检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：国师榜徐守兴孙颖吴斌华中农业大学:动物医学院生猪健康养殖协同创新中心农业微生物学国家重点实验室

本研究将本实验室自2014年2017年收集的疑似CSFV感染的临床病料及血清进行了RT-PCR/PCR检测,共检测到49份CSFV阳性,同时对49个CSFV阳性病料进行了 PRRSV、PRV、PCV2和PPV病原学检测,检测发现49份猪瘟阳性样本中,CSFV和PRV两种病毒混合感... 详细信息

本研究将本实验室自2014年2017年收集的疑似CSFV感染的临床病料及血清进行了RT-PCR/PCR检测,共检测到49份CSFV阳性,同时对49个CSFV阳性病料进行了 PRRSV、PRV、PCV2和PPV病原学检测,检测发现49份猪瘟阳性样本中,CSFV和PRV两种病毒混合感染8份,CSFV和PRRSV两种病毒混合感染21份,CSFV和PCV2两种病毒混合感染23份,CSFV和PPV两种病毒混合感染1份;CSFV和PRRSV、PCV2三种病毒混合感染5份,CSFV和PRV、PCV2三种病毒混合感染1份;CSFV和PRRSV、PRV、PCV2四种病毒混合感染2份。上述结果表明,我国猪瘟病毒与其他几种病毒性疾病混合感染严重,推测可能由于猪瘟病毒感染后造成机体免疫力低下,从而造成其他疾病的继发感染或混合感染。

关键词：猪瘟猪病毒性传染病混合感染

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IFN-γ-ELISpot方法用于评价猪伪狂犬病疫苗免疫效果

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畜牧兽医学报 2017年第10期48卷 1939-1948页

作者：谭鑫库旭钢于学祥郭恒科何东贤范盛先何启盖华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070 生猪健康养殖协同创新中心武汉430070

鉴于常用的抗体检测方法不能完整反映免疫猪获得针对猪伪狂犬病毒的保护力,有必要建立猪伪狂犬病病毒(PRV)特异性IFN-γ的酶联免疫斑点检测(ELISpot)方法,并评估伪狂犬病疫苗细胞免疫的免疫效果。依照ELISpot基本操作流程,摸索PRV作为... 详细信息

鉴于常用的抗体检测方法不能完整反映免疫猪获得针对猪伪狂犬病毒的保护力,有必要建立猪伪狂犬病病毒(PRV)特异性IFN-γ的酶联免疫斑点检测(ELISpot)方法,并评估伪狂犬病疫苗细胞免疫的免疫效果。依照ELISpot基本操作流程,摸索PRV作为刺激原的最适浓度、外周血单个核细胞(PBMC)密度和作用时间以建立并优化该方法。将20头gB抗体检测阴性猪,随机分为单独弱毒疫苗免疫组、单独灭活疫苗免疫组、弱毒疫苗-灭活疫苗联合组及对照组,免疫后攻毒。利用所建方法,结合gB-ELISA、中和试验及攻毒保护试验,评价上述三种免疫程序的效果。试验结果表明:IFN-γ-ELISpot最佳条件为刺激原浓度2μg·孔^(-1)、外周血单核细胞(PBMC)浓度106·孔^(-1),培养时间36h。一免弱毒疫苗二免灭活疫苗组二免后2周,试验猪中和抗体效价可达1∶14.48,ELISpot斑点数可达(151.8±26.61)个·孔^(-1),且该免疫程序下,试验猪攻毒后体温、鼻拭子排毒及临床症状均低于其余试验组,攻毒8d后仅表现呼吸道症状;单独灭活疫苗免疫组二免后2周,试验猪的中和抗体效价可达1∶32.36,而ELISpot斑点数仅为(40.4±9.07)个·孔^(-1);单独弱毒疫苗免疫组二免后2周,试验猪的中和抗体效价仅为1∶1.36,但ELISpot斑点数可达(189.6±27.36)个·孔^(-1)。综合分析攻毒试验结果和ELISpot斑点数之间的相关性,本试验所建立的IFN-γ-ELISpot可用于猪伪狂犬病疫苗的细胞免疫评估,为免疫程序的评价和选择提供有效手段。

关键词：猪伪狂犬病 IFN-γ-ELISpot 细胞免疫疫苗免疫程序

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红斑丹毒丝菌SpaA蛋白的免疫效果评价

红斑丹毒丝菌SpaA蛋白的免疫效果评价

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第二届狮子山养猪高峰论坛暨第十八届全国规模化猪场主要疫病监控与净化专题研讨会

作者：吴超李敬涛朱伟峰王雅金梅林武汉科前生物股份有限公司华中农业大学动物医学院武汉科前生物股份有限公司华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室农业部兽用诊断制剂创制重点实验室武汉430070

使用本室制备的红斑丹毒丝菌重组蛋白SpaA与201佐剂乳化，制备猪丹毒亚单位疫苗，用制备的疫苗免疫仔猪，对疫苗进行仔猪免疫的安全性检测，并通过对免疫后仔猪的血清抗体测定及攻毒保护试验来评价疫苗的免疫效果。结果表明：经猪丹毒... 详细信息

使用本室制备的红斑丹毒丝菌重组蛋白SpaA与201佐剂乳化，制备猪丹毒亚单位疫苗，用制备的疫苗免疫仔猪，对疫苗进行仔猪免疫的安全性检测，并通过对免疫后仔猪的血清抗体测定及攻毒保护试验来评价疫苗的免疫效果。结果表明：经猪丹毒亚单位疫苗(SpaA)两次免疫后，仔猪的血清IgG抗体能上升到较高水平，没有副反应和应激产生，安全性高，保护率为100％。说明SpaA是制备猪丹毒亚单位疫苗理想的候选蛋白。

关键词：红斑丹毒丝菌亚单位疫苗 SpaA 抗体攻毒保护

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PCR和western-blot检测SpaA蛋白在红斑丹毒丝菌中的分布情况

PCR和western-blot检测SpaA蛋白在红斑丹毒丝菌中的分布情况

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第二届狮子山养猪高峰论坛暨第十八届全国规模化猪场主要疫病监控与净化专题研讨会

作者：吴超康超孙小美朱伟峰李敬涛金梅林武汉科前生物股份有限公司华中农业大学动物医学院武汉科前生物股份有限公司华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室农业部兽用诊断制剂创制重点实验室武汉430070

红斑丹毒丝菌血清型众多，我国主要是1a型和2型.SpaA蛋白是红斑丹毒丝菌重要的免疫原性蛋白，是猪丹毒亚单位疫苗的重要候选蛋白.对红斑丹毒丝菌的疫苗候选蛋白SpaA的编码基因在1a型、2型标准菌株和大量临床分离菌株中的分布进行检测.采... 详细信息

红斑丹毒丝菌血清型众多，我国主要是1a型和2型.SpaA蛋白是红斑丹毒丝菌重要的免疫原性蛋白，是猪丹毒亚单位疫苗的重要候选蛋白.对红斑丹毒丝菌的疫苗候选蛋白SpaA的编码基因在1a型、2型标准菌株和大量临床分离菌株中的分布进行检测.采用western-blot方法检测疫苗候选蛋白SpaA在1a型、2型标准菌株血清和大量临床分离红斑丹毒丝菌阳性血清中的反应.PCR结果表明：SpaA编码基因在1a型、2型标准菌株和大量临床分离菌株中都存在;western-blot结果表明：SpaA蛋白与1a型、2型标准菌株血清和大量临床分离红斑丹毒丝菌阳性血清都有反应.这表明：SpaA广泛存在于我国流行的主要血清型和当前流行菌株中，做为疫苗候选蛋白达到了制备亚单位疫苗的要求.

关键词：红斑丹毒丝菌 SpaA疫苗候选蛋白 PCR western-blot

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CRISPR/Cas9技术在构建弓形虫微线体蛋白MIC3敲除株上的应用

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中国兽医学报 2017年第9期37卷 1720-1725页

作者：王一凡张伟超吴颢李龙娇周艳琴方瑞申邦赵俊龙农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种可以感染几乎所有温血动物的专性细胞内寄生原虫。该寄生虫入侵和感染宿主细胞需要其分泌细胞器所分泌的蛋白,其中包括微线体蛋白。近年来,CRISPR/Cas9技术已经成为分子生物学和功能基因组学研究的... 详细信息

刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种可以感染几乎所有温血动物的专性细胞内寄生原虫。该寄生虫入侵和感染宿主细胞需要其分泌细胞器所分泌的蛋白,其中包括微线体蛋白。近年来,CRISPR/Cas9技术已经成为分子生物学和功能基因组学研究的重要工具,本研究利用CRISPR/Cas9技术对弓形虫Ⅰ型虫株RH和Ⅱ型虫株PRU的微线体蛋白mic3基因进行敲除。通过单克隆的筛选和鉴定,成功获得了2种虫株的mic3敲除株。之后对RH敲除株进行研究,发现mic3缺失可以轻微提高虫体在体外培养时的生长速度以及对小鼠的毒力。本研究不仅说明了CRISPR/Cas9技术可以应用到弓形虫的基因敲除和改造上,并且不受弓形虫虫株的限制,同时也为进一步研究mic3在虫体中的功能奠定基础。

关键词：弓形虫 CRISPR/Cas9 基因敲除 mic3基因

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红斑丹毒丝菌SpaA蛋白ELISA抗体检测方法的建立

红斑丹毒丝菌SpaA蛋白ELISA抗体检测方法的建立

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第二届狮子山养猪高峰论坛暨第十八届全国规模化猪场主要疫病监控与净化专题研讨会

作者：吴超孙小美康超李敬涛朱伟峰金梅林武汉科前生物股份有限公司华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室农业部兽用诊断制剂创制重点实验室武汉430070

红斑丹毒丝菌感染猪导致猪丹毒，主要引起猪的败血症、皮炎、心内膜炎和多发性关节炎.2010年以来，我国多个省份均出现了猪丹毒的大范围流行，给猪场造成了巨大的经济损失.SpaA蛋白是红斑丹毒丝菌重要的细胞壁蛋白，具有很好的免疫原性... 详细信息

红斑丹毒丝菌感染猪导致猪丹毒，主要引起猪的败血症、皮炎、心内膜炎和多发性关节炎.2010年以来，我国多个省份均出现了猪丹毒的大范围流行，给猪场造成了巨大的经济损失.SpaA蛋白是红斑丹毒丝菌重要的细胞壁蛋白，具有很好的免疫原性，用SpaA蛋白制备亚单位疫苗可使猪只有效抵御红斑丹毒丝菌感染，本研究以SpaA蛋白作为包被抗原，建立检测SpaA蛋白抗体的ELISA方法，以检测猪丹毒SpaA蛋白亚单位疫苗中的SpaA蛋白抗体.

关键词：红斑丹毒丝菌 SpaA蛋白 ELISA 抗体

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益生菌在绿色健康养殖业中的应用

益生菌在绿色健康养殖业中的应用

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中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第五届第十三次全国学术研讨会

作者：胡进康超金梅林华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室农业部兽用诊断制剂创制重点实验室生猪健康养殖协同创新中心

擅要,随着养殖业大规模、集约化的快速发展,人类期望得到更加安全、高效的饲料添加剂来促进动物的生长和提高饲料利用率,同时能改善肉、牛奶和鸡蛋的品质,并能减少养殖业对生态环境的污染。随着抗生素的禁用,益生菌作为饲用抗生素的替... 详细信息

擅要,随着养殖业大规模、集约化的快速发展,人类期望得到更加安全、高效的饲料添加剂来促进动物的生长和提高饲料利用率,同时能改善肉、牛奶和鸡蛋的品质,并能减少养殖业对生态环境的污染。随着抗生素的禁用,益生菌作为饲用抗生素的替代品备受关注,它的功能主要是改善动物肠道微生态平衡,促进宿主健康进而抵抗对动物和人类构成威胁的病原菌。本文主要概述了益生菌在养殖业中的应用和对动物健康的影响。

关键词：益生菌机体免疫健康养殖

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猪丹毒流行菌株耐药特性研究

猪丹毒流行菌株耐药特性研究

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第二届狮子山养猪高峰论坛暨第十八届全国规模化猪场主要疫病监控与净化专题研讨会

作者：胡进王雅康超金梅林华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室农业部兽用诊断制剂创制重点实验室生猪健康养殖协同创新中心武汉430070

本研究通过分析临床分离的红斑丹毒丝菌耐药谱及对其喹诺酮耐药分子特征进行研究,发现红斑丹毒丝菌对卡那霉素、链霉素、阿米卡星、多粘菌素B和万古霉素的耐药率为100％,庆大霉素和复方新诺明的耐药率分别为97.6％和87.8％,环丙沙星、... 详细信息

本研究通过分析临床分离的红斑丹毒丝菌耐药谱及对其喹诺酮耐药分子特征进行研究,发现红斑丹毒丝菌对卡那霉素、链霉素、阿米卡星、多粘菌素B和万古霉素的耐药率为100％,庆大霉素和复方新诺明的耐药率分别为97.6％和87.8％,环丙沙星、氧氟沙星、壮观霉素、林可霉素和四环素的耐药率分别为48.8％,26.8％,24.4％,22.0％和14.6％.强力霉素、阿莫西林、恩诺沙星、头孢曲松、青霉素、氨苄西林、头孢拉定、阿奇霉素和克林霉素的耐药率均为0.从耐药率来看,当前最适合防控红斑丹毒丝菌的药物依次是：β-内酰胺类、林可酰胺类和四环素类.

关键词：红斑丹毒丝菌耐药谱喹诺酮耐药相关基因

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明尼苏达大学兽医诊断实验室工作一年的感悟-致远去的莫教授

明尼苏达大学兽医诊断实验室工作一年的感悟-致远去的莫教授

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第二届狮子山养猪高峰论坛暨第十八届全国规模化猪场主要疫病监控与净化专题研讨会

作者：陈芳洲刘爱民 Douglas Marthaler 何启盖华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070 明尼苏达大学动物医学院圣保罗 55108美国明尼苏达州堪萨斯州立大学兽医诊断实验室曼哈顿 66506美国堪萨斯州

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猪支气管败血波氏杆菌hcp基因缺失株构建及其生物学特性研究

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微生物学报 2017年第2期57卷 264-269页

作者：常宇慧张洪峰彭忠李慧陈焕春吴斌农业微生物学国家重点实验室生猪健康养殖协同创新中心华中农业大学动物科学技术学院动物医学院湖北武汉430070

【目的】构建猪支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)Ⅵ型分泌系统(T6SS)溶血素共调节蛋白hcp基因缺失株,并对其基本生物学特性进行初步的研究。【方法】使用自杀性质粒介导同源重组的方法敲除猪支气管败血波氏杆菌QH0814... 详细信息

【目的】构建猪支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)Ⅵ型分泌系统(T6SS)溶血素共调节蛋白hcp基因缺失株,并对其基本生物学特性进行初步的研究。【方法】使用自杀性质粒介导同源重组的方法敲除猪支气管败血波氏杆菌QH0814菌株hcp基因,并比较hcp基因缺失前后,菌体对细胞的黏附入侵、小鼠毒力及组织载菌量上的差异。【结果】成功构建支气管败血波氏杆菌hcp基因缺失株QH0814Δhcp,连续传50代且遗传稳定;缺失株与亲本株生长无明显差异;缺失株的黏附能力与亲本株差异不显著,但入侵能力显著降低(P<0.05);与亲本株相比,半数致死量提高,同时,缺失株对昆明鼠的感染能力也显著降低(P<0.05)。【结论】hcp基因的缺失对支气管败血波氏杆菌增殖无影响,但缺失后其入侵能力和定殖能力显著降低,由此推测hcp基因与支气管败血波氏杆菌的入侵和定殖相关。

关键词：支气管败血波氏杆菌 hcp基因缺失

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