阳性对照品,研发试剂盒并对试剂盒特异性、灵敏度、复现性及稳定性进行评价,并通过样品检测对试剂盒进行验证。结果水煮法提取的单核细胞增生李斯特菌浓度为148.81±0.97ng/μL,A_(260)/A_(280)在1.8~2.0范围内;PCR产物经克隆转化、测序对比,与GenBank数据库中基因序列的同源性均为100%;特异性检测,仅单核细胞增生李斯特菌为阳性结果,与金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、蜡样芽胞杆菌无交叉反应;灵敏度检测,最低检测限为10^(-2)ng/μL,比琼脂糖凝胶电泳高10倍;复现性检测,不同实验室不同人员分别对核酸试纸条进行验证,结果一致;稳定性检测,在第6、9、12月对核酸试纸条进行验证,稳定性较好。样品检测结果显示,本试剂盒可准确快速的检出样品中单核细胞增生李斯特菌。结论本剂盒可同时检测单核细胞增生李斯特菌的prfA和hly毒素基因,具有特异性强、灵敏度高、复现性好、稳定性好等优点,对保障食品安全具有现实意义。

关键词：单核细胞增生李斯特菌 prfA hly 双重核酸试纸条

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固有免疫受体NLRX1在中枢神经系统疾病中作用的研究进展

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神经解剖学杂志 2024年第1期40卷 127-131页

作者：高保青曹碗君高小川吴兴安刘蓉蓉陈雅慧邝芳延安大学医学院生理学教研室延安716000 空军军医大学基础医学院神经生物学教研室西安710032 空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室西安710032

中枢神经系统(CNS)正常功能的发挥高度依赖细胞能量供给与固有免疫体系提供的内环境稳定。NOD样受体家族成员X1(NLRX1)是定位于线粒体的固有免疫模式识别受体,具有调节线粒体自噬、炎性反应、活性氧的生成等多种功能,因而可影响炎症、... 详细信息

中枢神经系统(CNS)正常功能的发挥高度依赖细胞能量供给与固有免疫体系提供的内环境稳定。NOD样受体家族成员X1(NLRX1)是定位于线粒体的固有免疫模式识别受体,具有调节线粒体自噬、炎性反应、活性氧的生成等多种功能,因而可影响炎症、肿瘤等多种疾病的进展。近年来的研究表明,NLRX1通过抑制炎性反应、调节神经细胞线粒体自噬、线粒体动力变化和氧化应激反应等机制,在自身免疫性脱髓鞘疾病、缺血缺氧性疾病、创伤等CNS疾病中发挥神经保护作用。了解NLRX1参与CNS疾病过程的机制,可加深对CNS固有免疫分子的认识,并可望为CNS疾病的治疗提供新的思路与靶点。

关键词：中枢神经系统疾病 NLRX1 神经炎症线粒体调节细胞凋亡

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脱钙骨基质负载脂肪源性干细胞修复兔桡骨节段性骨缺损

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中国组织工程研究 2025年

作者：丁一凡尹文杰张力袁淑娅孙国驹张乃丽赵冬梅马丽娜滨州医学院基础医学院人体解剖学教研室滨州医学院第二临床医学院诊断学教研室

背景：脱钙骨基质是临床常用的骨修复材料，但在临床应用中发现存在成骨能力不足的问题，将脱钙骨基质与具有成骨潜力的细胞复合可有效提高成骨能力。目的：探讨脱钙骨基质复合脂肪源性干细胞提高桡骨节段性骨缺损修复能力的可行性。方... 详细信息

背景：脱钙骨基质是临床常用的骨修复材料，但在临床应用中发现存在成骨能力不足的问题，将脱钙骨基质与具有成骨潜力的细胞复合可有效提高成骨能力。目的：探讨脱钙骨基质复合脂肪源性干细胞提高桡骨节段性骨缺损修复能力的可行性。方法：以猪骨为原材料制备脱钙骨基质，采用酶解贴壁法体外分离、培养新西兰大白兔脂肪源性干细胞，流式细胞术检测细胞表型，并进行成骨、成脂诱导分化。将脂肪源性干细胞接种到脱钙骨基质复合培养3 d，倒置显微镜、扫描电镜观察脂肪源性干细胞在脱钙骨基质上的生长情况。取新西兰大白兔24只，随机分成4组，分别为空白对照组、脱钙骨基质组、脂肪源性干细胞-脱钙骨基质组和自体骨组，建立双侧桡骨节段缺损(12 mm)模型，按组别植入相应材料，术后4,8,12周通过拍摄X射线片、苏木精-伊红染色评价骨修复情况。结果与结论：(1)培养的细胞贴壁聚集生长，呈长梭形，CD44、CD71高表达，CD34、CD45、CD106低表达；成骨诱导分化后茜素红染色可见被染成橘红色的矿化结节；成脂诱导分化后油红O染色可见细胞内染成鲜红色的脂滴；(2)脂肪源性干细胞紧密复合于脱钙骨基表面，生长状态良好，并向孔隙内部生长；(3)X射线片和组织学观察显示，脂肪源性干细胞-脱钙骨基质组新西兰大白兔骨缺损修复情况优于空白对照组、脱钙骨基质组，与自体骨组相当。结果表明，负载脂肪源性干细胞可有效弥补脱钙骨基质成骨能力的不足。

关键词：脂肪源性干细胞脱钙骨基质桡骨节段性骨缺损成骨新西兰大白兔组织工程

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