检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：周锐蔡旭旺黎璐陈焕春农业微生物学国家重点实验室华中农业大学动物医学院武汉 430070

副猪嗜血杆菌病又被称为革拉斯氏病(Gl(a)sser’s disease),是由副猪嗜血杆菌(HPS)引起的一种猪细菌性传染病。该病是近年来危害世界养猪业最严重的新发细菌性传染病之一,呈世界性分布,目前在我国猪群呈爆发性流行,猪群感染率在70％以... 详细信息

副猪嗜血杆菌病又被称为革拉斯氏病(Gl(a)sser’s disease),是由副猪嗜血杆菌(HPS)引起的一种猪细菌性传染病。该病是近年来危害世界养猪业最严重的新发细菌性传染病之一,呈世界性分布,目前在我国猪群呈爆发性流行,猪群感染率在70％以上。该病主要表现为多发性浆膜炎、肺炎、关节炎和脑膜脑炎。HPS单独感染可影响2周龄到4月龄的猪,但主要在断奶前后和仔猪阶段发病,发病率一般为20—30％,严重时死亡率可达50％以上。然而,其更为严重的危害性主要表现在：与猪繁殖与呼吸综合征(蓝耳病)病毒、猪圆环病毒、猪链球菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、支气管败血波氏杆菌、猪肺炎支原体等猪的呼吸道病原微生物混合或／和继发感染,使猪的呼吸道传染病变得更为复杂和严重。这种混合感染和继发感染在我国猪群中普遍存在(混合／继发感染率在90％60以上),而且可以影响任何年龄的猪(包括成年猪),是当前猪蓝耳病等病毒性传染病造成大量生猪死亡的重要原因之一。因此,有效防控副猪嗜血杆菌病的爆发与流行是我国当前猪病防控中急需解决的课题。副猪嗜血杆菌血清型众多,各血清型之间缺乏交叉免疫保护作用,不同国家、地区和猪场流行的优势血清型又不尽相同,因此,有效诊断和防治该病是目前的一项世界性课题。在2002年开始本病的基础与防治技术研究,建立了检测与诊断方法,研制出国内第一个副猪嗜血杆菌病多价灭活疫苗,并实现了产业化与推广应用,为该病的诊断与防治作出了重要贡献。同时在副猪嗜血杆菌的基因组、转录组和蛋白质组研究领域取得了重要进展,为新型诊断与防治技术及产品的开发奠定了良好的基础。

关键词：副猪嗜血杆菌病副猪嗜血杆菌免疫保护猪病防控

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猪圆环病毒2型TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

猪圆环病毒2型TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

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中国畜牧兽医学会2010学术年会暨第二届中国兽医临床大会

作者：李文涛李文洁刘淑清汪洋杨昆邹浩勇何启盖华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉 430070

本研究旨在建立一种针对猪圆环病毒2型特异、敏感的定量PCR方法.根据GsnBank中猪圆环病毒2型ORF 2基因序列的保守区域设计合成引物和探针，以该PMD-ORF2阳性重组质粒为标准品模板制作荧光定量PCR标准曲线.用该方法对临床采集的54份血清... 详细信息

本研究旨在建立一种针对猪圆环病毒2型特异、敏感的定量PCR方法.根据GsnBank中猪圆环病毒2型ORF 2基因序列的保守区域设计合成引物和探针，以该PMD-ORF2阳性重组质粒为标准品模板制作荧光定量PCR标准曲线.用该方法对临床采集的54份血清样品进行检测，并与常规PCR方法进行敏感性和特异性比较，结果显示：所建立的方法灵敏度可达10拷贝·μL-1，比常规PCR方法灵敏度高100倍，并且与猪细小病毒(PPV)、猪圆环病毒1型(PCV1)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)没有交叉反应;田间试验表明，54份血清样品中，常规PCR结果显示，50份呈PCR阳性;而荧光定量PCR检测结果显示，52份血清为阳性;其中50份PCR阳性的样品，定量PCR均为阳性.上述结果显示该方法适合用于PCV2的流行病学调查和临床诊断.

关键词：猪圆环病毒2型实时荧光定量PCR TaqMan探针

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猪病毒性腹泻的流行现状及防治策略

猪病毒性腹泻的流行现状及防治策略

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第十一届全国规模化猪场主要疫病监控与净化专题研讨会

作者：张坤徐丽丽库旭钢何启盖华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉 430070

在寒冷季节，猪流行性腹泻病毒(PEDV)，猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)及猪A群轮状病毒(RV-A)是引起猪腹泻的主要因素，具有高接触性传染的特点，严重影响饲料转化率，常造成严重的经济损失。本实验室利用己建立的猪流行性腹泻病毒(PEDV)、... 详细信息

在寒冷季节，猪流行性腹泻病毒(PEDV)，猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)及猪A群轮状病毒(RV-A)是引起猪腹泻的主要因素，具有高接触性传染的特点，严重影响饲料转化率，常造成严重的经济损失。本实验室利用己建立的猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)及猪A群轮状病毒(RV-A)多重RT-PCR检测方法分别对来自湖北、河南、湖南、江西、广西的197份腹泻粪样进行了鉴别诊断。鉴于2009年1月份至2010年2月份的腹泻样品检测结果，本文介绍了这三种病毒性腹泻的临床症状、流行现状和防治策略。

关键词：猪病毒性腹泻防治策略鉴别诊断临床症状

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ClfA亚单位疫苗对金黄色葡萄球菌诱导小鼠乳腺炎的保护力评价

ClfA亚单位疫苗对金黄色葡萄球菌诱导小鼠乳腺炎的保护力评价

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中国畜牧兽医学会2010学术年会暨第二届中国兽医临床大会

作者：胡长敏龚瑞继素坤郭爱珍华中农业大学动物医学院／农业微生物学国家重点实验室武汉 430070

金黄色葡萄球菌是引起该病主要致病菌.本研究通过制备金黄色葡萄球菌ClfA亚单位疫苗和金黄色葡萄球菌灭活疫苗，以小鼠为试验模型，分别进行ELISA、血清粘附试验、血清调理的中性粒细胞吞噬实验和乳腺内金黄色葡萄球菌灌注攻毒等实验.... 详细信息

金黄色葡萄球菌是引起该病主要致病菌.本研究通过制备金黄色葡萄球菌ClfA亚单位疫苗和金黄色葡萄球菌灭活疫苗，以小鼠为试验模型，分别进行ELISA、血清粘附试验、血清调理的中性粒细胞吞噬实验和乳腺内金黄色葡萄球菌灌注攻毒等实验.结果发现CIfA组较灭活组和对照组能够诱导机体产生的更高水平的IgG抗体、更强的粘附能力及免疫血清调理吞噬能力.哺乳小鼠乳腺金黄色葡萄球菌灌注后，ClfA免疫组乳腺细菌回收数目较灭活疫苗组和对照组明显降低.本研究证实了ClfA金黄色葡萄球菌亚单位疫苗比金黄色葡萄球菌灭活疫苗能对机体产生更强和更有效的保护力，初步评价了此亚单位疫苗的免疫效力和保护力.

关键词：奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌 ClfA亚单位疫苗

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表达O型口蹄疫病毒P12A3C基因的重组伪狂犬病毒的构建

表达O型口蹄疫病毒P12A3C基因的重组伪狂犬病毒的构建

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：郝根喜张华伟杨应立赵俊娜曹齐树李祥敏钱平华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉 430070

伪狂犬病毒具有基因组容量大，有效表达外源基因多，安全并可以诱导有效的细胞免疫和体液免疫。到目前为止，已有多种外源基因以伪狂犬病毒为载体获得表达，并取得了良好的免疫效果。口蹄疫病毒前体衣壳蛋白(P1-2A)含有FMDV全部的免疫... 详细信息

伪狂犬病毒具有基因组容量大，有效表达外源基因多，安全并可以诱导有效的细胞免疫和体液免疫。到目前为止，已有多种外源基因以伪狂犬病毒为载体获得表达，并取得了良好的免疫效果。口蹄疫病毒前体衣壳蛋白(P1-2A)含有FMDV全部的免疫原性位点，并能在3C蛋白酶的作用下进行切割，加工，形成空衣壳。这种没有感染性核酸的空衣壳具有与全病毒相同的免疫效果，是今后口蹄疫基因工程疫苗发展的方向。本研究以伪狂犬病毒TK-/gE-/LacZ+为载体，构建了表达O型口蹄疫病毒衣壳前体蛋白(P1-2A)，3C蛋白酶基因的重组伪狂犬病毒，为研制口蹄疫基因工程疫苗候选株，最终为有效预防和控制口蹄疫流行奠定基础。

关键词： FMDV P12A3C基因重组病毒

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猪圆环病毒2型WH株的优化培养

猪圆环病毒2型WH株的优化培养

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中国畜牧兽医学会2010年学术年会——第二届中国兽医临床大会

作者：严伟东李文洁李文涛崔晓汪洋何启盖华中农业大学农业微生物学国家重点实验室科前动物生物制品有限责任公司

(目的)本研究针对分离鉴定的PCV2-WH株通过四种不同的方法进行病毒增殖优化培养,使培养的病毒滴度达到理想状态.(方法)①细胞与病毒同步接种并用300mm的D-氨基葡萄糖处理;②同步接种不用D-氨基葡萄糖处理;③不同步接种并用D-氨基葡萄糖... 详细信息

(目的)本研究针对分离鉴定的PCV2-WH株通过四种不同的方法进行病毒增殖优化培养,使培养的病毒滴度达到理想状态.(方法)①细胞与病毒同步接种并用300mm的D-氨基葡萄糖处理;②同步接种不用D-氨基葡萄糖处理;③不同步接种并用D-氨基葡萄糖处理;④不同步接种不用D-氨基葡萄糖处理.(结果)通过传统PCR和荧光定量PCR检测病毒增殖结果表明:同步接种并用D·氨基葡萄糖处理的病毒含量比其他三种培养工艺所获病毒量分别提高了12.8%,14.7%,56.7%.第二代中,同步接种并用D-氨基葡萄糖处理的病毒含量比其他三种培养工艺所获病毒量分别提高了55.8%,85.3%,73.3%.(结论)因此,在体外培养条件下,获得最大PCV2滴度的方法就是采取同步接种并用D-氨基葡萄糖处理的工艺.

关键词：猪圆环病毒2型优化培养

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多西环素人工抗原的合成与鉴定

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中国兽药杂志 2010年第1期44卷 30-34,55页

作者：乐涛严佩峰王喜亮郭延成沈亚安毕丁仁华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070 信阳农业高等专科学校动物科学系河南信阳464000

将多西环素（doxycycline，DOX）进行化学修饰引入羧基或氨基等活性基团，然后与牛血清白蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）偶联合成人工免疫原DOX—PABA—BSA、DOX—BSA和包被原DOX—PABA—OVA、DOX～OVA，并用紫外吸收（UV）、凝胶电泳（... 详细信息

将多西环素（doxycycline，DOX）进行化学修饰引入羧基或氨基等活性基团，然后与牛血清白蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）偶联合成人工免疫原DOX—PABA—BSA、DOX—BSA和包被原DOX—PABA—OVA、DOX～OVA，并用紫外吸收（UV）、凝胶电泳（SDS—PAGE）和EUSA方法对人工抗原进行鉴定；将合成的人工抗原DOX—PABA—BSA、DOX—BSA分别免疫BALB／C小鼠，用间接ELISA方法测定多抗（pAb）效价，用竞争ELISA方法鉴定其敏感性，用交叉反应试验鉴定其特异性。结果表明，二个免疫组6只小鼠血清抗体效价均在1：6400以上，DOXpAb对DOX的50％抑制浓度（IC50）在39．79～53．13μg/L，抗血清与四环素类药物交叉反应很低。本实验为建立多西环素ELISA残留免疫学检测方法和并制备多西环素试剂盒奠定了基础。

关键词：多西环素半抗原完全抗原合成鉴定

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有机磷水解酶的表达和纯化

有机磷水解酶的表达和纯化

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2010中国环境科学学会学术年会

作者：谭烽兰文升杨超江红陈雯莉乔传令中国科学院动物研究所农业虫害鼠害综合治理国家重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

从有机磷降解菌株YC-1中克隆出了有机磷水解酶基因mpd,成功构建了融合蛋白MPH的表达载体pETM,并构建了大肠杆菌基因工程菌,在1μM的IPTG,25℃诱导,能够高效表达MPH,经SDS-PAGE凝胶电泳验证为有机磷水解酶MPH。进行了酶活性的测定,表明... 详细信息

从有机磷降解菌株YC-1中克隆出了有机磷水解酶基因mpd,成功构建了融合蛋白MPH的表达载体pETM,并构建了大肠杆菌基因工程菌,在1μM的IPTG,25℃诱导,能够高效表达MPH,经SDS-PAGE凝胶电泳验证为有机磷水解酶MPH。进行了酶活性的测定,表明该蛋白具有较高活性。对MPH进行了分离纯化,SDS-PAGE电泳和酶活性的测定验证了MPH纯蛋白,比活力为5525.9/g蛋白。MPH纯蛋白广泛用于日常食用瓜果蔬菜的预处理中,并为生物传感器的应用奠定了基础。

关键词：有机磷水解酶表达纯化

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有机磷水解酶的表达和纯化

有机磷水解酶的表达和纯化

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中国环境科学学会2010年学术年会

作者：谭烽兰文升杨超江红陈雯莉乔传令中国科学院动物研究所农业虫害鼠害综合治理国家重点实验室北京 100101 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉 430070 中国科学院动物研究所农业虫害鼠害综合治理国家重点实验室北京 100101 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉 430070

从有机磷降解菌侏YC-1中克隆出了有机磷水解酶基因mpd，成功构建了融合蛋白MPH的表达载体pETM，并构建了大肠杆菌基因工程菌，在1μM的IPTG，25℃诱导，能够高效表达MPH，经SDS-PAGE凝胶电泳验证为有机磷水解酶MPH。进行了酶活性的测定... 详细信息

从有机磷降解菌侏YC-1中克隆出了有机磷水解酶基因mpd，成功构建了融合蛋白MPH的表达载体pETM，并构建了大肠杆菌基因工程菌，在1μM的IPTG，25℃诱导，能够高效表达MPH，经SDS-PAGE凝胶电泳验证为有机磷水解酶MPH。进行了酶活性的测定，表明该蛋白具有较高活性。对MPH进行了分离纯化，SDS-PAGE电泳和酶活性的测定验证了MPH纯蛋白，比活力为5525.9/g蛋白。MPH纯蛋白广泛用于日常食用瓜果蔬菜的预处理中，并为生物传感器的应用奠定了基础。

关键词：有机磷水解酶 SDS-PAGE电泳酶活性

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我国南方部分省市仔猪球虫病的流行病学调查

我国南方部分省市仔猪球虫病的流行病学调查

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第十一届全国规模化猪场主要疫病监控与净化专题研讨会

作者：张文杰周艳琴赵俊龙孙志勇唐万勇刘莹莹徐林海李法财张庆丽熊冰清宋淇淇农业微生物学国家重点实验室华中农业大学动物医学院拜耳(四川)动物保健有限公司

应用饱和食盐水溶液漂浮法,对我国南方部分省市10个地区30个猪场仔猪298份粪样进行球虫病的流行病学调查。结果发现,仔猪球虫阳性场占66.67％(20／30),猪场内阳性率096～60.00％,总阳性率15.77％。经初步鉴定,感染球虫的种类主要为混合... 详细信息

应用饱和食盐水溶液漂浮法,对我国南方部分省市10个地区30个猪场仔猪298份粪样进行球虫病的流行病学调查。结果发现,仔猪球虫阳性场占66.67％(20／30),猪场内阳性率096～60.00％,总阳性率15.77％。经初步鉴定,感染球虫的种类主要为混合感染,共有2个属6个种,为猪等孢球虫、蒂氏艾美耳球虫、猪艾美耳球虫、粗糙艾美耳球虫、平滑艾美耳球虫、极细艾美耳球虫。其感染率依次为48.93％、40.43％、19.15％、10.64％、29.79％、14.89％。

关键词：仔猪球虫病流行病学调查感染率

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