检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧兽医学报 2022年第5期53卷 1517-1526页

作者：于学祥陈晓雨李栋凡孙琪库旭钢范盛先杨汉春何启盖华中农业大学动物医学院武汉430070 农业微生物学国家重点实验室武汉430070 生猪健康养殖协同创新中心武汉430070 中国农业大学动物医学院北京100193

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起猪的一种急性、热性、出血性、高度接触性传染病,临床症状以败血症、皮炎和关节炎为特征,高发病率和高死亡率。为建立临床检测ASFV抗体的间接EL... 详细信息

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起猪的一种急性、热性、出血性、高度接触性传染病,临床症状以败血症、皮炎和关节炎为特征,高发病率和高死亡率。为建立临床检测ASFV抗体的间接ELISA检测方法,本研究扩增了ASFV-CP204L基因,通过pET-30a原核表达系统表达p30蛋白,使用Ni-NTA纯化表达产物,通过肠激酶切除外源性蛋白,得到无His-组氨酸标签的p30蛋白,以此为诊断抗原,建立间接ELISA方法。结果显示:表达的无标签p30重组蛋白大小约为30 ku,与ASF阳性猪血清具有较好的反应原性;确定ELISA抗原包被浓度为1μg·mL^(-1),根据ROC曲线下面积确定S/P值>0.398判定为阳性,批内、批间变异系数均<10%;与PCV2、CSFV、PRV-gE、PRRSV阳性血清无交叉反应与INGENASA商品化试剂盒总符合率为97.78%。用该方法分别检测标准阳性血清、动物感染试验血清和收集的区域性临床血清644份,该方法最低可检测到1∶512倍稀释的标准阳性血清样品;检测感染动物血清,其中80%(4/5)的试验动物在第10天抗体为阳性。644份临床猪血清样品中抗体阳性率为7.61%,其中,母猪、后备母猪、仔猪、保育猪和育肥猪抗体阳性率分别为3.03%、0%、4.94%、7.55%和28.7%。本试验建立的ASFV-p30间接ELISA方法具有良好的特异性、灵敏度和重复性,可应用于ASFV的抗体检测,为ASF的诊断和流行病学调查提供了技术手段。

关键词：非洲猪瘟 CP204L基因 p30蛋白原核表达 ELISA抗体检测

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费氏中华根瘤菌NodD2蛋白与植物类黄酮互作的生化机制研究

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生命的化学 2022年第7期42卷 1396-1404页

作者：陈敏朱辉曹扬荣华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 湖北洪山实验室武汉430070

为研究大豆根瘤菌Sinorhizobium fredii HH103 NodD2蛋白与豆科植物分泌的多种类黄酮(包括柚皮素、染料木素、大豆苷元和木犀草素)的体外相互作用,并解析NodD2蛋白与不同类黄酮结合的关键氨基酸位点,在NodD2蛋白C端选择4段氨基酸序列进... 详细信息

为研究大豆根瘤菌Sinorhizobium fredii HH103 NodD2蛋白与豆科植物分泌的多种类黄酮(包括柚皮素、染料木素、大豆苷元和木犀草素)的体外相互作用,并解析NodD2蛋白与不同类黄酮结合的关键氨基酸位点,在NodD2蛋白C端选择4段氨基酸序列进行截短,利用等温滴定量热法(ITC)在体外分别测定多种截短NodD2蛋白与类黄酮小分子互作产生的热量变化,根据计算机绘制的热量图谱得到两者反应的计量系数比、平衡常数和焓变化,以此分析NodD2蛋白与类黄酮小分子互作的强弱。使用三亲本杂交技术得到敲除突变体菌株S. fredii HH103ΩnodD2基因,并将不同突变形式的NodD2进行回补,基于大豆接种并观测根瘤固氮表型。结果显示,全长NodD2蛋白与柚皮素、染料木素和大豆苷元都有较强的结合能力,与木犀草素的结合能力很弱。4个截短NodD2蛋白对不同的类黄酮的敏感性不同,截短NodD2蛋白与类黄酮结合产生的热量变化相较于全长NodD2蛋白与类黄酮结合产生的热量变化较低。以上结果表明,NodD2蛋白作为直接受体结合类黄酮化合物,其C端氨基酸序列128F-132P、146V-152P、192S-198P和246P-249L在与类黄酮的结合中起关键作用。

关键词：共生固氮类黄酮等温滴定量热法 NodD蛋白

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上皮间质转化促乳腺癌机制及药物干预治疗研究进展

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中国畜牧兽医 2021年第1期48卷 117-123页

作者：林昌杰李婷唐鑫陈颖钰郭爱珍胡长敏华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

乳腺癌是犬、猫等伴侣动物与人类常发疾病,作为人类及动物常患恶性肿瘤和主要致死肿瘤之一,其疾病负担仍呈逐步加重趋势,乳腺癌的预防及治疗形势愈加严峻。上皮间质转化(EMT)是乳腺癌发生发展中重要的生物学过程。EMT还可促进恶性肿瘤... 详细信息

乳腺癌是犬、猫等伴侣动物与人类常发疾病,作为人类及动物常患恶性肿瘤和主要致死肿瘤之一,其疾病负担仍呈逐步加重趋势,乳腺癌的预防及治疗形势愈加严峻。上皮间质转化(EMT)是乳腺癌发生发展中重要的生物学过程。EMT还可促进恶性肿瘤的侵袭、扩散及耐药,因此它在肿瘤的研究中日益受到关注,靶向于EMT是治疗乳腺癌的重要研究方向与热点。文章就EMT发生过程中细胞形态功能及标志物的变化、EMT分类及EMT与乳腺癌的关系分别展开论述,详细解析了EMT相关TGF-β/Smad、NF-κB及Wnt信号通路转导途径;随后对乳腺癌治疗药物研究进展,包括TGF-β/Smad通路抑制剂开发,相关药物、基因及细胞因子治疗前景、NF-κB通路与Wnt通路抑制剂的动物试验研究结果进行了详细论述;最后对乳腺癌的治疗发展与趋势进行了展望。深入认识信号通路调控乳腺癌EMT的生物学过程,明确其发生发展机制,寻找关键靶点及开发靶向药物,将为乳腺癌的精准治疗带来曙光。

关键词：乳腺癌上皮间质转化靶向治疗 TGF-β/Smad NF-κB Wnt

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猪圆环病毒2型和3型混合感染引起的母猪繁殖障碍诊治

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中国畜牧兽医 2022年第10期49卷 3982-3993页

作者：孙庆帅陈燕虹姚伦孙琪于学祥吴昊阮胜男雷铭楷严伟东何启盖华中农业大学动物科技学院/动物医学院武汉430070 农业微生物学国家重点实验室武汉430070 武汉科前生物股份有限公司武汉430072

【目的】寻找引起某猪场母猪屡次配种不孕的原因。【方法】采集母猪饲料槽中正在食用的饲料检测黄曲霉素B含量;采集返情母猪的口鼻腔拭子、肛门拭子及血清,使用PCR、RT-PCR方法检测猪圆环病毒2型(Porcine circovirus 2,PCV2)、PCV3、猪... 详细信息

【目的】寻找引起某猪场母猪屡次配种不孕的原因。【方法】采集母猪饲料槽中正在食用的饲料检测黄曲霉素B含量;采集返情母猪的口鼻腔拭子、肛门拭子及血清,使用PCR、RT-PCR方法检测猪圆环病毒2型(Porcine circovirus 2,PCV2)、PCV3、猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)、猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪瘟病毒(Classic swine fever virus,CSFV);随机剖检13头返情母猪,采集脾脏、淋巴结、脊髓、子宫、卵巢组织检测繁殖障碍性病毒的感染情况;对检测到的PCV2和PCV3部分阳性样品进行ORF2基因序列分析;观察母猪卵巢病理变化情况,汇总分析结果,诊断该场母猪受胎率低、持续返情的原因。【结果】该猪场饲料中黄曲霉素B含量为4.5~9.0μg/kg,均在GB 13078-2017规定的饲料中黄曲霉素B允许范围内(<20μg/kg)。PCR、RT-PCR结果显示,口鼻腔拭子、肛门拭子和血清的PCV2、PCV3、PRV、PPV、PRRSV、CSFV检测结果均为阴性;13头母猪的PCV2阳性率为69.23%(9/13),PCV3阳性率为38.46%(5/13),PCV2和PCV3混合感染率为30.76%(4/13)。实时荧光定量PCR检测结果显示,PCV2在脊髓中的病毒载量最高,脾脏次之,淋巴结中最少;PCV3在脾脏中病毒载量最高,脊髓次之,卵巢中病毒载量最少。ORF2基因序列分析发现,PCV2为2d亚型,PCV3为3a亚型。卵巢病理切片观察发现,卵泡细胞数量减少,卵泡腔形状不规则、塌陷扁平。【结论】经过诊断确定该场母猪持续返情、屡配不孕的原因是PCV2和PCV3混合感染,进而引起繁殖障碍。根据诊断结果和该场情况,采取全群接种PCV2疫苗,配合全场消毒,加强生物安全防控,成功解决该场母猪繁殖障碍问题,恢复正常生产。

关键词：猪圆环病毒2型(PCV2) PCV3 母猪繁殖障碍

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花生紫色酸性磷酸酶基因家族的鉴定及表达分析

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中国油料作物学报 2022年第3期44卷 522-531页

作者：杜普旋刘浩胡冬秀陈小平洪彦彬李友国华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 广东省农业科学院作物研究所国家油料作物改良中心南方分中心广东省农作物遗传改良重点实验室广东广州510640

紫色酸性磷酸酶(purple acid phosphatase,PAP)是一类金属磷酸酯酶,参与植物的磷素利用、碳代谢、细胞壁合成等多种生理功能,尤其是对磷缺乏的适应。本研究利用生物信息学手段在花生(Arachis hypogaea L.)全基因组水平上对PAP基因家族... 详细信息

紫色酸性磷酸酶(purple acid phosphatase,PAP)是一类金属磷酸酯酶,参与植物的磷素利用、碳代谢、细胞壁合成等多种生理功能,尤其是对磷缺乏的适应。本研究利用生物信息学手段在花生(Arachis hypogaea L.)全基因组水平上对PAP基因家族进行了鉴定,并对其系统进化关系、保守结构域、基因结构以及它们在22个组织中的表达模式进行了分析。结果表明:花生基因组中有39个AhPAP基因,氨基酸序列长度为205~905,等电点大多数都小于7,蛋白质C端均含有金属磷酸酶结构域。以花生、拟南芥、水稻、苜蓿共74个PAP蛋白构建的系统发育树可分为四组,每组中都含有来自不同物种的PAP,并没有因为物种差异而各自聚为一类。AhPAP基因家族中部分成员的表达具有组织特异性,arahy.P03NME、***6C在根瘤中表达量最高,而它们在其他组织中表达量较低或未检测到表达。本研究为揭示AhPAP基因家族在花生中的生物学功能奠定了基础。

关键词：花生紫色酸性磷酸酶生物信息学基因家族

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一株分离自团头鲂的嗜水气单胞菌病原学及其与ST251型菌株的全基因组比较

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中国水产科学 2021年第4期28卷 503-516页

作者：王超杰王至诚康兴宇黎洁刘乃瑜王卫民罗毅华中农业大学水产学院农业农村部淡水生物繁育重点实验室/农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室湖北武汉430070 农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

为确定湖北仙桃一团头鲂(Megalobrama amblycephala)专养池塘的发病病原体及病原特征,并从全基因组层面初步分析该病原菌的毒力和耐药特征,本研究从患病团头鲂的肝脏分离得到一株病原菌LHW39,经理化性状及16S rRNA鉴定,表明LHW39为嗜水... 详细信息

为确定湖北仙桃一团头鲂(Megalobrama amblycephala)专养池塘的发病病原体及病原特征,并从全基因组层面初步分析该病原菌的毒力和耐药特征,本研究从患病团头鲂的肝脏分离得到一株病原菌LHW39,经理化性状及16S rRNA鉴定,表明LHW39为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)。多序列分型结果显示LHW39属于嗜水气单胞菌ST251型克隆群,该克隆群是导致中国和美国地区鱼类暴发气单胞菌败血症(motile Aeromonas septicemia,MAS)的流行菌株群。回归感染实验证实菌株LHW39是引起本次团头鲂患病的病原菌;LHW39对斑马鱼(Danio rerio)的半致死剂量为1.55×10^(5) CFU/尾,表明LHW39为高毒力菌株。药敏实验显示, LHW39对头孢噻吩耐药。全基因组测序结果发现,LHW39全基因组大小为5099855bp,GC含量为60.80%,共预测到4572个编码序列(CDS),GenBank登录号CP050012。基因组毒力基因比较分析结果显示:LHW39与其他ST251型菌株相似,基因组中含有丰富的毒力基因,并且含有VI型分泌系统(T6SS);此外,聚类热图暗示ST251克隆群中菌株毒力相关基因的进化可能与菌株分离的地理位置和感染的宿主存在关联。基因组原噬菌体预测结果显示,LHW39基因组中含有一个长度为30.2 kb的完整原噬菌体phAhLHW39,其在ST251型菌株中相当保守、并且是ST251型菌株所特有。耐药基因分析结果表明,LHW39中含有抗磺胺类、喹诺酮类、四环素类、头孢类和碳青霉烯类等抗生素的相关基因,这些基因在ST251型菌株中高度保守。本研究对致病性嗜水气单胞菌LHW39进行了病原学及全基因组比较分析,为防控鱼类嗜水气单胞菌感染提供了一定的参考依据。

关键词：团头鲂嗜水气单胞菌 ST251 全基因组毒力耐药原噬菌体

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三酮类除草剂微生物降解的研究进展

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微生物学通报 2023年第2期50卷 845-856页

作者：李情情马青云阮志勇中国农业科学院农业资源与农业区划研究所/CAAS-CIAT可持续农业联合实验室北京100081 中国农业科学院研究生院北京100081 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 西藏农牧学院资源与环境学院西藏林芝860000

三酮类除草剂是一类高效、广谱、高选择性的除草剂,能够有效地防除玉米地多种阔叶杂草和禾本科杂草。该类除草剂在土壤、水体中残留,易造成地表和地下水污染。有关研究表明,微生物降解有望成为解决该类除草剂残留的有效措施。本文分析了... 详细信息

三酮类除草剂是一类高效、广谱、高选择性的除草剂,能够有效地防除玉米地多种阔叶杂草和禾本科杂草。该类除草剂在土壤、水体中残留,易造成地表和地下水污染。有关研究表明,微生物降解有望成为解决该类除草剂残留的有效措施。本文分析了2种三酮类除草剂带来的生态效应,总结了已报道的微生物降解资源,简述了降解基因/酶的研究进展及可能的降解途径,为深入研究三酮类除草剂的生物降解提供一定的信息支撑。

关键词：三酮类除草剂对羟基苯基丙酮酸双氧化酶生态效应微生物降解

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大豆与丛枝菌根真菌共生建立及菌根检测方法的探究

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华中农业大学学报 2021年第2期40卷 148-155页

作者：谢丽萍黄诗宸许张珂李友国林会农业微生物学国家重点实验室/华中农业大学生命科学技术学院武汉430070

利用盆栽培养的方法,研究4种培养基质(蛭石、蛭石-土、沙-蛭石、沙-土)对不同品种大豆与AM真菌(Rhizophagus irregularis)共生的影响,比较Parker纯黑墨水和台盼蓝2种染色剂对大豆菌根的染色效果,探究放大网格交叉法和Trouvelot五级分级... 详细信息

利用盆栽培养的方法,研究4种培养基质(蛭石、蛭石-土、沙-蛭石、沙-土)对不同品种大豆与AM真菌(Rhizophagus irregularis)共生的影响,比较Parker纯黑墨水和台盼蓝2种染色剂对大豆菌根的染色效果,探究放大网格交叉法和Trouvelot五级分级法在大批量菌根共生指标检测中的应用。结果表明:蛭石-土(V蛭石∶V土=4∶1)更有利于AM真菌对大豆的侵染,该基质中菌根的丛枝丰度、根内菌丝密度、泡囊丰度均显著高于其他基质,可以作为大豆与AM真菌共生盆栽培养的最佳培养基质;对于大批量的菌根共生指标检测,墨水染色技术和放大网格交叉法是目前最优的菌根染色和真菌指标检测方法。

关键词：大豆丛枝菌根真菌菌根共生检测方法培养基质放大网格交叉法墨水染色

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桑黄等食药用真菌代谢产物的药用功能挖掘与生物合成分析

桑黄等食药用真菌代谢产物的药用功能挖掘与生物合成分析

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中国菌物学会2023年学术年会

作者：梅余霞胡炬团刘洋洋何慧慧梁运祥华中农业大学农业微生物学国家重点实验室生命科学技术学院

食药用真菌在维持森林生态系统平衡、促进可持续农业循环经济、推动大健康产业发展等方面显示出重要价值,其广泛的抗肿瘤、抗炎、降血糖、保肝护肝、增强免疫力等功效,倍受消费者青睐。学术界则围绕其种质资源、培养技术、生物活性等方...

食药用真菌在维持森林生态系统平衡、促进可持续农业循环经济、推动大健康产业发展等方面显示出重要价值,其广泛的抗肿瘤、抗炎、降血糖、保肝护肝、增强免疫力等功效,倍受消费者青睐。学术界则围绕其种质资源、培养技术、生物活性等方面开展研究。本文以桑黄等食药用真菌为对象,依托优化的固液态发酵体系,基于多组学分析方法,对菌丝体主要活性成分的药用功能、构效关系、作用机理等进行了系统性研究。结果表明,桑黄多糖提取物PLPE应用于2型糖尿病(T2D)大鼠后,显著下调了胰岛素抵抗指数、降低了糖化血清蛋白、甘油三酯TG、总胆固醇TCHO、游离脂肪酸FFA、低密度脂蛋白LDL等含量,表现出突出的降低血糖、调节血脂功效。高通量测序分析发现,PLPE可有效提高T2D大鼠的肠道菌群多样性具有降解多糖、产生短链脂肪酸(SCFAs)能力的细菌丰度增加,而Clostridium-sensu-stricto-1、Escherichia-Shigella等有害菌丰度减少。进一步纯化出多糖单一组分PLNP,作用于DSS诱导的急性溃疡性结肠炎(UC)小鼠表现出较强的抗炎活性。经PLNP干预后,UC小鼠模型通常表现出的体重下降、进食量减少、腹泻加重、疾病活动指数上升等状况得以扭转,血清中炎症因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)含量显著下降,表明PLNP具有较好的抗炎活性。肠道菌群结构与多样性分析表明,PLNP可恢复DSS导致的肠道微生物多样性下降,提高Bifidobacterium、Lactobacillus、Akkermansia有益菌丰度,下调Turicibacter,Bacteroides, Streptococcus等有害菌丰度。研究结果表明,桑黄等食药用真菌多糖可作为一种益生元,开发成为代谢综合症辅助治疗药物或保健品的潜力。既往研究大都以获得高生物量或高产量的代谢物质为目标,聚焦于培养技术的优化,却容易忽视了培养环节的差异性对产物结构功能的影响。本文通过设立不同培养条件对产物进行比较,发现碳源不仅会影响菌丝体生长和代谢产物产量,还会极大程度改变产物的结构和活性。不同碳源条件下获得的菌丝体多糖在分子量、单糖组成、糖苷键类型等结构参数明显不同;体外细胞试验发现其抗肿瘤、调节免疫等功能差异显著。qPCR分析指出,多糖结构和组成的差异归因于培养条件对多糖合成途径相关酶基因表达的影响。上述研究提示在食药用真菌资源规模化开发过程中应强化对代谢产物合成调控的理解,建立培养工艺与产物活性的对应关系,制定相应的技术标准和质量控制标准,促进食药用真菌产业的发展。

关键词：

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天冬氨酸转氨酶在中慢生根瘤菌MAFF303099共生固氮中的作用

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华中农业大学学报 2021年第6期40卷 68-74页

作者：王婧仪曹扬荣朱辉农业微生物学国家重点实验室/华中农业大学生命科学技术学院武汉430070

为寻找根瘤菌中与共生固氮相关的调控基因,采用同源重组法,分别敲除中慢生根瘤菌MAFF303099在与豆科植物百脉根共生固氮过程上调表达的10个基因,研究它们对共生固氮的影响。结果显示:Δmlr5883敲除突变体相比于野生型MAFF303099,其固氮... 详细信息

为寻找根瘤菌中与共生固氮相关的调控基因,采用同源重组法,分别敲除中慢生根瘤菌MAFF303099在与豆科植物百脉根共生固氮过程上调表达的10个基因,研究它们对共生固氮的影响。结果显示:Δmlr5883敲除突变体相比于野生型MAFF303099,其固氮酶活性下降40%,侵染细胞形态未发生显著改变,对Δmlr5883回补可恢复固氮酶活性;预测mlr5883编码天冬氨酸氨基转移酶,体外检测该酶的天冬氨酸转氨酶活性为16.67 U/mg。该基因的突变会影响固氮效率,推测其可能参与对植物供给碳源的代谢过程。

关键词：天冬氨酸转氨酶中慢生根瘤菌MAFF303099 共生固氮同源重组

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