检索结果-内蒙古大学图书馆

MicroRNA-155在结核分支杆菌与巨噬细胞互作中调控作用的研究进展

动物医学进展 2019年第7期40卷 92-96页

作者：肖瑶竺婷婷刘晗朱一帆熊学凯郭爱珍陈颖钰华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 湖北省兽医流行病学国际科技合作基地湖北武汉430070

microRNAs是广泛存在于真核生物中的小分子非编码RNA,在转录后水平调节多种生物进程,包括细胞分化和发育、免疫反应、凋亡等。microRNA-155是一个多功能的microRNA,研究发现microRNA-155在结核分支杆菌与巨噬细胞互作中发挥着重要的调... 详细信息

microRNAs是广泛存在于真核生物中的小分子非编码RNA,在转录后水平调节多种生物进程,包括细胞分化和发育、免疫反应、凋亡等。microRNA-155是一个多功能的microRNA,研究发现microRNA-155在结核分支杆菌与巨噬细胞互作中发挥着重要的调控作用,巨噬细胞是结核分支杆菌在体内的主要宿主细胞,结核分支杆菌与巨噬细胞互作的结果与结核病的发展密切相关。论文对结核分支杆菌与巨噬细胞互作中microRNA-155调控细胞自噬、细胞凋亡、细胞杀菌能力等作用的研究进展进行综述,以期为结核病的诊断和治疗提供新的思路。

关键词： microRNA-155 结核分支杆菌巨噬细胞

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4株猪流行性腹泻病毒的HA和HI试验

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中国动物检疫 2019年第9期36卷 78-82页

作者：郭恒科谭鑫库旭钢范盛先何启盖孟宪荣华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室

为观察猪流行性腹泻病毒(PDEV)的血凝特性,进而为建立PEDVHA和HI试验,评估疫苗免疫抗体水平奠定基础,将CV777、DR13、YN13和YN144共4株PEDV毒株,在37℃下,分别用0、5、10、50、100μg/mL胰蛋白酶处理30min,然后用鸡、兔和猪红细胞进行血... 详细信息

为观察猪流行性腹泻病毒(PDEV)的血凝特性,进而为建立PEDVHA和HI试验,评估疫苗免疫抗体水平奠定基础,将CV777、DR13、YN13和YN144共4株PEDV毒株,在37℃下,分别用0、5、10、50、100μg/mL胰蛋白酶处理30min,然后用鸡、兔和猪红细胞进行血凝(HA)试验;用已经鉴定为PEDV抗体阳性的血清和乳清分别进行血凝抑制(HI)试验。结果显示:4株PEDV毒株只与兔红细胞发生凝集反应;CV777、DR13毒株的HA现象需要用5μg/mL的胰蛋白酶进行预处理,但是YN13和YN144毒株的HA现象不需要胰蛋白酶作用;该凝集现象能够被PEDV抗体特异性抑制。结果表明,PEDV能够凝集兔的红细胞,不能凝集鸡和猪的红细胞,因而可以用兔红细胞建立PEDV的HA和HI试验方法。

关键词：猪流行性腹泻病毒红细胞血凝试验血凝抑制试验红细胞醛化特异性

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应用基于重组慢病毒的CRISPR/Cas9技术构建基因突变的鸡DF1细胞

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华中农业大学学报 2019年第3期38卷 83-88页

作者：靳泽华谢梦利易辰阳黄英付磊王晓萍张安定华中农业大学农业微生物学国家重点实验室/动物医学院/湖北省预防兽医学重点实验室/生猪健康养殖协同创新中心/农业农村部兽用诊断制剂创制重点实验室/科技部动物疫病联合研究中心武汉430070

为证实基于慢病毒的CRISPR/Cas9基因编辑技术可用于鸡基因组编辑,以鸡的mavs基因为靶基因,通过设计sgRNA,构建表达靶向mavs基因sgRNA的重组慢病毒,并将其感染DF1-Cas9细胞,通过T7E1酶切试验以及mavs基因的靶向序列测定,分析该方法是否... 详细信息

为证实基于慢病毒的CRISPR/Cas9基因编辑技术可用于鸡基因组编辑,以鸡的mavs基因为靶基因,通过设计sgRNA,构建表达靶向mavs基因sgRNA的重组慢病毒,并将其感染DF1-Cas9细胞,通过T7E1酶切试验以及mavs基因的靶向序列测定,分析该方法是否可以用于鸡细胞的基因编辑。扩增sgRNA靶向序列1 220 bp片段,经T7E1酶切琼脂糖凝胶分析可见约300 bp和900 bp大小的条带,表明感染sgRNA慢病毒的细胞mavs产生了突变。序列测定结果表明sgRNA靶向序列发生了多个碱基缺失的突变。以上结果表明基于慢病毒系统的CRISPR/Cas9技术可对鸡基因组进行编辑。

关键词： CRISPR/Cas9 慢病毒鸡DF1细胞基因编辑

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转录组测序技术在猪繁殖与呼吸综合征病毒研究中的应用

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中国畜牧兽医 2019年第1期46卷 37-44页

作者：梁婉周丹娜彭忠杨克礼段正赢郭锐刘威吴斌陈文杰孟丽田永祥湖北省农业科学院畜牧兽医研究所农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室武汉430064 华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070

猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)能导致母猪繁殖障碍及仔猪呼吸困难等症状,严重威胁全球养猪业的健康发展。目前,PRRSV的致病机制及其与宿主的互作机理并不完全清楚。近年来,随着... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)能导致母猪繁殖障碍及仔猪呼吸困难等症状,严重威胁全球养猪业的健康发展。目前,PRRSV的致病机制及其与宿主的互作机理并不完全清楚。近年来,随着高通量测序技术的快速发展,转录组测序技术已被广泛应用于PRRSV的研究中,为深入解析PRRSV的致病机理及其与宿主的互作机制提供了一种全新的研究工具。作者从感染应答、蛋白功能、毒株、疫苗、抗病品种5个方面对近年来转录组测序技术在PRRSV研究中的应用进行了综述分析,对其筛选的差异表达基因(DEGs)和通路进行总结,以期为未来PRRSV转录组学研究提供参考。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 转录组测序差异表达基因通路

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我国猪群中多杀性巴氏杆菌的基因型分析

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畜牧兽医学报 2019年第5期50卷 1064-1072页

作者：彭忠梁婉艾伟诚王斐华琳汤细彪陈焕春吴斌华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室生猪健康养殖协同创新中心武汉430070 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室武汉430070

本研究旨在了解我国猪群中流行的多杀性巴氏杆菌(Pm)的主要基因型。利用荚膜基因分型、脂多糖(LPS)基因分型、多位点序列分型(MLST)对2013年12月—2017年12月4年间来源于我国各地区规模化猪场患有疑似呼吸系统疾病的病死猪肺、鼻拭子、... 详细信息

本研究旨在了解我国猪群中流行的多杀性巴氏杆菌(Pm)的主要基因型。利用荚膜基因分型、脂多糖(LPS)基因分型、多位点序列分型(MLST)对2013年12月—2017年12月4年间来源于我国各地区规模化猪场患有疑似呼吸系统疾病的病死猪肺、鼻拭子、气管、肝等样品中分离鉴定的Pm进行基因型分析,并对23种主要毒力基因进行检测。结果表明,当前在我国猪群中流行的Pm的荚膜基因型为A(48.85%)、D(42.75%)、F(2.67%),优势基因型为A和D;LPS基因型为L3(25.00%)和L6(75.00%)型,优势基因型为L6;MLST基因型为ST3(21.25%)、ST10(27.50%)、ST11(42.50%)、ST12(2.50%)、ST16(2.50%)、ST74(1.25%)及ST75(2.50%),优势基因型为ST3、ST10和ST11。如果将荚膜基因型、LPS基因型和MLST基因型组合起来看,当前在我国猪群中流行的Pm的主要基因型为荚膜:脂多糖:MLST基因型A:L3:ST3(20.00%)、A:L6:ST10(26.25%)及D:L6:ST11(42.50%)。毒力基因检测的结果发现部分毒力基因的分布表现出一定的"基因型偏好性"。结果提示,D:L6:ST11是我国猪群中流行的多杀性巴氏杆菌的主要基因型,可能与我国猪群中由多杀性巴氏杆菌导致的呼吸道疾病密切相关。

关键词：猪多杀性巴氏杆菌荚膜基因型脂多糖基因型 MLST基因型毒力基因

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6-溴-靛玉红-3'-肟抑制脂多糖诱导的小鼠乳腺上皮细胞凋亡

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畜牧兽医学报 2018年第12期49卷 2753-2761页

作者：刘畅唐鑫张文劲赵春阳郭爱珍胡长敏华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

研究6-溴-靛玉红-3'-肟(BIO)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠乳腺上皮细胞(mouse mammary epithelial cell,MMEC)凋亡的作用及机制。收集空白对照组、DMSO组、BIO单独处理组及不同浓度BIO(5、25、50nmol·L^(-1))+LPS共同处理组细胞,分别用流式细胞术检测凋亡率,利用qRT-PCR检测Bak、Bax、Bcl-2、Bcl-xl、Caspase-3和Caspase-8 mRNA的变化,Western blot检测Bcl-2、Caspase-3和Caspase-8蛋白水平的变化。结果显示:BIO能够降低LPS诱导的MMECs的凋亡率,抑制凋亡基因Bak和Bax及凋亡通路蛋白Caspase-3和Caspase-8活性(P <0. 001),促进抑凋亡基因Bcl-2及Bcl-xl的活性。BIO通过调节Bax、Bak、Bcl-2、Bcl-xl、Caspase-3和Caspase-8活性抑制LPS诱导的鼠乳腺上皮细胞凋亡。

关键词： BIO LPS 乳腺炎凋亡凋亡因子

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猪圆环病毒3型TaqMan荧光定量PCR方法的建立和初步应用

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畜牧兽医学报 2018年第6期49卷 1320-1326页

作者：李畅库旭钢王俊伟李静朱玲何启盖华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070

为了灵敏而便捷的检测猪圆环病毒3型(PCV3),根据PCV3ORF2基因组保守序列设计合成4对引物,先使用荧光染料(SYBR)定量PCR法验证其能否有效扩增目的片段,并根据结果和引物对所扩增序列的交集进一步设计TaqMan探针,通过优化反应条件和反应... 详细信息

为了灵敏而便捷的检测猪圆环病毒3型(PCV3),根据PCV3ORF2基因组保守序列设计合成4对引物,先使用荧光染料(SYBR)定量PCR法验证其能否有效扩增目的片段,并根据结果和引物对所扩增序列的交集进一步设计TaqMan探针,通过优化反应条件和反应体系建立快速检测PCV3的实时荧光定量PCR检测方法。结果显示,SYBR染料法和TaqMan探针法均能有效地扩增PCV3标准质粒以及其他阳性样品,并且对1.29×10~2~1.29×10~9拷贝·μL^(-1)的PCV3标准质粒(Pmd18-t-Cap)呈现良好的线性关系,该方法的检测灵敏度为1.29×10~2拷贝·μL^(-1),比常规PCR的灵敏度高100倍,该方法与猪圆环病毒2型、猪轮状病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等病毒基因以及猪链球菌、猪肺炎支原体等细菌基因均无交叉反应,具有良好的特异性;批次内重复和批次间重复试验结果显示变异系数(CV)均小于1.5%,呈良好的可重复性。用该方法对2016年至2017年间收集的124份来自湖北省等地的猪病料DNA样品进行检测,结果显示本地区PCV3阳性率为8.06%(10/124),PCV2和PCV3共感染率为8.06%(10/124)。上述结果表明,本研究建立TaqMan荧光定量PCR能够灵敏特异的检测圆环病毒3型,为圆环病毒3型的临床检测提供有效手段。

关键词：圆环病毒3型 SYBR荧光定量PCR TaqMan荧光定量PCR 检测

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藤黄酸的药理作用机理研究

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中兽医医药杂志 2019年第5期38卷 33-36页

作者：唐鑫彭永崇张文皓张文劲刘畅郭爱珍胡长敏华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

本文就近年来藤黄酸及其主要衍生物的抗肿瘤、抑炎症、抗细菌、抗病毒及神经保护作用机制和临床应用研究进行综述,为深入研究藤黄酸及其衍生物的功能提供依据,也为其更广泛的临床应用提供相关理论支撑。

关键词：藤黄酸机理抗肿瘤抑炎研究进展

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牛传染性鼻气管炎基因工程疫苗研究进展

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中国预防兽医学报 2019年第4期41卷 426-431页

作者：杨姣陈曦陈颖钰郭爱珍华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 湖北省兽医流行病学国际科技合作基地湖北武汉430070

牛传染性鼻气管炎(Infectious bovine rhinotracheitis,IBR)是由IBR病毒(IBRV)又称牛疱疹病毒Ⅰ型(Bovine herpesvirus type 1,BoHV-1)引起的一种急性、热性、接触性传染病,又称“红鼻病”或“坏死性鼻炎”,是牛呼吸道疾病综合征(Bovine... 详细信息

牛传染性鼻气管炎(Infectious bovine rhinotracheitis,IBR)是由IBR病毒(IBRV)又称牛疱疹病毒Ⅰ型(Bovine herpesvirus type 1,BoHV-1)引起的一种急性、热性、接触性传染病,又称“红鼻病”或“坏死性鼻炎”,是牛呼吸道疾病综合征(Bovine respiratory disease complex,BRDC)和“运输热”(Shipping fever)的重要病原之一。IBR最早见于上世纪50年代美国科罗拉多州,由Madin等人从患病牛中分离得到[1]。我国最早于1980年从新西兰进口的一批牛中分离到该病毒[2],随后发现此病的流行呈上升趋势,不同品种的牛均有感染,血清阳性率可高达70%以上[3]。

关键词：牛传染性鼻气管炎基因工程疫苗牛疱疹病毒Ⅰ型呼吸道疾病综合征 complex 接触性传染病科罗拉多州 IBR

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MicroRNA-107负向调控结核分枝杆菌牛源人型分离株介导的巨噬细胞炎症反应

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中国奶牛 2019年第11期 9-14页

作者：朱一帆陈颖钰刘晗索朗斯珠牛家强郭爱珍西藏农牧学院动物科学学院林芝860000 华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

MicroRNA(miRNA)是一类长度仅为19~22个核苷酸的单链非编码小分子RNA,在多种疾病中发挥着重要作用。本实验室前期从一结核牛体内成功分离到一株结核分枝杆菌1458株,并基于该菌建立了体外感染模型。将1458株感染巨噬细胞系THP-1后进行RNA... 详细信息

MicroRNA(miRNA)是一类长度仅为19~22个核苷酸的单链非编码小分子RNA,在多种疾病中发挥着重要作用。本实验室前期从一结核牛体内成功分离到一株结核分枝杆菌1458株,并基于该菌建立了体外感染模型。将1458株感染巨噬细胞系THP-1后进行RNAseq分析,发现miR-107呈现显著下调表达。为确定miR-107在结核分枝杆菌(***)1458株与巨噬细胞互作中的功能及其相关机制,本研究利用*** 1458株体外感染THP-1细胞,检测了miR-107感染*** 1458株及其热灭活状态下的动态变化,及感染相关信号通路(NF-Κb、P38、JNK和PI3K)调控途径。进一步确定了miR-107所诱发的IL-1β、IL-10、TNF-α和IL-6表达水平及*** 1458株对THP-1细胞侵袭能力的影响。结果显示,*** 1458株感染可显著下调THP-1细胞中miR-107的表达(P<0.001);并受到PI3K信号通路的调控;此外miR-107还能够显著抑制*** 1458株感染的THP-1细胞炎性因子IL-1β(P<0.05)、IL-10(P<0.05)、TNF-α(P<0.05)和IL-6(P<0.01)mRNA水平的表达,并显著促进*** 1458株对THP-1细胞的入侵(P<0.001)。结论:*** 1458株感染可显著下调THP-1细胞中miR-107的表达,依赖于PI3K信号通路,miR-107下调表达能够促进*** 1458株感染诱导的炎性细胞因子表达,抑制*** 1458株的入侵。本研究揭示了巨噬细胞抵抗***感染的新型防御机制。

关键词：结核分枝杆菌巨噬细胞 MicroRNA-107 炎性因子侵袭

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