检索结果-内蒙古大学图书馆

生物技术通报 2025年第1期41卷 252-262页

作者：刘克寒杨升辉黄巧云崔文靖中化环境控股有限公司北京100071 济宁岚德生物科技有限公司济宁272000 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 绿氮生物科技有限公司北京100094

【目的】黑龙江是我国大豆的主产区,有着丰富的大豆根瘤菌资源,针对该区域筛选优质抗逆大豆根瘤菌及根际促共生菌株对于大豆的提质增产至关重要。【方法】从黑龙江采集根瘤、根际土分离纯化大豆根瘤菌、根际菌,通过rpoB、16S rRNA基因... 详细信息

【目的】黑龙江是我国大豆的主产区,有着丰富的大豆根瘤菌资源,针对该区域筛选优质抗逆大豆根瘤菌及根际促共生菌株对于大豆的提质增产至关重要。【方法】从黑龙江采集根瘤、根际土分离纯化大豆根瘤菌、根际菌,通过rpoB、16S rRNA基因测序进行种属鉴定。在试管培养条件下进行根瘤菌菌株对盐胁迫(1.2%NaCl)、干旱胁迫(15%PEG6000)的耐受性评价。胁迫耐受根瘤菌菌株接种到黑河43,筛选高效共生菌株。代表性根瘤菌菌株及其根际促共生菌株混合菌接种到黑河43,获得高效共生根瘤菌及促共生显著的菌株。【结果】(1)分离获得大豆根瘤菌136株,其中129株慢生型根瘤菌(分属于Bradyrhizobium elkanii、***、B. diazoefficiens、B. yuanmingense、B. liaoningense);7株快生型根瘤菌(分属于Sinorhizobium fredii、Sinorhizobium sp.)。(2)分离获得拮抗大豆根腐病病原菌(镰刀菌)的菌株6株(B1-B6,分属于Bacillus velezensis、B. subtilis、B. licheniformis、***、B. megaterium),其中有4株(B1、B2、B4、B5)具有产IAA的能力。(3)获得耐盐或耐旱代表性大豆根瘤菌28株,其中有两株大豆根瘤菌B. japonicum GN1、B. diazoefficiens GN10对盐胁迫、干旱胁迫均具有较好抗性,并且通过共生表型的筛选确定GN10是代表菌株中最为高效的大豆根瘤菌。(4)混合接种大豆表型结果表明,B. velezensis B4相比于其余5株芽胞杆菌可以显著提升*** GN10的共生表现。【结论】成功获得耐盐、耐旱且共生效率高的慢生大豆根瘤菌1株,同时获得对共生表现促进效果显著的贝莱斯芽胞杆菌1株,为高效复合根瘤菌菌剂的开发及应用提供有力支撑。

关键词：大豆根瘤菌胁迫耐受高效共生根际促生菌共接种

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2株Cluster 3鹅源坦布苏病毒的分离鉴定及其致病性研究

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中国畜牧兽医 2025年第4期52卷 1750-1762页

作者：陈作鑫陈宇欣潘彦林黄允真李林林董嘉文向勇徐志宏孙敏华张俊勤黄淑坚廖明广东省农业科学院动物卫生研究所农业农村部禽流感等家禽重大疾病防控重点实验室广东省畜禽疫病防治研究重点实验室广东省动物疫病野外科学观测研究站广州510640 佛山大学生命科学与工程学院佛山528225 仲恺农业工程学院动物科技学院广州510225 华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070

【目的】明确Cluster 3鹅源坦布苏病毒(Tembusu virus, TMUV)基因组变异情况及其对鹅的致病性,为Cluster 3 TMUV的防控提供参考。【方法】利用BHK-21细胞对感染TMUV的鹅肝脏组织样品进行病毒分离,通过RT-PCR、间接免疫荧光试验(IFA)、... 详细信息

【目的】明确Cluster 3鹅源坦布苏病毒(Tembusu virus, TMUV)基因组变异情况及其对鹅的致病性,为Cluster 3 TMUV的防控提供参考。【方法】利用BHK-21细胞对感染TMUV的鹅肝脏组织样品进行病毒分离,通过RT-PCR、间接免疫荧光试验(IFA)、透射电镜观察进行鉴定,并测定分离株的生长曲线。对分离株完成全基因组扩增后,使用ModelFinder、MrBayes等软件对其进行遗传进化分析,并对分离株的E蛋白进行氨基酸突变位点分析;测定分离株病毒滴度后,攻毒30日龄鹅,观察鹅各组织器官临床剖检病变及组织病理变化,使用实时荧光定量PCR检测鹅各组织脏器中的病毒载量。【结果】RT-PCR成功鉴定得到2份TMUV核酸阳性病料,接种至BHK-21细胞后,60 h即可观察到明显病变。将3代病毒液IFA检测可观察到明显红色荧光,透射电镜可观察到直径约50 nm、有囊膜的病毒粒子。从发病鹅肝脏组织成功分离得到2株TMUV,分别命名为JM3与JM1205。病毒一步生长曲线结果显示,JM3和JM1205株分别在培养60和48 h时病毒滴度最高。全基因扩增结果显示,JM3和JM1205株基因组全长均为10 994 bp。遗传进化树显示,JM3和JM1205株均为Cluster 3 TMUV成员,与Cluster 3 TMUV鸡源分离株CTLN遗传距离最近。氨基酸突变位点分析结果显示,与GenBank中最早上传的TMUV毒株MM1775株相比,JM3和JM1205株的E蛋白存在多个氨基酸位点突变,其中V157A突变可能与TMUV毒力增强相关。攻毒后1 d后鹅开始出现排绿色稀粪症状,攻毒后7 d开始出现神经症状。JM3组在攻毒后14 d仍持续排毒,JM1205组排毒持续至攻毒后11 d。攻毒后6 d,鹅出现体重增长减缓、下降的情况,至10 d开始恢复缓慢上升。剖检发现攻毒组鹅出现不同程度的脾脏肿大、胰脏坏死、肝脏发白、大脑充血;此外JM3株攻毒组鹅出现卵巢出血、心包积液;JM1205株攻毒组鹅出现心脏出血。攻毒后各时间点脾脏病毒载量均最高,在攻毒后3 d达到峰值,随后逐渐下降。【结论】本研究自广东地区养鹅场分离得到2株Cluster 3 TMUV:JM3和JM1205,2株分离株均对鹅有致病性,可在鹅体内多个器官复制,引起鹅共济失调、体重下降等症状。

关键词：坦布苏病毒(TMUV) 分支3 分离鉴定鹅致病性

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脑心肌炎病毒样颗粒疫苗的制备及免疫保护效果评价

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中国兽医学报 2025年第05期 994-1001页

作者：张艳芳朱琼付杰方耀辉靳佳音张丹娜邓菲曹胜波华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室中国科学院武汉病毒研究所病毒学国家重点实验室

脑心肌炎是由脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus, EMCV)引起的一种以脑炎、心肌炎为主要临床特征的人畜共患传染病。为探索有效的预防措施，本研究利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统，将EMCV的P12A和3C基因插入到pFastBacDual穿梭... 详细信息

脑心肌炎是由脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus, EMCV)引起的一种以脑炎、心肌炎为主要临床特征的人畜共患传染病。为探索有效的预防措施，本研究利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统，将EMCV的P12A和3C基因插入到pFastBacDual穿梭载体中，构建重组杆状病毒Ac-P12A-3C,并大量表达和纯化了EMCV病毒样颗粒(EMCV-VLPs),透射电镜观察显示，EMCV-VLPs能正确组装约30 nm的病毒样颗粒。小鼠免疫和攻毒试验表明，该病毒样颗粒免疫可有效抵抗EMCV的攻击，保护率高达100%。组织病理切片结果显示，与PBS攻毒组相比，VLP免疫组的组织病理损伤显著减轻，且组织中的病毒载量也明显降低。仔猪免疫试验结果显示，该病毒样颗粒可以诱导仔猪产生良好的体液免疫反应，二免后中和抗体滴度可达1∶320～1∶640,且免疫过程中未观察到明显的副反应。本研究初步验证了病毒样颗粒疫苗的免疫原性和安全性，为研制基于EMCV-VLPs的亚单位疫苗奠定了基础，并为脑心肌炎的防控提供了新的策略。

关键词：脑心肌炎病毒(EMCV) 病毒样颗粒(VLPs) 免疫原性体液免疫杆状病毒-昆虫细胞表达系统中和抗体亚单位疫苗

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生物大分子与重金属互作研究方法与微观机制

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科学通报 2022年第35期67卷 4192-4205页

作者：渠晨晨蔡鹏史凯祥陈雯莉陈今朝高春辉吴一超黄巧云华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

深入理解生物大分子与重金属相互作用的微观机制对于生态环境污染治理具有重要意义.近年来,随着现代谱学、显微方法以及组学技术的应用,生物大分子与重金属结合强度、配位结构、氧化还原过程及其生物学调控过程取得了重要进展,这些研究... 详细信息

深入理解生物大分子与重金属相互作用的微观机制对于生态环境污染治理具有重要意义.近年来,随着现代谱学、显微方法以及组学技术的应用,生物大分子与重金属结合强度、配位结构、氧化还原过程及其生物学调控过程取得了重要进展,这些研究在分子尺度极大丰富了相关机制的认识.本综述在总结生物大分子与重金属相互作用最新研究方法及其机制的基础上,指出未来亟须发展生物大分子结构与组成表征的方法体系,探究功能性生物大分子参与的重金属吸附与氧化还原过程,揭示复合生物膜系统中微生物功能和重金属形态转化之间的耦合机制,推进重金属与环境组分相互作用的理解从官能团到功能分子尺度的跨越.通过方法集成与创新、机制解析与应用,为水体和土壤重金属污染治理提供有效策略与精准技术.

关键词：生物膜生物大分子重金属污染分子机制氧化还原

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重新认识土壤有机质

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科学通报 2022年第10期67卷 913-923页

作者：渠晨晨任稳燕李秀秀蔡鹏陈雯莉黄巧云华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

以腐殖质为主要成分的土壤有机质占土壤固相组成的2%~8%,是土壤中养分元素的承载者、微生物活动的驱动者以及矿质转化的调节者,对于土壤功能的发挥起着关键作用.早在19世纪初,德国土壤学者D?bereiner[1]和Sprengel[2]就提出“humic acid... 详细信息

以腐殖质为主要成分的土壤有机质占土壤固相组成的2%~8%,是土壤中养分元素的承载者、微生物活动的驱动者以及矿质转化的调节者,对于土壤功能的发挥起着关键作用.早在19世纪初,德国土壤学者D?bereiner[1]和Sprengel[2]就提出“humic acids”概念.有学者利用碱提取和酸沉淀的方法将土壤有机质分成富里酸、胡敏酸以及高度缩合、惰性的胡敏素等不同组分[3-4].

关键词：土壤固相土壤有机质胡敏素养分元素富里酸微生物活动胡敏酸碱提取

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CdSe/ZnS量子点探针用于检测猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白(MRP)抗原的新方法研究

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化学学报 2009年第10期67卷 1087-1092页

作者：武红敏韩鹤友金梅林张安定华中农业大学理学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学动物科技学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070

合成了高发光效率的CdSe/ZnS量子点并制备了CdSe/ZnS量子点-溶菌酶释放蛋白(MRP)抗体探针,利用凝胶电泳和分子光谱法研究了MRP抗体与CdSe/ZnS量子点的结合机理.荧光光谱法优化了CdSe/ZnS量子点-MRP抗体探针制备的影响因素,建立了一种测... 详细信息

合成了高发光效率的CdSe/ZnS量子点并制备了CdSe/ZnS量子点-溶菌酶释放蛋白(MRP)抗体探针,利用凝胶电泳和分子光谱法研究了MRP抗体与CdSe/ZnS量子点的结合机理.荧光光谱法优化了CdSe/ZnS量子点-MRP抗体探针制备的影响因素,建立了一种测定MRP抗原的新方法,其线性范围为5.0×10-8～1.5×10-6mol/L,线性相关系数为0.9976,检测限为1.9×10-8mol/L.

关键词：猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白(MRP) CdSe/ZnS量子点探针检测

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SERS技术在疾病诊断和生物分析中的应用

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化学进展 2012年第12期24卷 2391-2402页

作者：邵锋陈坤罗志辉王艳君陆冬莲韩鹤友农业微生物学国家重点实验室、华中农业大学理学院武汉430070

表面增强拉曼散射(surface-enhanced Raman scattering,SERS)技术以其独特的谱带窄、灵敏度高、抗光漂白、原位和无损等优势,在疾病诊断和生物分析领域得到了越来越广泛的应用。本文介绍了近几年来应用于生物大分子、病原微生物、细胞... 详细信息

表面增强拉曼散射(surface-enhanced Raman scattering,SERS)技术以其独特的谱带窄、灵敏度高、抗光漂白、原位和无损等优势,在疾病诊断和生物分析领域得到了越来越广泛的应用。本文介绍了近几年来应用于生物大分子、病原微生物、细胞和活体检测分析中的最新SERS技术,并分别从标记与非标记的角度对其进行了阐述,总结了SERS标记检测生物大分子的基本识别模式,简述了检测低浓度病原微生物的SERS技术,着重评述了SERS检测技术在细胞和活体研究中的应用,并对基于SERS的疾病诊断和生物分析技术的发展趋势进行了初步展望。

关键词：表面增强拉曼散射(SERS) 生物大分子病原微生物细胞活体

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大肠杆菌Ee株SLT-ⅡeB基因的3拷贝融合表达及其生物学活性与免疫原性

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微生物学报 2007年第4期47卷 686-691页

作者：刘国平吴斌林艺远金梅林陈焕春赵战勤汤细彪杨明柳华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

根据大肠杆菌Ee株主要免疫原性片段SLT-ⅡeB的基因序列,设计合成两对引物,利用谷胱甘肽-S-转移酶(GST)表达系统将三拷贝SLT-ⅡeB的融合基因串联于GST下游,并在大肠杆菌中成功表达,获得了大小约为45kDa融合蛋白GST-3B,表达产物以包涵体... 详细信息

根据大肠杆菌Ee株主要免疫原性片段SLT-ⅡeB的基因序列,设计合成两对引物,利用谷胱甘肽-S-转移酶(GST)表达系统将三拷贝SLT-ⅡeB的融合基因串联于GST下游,并在大肠杆菌中成功表达,获得了大小约为45kDa融合蛋白GST-3B,表达产物以包涵体形式产生,Western blot检测证实表达的融合蛋白具有良好的生物学活性;结合抑制试验表明,与单拷贝融合表达蛋白GST-B相比,GST-3B与水肿毒素受体的亲和力更强。GST-3B及GST-B与等量弗氏不完全佐剂乳化后制成亚单位疫苗,间隔两周两次皮下免疫小鼠。结果GST-3B疫苗组产生的抗体水平明显高于GST-B疫苗组,但两种疫苗组的抗体消长趋势相同。二免后两周用5×LD50的Ee株大肠杆菌进行腹腔攻毒。GST-3B疫苗组保护率为60.0%(6/10),明显优于GST-B疫苗组40.0%(4/10)。研究结果表明GST-3B具有良好的生物学活性和免疫原性,可以作为疫苗添加成分,显示了良好的应用前景。

关键词：大肠杆菌 SLT-ⅡeB基因融合表达生物学活性免疫原性

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不同巯基试剂修饰的CdTe量子点与BSA相互作用研究

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光谱学与光谱分析 2010年第4期30卷 1039-1043页

作者：马金杰梁建功韩鹤友华中农业大学理学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

修饰试剂对量子点的合成、性质具有重要的影响,但目前有关修饰试剂对量子点与蛋白质间相互作用的影响尚不清楚。采用紫外-可见吸收光谱、荧光光谱及红外光谱研究了3种巯基化合物(巯基乙酸,TGA;L-半胱氨酸,L-Cys;还原型谷胱甘肽,GSH)修饰... 详细信息

修饰试剂对量子点的合成、性质具有重要的影响,但目前有关修饰试剂对量子点与蛋白质间相互作用的影响尚不清楚。采用紫外-可见吸收光谱、荧光光谱及红外光谱研究了3种巯基化合物(巯基乙酸,TGA;L-半胱氨酸,L-Cys;还原型谷胱甘肽,GSH)修饰的CdTe量子点与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。通过Stern-Volmer方程对数据进行了分析,得到了不同CdTe量子点与BSA相互作用过程的ΔHθ,ΔGθ和ΔSθ,并比较了CdTe量子点的不同修饰剂对BSA荧光猝灭的影响。研究结果表明,3种修饰试剂包覆的CdTe量子点与BSA的相互作用均为静态猝灭过程,猝灭常数KSV(L-Cys)>KSV(TGA)≈KSV(GSH);TGA和L-Cys修饰的CdTe量子点与BSA的结合力主要为疏水作用力,而GSH修饰的量子点与其结合力既有氢键作用力又有疏水作用力;这些结果说明量子点与BSA的作用过程与量子点表面修饰试剂的类型有关。

关键词： CdTe量子点牛血清白蛋白表面修饰荧光猝灭法巯基化合物

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CdTe量子点-罗丹明6G荧光共振能量转移体系的构建及其应用研究

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高等学校化学学报 2010年第2期31卷 260-263页

作者：王绪炎梁建功马金杰陈姝含韩鹤友华中农业大学理学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070

采用巯基化合物修饰的CdTe量子点构建了量子点(供体)-罗丹明6G(受体)荧光共振能量转移体系,研究了CdTe量子点与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用.结果表明,CdTe量子点与BSA相互作用后提高了CdTe量子点-罗丹明6G体系的荧光共振能量转移(FRET... 详细信息

采用巯基化合物修饰的CdTe量子点构建了量子点(供体)-罗丹明6G(受体)荧光共振能量转移体系,研究了CdTe量子点与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用.结果表明,CdTe量子点与BSA相互作用后提高了CdTe量子点-罗丹明6G体系的荧光共振能量转移(FRET)效率,减小了CdTe量子点和罗丹明6G分子间的距离(r),证实BSA是通过其色氨酸(Trp)残基与CdTe量子点表面金属发生配位作用而直接结合到量子点表面的.

关键词： CdTe量子点罗丹明6G 荧光共振能量转移牛血清白蛋白

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