检索结果-内蒙古大学图书馆

华中农业大学学报 2008年第6期27卷 701-704页

作者：马立安江涛张忠明长江大学生命科学学院荆州434025 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 长江大学动物科学学院荆州434025

分别采用RT-PCR和直接荧光免疫方法分析Ran2 mRNA在拟南芥不同组织器官中的表达及Ran2的亚细胞定位。结果表明,Ran2基因在拟南芥根、茎、叶和花中均有表达;Ran2蛋白在细胞分裂间期主要定位于核膜周边,在后期定位于赤道板上和纺锤体上,... 详细信息

分别采用RT-PCR和直接荧光免疫方法分析Ran2 mRNA在拟南芥不同组织器官中的表达及Ran2的亚细胞定位。结果表明,Ran2基因在拟南芥根、茎、叶和花中均有表达;Ran2蛋白在细胞分裂间期主要定位于核膜周边,在后期定位于赤道板上和纺锤体上,末期又回到子细胞核膜周边。

关键词：拟南芥Ran2小GTP结合蛋白 FITC-anti-Ran2抗体亚细胞定位

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附属基因调节子在葡萄球菌生物被膜形成与感染中的作用

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中南大学学报（医学版） 2008年第11期33卷 1066-1070页

作者：唐俊妮周锐王红宁曾志光四川大学生命科学学院四川大学动物疾病防控生物工程研究中心成都610065 华中农业大学动物医学院华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

葡萄球菌生物被膜是生物材料相关感染病理学中最重要的毒力因子,生物被膜形成是由群集感应系统调节的。葡萄球菌附属基因调节子agr作为群集感应系统具有种属特异性,在金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌中控制着一系列毒素和毒力因子的表达,... 详细信息

葡萄球菌生物被膜是生物材料相关感染病理学中最重要的毒力因子,生物被膜形成是由群集感应系统调节的。葡萄球菌附属基因调节子agr作为群集感应系统具有种属特异性,在金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌中控制着一系列毒素和毒力因子的表达,而且与天然免疫系统互作。新的研究进展表明附属基因调节子agr在体内感染中的作用非常微妙。这方面的进展有助于发掘新型抗菌剂和消除与装置相关的葡萄球菌生物被膜感染问题。

关键词： agr 生物被膜感染葡萄球菌

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胸膜肺炎放线杆菌血清7型apzIV基因缺失突变株的构建和鉴定

胸膜肺炎放线杆菌血清7型apzIV基因缺失突变株的构建和鉴定

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：刘金林郭毅谭臣陈砚贝为成陈焕春华中农业大学农业微生物学国家重点实验室病原分室武汉湖北430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室病原分室武汉湖北430070华中农业大学动物医学院武汉湖北430070

apxIV是胸膜肺炎放线杆菌的一种RTX毒素,为探究其在胸膜肺炎杆菌致病过程中的作用,以血清7型APPHB04为亲本菌株,通过接合转移和负向筛选方法,构建了一株apxIV基因缺失突变株.通过PCR、序列分析、Southernblot分析及遗传稳定性分析等实... 详细信息

apxIV是胸膜肺炎放线杆菌的一种RTX毒素,为探究其在胸膜肺炎杆菌致病过程中的作用,以血清7型APPHB04为亲本菌株,通过接合转移和负向筛选方法,构建了一株apxIV基因缺失突变株.通过PCR、序列分析、Southernblot分析及遗传稳定性分析等实验证明,突变株构建是成功的.对突变株生物学特性进行初步研究,发现突变株与亲本菌株相比,体外生长速度未发生明显变化,对小鼠的致病力有所降低.结果表明,毒素ApxIV在胸膜肺炎放线杆菌致病过程起着一定作用.因此,突变株的成功构建及生物学特性研究为进一步阐明胸膜肺炎放线杆菌的致病性及开发更为安全、高效的基因工程疫苗奠定了坚实基础.

关键词：胸膜肺炎放线杆菌 apzIV基因基因突变株菌株鉴定生物学特性

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胸膜肺炎放线杆菌AapxⅠC/AapxⅡC双基因缺失株的构建及其生物学特性和免疫原性研究

胸膜肺炎放线杆菌AapxⅠC/AapxⅡC双基因缺失株的构建及其生物学...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：刘金林林荔雯贝为成陈焕春华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物病原分室华中农业大学动物医学院

通过接合转移和SacB负向筛选的方法,我们以本地分离的血清1型胸膜肺炎放线杆菌SLW01为亲本菌,缺失毒素ApxⅠ和ApxⅡ的激活因子apxⅠC和apxⅡC,构建不含标记的胸膜肺炎放线杆菌双基因缺失株SLW03(ΔapxⅠC/ΔapxⅡC)。研究表明,双缺失突... 详细信息

通过接合转移和SacB负向筛选的方法,我们以本地分离的血清1型胸膜肺炎放线杆菌SLW01为亲本菌,缺失毒素ApxⅠ和ApxⅡ的激活因子apxⅠC和apxⅡC,构建不含标记的胸膜肺炎放线杆菌双基因缺失株SLW03(ΔapxⅠC/ΔapxⅡC)。研究表明,双缺失突变株失去溶血活性,但能分泌具有免疫原性的ApxⅠA和AaxⅡA,突变株的生长能力未受影响,对Balb/C小鼠的毒力显著降低。以SLW03免疫Balb/C小鼠和仔猪,可产生较高滴度的抗体水平,并可对致死剂量的同源血清型1型菌株和异源血清型的7型或9型菌株攻击提供保护。从而发展了一个能提供有效的交叉保护效率的无外源基因的安全、廉价的胸膜肺炎放线杆菌弱毒活疫苗菌株来预防和控制猪传染性胸膜肺炎的发生与流行。

关键词：胸膜肺炎放线杆菌 apxⅠC qpxⅡC 突变株构建生物学特性免疫原性

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胸膜肺炎放线杆菌AapzIC/AapzIIC双基因缺失株的构建及其生物学特性和免疫原性研究

胸膜肺炎放线杆菌AapzIC/AapzIIC双基因缺失株的构建及其生物学特...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：刘金林林荔雯贝为成陈焕春华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物病原分室武汉湖北430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物病原分室武汉湖北430070华中农业大学动物医学院武汉湖北 430070

通过接合转移和SacB负向筛选的方法,我们以本地分离的血清1型胸膜肺炎放线杆菌SLW01为素本菌,缺失毒素ApxI和ApxII的激活因子apxIC和apxIIC,构建不含标记的胸膜肺炎放线杆菌双基因缺失株SLW03(△apxIC/AapxIIC).研究表明,双缺失突变株... 详细信息

通过接合转移和SacB负向筛选的方法,我们以本地分离的血清1型胸膜肺炎放线杆菌SLW01为素本菌,缺失毒素ApxI和ApxII的激活因子apxIC和apxIIC,构建不含标记的胸膜肺炎放线杆菌双基因缺失株SLW03(△apxIC/AapxIIC).研究表明,双缺失突变株失去溶血活性,但能分泌具有免疫原性的ApxIA和ApxIIA.突变株的生长能力未受影响,对Balb/C小鼠的毒力显著降低.以SLW03免疫Balb/C小鼠和仔猪,可产生较高滴度的抗体水平.并可对致死剂量的同源血清型1型菌株和异源血清型的7型或9型菌株攻击提供保护.从而发展了一个能提供有效的交叉保护效率的无外源基因的安全、廉价的胸膜肺炎放线杆菌弱毒活疫苗菌株来预防和控制猪传染性胸膜肺炎的发生与流行.

关键词：胸膜肺炎放线杆菌 apzIC基因 apzIIC基因基因突变生物学特性免疫原性

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胸膜肺炎放线杆菌血清7型apxⅣ基因缺失突变株的构建和鉴定

胸膜肺炎放线杆菌血清7型apxⅣ基因缺失突变株的构建和鉴定

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：刘金林郭毅谭臣陈砚贝为成陈焕春华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物病原分室华中农业大学动物医学院

apxⅣ是胸膜肺炎放线杆菌的一种RTX毒素,为探究其在胸膜肺炎杆菌致病过程中的作用,以血清7型APP HB04为亲本菌株,通过接合转移和负向筛选方法,构建了一株apxⅣ基因缺失突变株。通过PCR、序列分析、Southern blot分析及遗传稳定性分析等... 详细信息

apxⅣ是胸膜肺炎放线杆菌的一种RTX毒素,为探究其在胸膜肺炎杆菌致病过程中的作用,以血清7型APP HB04为亲本菌株,通过接合转移和负向筛选方法,构建了一株apxⅣ基因缺失突变株。通过PCR、序列分析、Southern blot分析及遗传稳定性分析等实验证明,突变株构建是成功的。对突变株生物学特性进行初步研究,发现突变株与亲本菌株相比,体外生长速度未发生明显变化,对小鼠的致病力有所降低。结果表明,毒素ApxⅣ在胸膜肺炎放线杆菌致病过程起着一定作用。因此,突变株的成功构建及生物学特性研究为进一步阐明胸膜肺炎放线杆菌的致病性及开发更为安全、高效的基因工程疫苗奠定了坚实基础。

关键词：胸膜肺炎放线杆菌 apsⅣ 突变株构建鉴定

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鸡传染性支气管炎病毒S1基因与猪IgG Fc基因在HeLa细胞中的融合表达

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生物技术通报 2008年第S1期24卷 276-281页

作者：张明富陈汉阳彭博佟铁俦陈焕春郭爱珍华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学湖北省预防兽医学重点实验室武汉430070

根据Genbank中发表的猪IgG Fc段基因及IBV S1基因序列,设计并合成引物。以猪肝组织总RNA为模扩增出猪IgG Fc基因,以含全长IBV M41 S基因的质粒为模板扩增出IBV S1基因,分别克隆至T载体。DNA测序表明,所获得的IBV S1基因大小为1.5 kb,IgG... 详细信息

根据Genbank中发表的猪IgG Fc段基因及IBV S1基因序列,设计并合成引物。以猪肝组织总RNA为模扩增出猪IgG Fc基因,以含全长IBV M41 S基因的质粒为模板扩增出IBV S1基因,分别克隆至T载体。DNA测序表明,所获得的IBV S1基因大小为1.5 kb,IgG Fc大小为1kb,序列正确。将IBV S1与IgG Fc基因串连,插入含有人组织型纤维蛋白溶酶原激活物分泌信号肽序列(tPA)真核表达载体pcDNA3.1-tPA上,在HeLa细胞上进行瞬时融合表达。经免疫荧光和斑点杂交检测,表达产物同时具有IBV S1蛋白和IgG Fc活性。

关键词：禽传染性支气管炎病毒 S1基因猪IgG Fc基因真核表达融合表达

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免疫胶体金试纸条检测肉鸡感染H9N2亚型禽流感NS1抗体消长规律的研究

免疫胶体金试纸条检测肉鸡感染H9N2亚型禽流感NS1抗体消长规律的...

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首届中国兽药大会暨中国畜牧兽医学会动物药品学分会2008年学术年会

作者：张文泽崔卫涛肖运才刘梅王喜亮胡思顺毕丁仁华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室，武汉 430070 华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室，武汉 430070

禽流感病毒非结构蛋白(AIV-NS1)抗体检测可作为禽流感野毒感染的诊断标签。在禽流感NS1抗体鉴别诊断试纸条研制成功的基础上，我们采用人工感染的方法，探讨了感染肉鸡体内NS1特异性抗体的消长规律。结果表明，肉鸡感染后第3d开始... 详细信息

禽流感病毒非结构蛋白(AIV-NS1)抗体检测可作为禽流感野毒感染的诊断标签。在禽流感NS1抗体鉴别诊断试纸条研制成功的基础上，我们采用人工感染的方法，探讨了感染肉鸡体内NS1特异性抗体的消长规律。结果表明，肉鸡感染后第3d开始可检测出NS1抗体，至11d阳性率达89％，然后快速下降，21d检出率下降至10％，26天后完全消失，NS1抗体阳性率高低与感染鸡发病及死亡率高低明显一致。而对照组和疫苗免疫组在整个试验过程中NS1抗体检测均呈阴性。感染组血凝抑制抗体出现早于疫苗免疫组，但二者效价持续上升的结果类似。通过肉鸡人工感染实验，我们首次揭示了禽流感感染后肉鸡体内NS1抗体消长情况，同时也证实本研究室研制的AIV-NS1抗体检测试纸条，不仅可以从患有呼吸道感染的病鸡中快速诊断出禽流感感染，而且也可以鉴别禽流感疫苗免疫与病毒感染的鸡群。

关键词：免疫层析试纸条 H9N2亚型禽流感病毒非结构蛋白肉鸡 NS1抗体鉴别诊断

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基于结核菌素与CFP10/ESAT6的牛IFN-γ检测法在牛结核病诊断中的比较研究

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中国奶牛 2008年第6期 12-14页

作者：陈颖钰邓铨涛郭爱珍晁彦杰匡有吉于清龙陈焕春华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学动物医学院预防兽医学省重点实验室武汉430070

本研究通过比较三种刺激物(牛结核菌素、禽结核菌素和牛型结核菌特异性抗原CFP10/ESAT6对结核菌素皮内变态反应阳性牛的IFN-γ刺激反应,探讨IFN-γ检测法在我国牛结核病诊断中的应用前景。无菌采集22头结核菌素皮内变态反应阳性牛的血液... 详细信息

本研究通过比较三种刺激物(牛结核菌素、禽结核菌素和牛型结核菌特异性抗原CFP10/ESAT6对结核菌素皮内变态反应阳性牛的IFN-γ刺激反应,探讨IFN-γ检测法在我国牛结核病诊断中的应用前景。无菌采集22头结核菌素皮内变态反应阳性牛的血液,肝素抗凝。每1mL全血与1mLRPMI1640完全培养基混合均匀,并加入0.1mL(20μg)PHA(阳性对照孔)、0.1mL(20μg PHA)CFP10/ESAT6融合蛋白、0.1mL(2000U)牛结核菌素(PPD/B)、0.1mL(2500U)禽结核菌素(PPD/A)或等量PBS(无刺激阴性对照),37℃培养过夜。次日用夹心ELISA法检测各刺激组0.1mL培养上清的IFN-γ,以OD630表示IFN-γ浓度。结果,特异性抗原CFP10/ESAT6刺激组与牛结核菌素(PPD/B)刺激组的IFN-γ反应具有良好的相关性,相关系数为0.84。但CFP10/ESAT6刺激组IFN-γ浓度与牛和禽PPD的比较反应(以两刺激组IFN-γ浓度差值表示)间无相关性,相关系数为-0.11。分析禽PPD组的IFN-γ反应,发现实验牛中有少数牛对禽PPD有反应。以OD630=0.17为阳性反应切割值,牛PPD检出阳性牛21头,CFP10/ESAT6检出20头,牛和禽PPD比较反应(以OD值差值表示)检出14头,禽PPD阳性反应3头。扣除禽PPD阳性反应牛后,牛和禽PPD比较反应与牛PPD刺激组的相关系数增至0.54。结果表明,牛PPD的IFN-γ释放反应检测灵敏度最高。当出现牛型结核菌与环境分枝杆菌混合感染时,应用牛和禽PPD比较反应检测牛结核的准确度低,混合感染牛被误判为结核阴性牛。而基于CFP10/ESAT6的IFN-γ释放反应不受环境分枝杆菌的影响,检测具有良好的特异性与敏感性。

关键词：牛结核 IFN—γ 牛结核菌素 CFP10 ESAT6 禽结核菌素

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弓形虫MIC3自杀性DNA疫苗的构建及免疫保护作用研究

弓形虫MIC3自杀性DNA疫苗的构建及免疫保护作用研究

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全国寄生虫学与热带医学学术研讨会

作者：方瑞赵俊龙周艳琴姚宝安华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学动物医学院

本研究的目的是构建一种弓形虫自杀性DNA疫苗并初步探讨该疫苗的免疫保护力。首先克隆了弓形虫微线体蛋白3(MIC3)的基因片段并将其插入基于甲病毒复制子的自杀性DNA疫苗载体"pSCA1"中,构建重组自杀性DNA质粒,使用限制性内切...

本研究的目的是构建一种弓形虫自杀性DNA疫苗并初步探讨该疫苗的免疫保护力。首先克隆了弓形虫微线体蛋白3(MIC3)的基因片段并将其插入基于甲病毒复制子的自杀性DNA疫苗载体"pSCA1"中,构建重组自杀性DNA质粒,使用限制性内切酶及序列测定筛选出正确的重组子,命名为"pSCA/MIC3"。然后将"pSCA/MIC3"共转染BHK-21细胞,间

关键词：

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