检索结果-内蒙古大学图书馆

感染．炎症．修复 2015年第2期16卷 114-117页

作者：陈艳张翠萍付小兵解放军总医院生命科学院北京100853 北京军区总医院药理科北京100700 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048

微小RNA（miRNA）是由18～24个核苷酸组成的单链非编码小RNA。研究预测，人类基因组中超过60％的基因受miRNAs调节．miRNAs在各种生理、病理过程和疾病治疗中发挥着重要作用。作为分子生物领域一个新的研究热点，当前miRNAS的研究发展... 详细信息

微小RNA（miRNA）是由18～24个核苷酸组成的单链非编码小RNA。研究预测，人类基因组中超过60％的基因受miRNAs调节．miRNAs在各种生理、病理过程和疾病治疗中发挥着重要作用。作为分子生物领域一个新的研究热点，当前miRNAS的研究发展迅速，获得了重要的研究进展，但miRNA研究仍处于早期阶段，尤其面向临床应用时，许多现实问题和技术性瓶颈仍有待于解决。

关键词：临床应用微小RNA 治疗实验室 miRNAs 非编码小RNA 人类基因组 miRNAS

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脐带间充质干细胞对重度烧伤大鼠肾脏保护作用的研究

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感染．炎症．修复 2012年第1期13卷 10-13,F0002页

作者：鲁刚马奎黄沙孙同柱付小兵军医进修学院北京100853 北京军区总医院烧伤整形科北京100126 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室北京100048

目的：观察脐带间充质干细胞（UCMSCs）移植对大鼠严重烧伤后肾脏损伤的影响，为干细胞应用于烧伤后的脏器保护研究奠定基础。方法：获取并分离培养孕大鼠UCMSCs并用流式细胞技术鉴定细胞表面抗原。48只SD大鼠随机分为4组：正常对照组（... 详细信息

目的：观察脐带间充质干细胞（UCMSCs）移植对大鼠严重烧伤后肾脏损伤的影响，为干细胞应用于烧伤后的脏器保护研究奠定基础。方法：获取并分离培养孕大鼠UCMSCs并用流式细胞技术鉴定细胞表面抗原。48只SD大鼠随机分为4组：正常对照组（n=12）、生理盐水组（n=12）、乌司他丁组（n=12）和UCMSCs组（n=12）。正常对照组不作任何处理，立即活杀取材；其余3组制备20％TBSAIII度烧伤模型（98℃，12s），于伤后48h分别静脉注射生理盐水0．1ml／g（生理盐水组）、乌司他丁1．6×105U／kg（乌司他丁组）和UCMSCs106／k（uCMSCs组），于给药后7、14d观察大鼠肾脏组织病理学，免疫组化法观察组织凋亡相关蛋白Bcl-2的表达，并进行血尿素氮（BUN）、肌酐（cr）水平的测定。结果：烧伤后7、14d的组织病理学观察显示，干细胞移植后的大鼠烧伤后肾脏组织充血、肿胀等病理学改变较乌司他丁组及生理盐水组有所减轻，随时间延长减轻更加明显；免疫组化观察显示UCMSCs组伤后7d和14d肾组织中Bcl-2的表达较乌司他丁组和生理盐水组明显增多，表明肾组织抗凋亡能力增强。大鼠烧伤后BUN和Cr均较正常对照组显著升高。乌司他丁治疗组除14dBUN较生理盐水组升高外，其余时间BUN和Cr均明显下降。UCMSCs组伤后7和14d两肾功能指标均明显下降，与生理盐水组和乌司他丁组比较差异均有显著性（P〈0．05），显示干细胞治疗对肾功能有明显改善作用。结论：UC—MSCs移植可有效减轻重度烧伤后大鼠‘肾脏组织的损伤并改善肾脏功能。

关键词：间充质干细胞,脐带烧伤肾脏乌司他丁 Bcl-2

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低剂量光动力对人脂肪间充质干细胞功能的影响及其机制

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中华烧伤与创面修复杂志 2022年第9期38卷 830-838页

作者：杨扬李磊杨增俊郑梦雪贺伟峰尹锐陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院皮肤科重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院全军烧伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆市创面修复与组织再生重点实验室重庆400038

目的探讨低剂量光动力对人脂肪间充质干细胞(ADSC)的增殖、调节及分泌功能的作用及其相关机制,以期为慢性创面的修复探索新方法。方法采用实验研究方法。取2021年2—4月于陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院皮肤科行皮肤外科手术... 详细信息

目的探讨低剂量光动力对人脂肪间充质干细胞(ADSC)的增殖、调节及分泌功能的作用及其相关机制,以期为慢性创面的修复探索新方法。方法采用实验研究方法。取2021年2—4月于陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院皮肤科行皮肤外科手术的10例患者(5例男性、5例女性,23~47岁)捐献的术后废弃脂肪组织,提取细胞并鉴定表型。取3批ADSC,各批细胞均分为仅行常规培养的正常对照组,行海姆泊芬处理后常规培养的单纯光敏剂组,行红光照射处理后常规培养的单纯光照组,行海姆泊芬和红光照射处理后再常规培养的光敏剂+光照组,样本数均为3。第1和2批细胞于处理完成后培养24 h,分别采用脱氧尿嘧啶核苷染色法检测ADSC增殖水平,Transwell实验检测与ADSC共培养的HaCaT细胞迁移比例;第3批细胞于处理完成后培养7 d,采用免疫荧光法检测ADSC的细胞外基质蛋白表达。取ADSC分为光动力后0 min组、光动力后15 min组、光动力后30 min组、光动力后60 min组,每组3孔,分别于行光动力处理后相应时间点采用蛋白质印迹法检测并计算磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化p70核糖体蛋白S6激酶(p-p70 S6K)/p70核糖体蛋白S6激酶(p70 S6K)比值。取2批ADSC,各批细胞均分为正常对照组、单纯光动力组及光动力+雷帕霉素组,每组3孔,并行相应处理。第1批细胞于处理完成后培养15 min,同前检测并计算p-mTOR/mTOR、p-p70 S6K/p70 S6K比值;第2批细胞于处理完成后培养7 d,同前检测细胞外基质蛋白表达。对数据行单因素方差分析、LSD检验。结果培养12 d后,细胞鉴定为ADSC。处理完成后培养24 h,单纯光敏剂组和单纯光照组ADSC增殖水平[分别为(4.0±1.0)%、(4.1±0.4)%]和HaCaT细胞迁移比例(分别为1.17±0.14、1.13±0.12)均与正常对照组[分别为(3.7±0.6)%、1.00±0.16]相近(P>0.05),且均明显低于光敏剂+光照组[分别为(34.2±7.0)%、2.55±0.13,P<0.01]。处理完成后培养7 d,与正常对照组相比,单纯光敏剂组ADSC的Ⅲ型胶原表达增加(P<0.05),单纯光照组ADSC的Ⅰ型胶原与Ⅲ型胶原表达均明显增加(P<0.01);与单纯光敏剂组和单纯光照组相比,光敏剂+光照组ADSC的Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原与纤维连接蛋白表达均明显增加(P<0.01)。与光动力后0 min组相比,光动力后15 min组ADSC的p-mTOR/mTOR与p-p70 S6K/p70 S6K比值均明显增加(P<0.01),光动力后30 min组、光动力后60 min组ADSC的p-p70 S6K/p70 S6K比值均明显增加(P<0.01)。处理完成后培养15 min,与正常对照组相比,单纯光动力组ADSC的p-mTOR/mTOR与p-p70 S6K/p70 S6K比值均明显增加(P<0.05或P<0.01);与单纯光动力组相比,光动力+雷帕霉素组ADSC的p-mTOR/mTOR与p-p70 S6K/p70 S6K比值均明显减少(P<0.05)。处理完成后培养7 d,与正常对照组相比,单纯光动力组ADSC的Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原与纤维连接蛋白表达均明显增加(P<0.01);与单纯光动力组相比,光动力+雷帕霉素组ADSC的Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原与纤维连接蛋白表达均明显减少(P<0.01)。结论低剂量光动力可以促进ADSC的增殖、提高ADSC调节HaCaT细胞迁移的能力,并通过快速激活mTOR信号通路增强细胞外基质蛋白的分泌。

关键词：光化学疗法细胞增殖细胞外基质脂肪间充质干细胞创面修复

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血必净注射液对系统性红斑狼疮小鼠脾脏T淋巴细胞的免疫调节作用

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感染．炎症．修复 2015年第1期16卷 28-32页

作者：王彦博赵艳琴丁砚兰王强解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048 武警北京总队医院北京100027 中国疾病预防控制中心北京102206

目的:探讨血必净注射液对系统性红斑狼疮(SLE)小鼠T淋巴细胞的免疫调节作用。方法:以清洁级EB病毒膜抗原BLLF1基因转基因小鼠30只为SLE模型小鼠,随机分为模型组(8周龄和10周龄各5只)、8周龄治疗组(10只)和10周龄治疗组(10只)。两治疗组... 详细信息

目的:探讨血必净注射液对系统性红斑狼疮(SLE)小鼠T淋巴细胞的免疫调节作用。方法:以清洁级EB病毒膜抗原BLLF1基因转基因小鼠30只为SLE模型小鼠,随机分为模型组(8周龄和10周龄各5只)、8周龄治疗组(10只)和10周龄治疗组(10只)。两治疗组给予血必净注射液6.4ml/kg腹腔内注射,每日1次,连续14d。治疗14d后处死,分离脾脏,提取DC和T淋巴细胞,荧光定量PCR和酶联免疫吸附试验检测T细胞孵育上清和脾组织匀浆液IL-2和TNF-α基因及细胞因子表达水平。结果:与正常对照组比较,SLE小鼠IL-4、TNF-α含量显著升高,而IL-2、IFN-γ水平明显降低,脾脏组织及T淋巴细胞IL-2的基因表达显著下降,而TNF-α基因表达则明显升高(P<0.05或P<0.01)。给予血必净注射液治疗后,与模型组比较,狼疮鼠IL-4、TNF-α含量显著降低,而IL-2、IFN-γ水平明显升高,IL-2基因表达显著升高,TNF-α基因表达明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。两个治疗组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:血必净治疗能够将脾脏的Th2细胞转化为Th1细胞,改变Th1/Th2的比例和机体的免疫应答类型,对系统性红斑狼疮的免疫功能产生影响。

关键词：系统性红斑狼疮血必净注射液 T 淋巴细胞细胞因子

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差速贴壁交换法在C57小鼠骨髓间充质干细胞集落形成实验中的新发现

差速贴壁交换法在C57小鼠骨髓间充质干细胞集落形成实验中的新发现

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第十届全国创伤修复(愈合)与组织再生学术会议、第三届中欧创面修复学术会议、中国医师协会创伤外科医师分会创面修复医师专业委员会会议

作者：吴旭张振中刘南波付小兵黄沙南方医科大学南方医院惠侨医学中心解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室

目的：在全骨髓法提取C57 小鼠骨髓间充质干细胞的过程中引入差速贴壁交换法,初步探索骨髓间充质干细胞集落的形成过程.方法：实验一：在全骨髓法提取C57 小鼠骨髓间充质干细胞的过程中,采用差速贴壁法将骨髓中的细胞按照贴壁的先后顺...

目的：在全骨髓法提取C57 小鼠骨髓间充质干细胞的过程中引入差速贴壁交换法,初步探索骨髓间充质干细胞集落的形成过程.方法：实验一：在全骨髓法提取C57 小鼠骨髓间充质干细胞的过程中,采用差速贴壁法将骨髓中的细胞按照贴壁的先后顺序进行分离培养,每隔2h 将已接种但仍未贴壁的细胞重新悬浮和接种至新的细胞培养皿中,进而将细胞分为0～2h 组、2h～4h 组、4h～6h 组、6h～8h组、8h～48h 组,并观察和比较其形态特征和生长规律;实验二：选取GFP(+)或GFP(-)的C57 小鼠作为研究对象,分为GFP(+)组和GFP(-)组.全骨髓法提取C57 小鼠骨髓细胞.在细胞混悬液恒温孵育4h 后,悬浮起仍未贴壁的骨髓细胞,在GFP(+)组和GFP(-)组间进行交换,并继续孵育至48h,从而获得了"(0～4h 内贴壁)GFP(+)细胞/(4h～48h内贴壁)GFP(-)细胞"混合组A 及"(0～4h 内贴壁)GFP(-)细胞/(4h～48h 内贴壁)GFP(+)细胞"混合组B.继续原代培养上述两组细胞,并观察其中的集落形成过程.结果：在实验一中：0～2h 组和2h～4h 组的细胞形态和生长规律相似,4h～6h 组、6h～8h 组和8h～48h 组的细胞形态和生长规律相似.重复上述实验,将细胞重新分为0～4h 组和4h～48h组,继续孵育3 天,0～4h 组的细胞悉数凋亡,继续孵育10 天,4h～48h 组的细胞相继凋亡;在实验二中："(0～4h 内贴壁)GFP(+)细胞"和"(4h～48h 内贴壁)GFP(-)细胞"混合培养后分别发现了由"(0～4h 内贴壁)GFP(+)细胞"和"(4h～48h 内贴壁)GFP(-)细胞"形成的细胞集落,两种集落的细胞形态有较大差异.结论：通过全骨髓法获得的C57 小鼠"骨髓间充质干细胞"中至少应该含有两种不同的细胞类型(暂命名为"先贴细胞"和"后贴细胞")."先贴细胞"和"后贴细胞"的贴壁时间不同,但在体外培养时相互依存,并共同参与了"骨髓间充质干细胞"的集落形成、和传代.

关键词：

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胰酶-EDTA差速消化法纯化原代培养的汗腺细胞

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感染．炎症．修复 2013年第4期14卷 225-227,I0002页

作者：谭志军陈艳赵洪良赵换军孙同柱马奎张翠萍付小兵天津医科大学天津300070 解放军总医院北京100853 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室北京100048

目的：探讨胰酶-EDTA差速消化法纯化原代培养的汗腺细胞的效果.方法：取新鲜的腹部手术患者腹部皮肤,D-Hanks液浸洗去除皮肤中的血液,剪成1 mm×1 mm大小的皮粒,将剪碎的皮粒放入装有5 ml （2 mg/ml）的Ⅱ型胶原酶的培养皿中,置于... 详细信息

目的：探讨胰酶-EDTA差速消化法纯化原代培养的汗腺细胞的效果.方法：取新鲜的腹部手术患者腹部皮肤,D-Hanks液浸洗去除皮肤中的血液,剪成1 mm×1 mm大小的皮粒,将剪碎的皮粒放入装有5 ml （2 mg/ml）的Ⅱ型胶原酶的培养皿中,置于37 ℃、5%CO2孵箱中消化8-12 h,倒置相差显微镜直视下吸取游离的汗腺,用汗腺培养基培养5-7 d,观察细胞形态和生长状况,加入胰酶-EDTA混合溶液2 ml（胰蛋白酶0.25,EDTA 0.53 mol/L）消化3 min,成纤维细胞收缩变圆后立即加入胎牛血清5 ml终止消化,吸弃消化液,D-Hanks冲洗2~3次,加入5 ml含10%胎牛血清DMEM培养液继续培养.镜下观察成纤维细胞去除效果,并对纯化后的细胞进行免疫细胞化学鉴定.结果：汗腺分离培养5-7 d后,汗腺细胞呈铺路石样生长,并且汗腺细胞周围生长有大量的成纤维细胞;用胰酶-EDTA消化3 min后,细胞计数显示约有95%以上的成纤维细胞被去除;免疫细胞化学鉴定结果显示纯化后的细胞CEA和CK8染色阳性,而波形蛋白和成纤维细胞特异性蛋白染色阴性.结论：胰酶-EDTA差速消化法能够简单、快速、高效地纯化汗腺细胞.

关键词：胰酶-EDTA汗腺分离纯化成纤维细胞

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应用噬菌体随机十二肽库筛选hFGF-7相关模拟肽

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山东大学学报（医学版） 2009年第11期47卷 46-49页

作者：宗宪磊蔡景龙姜笃银付小兵盛志勇单菲山东大学组织工程研究所济南250033 山东大学第二医院美容整形烧伤外科济南250033 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100037

目的应用噬菌体随机十二肽库生物淘选具有刺激表皮细胞增殖作用的人成纤维细胞生长因子-7(hFGF-7)噬菌体模拟肽。方法以hFGF-7单克隆抗体为靶,进行4轮生物淘选噬菌体随机十二肽库;随机挑取单克隆噬菌体,应用ELISA方法检测单克隆噬菌体... 详细信息

目的应用噬菌体随机十二肽库生物淘选具有刺激表皮细胞增殖作用的人成纤维细胞生长因子-7(hFGF-7)噬菌体模拟肽。方法以hFGF-7单克隆抗体为靶,进行4轮生物淘选噬菌体随机十二肽库;随机挑取单克隆噬菌体,应用ELISA方法检测单克隆噬菌体的结合力,对结合力较好的单克隆噬菌体提取噬菌体DNA,进行测序,并行序列分析。结果经过4轮生物淘选,特异性噬菌体模拟肽获得了富集,ELISA检测结果显示获得的一些噬菌体模拟肽具有较好的结合力,测序获得11个与促进细胞分裂、增殖或抑制细胞增殖有关的碱基序列。结论从噬菌体随机十二肽库中可淘选到与hFGF-7相关的噬菌体模拟肽,其中部分噬菌体模拟肽可能会促进表皮细胞增殖,期望将来可应用于促进创面愈合。

关键词：噬菌体随机十二肽库人成纤维细胞生长因子-7噬菌体模拟肽生物淘选测序

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A型肉毒毒素治疗挛缩性瘢痕的初步研究

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感染．炎症．修复 2013年第1期14卷 31-33,F0002页

作者：颜彤彤陈敏亮马奎孙同柱梁黎明刘畅赖林英付小兵解放军医学院北京100853 解放军总医院第一附属医院烧伤整形科北京100048 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室北京100048

目的:探讨A型肉毒毒素(BTXA)治疗挛缩性瘢痕的效果及其作用机制。方法:10例烧伤后挛缩性瘢痕患者,每人选取两处挛缩性瘢痕,随机分为BTXA组(瘢痕内注射BTXA,间隔3个月1次,共2次)和空白对照组(瘢痕内注射等积生理盐水),于注射前及首次注射... 详细信息

目的:探讨A型肉毒毒素(BTXA)治疗挛缩性瘢痕的效果及其作用机制。方法:10例烧伤后挛缩性瘢痕患者,每人选取两处挛缩性瘢痕,随机分为BTXA组(瘢痕内注射BTXA,间隔3个月1次,共2次)和空白对照组(瘢痕内注射等积生理盐水),于注射前及首次注射后1、3、6个月测量瘢痕长轴长度,观察其长度变化用以反映瘢痕挛缩程度;切取5例药物治疗6个月后行瘢痕切除手术患者的瘢痕组织,HE染色观察病理学改变,免疫组化染色观察α-平滑肌肌动蛋白及肌球蛋白-Ⅱ的表达。结果:BTXA组较空白对照组瘢痕挛缩程度明显减轻(P<0.01),尤以6个月时差异明显[(1.103±0.158)cm比(0.187±0.221)cm]。常规HE染色观察到BTXA组瘢痕组织内胶原纤维排列稀疏且规则,瘢痕内成纤维细胞数量较空白对照组减少。免疫组化结果显示BTXA组瘢痕内α-平滑肌肌动蛋白及肌球蛋白-Ⅱ表达较空白对照组明显减少(P<0.01)。结论:BTXA可用于治疗挛缩性瘢痕,作用机制可能与BTXA能够抑制瘢痕内成纤维细胞中α平滑肌肌动蛋白及肌球蛋白-Ⅱ的表达有关。

关键词：挛缩性瘢痕 A型肉毒毒素 α平滑肌肌动蛋白肌球蛋白-Ⅱ

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组织修复与再生的重要进展与展望

组织修复与再生的重要进展与展望

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《中华急诊医学杂志》更名十周年、World Journal of Emergency Medicine创刊一周年庆典《中华急诊医学杂志》第十届组稿会、第三届急诊医学青年论坛

作者：付小兵解放军总医院基础医学研究所第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室中国工程院

再生医学涉及包括发育生物学、基础医学、临床医学等在内的多个学科,是当今生物学和医学领域研究的重点、热点和攻克的难点。上世纪90年代以来,随着干细胞生物学和组织工程学的发展,组织再生无论从基础研究到临床治疗均取得了重要进展,... 详细信息

再生医学涉及包括发育生物学、基础医学、临床医学等在内的多个学科,是当今生物学和医学领域研究的重点、热点和攻克的难点。上世纪90年代以来,随着干细胞生物学和组织工程学的发展,组织再生无论从基础研究到临床治疗均取得了重要进展,某些治疗技术在临床应用已获得明显的疗效。先后召开的两次再生医学香山科学会议,对促进我国再生医学从基础研究、临床转化性应用、人才培养以及基地建设等方面都取得了可喜的进展。本文概要报告近年来国内外在再生医学基础研究和部分临床试验方面所取得的重要进展,并对我国再生医学的发展提出个人的看法和建议。

关键词：组织修复再生医学

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乌司他丁对致死性烫伤大鼠肺微血管通透性和肺组织含水率的影响

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感染．炎症．修复 2014年第4期15卷 209-212,216页

作者：刘锐曹卫红胡森王树明赵增凯郑金光高明娟王晓娜李宗瑜盛志勇哈尔滨市第五医院烧伤整形科黑龙江哈尔滨150040 空军总医院烧伤整形外科北京100142 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048

目的:研究乌司他丁对50%总体表面积烫伤大鼠炎症介质、肺微血管通透性和肺组织含水率的影响。方法:40只雄性SD大鼠随机分为烫伤组和乌司他丁组(n=20),两组均用80℃水浴造成50%总体表面积Ⅲ度烫伤。于烫伤后即刻静脉分别注射生理盐水1ml... 详细信息

目的:研究乌司他丁对50%总体表面积烫伤大鼠炎症介质、肺微血管通透性和肺组织含水率的影响。方法:40只雄性SD大鼠随机分为烫伤组和乌司他丁组(n=20),两组均用80℃水浴造成50%总体表面积Ⅲ度烫伤。于烫伤后即刻静脉分别注射生理盐水1ml和乌司他丁40 000U/kg。分别于烫伤后6h、24h采用伊文斯蓝(EB)法测定肺微血管通透性,干/湿重法测定肺组织含水率,酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺组织TNF-α、IL-6和IL-8的活性。结果:烫伤后6h、24h乌司他丁组TNF-α、IL-6和IL-8均低于单纯烫伤组,其中烫伤后24h乌司他丁组TNF-α、IL-6和IL-8的变化差异更显著(P<0.01);与单纯烫伤组比较,乌司他丁组肺组织EB含量和含水率均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:乌司他丁能减轻致死性烫伤休克大鼠肺组织炎症水平,抑制血管内皮细胞活化和通透性增加,减少烧伤休克时血容量丢失和补液量,用于烧伤休克的早期治疗和改善存活率有潜在价值。

关键词：乌司他丁肺组织水肿血管通透性

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