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2006中国微生物学会第九次全国会员代表大会暨学术年会

作者：彭东海陈守文阮丽芳李林喻子牛孙明华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

利用营养期杀虫蛋白基因vip3Aa7通过DNA重组技术构建了一株广谱的苏云金芽胞杆菌工程菌(命名为BMB696B)。通过生物测定和田间试验,证明该工程菌对甜菜夜蛾和小菜蛾具有很好的防治效果,表明该工程菌具有良好的应用价值,有望成为一种新型... 详细信息

利用营养期杀虫蛋白基因vip3Aa7通过DNA重组技术构建了一株广谱的苏云金芽胞杆菌工程菌(命名为BMB696B)。通过生物测定和田间试验,证明该工程菌对甜菜夜蛾和小菜蛾具有很好的防治效果,表明该工程菌具有良好的应用价值,有望成为一种新型的生物杀虫剂。但是,国内外至今未见有该蛋白毒理学方面的研究报道,根据《农药登记资料要求》和《农药登记毒理学试验方法》,并参照国内外关于生物杀虫剂的安全性评价方法,进行了

关键词：杀虫蛋白基因工程菌毒理学试验

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华癸中生根瘤菌质粒消除方法研究进展

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化学与生物工程 2006年第3期23卷 7-9页

作者：胡国元周俊初华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

结合对华癸中生根瘤菌(Mesorhizobium huakuii)质粒功能的研究,介绍了高温和吖啶橙处理法、标记质粒消除法和质粒的不相容性消除质粒法在华癸中生根瘤菌质粒消除中的应用,并比较了各方法的优缺点。

关键词：华癸中生根瘤菌质粒消除质粒检测

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杀线虫晶体蛋白基因cry6Aa操纵子中存在负表达调控因子

杀线虫晶体蛋白基因cry6Aa操纵子中存在负表达调控因子

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2006中国微生物学会第九次全国会员代表大会暨学术年会

作者：余子全孙明喻子牛华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

苏云金芽胞杆菌YBT-1518能产生米粒状伴胞晶体蛋白,该晶体蛋白包含54kDa和45kDa 两种蛋白,其对北方根结线虫(Meloidogyne hapla)毒力为7．55 μ g／mL。从该菌株中克隆到一个2941bp的片断。序列分析表明,该片断上游有一启动子,下游有两... 详细信息

关键词：晶体蛋白反向重复序列 cry6Aa 操纵子

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华癸中生根瘤菌7653R中可转移插入序列的捕捉

华癸中生根瘤菌7653R中可转移插入序列的捕捉

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2006年度学术研讨会

作者：康凯周俊初郭先武农业微生物学国家重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学

基因组动态学是生物基因组学研究的一个重要方面,已知细菌基因组中有插入序列,转座子,原噬菌体,整合元,可转移质粒和第二类内含子等许多可转移的因子。插入序列有转座的功能,普遍存在于所有已测序的基因组中。

关键词：华癸中生根瘤菌插入序列接合子

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苏云金芽胞杆菌中杀线虫晶体蛋白基因cry6A的负表达调控

苏云金芽胞杆菌中杀线虫晶体蛋白基因cry6A的负表达调控

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第二届中国青年学者微生物遗传学学术研讨会

苏云金芽胞杆菌YBT-1518能产生米粒状伴胞晶体蛋白,该晶体蛋白包含 54kDa和45kDa两种蛋白,其对北方根结线虫(Meloidogyne hapla)毒力为7．55 μg／mL。从该菌株中克隆到一个2941bp的片断。序列分析表明,该片断上游有一启动子,下游有两个... 详细信息

苏云金芽胞杆菌YBT-1518能产生米粒状伴胞晶体蛋白,该晶体蛋白包含 54kDa和45kDa两种蛋白,其对北方根结线虫(Meloidogyne hapla)毒力为7．55 μg／mL。从该菌株中克隆到一个2941bp的片断。序列分析表明,该片断上游有一启动子,下游有两个ORF(orf1和orf2),在它们之间有一个可形成茎环结构的反向重复序列。Blast分析发现,orf1与已经报道的cry6Aa1有98％同源性, 该序列已经在Getabank上登陆,其登陆号为AF499736,命名为cry6Aa2。未发现有与orf2有明显同源性的序列。将该序列克隆到***-Bt穿梭载体pHT304 上,并转入无晶体突变株BMB171中,发现orf1表达一个54kDa的蛋白,也可形成米粒状伴胞晶体,对北方根结线虫的毒力为7．43 μ g／mL。SDS-PAGE未能检测到orf2的表达产物,但orf2能在orf1上游启动子的启动下单独表达或与orf1 共表达,其表达产物对线虫无毒力,也不能帮助提高orf1表达产物的毒力。通过RT-PCR能在YBT-1518中检测到orf2的转录产物。当将orf2插入突变后,orf1 的表达量提高了80％。所有实验结果表明,克隆的该序列为一个完整的操纵子, 其中反向重复序列为一顺式作用因子,抑制orf2的表达,导致其低水平表达。 Orf2为一反式作用因子,其微量表达产物反向调节orf1的表达。

关键词：苏云金芽胞杆菌伴胞晶体蛋白基因表达调控线虫

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苏云金芽胞杆菌中杀线虫晶体蛋白基因的表达调控

苏云金芽胞杆菌中杀线虫晶体蛋白基因的表达调控

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第十届全国杀虫微生物学术研讨会暨全国生物农药与化学生物学研究与产业化会议

苏云金芽胞杆菌YBT-1518能产生米粒状伴胞晶体蛋白,该晶体蛋白包含 54kDa和45kDa两种蛋白,其对北方根结线虫(Meloidogyne hapla)毒力为7．55 μg／mL。从该菌株中克隆到一个2941bp的片断。序列分析表明,该片断上游有一启动子,下游有两个ORF(orf1和orf2),在它们之间有一个可形成茎环结构的反向重复序列。Blast分析发现,orf1与已经报道的cry6Aa1有98％同源性, 该序列已经在Genbank上登陆,其登陆号为AF499736,命名为cry6Aa2。未发现有与orf2有明显同源性的序列。将该序列克隆到***-Bt穿梭载体pHT304 上,并转入无晶体突变株BMB171中,发现orf1表达一个54kDa的蛋白,也可形成米粒状伴胞晶体,对北方根结线虫的毒力为7．43 μg／mL。SDS-PAGE未能检测到orf2的表达产物,但orf2能在orf1上游启动子的启动下单独表达或与orf1 共表达,其表达产物对线虫无毒力,也不能帮助提高orf1表达产物的毒力。通过RT-PCR能在YBT-1518中检测到orf2的转录产物。当将orf2插入突变后,orf1 的表达量提高了80％。所有实验结果表明,克隆的该序列为一个完整的操纵子, 其中反向重复序列为一顺式作用因子,抑制orf2的表达,导致其低水平表达。 orf2为一反式作用因子,其微量表达产物反向调节orf1的表达。

关键词：苏云金芽胞杆菌伴胞晶体蛋白基因表达调控线虫

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生态安全型重组大豆根瘤菌的构建与浓缩液体新剂型的研制

生态安全型重组大豆根瘤菌的构建与浓缩液体新剂型的研制

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第十届全国杀虫微生物学术研讨会暨全国生物农药与化学生物学研究与产业化会议

作者：谢波吴红慧周俊初农业微生物学国家重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学

中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)腺嘌呤合成必需基因purL缺失后只结瘤、但不固氮的突变株。再导入在共生诱导启动子调控下的野生型purL基因以恢复其固氮能力,从而获得了具有生态安全性的重组根瘤菌,并对其在土壤中的存活能力进行了比... 详细信息

中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)腺嘌呤合成必需基因purL缺失后只结瘤、但不固氮的突变株。再导入在共生诱导启动子调控下的野生型purL基因以恢复其固氮能力,从而获得了具有生态安全性的重组根瘤菌,并对其在土壤中的存活能力进行了比较研究。为了减小重组根瘤菌中抗性基因向其它土壤微生物的转移性和接种根瘤菌在土壤中的成活性,本研究构建并筛选出费氏

关键词：大豆根瘤菌共生固氮中华根瘤菌存活能力缺陷型新剂型重组菌野生型菌株双交换安全型

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紫云英中5个共生固氮相关基因在盐及铵胁迫下的表达研究

紫云英中5个共生固氮相关基因在盐及铵胁迫下的表达研究

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2006年度学术研讨会

作者：陈大松李友国周俊初农业微生物学国家重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学

在豆科植物与根瘤菌进行共生固氮的过程中,豆科植物与根瘤菌中各有一系列基因参与了微生物与植物的相互作用。本研究室用抑制消减杂交法(suppressive subtractive hybridization)从紫云英 (Astragalus sinicus)中克隆到若干个在根瘤中... 详细信息

在豆科植物与根瘤菌进行共生固氮的过程中,豆科植物与根瘤菌中各有一系列基因参与了微生物与植物的相互作用。本研究室用抑制消减杂交法(suppressive subtractive hybridization)从紫云英 (Astragalus sinicus)中克隆到若干个在根瘤中特异表达的全序列基因。其中,基因AsG2411,

关键词：共生固氮相关基因紫云英

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一株海洋单胞菌的分离、鉴定和相关功能基因克隆

一株海洋单胞菌的分离、鉴定和相关功能基因克隆

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2006中国微生物学会第九次全国会员代表大会暨学术年会

作者：魏力方加玮周俊初李友国华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

对分离自沼泽地的一株细菌进行了形态观察、生理生化分析以及16S rDNA的克隆和序列分析,初步鉴定其分类地位归为海洋单胞菌属(Marinomonas)。该菌革兰氏染色呈阴性, 直杆状;基于16S rDNA序列的Blast分析表明,该菌与Marinomonas pontica... 详细信息

对分离自沼泽地的一株细菌进行了形态观察、生理生化分析以及16S rDNA的克隆和序列分析,初步鉴定其分类地位归为海洋单胞菌属(Marinomonas)。该菌革兰氏染色呈阴性, 直杆状;基于16S rDNA序列的Blast分析表明,该菌与Marinomonas pontica和Marinomonas dokdonensis的序列相似值分别为97％和95％;但海洋单胞菌属16s rDNA序列系统发育聚类分析结果显示,该菌与Marinomonas arctica聚为一类．其准确种属分类地位有待于进一步研究和鉴定。

关键词：海洋单胞菌分类地位单胞菌属插入片段酶基因基因克隆

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紫云英体细胞胚的诱导及植株再生研究

紫云英体细胞胚的诱导及植株再生研究

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2006中国微生物学会第九次全国会员代表大会暨学术年会

作者：李一星李友国周俊初华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

本研究从子叶柄上直接诱导出了体细胞胚,建立了一套紫云英体细胞胚的直接再生体系。实验结果表明:紫云英体细胞胚的诱导及再生频率受众多因素影响。对于包括2,4-D,BA 等生长因子,苗龄,蔗糖浓度,CH浓度,培养基组成等这些影响因素进行了研... 详细信息

本研究从子叶柄上直接诱导出了体细胞胚,建立了一套紫云英体细胞胚的直接再生体系。实验结果表明:紫云英体细胞胚的诱导及再生频率受众多因素影响。对于包括2,4-D,BA 等生长因子,苗龄,蔗糖浓度,CH浓度,培养基组成等这些影响因素进行了研究,得到了最佳的再生条件:在1.2％琼脂平板上培养5天的子叶柄体细胞胚诱导效率最高,达到66.7％,

关键词：体细胞胚紫云英植株再生

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