检索结果-内蒙古大学图书馆

中国农业科学 2018年第9期51卷 1795-1805页

作者：许月园齐晓龙候晔赵云霞栾宇周焕焕赵书红李新云华中农业大学农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室生猪健康养殖协同创新中心农业部猪健康养殖重点实验室广西扬翔股份有限公司

【目的】通过分析蓝塘猪和长白猪生长发育过程中品种间骨骼肌组织差异表达基因及顺式天然反义转录本(cis-natural antisense transcripts,cis-NATs),并以此为基础进行整合分析,探索cis-NATs调控猪骨骼肌生长发育的分子机理。【方法】使... 详细信息

【目的】通过分析蓝塘猪和长白猪生长发育过程中品种间骨骼肌组织差异表达基因及顺式天然反义转录本(cis-natural antisense transcripts,cis-NATs),并以此为基础进行整合分析,探索cis-NATs调控猪骨骼肌生长发育的分子机理。【方法】使用差异表达分析鉴定蓝塘猪和长白猪胚胎期35 d至出生后180 d共10个时间点品种间差异表达基因及cis-NATs(|log2FC|≥1且FDR<0.01);然后通过功能富集分析注释出差异表达基因及cis-NATs对应的正义基因主要参与的GO生物学过程(P<0.01)及KEGG通路(P<0.05);再根据与cis-NATs相关表达的基因数目筛选出cis-NATs主要参与的GO生物学过程和KEGG通路,并根据通路间的相同基因数目对所有KEGG通路进行整合;最后基于通路内cis-NATs及其正义基因在品种间的差异表达倍数进行通路可视化分析。【结果】在蓝塘和长白猪骨骼肌发育的10个时间点共鉴定出5 350个品种间差异表达基因和738个差异表达cis-NATs;GO分析结果显示品种间骨骼肌组织差异表达cis-NATs主要与肌肉发育及能量代谢等GO生物学过程中的基因相关表达;KEGG通路整合分析发现能量代谢通路之间关联性最强;其中线粒体三羧酸循环通路中基因及其相关表达的cis-NATs在仔猪出生后早期表达量较高;通路可视化分析发现在肌纤维生长的两个关键时间点即胚胎期49 d和77 d,蓝塘猪能量代谢相关通路中基因及其相关表达的cis-NATs显著高表达于长白猪,而出生后品种间表达模式的变化则主要集中在出生后2—90 d的出生后早期阶段。【结论】在蓝塘猪和长白猪骨骼肌发育的10个时间点,共鉴定出738个品种间差异表达的cis-NATs,功能注释结果表明这些cis-NATs主要通过与能量代谢通路中的基因相关表达从而参与影响蓝塘猪和长白猪品种间骨骼肌纤维发育差异。

关键词：蓝塘猪长白猪顺势天然反义转录本差异表达能量代谢

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LbCas12a蛋白的原核表达及活性检测

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中国畜牧兽医 2022年第5期49卷 1621-1629页

作者：刘茹李小龙张晓倩田小欢余梅赵书红曹建华华中农业大学农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室武汉430070 华中农业大学农业农村部猪遗传育种重点实验室武汉430070 华中农业大学生猪健康养殖协同创新中心武汉430070

【目的】获得具有体外切割活性的来自毛螺旋菌属(Lachnospiraceae)ND2006的LbCas12a蛋白,以期为LbCas12a的应用研究提供重要的生物学工具。【方法】根据pMBP-LbCas12a质粒(Addgene,113431)的基因序列合成LbCas12a基因,并将其与pET-28a(+)线性化载体进行同源重组,构建重组质粒pET28a-LbCas12a,经测序和NheⅠ、SalⅠ双酶切鉴定后将阳性重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行IPTG诱导表达。通过12%SDS-PAGE凝胶电泳检测确定IPTG诱导的最佳浓度及温度,鉴定重组蛋白的表达形式,通过Ni-NTA树脂亲和层析的方法进行纯化、超滤法浓缩,BCA法检测蛋白浓度。将浓缩后的LbCas12a与猪细小病毒(PPV)靶标DNA、CRISPR RNA(crRNA)及偶联荧光基团的非特异性单链DNA(ssDNA)探针FQ共孵育,设置1个无LbCas12a蛋白的对照组、4个不同蛋白浓度(125、250、500、1000 nmol/L)的试验组,检测不同组别ssDNA探针的荧光强度,检测测试位点PPV活性。【结果】测序和NheⅠ、SalⅠ双酶切鉴定结果表明,重组质粒pET28a-LbCas12a构建成功且无移码突变。12%SDS-PAGE凝胶电泳检测结果表明,IPTG诱导表达的最佳浓度为0.5 mmol/L,最佳温度为37℃,表达形式主要为可溶性表达。蛋白浓度检测结果表明,浓缩后的蛋白浓度为485 ng/μL,质量为143 ku。活性检测结果表明,125、250、500、1000 nmol/L LbCas12a蛋白组的荧光强度均极显著高于对照组(P<0.01)。【结论】本研究成功表达出高活性的LbCas12a蛋白,且LbCas12a蛋白具有体外切割ssDNA的反式活性,为后续基于CRISPR-LbCas12a系统的分子检测技术奠定了基础。

关键词： LbCas12a蛋白原核表达蛋白纯化反式活性

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Poly I:C刺激对杜洛克×二花脸F2猪血液参数的影响

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华中农业大学学报 2016年第4期35卷 76-81页

作者：王海燕贺佳玮向安静章程朱猛进赵书红刘向东华中农业大学农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室/农业部猪遗传育种重点开放实验室/生猪健康养殖协同创新中心武汉430070 华中农业大学信息学院武汉430070

为研究聚肌胞苷酸(polyinosinic:polycytidylic acid,简称Poly I:C)刺激对杜洛克×二花脸F2猪群血液参数的影响,选用杜洛克×二花脸F2猪393头,在33d时前腔静脉采血(对照组),在35d时用Poly(I:C)刺激,4h后采血(处理组),对刺激前... 详细信息

为研究聚肌胞苷酸(polyinosinic:polycytidylic acid,简称Poly I:C)刺激对杜洛克×二花脸F2猪群血液参数的影响,选用杜洛克×二花脸F2猪393头,在33d时前腔静脉采血(对照组),在35d时用Poly(I:C)刺激,4h后采血(处理组),对刺激前后血液参数进行相关性和主成分等分析。研究结果表明,处理组与对照组相比,白细胞中的嗜中性粒细胞百分比(NE%)、淋巴细胞数(LY)和淋巴细胞百分比(LY%)这3项血液参数差异显著相关,红细胞中的红细胞压积(HCT%)和红细胞数(RBC)差异相关性显著,而血小板第一主成分中决定性指标血小板数(PLT)和血小板压积(PCT)在刺激前后不存在显著差异。

关键词：猪 F2群体 Poly I:C 血液参数相关性分析主成分分析

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宰杀方式对猪血液成分以及肉质的影响

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华中农业大学学报 2009年第5期28卷 583-586页

作者：柴进彭健熊琪张昌新缪文李凤娥郑嵘蒋思文华中农业大学农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室/农业部猪遗传育种开放重点实验室武汉430070 华中农业大学动物营养实验室武汉430070 武汉中粮肉食品有限责任公司武汉430200

选择体重约为100kg、氟烷基因型为NN的长×大二元杂交猪16头，按照年龄、体重相近，公母各半原则分为2组，试验1组采取直接刺杀心脏放血致死。试验2组采取电麻（75V、1．5A、3～4s）击晕后，割破颈部血管放血致死。屠宰后测定血液... 详细信息

选择体重约为100kg、氟烷基因型为NN的长×大二元杂交猪16头，按照年龄、体重相近，公母各半原则分为2组，试验1组采取直接刺杀心脏放血致死。试验2组采取电麻（75V、1．5A、3～4s）击晕后，割破颈部血管放血致死。屠宰后测定血液生化指标、相关肉质指标以及免疫指标。结果表明：屠宰方式对肉质与免疫能力的影响较小，但反映应激程度的激素指标（皮质醇、促肾上腺皮质激素）差异显著，在屠宰过程中，经历电麻击晕方式的猪比直接刺杀心脏放血屠宰的猪应激程度要小得多，从动物福利角度考虑，电麻击晕优于直接刺杀心脏放血。因此，在这2种屠宰方式选择上，应该优先考虑电麻击晕这一屠宰方式。

关键词：宰杀方式生化指标免疫指标肉质

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BCL10、Nramp1基因多态性与大白仔猪断奶前腹泻关联分析

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华中农业大学学报 2017年第4期36卷 83-89页

作者：罗兴尹立林刘飞张维旭李新云赵书红王海燕华中农业大学农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室/农业部猪遗传育种重点开放实验室/生猪健康养殖协同创新中心武汉430070 华中农业大学信息学院武汉430070

为研究大白猪BCL10基因和Nramp1基因的单核苷酸多态性,并寻找与大白仔猪断奶前腹泻相关的分子标记,构建490头大白仔猪群体,对仔猪断奶前腹泻情况进行统计,利用PCR-RFLP法检测BCL10基因3′端1149T/C位点和Nramp1基因第六内含子NdeⅠ酶切... 详细信息

为研究大白猪BCL10基因和Nramp1基因的单核苷酸多态性,并寻找与大白仔猪断奶前腹泻相关的分子标记,构建490头大白仔猪群体,对仔猪断奶前腹泻情况进行统计,利用PCR-RFLP法检测BCL10基因3′端1149T/C位点和Nramp1基因第六内含子NdeⅠ酶切位点多态性,同时与腹泻频率、腹泻指数和部分生长性状进行关联分析。结果显示:大白仔猪断奶前腹泻率为32.0%,重度腹泻个体的21日龄平均断奶重比正常个体低13.0%,日增重低16.2%,而且大白仔猪在7~11日龄和17~21日龄存在2个断奶前腹泻小高峰。仔猪腹泻粪便病原检测结果表明,22.5%的样本检出为沙门氏菌感染,17.5%的样本检出为致病性大肠杆菌感染。关联分析结果表明:BCL10基因多态性与初生重相关联(P<0.05),TT型个体初生重大于TC型个体,差异显著(P<0.05);BCL10基因多态性与腹泻频率、腹泻指数相关联,差异极显著(P<0.01),个体腹泻频率、腹泻指数均表现为TT>TC>CC,CC与TC之间差异显著(P<0.05),CC与TT之间差异极显著(P<0.01);Nramp1基因多态性与腹泻频率、腹泻指数相关联,差异极显著(P<0.01),个体腹泻频率、腹泻指数均为AA、AB型大于BB型,且AA型与BB型差异显著(P<0.05),AB型与BB型差异极显著(P<0.01)。研究结果表明,BCL10基因和Nramp1基因不同基因型对大白仔猪断奶前腹泻有显著影响,Nramp1基因与猪沙门氏菌感染导致的腹泻有关,BCL10基因3′端1149T/C位点和Nramp1基因第六内含子NdeⅠ酶切位点可以作为大白仔猪断奶前抗腹泻育种分子标记。

关键词： BCL10基因 Nramp1基因仔猪腹泻抗病育种

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团头鲂jphs家族基因的克隆及表达分析

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华中农业大学学报 2020年第1期39卷 126-135页

作者：涂佳鹏黄春筱黄岩王焕岭华中农业大学水产学院/农业农村部淡水生物繁育重点实验室/农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室武汉430070 华中农业大学水产养殖实验教学中心武汉430070

以团头鲂为研究对象,扩增获得Junctophilin(Jph)家族4个成员,jph1a、jph1b、jph2和jph3的cDNA编码序列,分别为2031、2016、2358和2361 bp,分别编码676、671、785和786 aa。团头鲂jphs均由5个外显子和4个内含子组成,与大多数物种的JPHs基因结构相似;结构域预测显示出8个MORN和1个TM结构域,且蛋白多序列比对分析显示Jphs在进化上非常保守。基于qRT-PCR(quantitative real-time PCR)分析显示,这4个基因呈现出组织特异性表达,其中jph1a、jph1b和jph2主要在肌肉和心脏中表达,而jph3主要表达于心脏、血液和大脑。在早期发育过程中,jph1a、jph1b、jph2和jph3的mRNA表达模式类似,分别在原肠胚期、心跳期和25 dph(days post hatching)达到高峰。综上研究结果表明,鱼类jphs基因在心脏和肌肉等组织中发挥重要作用,并且其功能可能不同于哺乳动物。

关键词：团头鲂 Junctophilin jph基因基因表达分子克隆

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宰前休息方式对猪福利、血液成分及肉质的影响

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畜牧兽医学报 2009年第11期40卷 1645-1650页

作者：柴进彭健熊琪张昌新缪文李凤娥郑嵘蒋思文华中农业大学动物科技学院农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室&农业部猪遗传育种开放重点实验室武汉430070 华中农业大学动物科技学院动物营养系武汉430070 武汉中粮肉食品有限责任公司武汉430000

选取体质量约为100 kg、氟烷基因型为NN的长×大二元杂交猪60头,随机分为3组:不休息组,休息3 h组,休息3 h+玩具组,公母各半。根据评分标准分别记录休息过程中猪的精神状况。放血时收集血样,用于分析血浆中皮质醇、促肾上腺皮质激素(... 详细信息

选取体质量约为100 kg、氟烷基因型为NN的长×大二元杂交猪60头,随机分为3组:不休息组,休息3 h组,休息3 h+玩具组,公母各半。根据评分标准分别记录休息过程中猪的精神状况。放血时收集血样,用于分析血浆中皮质醇、促肾上腺皮质激素(ACTH)浓度,乳酸脱氢酶、肌酸激酶活性,乳酸、血糖浓度;添加EDTA-K2抗凝剂的血样用于血细胞分析。同时在放血时,测定血温。屠宰后,测定背最长肌24 h滴水损失;背最长肌(LM)、半膜肌(SM)45 min以及24 h的pH、色值、导电率。结果表明:①休息3 h+玩具组在3个时间段的精神评分要极显著高于休息3 h组,随着时间的延长猪都表现出趋于平静的趋势;②休息3 h+玩具组和休息组3 h组在皮质醇、促肾上腺皮质激素要显著低于不休组(P<0.05),相反乳酸脱氢酶、肌酸激酶要显著高于不休息组(P<0.05),而休息3h+玩具组与休息3 h组差别不显著(P<0.05);③3个休息处理组在肉质指标上没有出现显著差别(P<0.05);④休息3 h+玩具组、休息3 h组在红细胞数(RBC)、血红蛋白含量(HGB)均要显著低于不休息组(P<0.05);休息3h+玩具组在白细胞数(WBC)上显著高于不休组(P<0.05);休息3 h组的淋巴细胞绝对值(W-SCC)显著高于不休息组(P<0.05);而休息3 h+玩具组与休息3 h组在所有的免疫指标上都没有显著差异(P>0.05)。根据上述的结果显示,宰前一定要让猪有一个休息的过程,这种措施能有效缓解猪的应激,并能恢复其免疫能力;在休息的过程中,添加部分福利玩具,至少对猪的精神状态有明显的好处。

关键词：商品猪休息方式猪福利血液指标肉质

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饲料蛋白水平对鳜生长、消化和代谢的影响

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华中农业大学学报 2023年第4期42卷 215-224页

作者：郭薇尹恒莫爱杰翟昱翔矣林园杨慧君袁勇超华中农业大学水产学院/农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室/农业农村部淡水生物繁育重点实验室武汉430070 湖北省农业事业发展中心武汉430070

为确定不同规格的鳜(Siniperca chuatsi)对饲料蛋白水平的需求,以G1、G2、G3规格的初始体质量分别为(11.58±1.34)、(94.77±2.59)和(245.26±3.59)g的鳜为研究对象,研究不同蛋白水平饲料对其生长性能、饲料利用率、形态指... 详细信息

为确定不同规格的鳜(Siniperca chuatsi)对饲料蛋白水平的需求,以G1、G2、G3规格的初始体质量分别为(11.58±1.34)、(94.77±2.59)和(245.26±3.59)g的鳜为研究对象,研究不同蛋白水平饲料对其生长性能、饲料利用率、形态指标、消化酶活性、抗氧化能力和氨氮排泄的影响。结果显示,G1和G2组鳜特定生长率、终末体质量和增重率均在蛋白水平为500 g/kg时最高,但G3组鳜在饲料蛋白水平为450 g/kg时达到最大值;饲料系数则呈现出相反的变化趋势。特定生长率折线回归模型结果显示,3种规格鳜的最适蛋白需求分别为497.1、451.9和446 g/kg。G1和G2组鳜摄食低蛋白水平(350 g/kg和400 g/kg)饲料时存活率均显著低于其他各组,但饲料蛋白水平对G3组鳜的存活率无显著影响。G1和G2组鳜肥满度、肝体比和脏体比与饲料蛋白含量呈负相关(P<0.05)。随饲料中蛋白含量升高,G1和G3组鳜对饲料干物质的表观消化率均先上升后趋于稳定,而G2组鳜呈先升后降的趋势。在一定的蛋白水平范围内,3种规格的鳜粗蛋白表观消化率与饲料中蛋白含量呈正相关(P<0.05),在蛋白水平为500 g/kg时达到峰值,随后保持不变;前肠胰蛋白酶活性有着相似的变化趋势。3种规格的鳜肝脏中的谷丙转氨酶、谷草转氨酶活力随饲料蛋白含量的增加而明显增高(P<0.05)。其氨氮排泄率均在摄食后6 h达到高峰,并随着饲料蛋白水平的提高均显著增加;饲料蛋白水平为550 g/kg和600 g/kg时,G3组鳜的氨氮排泄率显著高于G1组。以上结果表明,饲料蛋白含量对3种规格鳜的生长性能及消化、代谢指标均有明显的影响,确定最适蛋白需求量才能达到最理想的鳜健康养殖效果。

关键词：鳜饲料蛋白水平生长性能表观消化率氨氮排泄精准养殖

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PRLR、RBP4基因多态性分布及其对大白猪产仔数的影响

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中国畜牧兽医 2010年第7期37卷 120-123页

作者：刘远李良良莫小雨王建华熊远雷明刚华中农业大学动物科技学院农业部猪遗传育种重点开放实验室&农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室武汉430070 宜昌正大畜牧有限公司宜昌443000

为了研究猪繁殖性状候选主效基因PRLR、RBP4多态性在大白猪群中的遗传效应,并应用于遗传改良,试验检测了278头大白母猪的基因多态性分布,分析了2个基因多态性位点不同基因型与该群体1418胎总产仔数和产活仔数的遗传效应。结果表明,PRLR... 详细信息

为了研究猪繁殖性状候选主效基因PRLR、RBP4多态性在大白猪群中的遗传效应,并应用于遗传改良,试验检测了278头大白母猪的基因多态性分布,分析了2个基因多态性位点不同基因型与该群体1418胎总产仔数和产活仔数的遗传效应。结果表明,PRLR基因位点上优势等位基因为B,其频率为0.538;头胎、二胎和所有胎次各基因型母猪的总产仔数大小均为BB>AB>AA,经产胎次各基因型母猪则为AB>BB>AA,但均没有显著差异,产活仔数的分析也得到了相似的结果;RBP4基因位点在该群体中均为AA型纯合子。

关键词： PRLR RBP4 猪产仔数

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团头鲂SREBP-1基因的克隆及其表达分析

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华中农业大学学报 2019年第2期38卷 9-16页

作者：吴文新曹赞王凡徐佳王卫民赵玉华华中农业大学水产学院/农业农村部淡水生物繁育重点实验室/农业动物遗传育种与繁育教育部重点实验室/池塘健康养殖湖北省工程实验室武汉430070

为阐明团头鲂SREBP-1的功能,采用RT-PCR技术克隆获得SREBP-1基因的cDNA序列,利用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测SREBP-1基因在不同发育时期及不同组织中的表达情况。生物信息学分析发现,SREBP-1基因cDNA的编码序列(coding sequence,CDS)为3 4... 详细信息

为阐明团头鲂SREBP-1的功能,采用RT-PCR技术克隆获得SREBP-1基因的cDNA序列,利用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测SREBP-1基因在不同发育时期及不同组织中的表达情况。生物信息学分析发现,SREBP-1基因cDNA的编码序列(coding sequence,CDS)为3 426bp(GenBank登录号:MH633449),开放阅读框(ORF)编码1 141个氨基酸,与大西洋鲑、斑马鱼、草鱼、鲤、金线鲃SREBP-1的氨基酸序列相似性较高(74%～99%)。保守结构域分析显示,团头鲂SREBP-1蛋白具有SREBPs家族典型的"碱性螺旋-环-螺旋-亮氨酸拉链"(bHLH-Zip)结构域。表达分析结果显示,SREBP-1基因在团头鲂胚胎发育过程中的表达呈现先下降后增高的趋势,在眼囊期最低,至出膜期达到最高。在团头鲂幼鱼中,SREBP-1在脑组织中的表达量最高,其次是眼、肝脏、心脏、肌肉、脂肪组织、肾脏,鳃中表达量最低。在成鱼中,SREBP-1在脑组织表达量最高,其次是性腺组织、肌肉、肝脏、眼,肾脏、脾脏和心脏中的表达量较低。以上结果表明,SREBP-1基因在团头鲂幼鱼和成鱼的不同组织中的表达模式存在差异。

关键词：团头鲂固醇调节元件结合蛋白-1 克隆表达

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