检索结果-内蒙古大学图书馆

MicroRNA-107负向调控结核分枝杆菌牛源人型分离株介导的巨噬细胞炎症反应

中国奶牛 2019年第11期 9-14页

作者：朱一帆陈颖钰刘晗索朗斯珠牛家强郭爱珍西藏农牧学院动物科学学院林芝860000 华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

MicroRNA(miRNA)是一类长度仅为19~22个核苷酸的单链非编码小分子RNA,在多种疾病中发挥着重要作用。本实验室前期从一结核牛体内成功分离到一株结核分枝杆菌1458株,并基于该菌建立了体外感染模型。将1458株感染巨噬细胞系THP-1后进行RNA... 详细信息

MicroRNA(miRNA)是一类长度仅为19~22个核苷酸的单链非编码小分子RNA,在多种疾病中发挥着重要作用。本实验室前期从一结核牛体内成功分离到一株结核分枝杆菌1458株,并基于该菌建立了体外感染模型。将1458株感染巨噬细胞系THP-1后进行RNAseq分析,发现miR-107呈现显著下调表达。为确定miR-107在结核分枝杆菌(***)1458株与巨噬细胞互作中的功能及其相关机制,本研究利用*** 1458株体外感染THP-1细胞,检测了miR-107感染*** 1458株及其热灭活状态下的动态变化,及感染相关信号通路(NF-Κb、P38、JNK和PI3K)调控途径。进一步确定了miR-107所诱发的IL-1β、IL-10、TNF-α和IL-6表达水平及*** 1458株对THP-1细胞侵袭能力的影响。结果显示,*** 1458株感染可显著下调THP-1细胞中miR-107的表达(P<0.001);并受到PI3K信号通路的调控;此外miR-107还能够显著抑制*** 1458株感染的THP-1细胞炎性因子IL-1β(P<0.05)、IL-10(P<0.05)、TNF-α(P<0.05)和IL-6(P<0.01)mRNA水平的表达,并显著促进*** 1458株对THP-1细胞的入侵(P<0.001)。结论:*** 1458株感染可显著下调THP-1细胞中miR-107的表达,依赖于PI3K信号通路,miR-107下调表达能够促进*** 1458株感染诱导的炎性细胞因子表达,抑制*** 1458株的入侵。本研究揭示了巨噬细胞抵抗***感染的新型防御机制。

关键词：结核分枝杆菌巨噬细胞 MicroRNA-107 炎性因子侵袭

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捻转血矛线虫病的研究进展

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中国动物传染病学报 2019年第3期27卷 107-111页

作者：李芳芳张挺周彩显冯新港杜爱芳索勋李祥瑞朱兴全胡敏农业微生物学国家重点实验室华中农业大学动物医学院武汉430070 中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 浙江省动物预防医学重点实验室浙江大学动物科学学院杭州310029 中国农业大学动物医学院北京100193 南京农业大学动物医学院南京210095 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室兰州730046

捻转血矛线虫病是由主要寄生于反刍动物皱胃的捻转血矛线虫引起的一种重要的寄生线虫病,在我国草地牧区普遍流行,可引起宿主消瘦、贫血等慢性消耗性症状,严重感染甚至可引起死亡,给我国养殖业带来巨大的经济损失。由于基层养殖人员常常... 详细信息

捻转血矛线虫病是由主要寄生于反刍动物皱胃的捻转血矛线虫引起的一种重要的寄生线虫病,在我国草地牧区普遍流行,可引起宿主消瘦、贫血等慢性消耗性症状,严重感染甚至可引起死亡,给我国养殖业带来巨大的经济损失。由于基层养殖人员常常忽视寄生线虫病的危害,缺乏基本的防控常识和驱虫意识,从而错过了预防和治疗该病的最佳时机,最终导致动物大批感染,极大的降低了动物的品质和养殖的经济效益。本文从捻转血矛线虫的形态和生活史着手,介绍了捻转血矛线虫病的危害和症状、诊断和治疗、防控方法及感染和致病的相关分子机制研究进展,希望能为该病的防控提供一定的指导。

关键词：捻转血矛线虫病感染致病分子机制防控

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猪Beclin1基因调控伪狂犬病病毒诱导细胞自噬和凋亡的机制分析

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畜牧兽医学报 2018年第6期49卷 1274-1281页

作者：胡林南良康张敏许苏童杨了寒李帅峰王凯刘正飞张淑君华中农业大学动物科学技术学院农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室武汉430070 华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070

旨在研究伪狂犬病病毒(PRV)感染后细胞自噬和凋亡情况,进一步分析鉴定PRV感染条件下与Beclin1互作的猪宿主凋亡家族蛋白。利用免疫印迹(WB)方法检测PRV感染细胞的自噬水平;利用流式细胞术探讨凋亡水平;最后利用免疫共沉淀试验分析PRV感... 详细信息

旨在研究伪狂犬病病毒(PRV)感染后细胞自噬和凋亡情况,进一步分析鉴定PRV感染条件下与Beclin1互作的猪宿主凋亡家族蛋白。利用免疫印迹(WB)方法检测PRV感染细胞的自噬水平;利用流式细胞术探讨凋亡水平;最后利用免疫共沉淀试验分析PRV感染PK-15细胞中Beclin1与Bcl-2和Bcl-xL的结合水平。结果显示,PRV感染导致LC3-Ⅱ的表达明显增多,而P62显著下降,且AKT(S473)磷酸化水平显著减少;其次,PRV感染诱导细胞凋亡且显著上调剪切型Caspase-9/8的表达水平;最后,免疫共沉淀结果显示PRV感染条件下Beclin1能与Bcl-2和Bcl-xL结合,但结合的水平明显降低。PRV感染诱导的细胞自噬可能依赖于PI3K-Ⅰ/AKT信号通路,PRV感染可能同时激活了线粒体凋亡途经和死亡受体途经从而诱导细胞凋亡,而PRV感染诱导的细胞自噬和细胞凋亡可能通过抑制Beclin1和Bcl-2、Bcl-xL结合而相互关联。

关键词： PRV 细胞自噬细胞凋亡 Beclin1

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四种前后盘吸虫线粒体基因组的系统发育分析

四种前后盘吸虫线粒体基因组的系统发育分析

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中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第一届青年科学家学术论坛

作者：杨新方瑞胡敏肖立华华南农业大学兽医学院人兽共患病重点实验室华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室

长菲策吸虫、链肠锡叶吸虫、荷包状腹带吸虫及野牛平腹吸虫是四种重要的但容易被人们忽视的前后盘吸虫,给畜牧业造成严重的经济损失。尽管这四种前后盘吸虫比较重要,但目前对于它们的分子生态学以及群体遗传学方面的研究比较局限。通过... 详细信息

长菲策吸虫、链肠锡叶吸虫、荷包状腹带吸虫及野牛平腹吸虫是四种重要的但容易被人们忽视的前后盘吸虫,给畜牧业造成严重的经济损失。尽管这四种前后盘吸虫比较重要,但目前对于它们的分子生态学以及群体遗传学方面的研究比较局限。通过对这四种前后盘吸虫的线粒体全基因组分析可以为系统发育研究和流行病学调查提供指导。本研究对这四种前后盘吸虫的线粒体全基因组进行了PCR扩增、测序和注释,并同其它吸虫的线粒体基因组进行了比较分析;同时,利用12个蛋白编码基因的氨基酸串联序列分析了包括这四种前后盘吸虫在内的18种吸虫的遗传进化关系。结果表明,长菲策吸虫、链肠锡叶吸虫、荷包状腹带吸虫及野牛平腹吸虫线粒体全基因组全长分别为14,120 bp、13,800 bp、14,801 bp和14,490bp,包含12个蛋白编码基因、22个tRNA基因、2个rRNA以及1个非编码区。长菲策吸虫、链肠锡叶吸虫、荷包状腹带吸虫及野牛平腹吸虫的线粒体基因排列顺序与其它吸虫的类似,所有的基因都是沿着同一个方向进行翻译。系统发育分析表明所有的前后盘吸虫都分在单独的一支上,与背孔科吸虫的亲缘关系最近,其次是片形科、异形科、后睾科及分体科吸虫。长菲策吸虫、链肠锡叶吸虫、荷包状腹带吸虫及野牛平腹吸虫线粒体全基因组序列对于吸虫的比较基因组学分析具有重要的意义,同时为前后盘吸虫的分类、群体遗传和流行病学的系统研究提供DNA标记。

关键词：长菲策吸虫链肠锡叶吸虫荷包状腹带吸虫野牛平腹吸虫线粒体基因组

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SIGIRR对奶牛乳腺上皮细胞TLR4致炎信号通路的负调控作用

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中国兽医学报 2018年第2期38卷 404-410页

作者：周秋格刘畅赖金伦郭爱珍胡长敏华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉450070

旨在探究SIGIRR对奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）TLR4信号通路的负调控作用。构建SIGIRR—pEGFP真核表达载体，脂质体法转染HEK293T及BMECs，荧光显微镜观察及Westernblot验证融合蛋白SIGIRR—pEGFP的表达；LPS刺激转染后BMECs，检测TLR4及... 详细信息

旨在探究SIGIRR对奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）TLR4信号通路的负调控作用。构建SIGIRR—pEGFP真核表达载体，脂质体法转染HEK293T及BMECs，荧光显微镜观察及Westernblot验证融合蛋白SIGIRR—pEGFP的表达；LPS刺激转染后BMECs，检测TLR4及其信号通路分子IRAK1、IRAK4和TRAF6的变化，以及下游炎性因子IL-6、IL-8、IL-18和TNF-a的表达量。结果显示，成功构建SIGIRR-pEGFP真核表达载体，荧光检测重组质粒转染到HEK293T和BMECs中；Westernblot鉴定融合蛋白SIGIRR—pEGFP表达正确；重组质粒转染BMECs后，SIGIRR表达量较转染空载质粒组及空白未转染组显著升高（P〈0．01）；炎性因子IL-6、IL-8、IL-10、TNFa、TLR4及下游信号分子IRAK1、IRAK4、TRAF6表达量显著降低（P〈0．01），转染空载质粒组与空白未转染组相比仅IRAKl表达量有差异（P〈0．05）。结果表明，本试验通过研究牛SIGIRR在BMECs中的作用，证实sIGIRR基因具有炎性负调控LPS-TLR4信号通路的作用，具有潜力成为临床治疗奶牛乳腺炎的新靶标。

关键词：奶牛乳腺炎乳腺上皮细胞 SIGIRR TLR4信号通路负性调控

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牛结核病免疫学诊断研究进展

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中国兽医学报 2018年第6期38卷 1250-1254,1259页

作者：彭永崇朱小洁王子健陈颖钰郭爱珍华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

牛结核病是一种严重危害养牛业、食品安全和公共卫生的人兽共惠传染病。由于检疫和扑杀是目前控制牛结核病的基本策略，检测技术成为影响牛结核病控制效果的重要因素。理想的检测方法应具有准确、简便、高效、成本低、对动物干扰小、结... 详细信息

牛结核病是一种严重危害养牛业、食品安全和公共卫生的人兽共惠传染病。由于检疫和扑杀是目前控制牛结核病的基本策略，检测技术成为影响牛结核病控制效果的重要因素。理想的检测方法应具有准确、简便、高效、成本低、对动物干扰小、结果可追溯等特点。当前的法定检疫方法为结核菌素皮内变态反应，该方法具有受环境分枝杆菌干扰、诊断特异性低、费时费力、对动物干扰大、结果判断主观性强、不可回溯等缺陷。一些牛结核实验室诊断技术克服了以上缺点，可与皮试法联用或单独使用。新型诊断抗原仍在不断被发掘，新型材料也被不断用于牛结核病诊断技术中。现对相关进展进行了归纳和综述，以期为牛结核病免疫学诊断的合理应用及深入研究提供参考。

关键词：牛结核牛分枝杆菌免疫学诊断抗原人兽共患病

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新疆伊犁地区捻转血矛线虫种群Ⅰ型β微管蛋白基因苯并咪唑抗药性相关单核苷酸多态性调查

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中国兽医杂志 2018年第9期54卷 8-11,I0002页

作者：杨新雷卫强邸文达王春群周彩显张宗泽方瑞周艳琴赵俊龙胡敏华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

为了了解新疆伊犁地区捻转血矛线虫对苯并咪唑类药物的抗药性情况,本课题组对该地区某绵羊场捻转血矛线虫种群Ⅰ型β微管蛋白基因苯并咪唑抗药性相关单核苷酸多态性进行了调查。在通过捻转血矛线虫ITS-2种特异性PCR鉴定为捻转血矛线虫... 详细信息

为了了解新疆伊犁地区捻转血矛线虫对苯并咪唑类药物的抗药性情况,本课题组对该地区某绵羊场捻转血矛线虫种群Ⅰ型β微管蛋白基因苯并咪唑抗药性相关单核苷酸多态性进行了调查。在通过捻转血矛线虫ITS-2种特异性PCR鉴定为捻转血矛线虫的基础上,分别扩增了27条捻转血矛线虫雄虫的Ⅰ型β微管蛋白基因,测序后对抗药性相关的167,198位点和200位点的单核苷酸多态性进行了调查研究。结果表明,该羊场的捻转血矛线虫种群的抗药性突变只发生在198位点和200位点,以198位点的抗药性突变为主,没有在167位点发现抗药性突变。共发现了4种基因型,198纯合敏感型及200位点纯合敏感型(20; 74. 07%)、198杂合抗药型及200位点纯合敏感型(3; 11. 11%)、198纯合敏感型及200位点杂合抗药型(2; 7. 41%)和198纯合抗药型及200位点纯合敏感型(2; 7. 41%)。该羊场捻转血矛线虫种群中存在198位点的纯合抗药型突变,说明有抗药性的风险,需要引起注意。本研究首次从分子水平报道了新疆伊犁地区捻转血矛线虫种群Ⅰ型β微管蛋白基因存在苯并咪唑抗药性突变,这对该地区以及其他类似地区的捻转血矛线虫病的防控以及抗药性的管理具有一定的指导意义。

关键词：捻转血矛线虫苯并咪唑抗药性 Ⅰ型β微管蛋白单核苷酸多态性

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NOD1/2及其在奶牛乳腺炎中作用研究进展

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动物医学进展 2018年第3期39卷 75-78页

作者：刘畅曹钰晗赵春阳徐璐尧张文劲赖金伦陈颖钰郭爱珍胡长敏华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

奶牛乳腺炎是严重危害养牛业的常见疾病,近年来对奶牛乳腺炎的研究不断深入,关于乳腺炎天然免疫进程的研究也不断深化。核苷酸结合寡聚化结构域蛋白(NOD)是天然免疫的重要组成部分,不断有报道称NOD蛋白参与或调控了乳腺炎天然免疫进程,... 详细信息

奶牛乳腺炎是严重危害养牛业的常见疾病,近年来对奶牛乳腺炎的研究不断深入,关于乳腺炎天然免疫进程的研究也不断深化。核苷酸结合寡聚化结构域蛋白(NOD)是天然免疫的重要组成部分,不断有报道称NOD蛋白参与或调控了乳腺炎天然免疫进程,论文以NOD1/2为出发点从NOD家族的结构、NOD1与NOD2的异同、NOD1/2参与天然免疫进程以及NOD1/2与乳腺炎的关系等方面总结相关研究进展,为深入了解NOD1/2及其在奶牛乳腺炎中的作用,给乳腺炎相关治疗方法的优化及相关药物的研发提供参考。

关键词： NOD1/2 天然免疫奶牛乳腺炎

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牛支原体膜蛋白的研究进展

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中国兽医学报 2018年第10期38卷 2011-2014,2019页

作者：刘畅曹钰晗赵春阳徐璐尧张文劲唐鑫赖金伦陈颖钰郭爱珍胡长敏华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

支原体（Mvfoplasma）是目前世界上最小的、进行自我复制的、且能在无生命培养基中生长的原核生物，结构简单．缺乏细胞壁。能通过0．22微米的细菌滤器。支原体种类繁多，对人类和动植物造成的危害大，且易污染体外培养的细胞，给科研... 详细信息

支原体（Mvfoplasma）是目前世界上最小的、进行自我复制的、且能在无生命培养基中生长的原核生物，结构简单．缺乏细胞壁。能通过0．22微米的细菌滤器。支原体种类繁多，对人类和动植物造成的危害大，且易污染体外培养的细胞，给科研工作带来多重不利影响。

关键词：牛支原体膜蛋白结构功能应用

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牛结核γ-干扰素检测法和比较皮内变态反应在牛临床检测中应用

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中国奶牛 2019年第5期 33-36页

作者：杨莉刘心彭清洁李庆妮陈颖钰胡长敏陈曦李翔郭爱珍华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 武汉科前生物股份有限公司武汉430070 国家动物结核病专业实验室(武汉) 武汉430070 湖北省动物流行病学国际科技合作基地武汉430070 华中农业大学动物科技学院武汉430070

我国已启动牛结核病净化计划和评估论证工作。有效诊断是有效实施牛结核病"检疫-扑杀"控制策略的前提。牛结核γ-干扰素检测法是国际公认的确诊方法。本研究进行不同方法的临床比对试验,旨在指导临床有效选择和应用牛结核检... 详细信息

我国已启动牛结核病净化计划和评估论证工作。有效诊断是有效实施牛结核病"检疫-扑杀"控制策略的前提。牛结核γ-干扰素检测法是国际公认的确诊方法。本研究进行不同方法的临床比对试验,旨在指导临床有效选择和应用牛结核检测的不同方法。使用牛结核菌素比较皮内变态反应(CCT)与牛结核γ-干扰素检测法对某奶牛场200头奶牛实施平行检测,γ-干扰素检测法同时采用了国产试剂盒(KIT1)与进口试剂盒(KIT2)。结果显示:CCT与KIT2具有中等一致性(Kappa值为0.5),但特异性较差(66.4%),阳性预测值低(54.0%),易出现假阳性结果导致大量的错杀。γ-干扰素检测试剂盒KIT1与KIT2具有较好的一致性(Kappa值为0.9),总符合率95.0%,表明二者均能有效检测牛结核,且国产试剂盒能显著降低检测成本。在控制成本的前提下,建议用皮试先初筛,γ-干扰素检测法确诊阳性牛。

关键词：牛结核病 γ-干扰素皮内变态反应检测净化

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