检索结果-内蒙古大学图书馆

中国畜牧兽医学会2014年学术年会

作者：杨影程艳青郭学波金梅林武汉科前动物生物制品有限责任公司湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

引言猪流感(SI)是一种急性感染的呼吸系统疾病,临床上表现突然发病、咳嗽、呼吸困难、发热和衰竭等特征.各品种、性别和年龄猪均能感染,猪群暴发流感时,发病率可高达100％[1].流感的病毒分离是流感诊断的金标准,也是流感病原学监测的基...

引言猪流感(SI)是一种急性感染的呼吸系统疾病,临床上表现突然发病、咳嗽、呼吸困难、发热和衰竭等特征.各品种、性别和年龄猪均能感染,猪群暴发流感时,发病率可高达100％[1].流感的病毒分离是流感诊断的金标准,也是流感病原学监测的基础,近年来本试验室开展了猪流感病原学工作,本研究从天津、河南、广东地区采集病料中分离到三株H1亚型SIV病[2],并开展了相关鉴定,确定了疫苗用毒种.

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猪流感H3N2亚型灭活疫苗的抗体平行关系及交叉保护力

猪流感H3N2亚型灭活疫苗的抗体平行关系及交叉保护力

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中国畜牧兽医学会2014年学术年会

作者：杨影程艳青金梅林武汉科前动物生物制品有限责任公司湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

引言为了使产品质量标准与国际接轨,检测方法便于操作,尽量减少使用本动物以及减少散毒,有必要对该灭活疫苗开展攻毒保护试验和血凝抑制抗体效价的比较研究,以了解本动物攻毒试验和血清学试验之间的平行关系,我们进行了如下研究.为了考...

引言为了使产品质量标准与国际接轨,检测方法便于操作,尽量减少使用本动物以及减少散毒,有必要对该灭活疫苗开展攻毒保护试验和血凝抑制抗体效价的比较研究,以了解本动物攻毒试验和血清学试验之间的平行关系,我们进行了如下研究.为了考察我们研制的猪流感H3N2亚型灭活疫苗(HuN-1株)对H3N2亚型的其他流行毒株的交叉保护情况我们免疫后,分别用分离的分别用H3N2亚型的HuN-1株、HuN-2株、GD株进行了攻毒试验.

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H3N2亚型猪流感疫苗株的筛选

H3N2亚型猪流感疫苗株的筛选

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中国畜牧兽医学会2014年学术年会

作者：杨影程艳青金梅林武汉科前动物生物制品有限责任公司湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

引言鉴于猪在禽、猪、人的流感传播链中的中间宿主作用,我国猪群中SIV的存在情况及潜在的公共卫生意义如何,己成为世界同行关注的焦点,而我国对SIV的研究一直处于起步阶段,为了解近年SIV在我国的存在和流行情况,我们对广东、湖南等疑似...

引言鉴于猪在禽、猪、人的流感传播链中的中间宿主作用,我国猪群中SIV的存在情况及潜在的公共卫生意义如何,己成为世界同行关注的焦点,而我国对SIV的研究一直处于起步阶段,为了解近年SIV在我国的存在和流行情况,我们对广东、湖南等疑似猪流感感染的猪场进行病毒分离工作,分离到3株H3N2亚型SIV,并对其生物学特性等进行了研究[1,2].

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猪链球菌2型毒力因子gapdh基因的克隆·表达及与Hela细胞互作蛋白的筛选

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安徽农业科学 2014年第36期42卷 12821-12824页

作者：袁芳艳谭臣雷丽贝为成刘泽文郭锐段正赢杨克礼周丹娜田永祥湖北省农业科学院畜牧兽医研究所/动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室湖北武汉430064 农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

[目的]克隆并在大肠杆菌中表达猪链球菌2型毒力因子gapdh基因,寻找与GAPDH互作的受体蛋白。[方法]扩增猪链球菌2型甘油醛-3-磷酸脱氢酶gapdh基因并构建表达质粒p ET28a-gapdh。[结果]在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达了约41 k Da的融合蛋... 详细信息

[目的]克隆并在大肠杆菌中表达猪链球菌2型毒力因子gapdh基因,寻找与GAPDH互作的受体蛋白。[方法]扩增猪链球菌2型甘油醛-3-磷酸脱氢酶gapdh基因并构建表达质粒p ET28a-gapdh。[结果]在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达了约41 k Da的融合蛋白GAPDH。Western blot试验说明GAPDH具有良好的免疫学活性。利用新西兰大白兔制备抗GAPDH蛋白的多克隆抗体。运用配体重叠技术,在He La细胞中初步找到了一个与GAPDH蛋白作用的潜在受体蛋白。[结论]为进一步研究猪链球菌2型的分子致病机理奠定基础。

关键词： 2型猪链球菌原核表达多抗制备受体

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禽霍乱巴氏杆菌的分离鉴定与致病性研究

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中国兽医杂志 2013年第2期49卷 21-24,I0001页

作者：于成接丁优玲华亚峰金梅林张安定华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

禽巴氏杆菌病又称禽霍乱,是由多杀性巴氏杆菌所引起的鸡、火鸡、鸭、鹅等禽类的一种出血性、败血性传染病。禽巴氏杆菌病在我国有些地区的养鸡场发病严重,常造成严重的经济损失,是危害养禽业的重要传染病之一。2011年10月广西某鸡场发... 详细信息

禽巴氏杆菌病又称禽霍乱,是由多杀性巴氏杆菌所引起的鸡、火鸡、鸭、鹅等禽类的一种出血性、败血性传染病。禽巴氏杆菌病在我国有些地区的养鸡场发病严重,常造成严重的经济损失,是危害养禽业的重要传染病之一。2011年10月广西某鸡场发生产蛋鸡急性致死病例,流行病学与临床剖检结果疑似禽巴氏杆菌感染所致疾病。分离的病原镜检可见革兰染色阴性、瑞氏染色两极浓染的小杆菌,16SrRNA序列分析表明,该菌与禽巴氏杆菌的同源性为98%,经分型PCR鉴定该菌为A型巴氏杆菌。致病性试验结果表明,该菌对鸡表现为较高的致病性,人工感染100CFU即能导致10周龄的鸡3d内死亡。药敏试验结果表明,该菌对环丙沙星、恩诺沙星、四环素、痢特灵、氧氟沙星敏感,通过鸡场彻底消毒并结合使用恩诺沙星和四环素进行治疗,控制了该病的发生。

关键词：多杀性巴氏杆菌 PCR 实验室诊断

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四甲基秋兰姆二硫化物对肉鸡胫骨生长板超微结构的影响

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畜牧兽医学报 2013年第6期44卷 965-971页

作者：田文霞李家奎王瑞覃平宁官保乔建钢李宏全毕丁仁潘思轶郭定宗华中农业大学动物医学院武汉430070 山西农业大学动物科技学院太谷030801 华中农业大学食品科技学院武汉430070 华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070

本研究拟研究四甲基秋兰姆二硫化物(福美双)对肉鸡胫骨生长板超微结构的时序性影响。7日龄AA肉鸡饲喂含100mg·kg-1福美双的饲料48h,分别在8、9、13日龄剖杀试验鸡,迅速采取胫骨生长板放入2.5%戊二醛溶液于4℃固定,制备超薄切片,用... 详细信息

本研究拟研究四甲基秋兰姆二硫化物(福美双)对肉鸡胫骨生长板超微结构的时序性影响。7日龄AA肉鸡饲喂含100mg·kg-1福美双的饲料48h,分别在8、9、13日龄剖杀试验鸡,迅速采取胫骨生长板放入2.5%戊二醛溶液于4℃固定,制备超薄切片,用透射电镜做超微结构观察。结果发现:8日龄鸡增殖软骨细胞变圆、坏死,线粒体增多、稍肿胀、出现致密颗粒,内质网断裂扩张呈泡状,而9日龄时更为严重;在8、9日龄时,前肥大软骨细胞多数无完整的细胞结构、细胞质溶解、有疑似凋亡细胞,13日龄时,前肥大软骨细胞已有完整的细胞结构,但细胞器仍呈坏死状、分泌旺盛。由此可见,福美双在短时间内可导致胫骨生长板增殖细胞、前肥大软骨细胞坏死,且前肥大软骨细胞更易受损,影响了软骨细胞的正常发育,推测其可能引发能量代谢障碍,并干扰了细胞内信号转导,使细胞周期紊乱,从而引发肉鸡胫骨软骨发育不良。

关键词：福美双肉鸡胫骨生长板超微结构软骨细胞

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水牛IFN-γ在毕赤酵母中的表达及其单克隆抗体的制备

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动物医学进展 2013年第6期34卷 71-77页

作者：邹新峰郭爱珍陈颖钰胡长敏王冰刘晓乐谢倩姜勇张策陈焕春华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学动物科技学院湖北武汉430070

本研究旨在建立水牛IFN-γ(Bubalus bubalus IFN-γ,Bb IFN-γ)体外释放检测法,为定量检测水牛IFN-γ、开发水牛结核病及其他疫病的检测技术奠定基础。克隆了水牛IFN-γ成熟肽基因片段,根据测序结果,在不改变氨基酸序列的情况下,将密码... 详细信息

本研究旨在建立水牛IFN-γ(Bubalus bubalus IFN-γ,Bb IFN-γ)体外释放检测法,为定量检测水牛IFN-γ、开发水牛结核病及其他疫病的检测技术奠定基础。克隆了水牛IFN-γ成熟肽基因片段,根据测序结果,在不改变氨基酸序列的情况下,将密码子替换成毕赤酵母偏爱密码子并合成全基因,进一步用毕赤酵母GS115表达了水牛IFN-γ成熟肽基因。通过水疱性口炎病毒(VSV)在牛肾细胞(MDBK)上检测了其抗病毒活性,抗VSV活性为7.44×105 U/mL。利用酵母表达的水牛IFN-γ蛋白免疫Balb/c小鼠,并筛选阳性杂交瘤细胞,获得5株高效价的单克隆抗体。利用该重组蛋白免疫日本长耳大白兔,得到高效价的抗水牛IFN-γ多克隆抗体。用所获得的单克隆抗体及多克隆抗体建立了检测水牛IFN-γ的双抗体夹心ELISA方法,检测灵敏度达到125pg/mL。通过建立的方法分别检测了原核表达的奶牛IFN-γ、梅花鹿IFN-γ、弥猴IFN-γ以及其他7种非相关重组蛋白,结果表明所建立的方法灵敏度高,特异性好。

关键词：水牛 γ干扰素毕赤酵母双抗体夹心酶联免疫吸附试验单克隆抗体

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亚细胞蛋白质组研究进展

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动物医学进展 2013年第6期34卷 167-171页

作者：孔汉金张克山刘永杰尚佑军吴斌刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046 华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

随着蛋白质组学研究的不断细化和深入,亚细胞水平的蛋白质组成为当前蛋白组学研究的热点之一。亚细胞蛋白质组学研究可以减少全细胞蛋白组分析的复杂性,其研究内容主要包括亚细胞水平的蛋白质组组成、功能、定位及其相互作用。比较、鉴... 详细信息

随着蛋白质组学研究的不断细化和深入,亚细胞水平的蛋白质组成为当前蛋白组学研究的热点之一。亚细胞蛋白质组学研究可以减少全细胞蛋白组分析的复杂性,其研究内容主要包括亚细胞水平的蛋白质组组成、功能、定位及其相互作用。比较、鉴定、分析正常生理状态和病理状态下亚细胞蛋白质组的差异表达蛋白并研究其功能,成为寻找疾病特异生物标记,揭示致病机理的有效途径之一。论文就蛋白质组学在不同亚细胞水平的应用和研究现状、面临的挑战以及未来的发展方向做一综述。

关键词：蛋白质组学亚细胞功能

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牛A型多杀性巴氏杆菌分离株的鉴定和免疫原性研究

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中国兽医杂志 2013年第10期49卷 3-6,10页

作者：汪漫胡长敏陈颖钰彭清洁姜鹏崔鹏陈焕春郭爱珍华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学动物科技学院湖北武汉430070 武汉科前动物生物制品有限公司湖北武汉430070

从湖北黄冈、洪湖、钟祥和河南驻马店发病肉牛场送检病变肺中分离到4株病原菌,经过菌落形态观察、培养特性、生化反应、PCR鉴定等检测,确定这4株临床分离株均为荚膜A型多杀性巴氏杆菌,分别命名为Pm-HG、Pm-HH、Pm-ZX和Pm-ZMD。比较4株... 详细信息

从湖北黄冈、洪湖、钟祥和河南驻马店发病肉牛场送检病变肺中分离到4株病原菌,经过菌落形态观察、培养特性、生化反应、PCR鉴定等检测,确定这4株临床分离株均为荚膜A型多杀性巴氏杆菌,分别命名为Pm-HG、Pm-HH、Pm-ZX和Pm-ZMD。比较4株临床分离株与参考株的生长特性,发现生长曲线与参考株无明显差异。小鼠毒力试验表明,Pm-HG、PmHH和Pm-ZX接种10个菌以下即可将小鼠致死,毒力均很强。将4株菌灭活后免疫小鼠,二免后2周,血清抗体效价都在1∶20 000以上,其中Pm-ZMD和Pm-HG抗体效价最高。用各株菌进行交叉攻击,结果Pm-HG的交叉保护率最高,除能完全保护同种菌的攻击外,对其他3株菌的交叉保护率都在90%以上。因此Pm-HG可望作为进一步研发A型多杀性巴氏杆菌灭活疫苗的制苗菌株。

关键词：巴氏杆菌 A型多杀性巴氏杆菌疫苗毒力免疫牛

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BHV-1 gG-/tk-/GM-CSF+重组病毒的构建及其免疫效果评价

BHV-1 gG-/tk-/GM-CSF+重组病毒的构建及其免疫效果评价

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中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会

作者：纪素坤邓明亮费文涛胡长敏陈颖钰郭爱珍陈焕春农业微生物学国家重点实验室华中农业大学华中农业大学动物科技学院农业微生物学国家重点实验室华中农业大学华中农业大学动物医学院

目的：通过引入免疫增强因子GM-CSF,提高重组病毒的免疫原性。方法：将牛GM-CSF克隆到pcDNA3.1载体中,构建GM-CSF基因表达盒;将tk基因上游同源臂、GM-CSF基因表达盒、tk基因下游同源臂克隆到pcDNA3.1载体中,得到转移载体pTK-GM-CSF.将... 详细信息

目的：通过引入免疫增强因子GM-CSF,提高重组病毒的免疫原性。方法：将牛GM-CSF克隆到pcDNA3.1载体中,构建GM-CSF基因表达盒;将tk基因上游同源臂、GM-CSF基因表达盒、tk基因下游同源臂克隆到pcDNA3.1载体中,得到转移载体pTK-GM-CSF.将亲本病毒BHV-1gG–/TK–/EGFP+基因组与转移载体pTK-GM-CSF采用磷酸钙法共转染MDBK细胞,得到重组病毒BHV-1 gG–/TK–/GM-CSF+.并对重组病毒的生物学特性和对日本大耳白兔的免疫原性进行了评价。结果：利用PCR和RT-PCR证实GM-CSF基因表达盒已正确插入重组病毒的tk基因位置,并具有转录活性。亲本株和重组株的空斑形态、空斑直径大小无明显差异;两者病毒滴度无明显变化,生长曲线相似;体外遗传稳定性良好。兔体实验表明在免疫早期重组毒株能产生较亲本株更高水平的IFN-β(P＜0.05).但中和抗体水平、攻毒后的临床症状及病毒排毒时间等各项指标检测表明,亲本株和重组毒株之间无明显差异。结论：在免疫早期重组株刺激机体产生的IFN-β高于亲本株,具有一定的应用前景。

关键词：牛疱疹病毒Ⅰ型重组病毒基因工程疫苗免疫效果

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