检索结果-内蒙古大学图书馆

医用生物力学 2015年第4期30卷 350-354页

作者：李翠笛陈芳萍王金武戴尅戎刘昌胜华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室上海200237 华东理工大学教育部生物医学材料工程技术研究中心上海200237 华东理工大学教育部超细材料重点实验室上海200237 上海交通大学医学院附属第九人民医院骨科上海市骨科内植物重点实验室上海200011

目的设计和制备新型钙磷硅基骨修复支架，研究其在不同外力作用下体外生物力学性能。方法以自固化磷酸钙骨水泥（calcium phosphate cement，CPC）、介孔硅酸钙（mesporous calcium silicate，MCS）为原料，通过3D生物描绘技术构建孔径... 详细信息

目的设计和制备新型钙磷硅基骨修复支架，研究其在不同外力作用下体外生物力学性能。方法以自固化磷酸钙骨水泥（calcium phosphate cement，CPC）、介孔硅酸钙（mesporous calcium silicate，MCS）为原料，通过3D生物描绘技术构建孔径分别为350、500μm的MCS／CPC复合支架。采用扫描电镜观察支架表面形貌；分别通过万能力学试验机和动态力学分析仪，考察具有不同孔道结构MCS／CPC支架的抗压力学性能和不同频率动态周期性载荷作用下的力学性能。结果通过3D生物描绘技术能够实现对钙磷硅基骨修复支架内部孔道结构的可控制备。孔径为350μm的MCS／CPC支架具有较高的抗压力学强度[（9．80±0．39）MPa]和抗压模量[（132．50±4．30）MPa]；此外，载荷频率在1—100Hz范围内，孔径为350μm的支架具有较高的储能模量。结论通过3D生物描绘技术制备的孔径为350μm的MCS／CPC复合支架不仅具有规则的连通孔道，还具有较高的抗压力学性能，能在动态载荷作用下保持结构稳定，适合作为一种新型的骨缺损修复材料。

关键词：骨修复介孔材料硅酸钙 3D生物描绘力学性能

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必特螺旋霉素基因工程菌发酵参数的研究

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中国抗生素杂志 2005年第6期30卷 324-327页

作者：戴剑漉王永红刘玉伟肖慈英佟祖佲储炬张嗣良律光耀王以光中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所北京100050 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室国家生化工程技术研究中心上海200237 北京赛而生物药业有限公司北京102604

曾利用同源重组技术构建了稳定的必特螺旋霉素基因工程菌。本研究在30L全自动发酵罐从菌体生长,糖、氮源利用及发酵效价增长情况考察了必特螺旋霉素基因工程菌的发酵过程,研究了发酵过程摄氧率(OUR)、二氧化碳释放率(CER)、溶解氧(DO)... 详细信息

曾利用同源重组技术构建了稳定的必特螺旋霉素基因工程菌。本研究在30L全自动发酵罐从菌体生长,糖、氮源利用及发酵效价增长情况考察了必特螺旋霉素基因工程菌的发酵过程,研究了发酵过程摄氧率(OUR)、二氧化碳释放率(CER)、溶解氧(DO)等在线参数的变化,着重研究了不同溶氧水平对必特螺旋霉素发酵的影响。结果表明溶氧水平尤其是发酵前期溶氧水平对必特螺旋霉素发酵影响至关重要,前期临界氧浓度应控制在25%左右。本研究为必特螺旋霉素发酵放大工艺研究提供了依据。

关键词：必特螺旋霉索溶氧参数检测

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阻断消耗途径提高毕赤酵母工程菌S-腺苷甲硫氨酸产量

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微生物学通报 2023年第2期50卷 441-453页

作者：苏慧颖蒙世拯赵欣欣钱江潮储炬秦秀林广西大学生命科学与技术学院、亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室、广西微生物与酶工程技术研究中心广西南宁530004 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室上海200237

【背景】S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosyl-L-methionine,SAM)作为所有生物体内的重要中间代谢物,不仅可作为膳食补充剂,还具有良好的临床应用价值。【目的】将毕赤酵母重组菌GS115/DS16的SAM消耗途径阻断,进一步提高SAM的产量。【方法】分别... 详细信息

【背景】S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosyl-L-methionine,SAM)作为所有生物体内的重要中间代谢物,不仅可作为膳食补充剂,还具有良好的临床应用价值。【目的】将毕赤酵母重组菌GS115/DS16的SAM消耗途径阻断,进一步提高SAM的产量。【方法】分别敲除毕赤酵母重组菌GS115/DS16的S-腺苷同型半胱氨酸水解酶基因sah1、S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶基因spe2和L-甲硫氨酰tRNA合酶基因msm1,构建工程菌G/Dsah、G/Dspe和G/Dmsm。检测3个工程菌的生长和SAM产量,以及L-Met添加量对SAM积累的影响。【结果】与出发菌GS115/DS16相比,工程菌G/Dsah、G/Dspe和G/Dmsm的单位菌体SAM产量分别提高了29.3%、55.6%和24.8%,其生长无显著差异。L-Met添加量优化后(0.06%),G/Dsah和G/Dmsm单位菌体的SAM产量分别提高了26.4%和28.9%。【结论】构建的毕赤酵母工程菌可用于SAM的工业化生产,该代谢工程策略可用于改进其他化学品的生产。

关键词： S-腺苷甲硫氨酸毕赤酵母 S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶 S-腺苷同型半胱氨酸水解酶 L-甲硫氨酰tRNA合酶

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透明颤菌vgb基因在脱氮假单胞菌中的表达及对维生素B_(12)合成的碳中心代谢流分析

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中国生物工程杂志 2016年第9期36卷 21-30页

作者：施慧琳王泽建吴杰群郭美锦储炬庄英萍华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室国家生化工程技术研究中心上海生物制造产业技术研究院上海200237 中国科学院上海生命科学研究院湖州工业生物技术中心湖州333000

在为维生素B_(12)生产菌株脱氮假单胞菌确立合适的接合转移操作条件的基础上,通过单交换的方式,将vgb基因整合到脱氮假单胞菌染色体上,获得了vgb重组菌株Pvgb-16,并通过^(13)C同位素标记实验,探索VHb蛋白对脱氮假单胞菌碳中心代谢流变... 详细信息

在为维生素B_(12)生产菌株脱氮假单胞菌确立合适的接合转移操作条件的基础上,通过单交换的方式,将vgb基因整合到脱氮假单胞菌染色体上,获得了vgb重组菌株Pvgb-16,并通过^(13)C同位素标记实验,探索VHb蛋白对脱氮假单胞菌碳中心代谢流变化和维生素B_(12)合成的影响。研究结果表明,在相同的供氧条件下,vgb重组菌株Pvgb-16拥有更高的比生长速率和比产物合成速率,与出发菌株相比分别提升了22%和52%。碳代谢通量分布分析表明,vgb重组菌株Pvgb-16的PP途径改善,提升了NADPH合成通量;甘氨酸由甜菜碱合成的通量上升,促进了前体物质氨基乙酰丙酸的合成,进一步加速维生素B_(12)的合成。总体来看,含vgb基因的重组菌株与出发菌株相比在促进菌体的生长、维生素B_(12)的合成速率及得率上都有显著效果,对进一步的发酵生产应用研究具有重要意义。

关键词：脱氮假单胞菌维生素B12 碳中心代谢流分析 vgb基因

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大数据时代的生物过程研究

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生物产业技术 2016年第3期 34-39页

作者：张嗣良华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室、国家生化工程技术研究中心(上海) 上海200237

在讨论实现生物技术产业化时,认为由于从基因、细胞到生物反应器操作的生物过程高度复杂性,必须改变传统的数据处理思维方式。建议采用大数据分析方法和工业4.0,打破生命科学上游研究到生物制造下游研究的多学科技术壁垒,其大数据分析... 详细信息

在讨论实现生物技术产业化时,认为由于从基因、细胞到生物反应器操作的生物过程高度复杂性,必须改变传统的数据处理思维方式。建议采用大数据分析方法和工业4.0,打破生命科学上游研究到生物制造下游研究的多学科技术壁垒,其大数据分析的4V特征和3个观念转变是生物过程研究的基本出发点。总结了笔者研究组近几十年的研究成果,分析了发酵过程多尺度理论方法与大数据分析理念,由此探索形成新的概念、理论、方法与装备技术。其中最重要的技术进展标志是生物反应器由原来的参数自动控制演变为实现过程优化与放大决策的智能控制,以及＂数据超载＂情况下的＂信息→相关→因果→知识＂的研究过程。

关键词：生物过程生物反应器生物制造技术产业化智能控制装备技术多学科技术生命科学研究成果因果关系

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鸟苷发酵过程的多尺度问题研究

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生物加工过程 2004年第3期2卷 23-29页

作者：张嗣良储炬庄英萍黄明志华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室国家生化工程技术研究中心(上海) 上海200237

以鸟苷发酵为对象 ,在生物反应器中以多尺度问题的角度 ,对在线计算机数据进行相关分析 ,结合中间代谢物及有关酶活性的检测 ,建立了以代谢流为核心的多尺度调控方法 ;又通过与代谢流迁移有关的动态化学计量分析 ,实现了对批式发酵过程... 详细信息

以鸟苷发酵为对象 ,在生物反应器中以多尺度问题的角度 ,对在线计算机数据进行相关分析 ,结合中间代谢物及有关酶活性的检测 ,建立了以代谢流为核心的多尺度调控方法 ;又通过与代谢流迁移有关的动态化学计量分析 ,实现了对批式发酵过程的时变系统估算 ,建立了主体代谢与产物形成的支路代谢间 ,包括能量与物质流的关系模型 ;最后 ,把具有不同生产能力菌株的关键基因与基因库数据进行了序列比较 ,发现了本文研究的菌株已具备高产能力 ,即编码sAMP合成酶的基因发生移码突变以及pur操纵子的多处突变 ,而中心代谢流迁移是过程优化的关键。对开展微生物功能基因组学的研究和工业过程优化的问题进行了探讨 ,作者提出有必要从生物反应器的系统生物学高度来认识和解决所面临的问题。

关键词：鸟苷代谢流多尺度发酵 sAMP合成酶

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棘突蛋白氨基端嵌入标签(记)蛋白的重组猪流行性腹泻病毒的拯救和鉴定

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微生物学通报 2024年第7期51卷 2534-2545页

作者：孙如晶董世娟于瑞嵩李震李春华司伏生谢春芳陈冰清张道敬华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室上海200237 上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海种猪工程技术研究中心上海201106 上海农业遗传育种重点实验室上海201106

【背景】猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是严重影响养猪业健康发展的动物传染病,其致病原为猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)。PEDV结构蛋白之一——棘突蛋白(spike protein,S protein)负责病毒的侵染、入胞等过程,该蛋白结构和功能研究是PEDV分子生物学研究的热点。S蛋白分为两个功能域,N端的S1亚单位和C端的S2亚单位,以往研究表明PEDV DR13att毒株S1N(19-233 aa)结构域缺失,不影响DR13att毒株的存活和增殖。【目的】基于靶向RNA重组技术,在PEDV(DR13att)S1N结构域分别引入HA标签基因、抗坏血酸过氧化物酶(APEX2)基因,构建重组PEDV,考察S1N结构域能否被标签(记)蛋白或多肽替换。【方法】利用靶向RNA重组技术的PEDV反向遗传学操作平台,将转移载体p-PEDV-DR13att的S1N结构域(1-234 aa)分别替换成HA基因、APEX2基因,进行重组转移载体的构建,再分别将线性化的载体体外转录的RNA转染至m PEDV感染的LR7细胞,然后在Vero细胞上拯救重组PEDV。通过观察细胞病变效应(cytopathic effect,CPE)、RT-PCR检测、测序、间接免疫荧光分析(immunofluorescence assay,IFA)、Western blotting检测对重组病毒进行验证,最后测定重组病毒滴度并绘制重组病毒生长曲线,探究重组病毒与亲本病毒的生长特性。【结果】构建的重组病毒经过拯救和传代,发现引入HA标签蛋白的重组猪流行性腹泻病毒r PEDV-DR13-S1N-HA(r PEDV-DSH)在P1代出现细胞病变,引入APEX2蛋白的重组猪流行性腹泻病毒r PEDV-DR13-S1N-APEX2(rPEDV-DSA)盲传至P4代,未出现细胞病变。对P4代的rPEDV-DSH、rPEDV-DSA进行RT-PCR检测、测序、间接免疫荧光分析、蛋白质印迹法验证,证实引入HA标签的重组病毒r PEDV-DSH拯救成功,而携带APEX2的重组病毒未能拯救成功。重组病毒rPEDV-DSH生长曲线表明rPEDV-DSH与亲本毒株DR13att有相似的生长趋势,但病毒增殖水平显著低于亲本毒株。【结论】HA标签替换S1N(1-234 aa)结构域的重组PEDV rPEDV-DSH成功拯救,为进一步研究S蛋白与宿主细胞的互作机制建立了基础。

关键词：猪流行性腹泻病毒 HA标签靶向RNA重组技术 S1N结构域

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重组毕赤酵母表达猪胰岛素前体代谢参数分析和动力学模型

重组毕赤酵母表达猪胰岛素前体代谢参数分析和动力学模型

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第一届全国化学工程与生物化工年会

作者：储炬陈文郭美锦杭海峰庄英萍张嗣良华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室国家生化工程技术研究中心华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室国家生化工程技术研究中心华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室国家生化工程技术研究中心华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室国家生化工程技术研究中心华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室国家生化工程技术研究中心华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室国家生化工程技术研究中心

＜正＞重组人胰岛素是治疗糖尿病,特别是胰岛素依赖型糖尿病的药物。目前胰岛素的市场需求依然很大。过去医用胰岛素主要从动物的胰脏中提取。近来的研究使人们对动物胰岛素副作用的认知程度逐渐加深,因此研究和生产重点转向了重组人...

＜正＞重组人胰岛素是治疗糖尿病,特别是胰岛素依赖型糖尿病的药物。目前胰岛素的市场需求依然很大。过去医用胰岛素主要从动物的胰脏中提取。近来的研究使人们对动物胰岛素副作用的认知程度逐渐加深,因此研究和生产重点转向了重组人胰岛素。大肠杆菌和酿酒酵母都曾用于人胰岛素的工业化生产。

关键词：

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乳酸发酵过程中维生素对细胞活性和代谢途径相关酶活性的影响

乳酸发酵过程中维生素对细胞活性和代谢途径相关酶活性的影响

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中国生物工程学会2006年学术年会暨全国生物反应器学术研讨会

作者：庄英萍邱伙琴徐国谦储炬张嗣良彭华琼华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室国家生化工程技术研究中心华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室国家生化工程技术研究中心华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室国家生化工程技术研究中心华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室国家生化工程技术研究中心华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室国家生化工程技术研究中心华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室国家生化工程技术研究中心

本论文研究了拟干酪乳杆菌(Lactobacillusparacasei)发酵生产乳酸过程中,维生素的添加对菌体的生长、细胞活性、乳酸产量,以及在碳流代谢中与乳酸生物合成密切相关的4种酶[乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸果糖激酶(PFK)、丙酮酸脱氢酶复合体系(P... 详细信息

本论文研究了拟干酪乳杆菌(Lactobacillusparacasei)发酵生产乳酸过程中,维生素的添加对菌体的生长、细胞活性、乳酸产量,以及在碳流代谢中与乳酸生物合成密切相关的4种酶[乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸果糖激酶(PFK)、丙酮酸脱氢酶复合体系(PDC)和丙酮酸羧化酶(PC)]活性的影响。本论文在带pH检测与补料的摇床上,通过闭环控制发酵中后期的pH,研究了添加维生素以后对上述因素的影响,结果表明:(1)加入维生素后发酵液

关键词：维生素发酵过程代谢途径乳酸发酵细胞活性相关酶活性

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发酵过程多水平问题及其生物反应器装置技术研究——基于过程参数相关的发酵过程优化与放大技术

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中国工程科学 2001年第8期3卷 37-45页

作者：张嗣良华东理工大学生物反应器国家重点实验室国家生化工程技术研究中心上海200237

回顾了发酵过程优化与放大所依据的基本思想和方法 ,认为采用以动力学为基础的最佳工艺控制点为依据的静态操作方法 ,实质上只是化学工程宏观动力学概念在发酵工程上的延伸 ,往往忽视细胞代谢流的存在。以细胞代谢流的分析与控制为核心... 详细信息

回顾了发酵过程优化与放大所依据的基本思想和方法 ,认为采用以动力学为基础的最佳工艺控制点为依据的静态操作方法 ,实质上只是化学工程宏观动力学概念在发酵工程上的延伸 ,往往忽视细胞代谢流的存在。以细胞代谢流的分析与控制为核心的生物反应工程学的观点 ,通过实验研究 ,提出了基于参数相关的发酵过程多水平问题研究的优化技术和发酵过程多参数调整的放大技术。随着过程传感技术和计算机技术的发展 ,设计了一种定型为FUS 5 0L (A)的新概念生物反应器。这种新型生物反应器是以物料流检测为手段 ,过程优化与放大为目标 ,成功地应用在青霉素、红霉素、金霉素、肌苷、鸟苷发酵和Pichia酵母表达系统的基因工程人血清白蛋白 (rh SA)、疟疾疫苗等高密度高表达培养 ,大幅度提高发酵水平 ,并直接放大到几百升 ,甚至 10 0m3

关键词：生物反应器发酵放大过程优化细胞培养

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