检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：刘金林林荔雯贝为成陈焕春华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物病原分室武汉湖北430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物病原分室武汉湖北430070华中农业大学动物医学院武汉湖北 430070

通过接合转移和SacB负向筛选的方法,我们以本地分离的血清1型胸膜肺炎放线杆菌SLW01为素本菌,缺失毒素ApxI和ApxII的激活因子apxIC和apxIIC,构建不含标记的胸膜肺炎放线杆菌双基因缺失株SLW03(△apxIC/AapxIIC).研究表明,双缺失突变株... 详细信息

通过接合转移和SacB负向筛选的方法,我们以本地分离的血清1型胸膜肺炎放线杆菌SLW01为素本菌,缺失毒素ApxI和ApxII的激活因子apxIC和apxIIC,构建不含标记的胸膜肺炎放线杆菌双基因缺失株SLW03(△apxIC/AapxIIC).研究表明,双缺失突变株失去溶血活性,但能分泌具有免疫原性的ApxIA和ApxIIA.突变株的生长能力未受影响,对Balb/C小鼠的毒力显著降低.以SLW03免疫Balb/C小鼠和仔猪,可产生较高滴度的抗体水平.并可对致死剂量的同源血清型1型菌株和异源血清型的7型或9型菌株攻击提供保护.从而发展了一个能提供有效的交叉保护效率的无外源基因的安全、廉价的胸膜肺炎放线杆菌弱毒活疫苗菌株来预防和控制猪传染性胸膜肺炎的发生与流行.

关键词：胸膜肺炎放线杆菌 apzIC基因 apzIIC基因基因突变生物学特性免疫原性

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胸膜肺炎放线杆菌AapxⅠC/AapxⅡC双基因缺失株的构建及其生物学特性和免疫原性研究

胸膜肺炎放线杆菌AapxⅠC/AapxⅡC双基因缺失株的构建及其生物学...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：刘金林林荔雯贝为成陈焕春华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物病原分室华中农业大学动物医学院

通过接合转移和SacB负向筛选的方法,我们以本地分离的血清1型胸膜肺炎放线杆菌SLW01为亲本菌,缺失毒素ApxⅠ和ApxⅡ的激活因子apxⅠC和apxⅡC,构建不含标记的胸膜肺炎放线杆菌双基因缺失株SLW03(ΔapxⅠC/ΔapxⅡC)。研究表明,双缺失突... 详细信息

通过接合转移和SacB负向筛选的方法,我们以本地分离的血清1型胸膜肺炎放线杆菌SLW01为亲本菌,缺失毒素ApxⅠ和ApxⅡ的激活因子apxⅠC和apxⅡC,构建不含标记的胸膜肺炎放线杆菌双基因缺失株SLW03(ΔapxⅠC/ΔapxⅡC)。研究表明,双缺失突变株失去溶血活性,但能分泌具有免疫原性的ApxⅠA和AaxⅡA,突变株的生长能力未受影响,对Balb/C小鼠的毒力显著降低。以SLW03免疫Balb/C小鼠和仔猪,可产生较高滴度的抗体水平,并可对致死剂量的同源血清型1型菌株和异源血清型的7型或9型菌株攻击提供保护。从而发展了一个能提供有效的交叉保护效率的无外源基因的安全、廉价的胸膜肺炎放线杆菌弱毒活疫苗菌株来预防和控制猪传染性胸膜肺炎的发生与流行。

关键词：胸膜肺炎放线杆菌 apxⅠC qpxⅡC 突变株构建生物学特性免疫原性

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仔猪吃初乳前后血清差异蛋白的鉴定和分析

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中国兽医学报 2019年第8期39卷 1577-1580,1590页

作者：徐守兴卢炳州刘华南王国庆吴斌张克山郑海学刘湘涛华中农业大学动物医学学院农业微生物学国家重点实验室预防兽医学湖北省重点实验室湖北武汉430070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

通过SDS-PAGE方法对仔猪吃初乳前后血清进行检测,找到差异蛋白后,利用LC-MS/MS技术对差异蛋白条带进行鉴定,并使用生物信息学手段对鉴定的蛋白进行GO和KEGG分析。结果显示,仔猪吃初乳前后有很明显的差异蛋白条带,共鉴定出338个蛋白,GO和... 详细信息

通过SDS-PAGE方法对仔猪吃初乳前后血清进行检测,找到差异蛋白后,利用LC-MS/MS技术对差异蛋白条带进行鉴定,并使用生物信息学手段对鉴定的蛋白进行GO和KEGG分析。结果显示,仔猪吃初乳前后有很明显的差异蛋白条带,共鉴定出338个蛋白,GO和KEGG分析结果表明,差异蛋白的功能主要和生长发育和免疫保护相关。这为进一步研究初乳调控仔猪生长发育和免疫调控奠定基础。

关键词：仔猪初乳血清差异蛋白鉴定分析

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胸膜肺炎放线杆菌血清7型apxⅣ基因缺失突变株的构建和鉴定

胸膜肺炎放线杆菌血清7型apxⅣ基因缺失突变株的构建和鉴定

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：刘金林郭毅谭臣陈砚贝为成陈焕春华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物病原分室华中农业大学动物医学院

apxⅣ是胸膜肺炎放线杆菌的一种RTX毒素,为探究其在胸膜肺炎杆菌致病过程中的作用,以血清7型APP HB04为亲本菌株,通过接合转移和负向筛选方法,构建了一株apxⅣ基因缺失突变株。通过PCR、序列分析、Southern blot分析及遗传稳定性分析等... 详细信息

apxⅣ是胸膜肺炎放线杆菌的一种RTX毒素,为探究其在胸膜肺炎杆菌致病过程中的作用,以血清7型APP HB04为亲本菌株,通过接合转移和负向筛选方法,构建了一株apxⅣ基因缺失突变株。通过PCR、序列分析、Southern blot分析及遗传稳定性分析等实验证明,突变株构建是成功的。对突变株生物学特性进行初步研究,发现突变株与亲本菌株相比,体外生长速度未发生明显变化,对小鼠的致病力有所降低。结果表明,毒素ApxⅣ在胸膜肺炎放线杆菌致病过程起着一定作用。因此,突变株的成功构建及生物学特性研究为进一步阐明胸膜肺炎放线杆菌的致病性及开发更为安全、高效的基因工程疫苗奠定了坚实基础。

关键词：胸膜肺炎放线杆菌 apsⅣ 突变株构建鉴定

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胸膜肺炎放线杆菌双组份ArcA基因缺失弱毒疫苗的初步研究

胸膜肺炎放线杆菌双组份ArcA基因缺失弱毒疫苗的初步研究

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第14届全国规模化猪场主要疫病监控与净化专题研讨会

作者：游武进贝为成华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物病原分室武汉430070 华中农业大学动物医学院动物传染病研究室武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物病原分室武汉430070

本研究在以本实验室承慧硕士构建的APP血清1型多基因缺失菌株CH04(APP-1,△apxIC/△apxⅡC/△apxⅣ-orf1/△cpxAR)为亲本菌基础上,通过同源重组技术,进一步缺失ArcA毒力因子,获得YWJ05(△apxIC/△apxⅡC/△apx Ⅳ-orf1/△cpxAR/△ arcA... 详细信息

本研究在以本实验室承慧硕士构建的APP血清1型多基因缺失菌株CH04(APP-1,△apxIC/△apxⅡC/△apxⅣ-orf1/△cpxAR)为亲本菌基础上,通过同源重组技术,进一步缺失ArcA毒力因子,获得YWJ05(△apxIC/△apxⅡC/△apx Ⅳ-orf1/△cpxAR/△ arcA)多基因缺失缺失疫苗菌株,研究其生物学特性及安全性和免疫效力,并再在临床上初步使用,评价其效果.以期获得在临床上安全、高效的弱毒疫苗.

关键词：养猪业胸膜肺炎放线杆菌基因缺失弱毒疫苗免疫效力

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猪胸膜肺炎放线杆菌flic蛋白二级结构与B细胞表位预测

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生物技术 2009年第4期19卷 13-15页

作者：李任峰田香勤何启盖赵坤姜金庆胡建和王三虎河南科技学院动物科学学院河南新乡453003 新乡医学院医学研究中心河南新乡453003 华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室动物病原分室湖北武汉430070

目的:预测和分析猪胸膜肺炎放线杆菌(Actionobacillus pleuropneumoniae,APP)鞭毛蛋白(flic)的二级结构和B细胞表位。方法:利用生物信息学方法对flic基因推导的氨基酸序列进行结构特征和B细胞表位预测分析。结果:flic蛋白为非稳定型脂蛋... 详细信息

目的:预测和分析猪胸膜肺炎放线杆菌(Actionobacillus pleuropneumoniae,APP)鞭毛蛋白(flic)的二级结构和B细胞表位。方法:利用生物信息学方法对flic基因推导的氨基酸序列进行结构特征和B细胞表位预测分析。结果:flic蛋白为非稳定型脂蛋白,含有2个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点(39-42 SirD,164-167 SvkD)和3个蛋白质激酶C磷酸化位点(39-41 SiR,161-163 TsR、164-166 SvK)。该蛋白无信号肽,在21Ala^38Ala处存在跨膜区的可能性最大。flic蛋白的二级结构主要由无规卷曲区域、α-螺旋和β-折叠组成,而形成较少的转角结构。该蛋白的B细胞表位可能位于55~61和152~158区段内或其附近区域。结论:预测结果将有助于确定flic蛋白的B细胞表位,为进一步研究flic基因功能及研制APP基因工程疫苗提供参考。

关键词：猪胸膜肺炎放线杆菌二级结构 B细胞抗原表位

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猪源支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及病原流行病学研究

猪源支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及病原流行病学研究

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会

作者：赵战勤裴洁吴斌张春杰李银聚何启盖程相朝陈焕春河南科技大学动物科技学院动物病原微生物学实验室华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室

目的:探讨2003～2006年间支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiscptica,Bb)在我国湖北等十余省市猪群中的流行病学分布和协同感染特性并对部分菌株进行生物学特性研究.方法和结果:采用病原菌的形态学观察,生化鉴定和PCR鉴定,从2,057... 详细信息

目的:探讨2003～2006年间支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiscptica,Bb)在我国湖北等十余省市猪群中的流行病学分布和协同感染特性并对部分菌株进行生物学特性研究.方法和结果:采用病原菌的形态学观察,生化鉴定和PCR鉴定,从2,057份有肺炎或萎缩性鼻炎症状猪的肺脏等病料组织中分离出190株Bb和不同数量的其它共感染菌,在我国湖北等十余省市的猪群中,不同省份Bb的总分离率介于7.3%～14.1%之间;不同年份Bb的总分离率介于7.3%～11.8%之间;2003～2006年间的Bb总分离率为9.2%;Bb的分离率与猪日龄有一定的关系.Bb最常见的共感染菌依次是链球菌(55.9%)、副猪嗜血杆菌(50.0%)、大肠杆菌(43.1%)、巴氏杆菌(25.5%)、绿脓杆菌(17.6%)和沙门氏菌(11.8%).在43份有典型萎缩性鼻炎症状猪的病料中,分离出22株Bb、7株产毒素巴氏杆菌和6株绿脓杆菌;在分离出产毒素巴氏杆菌的7份病料中均同时分离出了Bb,而其中6份又同时分离出了绿脓杆菌,对2003年分离的31株Bb进行药敏试验、红细胞凝集试验和乳鼠皮肤坏死试验.结果表明:各菌株对15种药物的耐药谱不同,但对卡那霉素、庆大霉素、多粘菌素B、环丙沙星和舒普深高度敏感;各菌株均可凝集猪和羊的红细胞且能不同程度导致乳鼠皮肤坏死.结论:在我国湖北等十余省市的猪群中,Bb与其它病原菌的共感染情况非常严重,且在萎缩性鼻炎的病猪中检出率最高.

关键词：支气管败血波氏杆菌流行病学协同感染毒力因子

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血清7型胸膜肺炎放线杆菌apxIIC-/apxIA+基因缺失重组菌株的构建与鉴定

血清7型胸膜肺炎放线杆菌apxIIC-/apxIA+基因缺失重组菌株的构建...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

作者：刘金林林荔雯贝为成陈焕春华中农业大学动物医学院动物传染病研究室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物病原分室

通过接合转移和SacB负向筛选的方法,我们构建了一株apxIIC缺失的血清7型胸膜肺炎放线杆菌重组菌株。首先构建重组转移质粒pEHA1。将pEHA1转化供体大肠杆菌β2155,并将其与野生型APP血清7型亲本菌混合培养5小时,然后涂到含霉素抗性的培... 详细信息

通过接合转移和SacB负向筛选的方法,我们构建了一株apxIIC缺失的血清7型胸膜肺炎放线杆菌重组菌株。首先构建重组转移质粒pEHA1。将pEHA1转化供体大肠杆菌β2155,并将其与野生型APP血清7型亲本菌混合培养5小时,然后涂到含霉素抗性的培养基上培养,挑取阳性克隆,接种到无抗性液体培养基,培养后涂于含有蔗糖的的培养基,培养一定时间后挑取蔗糖抗性的克隆,即可得到目的突变株。通过PCR、遗传稳定性、外毒素分泌、重组位点序列分析验证了重组菌构建成功。我们对重组菌生物学特性进行了初步研究,发现其增殖能力未受影响,对小鼠毒力显著降低。该突变株构建体系的建立为猪传染性胸膜肺炎减毒活疫苗的开发以及对胸膜肺炎放线杆菌特定基因的功能研究奠定了良好基础。

关键词：胸膜肺炎放线杆菌接合转移负向筛选重组菌株构建鉴定

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基于蛋白质组的猪链球菌研究进展

基于蛋白质组的猪链球菌研究进展

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中国微生物学会第三届全国农业微生物研究及产业化研讨会、第十二届全国杀虫微生物学术研讨会、湖北省暨武汉市微生物学会和新疆微生物学会2010年会

作者：张安定陈博李冉胡巧云魏子贡周明光金梅林华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物病原分室武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070

@@猪链球菌(Streptococcus suis，***)是当今危害养猪业的一种重要病原，是目前引起猪链球菌病的主要病原。在33种荚膜血清型中，即1-31、33和1/2型，猪链球菌2型是临床分离株中致病力最强，同时也是分离率最高的血清型。该型菌亦可导... 详细信息

@@猪链球菌(Streptococcus suis，***)是当今危害养猪业的一种重要病原，是目前引起猪链球菌病的主要病原。在33种荚膜血清型中，即1-31、33和1/2型，猪链球菌2型是临床分离株中致病力最强，同时也是分离率最高的血清型。该型菌亦可导致人的感染甚至死亡。1998年我国江苏和2005年四川爆发的人猪链球菌病更是引起了全世界对该病的重视，分别引起25人感染14人死亡和204人感染38人死亡。猪链球菌2型作为当前危害我国乃至世界养猪业的重要传染病和人畜共患病病原，开发新型有效的疫苗以及致病机制的阐明是控制该病鱼待解决的关键问题之一。同时新毒力(相关)因子及毒力调控基因的发掘以及功能研究是目前猪链球菌致病机理研究的关键。虽然一些新的毒力相关因子相继被鉴定，但发掘新的毒力相关因子并阐明其在致病过程中发挥的作用仍是当前致病机制的研究的重点。

关键词：蛋白质组猪链球菌致病机制

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金黄色葡萄球菌毒力调控因子及其结构与功能

金黄色葡萄球菌毒力调控因子及其结构与功能

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第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会

作者：唐俊妮周锐史贤明陈焕春上海交通大学农业与生物学院食品安全与功能中心华中农业大学微生物学国家重点实验室动物病原分室

前言金黄色葡萄球菌广泛存在于自然界,是极为重要的人畜共患病病原体。金黄色葡萄球菌为条件致病菌,常寄居于皮肤、粘膜上,当动物体的抵抗力下降或皮肤粘膜破损时,病菌便可乘虚而入,引起畜禽各种化脓性疾病,如鸡的化脓性关节炎、牛及羊...

前言金黄色葡萄球菌广泛存在于自然界,是极为重要的人畜共患病病原体。金黄色葡萄球菌为条件致病菌,常寄居于皮肤、粘膜上,当动物体的抵抗力下降或皮肤粘膜破损时,病菌便可乘虚而入,引起畜禽各种化脓性疾病,如鸡的化脓性关节炎、牛及羊的急性或慢性乳房炎、猪的流产、皮炎,马属动物的创伤感染、脓肿、蜂窝织炎等,给畜牧业造成了巨大的经济损失。调查结果显示,金黄色葡萄球菌是污染牛乳的重要致病菌,其污染率同奶牛乳房炎患病率有极为密切的关系。已有研究报道:奶牛中临床型乳房炎发病率为5.33%,隐性乳房炎的阳眭率为59.33%,而乳房炎中88%-98%是由金黄色葡萄球菌、链球菌和大肠杆菌所引

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