检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧兽医学报 2005年第10期36卷 1055-1063页

作者：何启盖方六荣吴斌刘正飞吴美洲肖少波金梅林陈焕春华中农业大学动物医学院预防兽医学湖北省重点实验室农业微生物学国家重点实验室武汉430070

为了提供有效的伪狂犬病疫苗,用鸡胚成纤维细胞扩大培养了PrV HB-98突变株(TK-/gG-/LacZ+),研制了伪狂犬病基因缺失疫苗,并对该疫苗经肌肉接种、经口等免疫途径的最小免疫剂量进行了测定,同时也对4批疫苗的安全性、效力、免疫期和保存... 详细信息

为了提供有效的伪狂犬病疫苗,用鸡胚成纤维细胞扩大培养了PrV HB-98突变株(TK-/gG-/LacZ+),研制了伪狂犬病基因缺失疫苗,并对该疫苗经肌肉接种、经口等免疫途径的最小免疫剂量进行了测定,同时也对4批疫苗的安全性、效力、免疫期和保存期进行了检测;同时将4批疫苗用于免疫23个猪场的母猪、新生仔猪和育肥猪进行区域试验。测定结果表明,疫苗经上述两种途径接种对不同阶段猪的最小免疫剂量均为105.0TCID50;10倍免疫剂量的疫苗对初生仔猪、15日龄仔猪和妊娠母猪是安全的,免疫猪能抵抗强毒的攻击;疫苗在4℃和-20℃下分别可保存6个月和12个月。对伪狂犬病毒抗体阴性的70日龄商品猪和种猪的免疫期为6个月。田间试验表明,4批猪伪狂犬病基因缺失疫苗安全有效,并可用于仔猪发病时的紧急接种。为猪伪狂犬病基因工程疫苗的制备与应用提供了有力的依据。

关键词：伪狂犬病基因疫缺失苗 PrY HK-98突变株安全性免疫原性区域试验

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微生物产生的土腥味化合物及其清除方法

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中国生物工程杂志 2005年第8期25卷 35-38页

作者：刘欣何进喻子牛华中农业大学农业微生物学国家重点实验室微生物农药国家工程研究中心武汉430070

自然界中存在许多具有土腥味的化合物,以Geosmin和MIB为代表,它们的嗅阈值极低,即便含量极微,也能嗅到浓烈的土腥味、土臭味、泥土味和霉味。这些土腥味挥发性物质主要是放线菌和藻类的次生代谢产物,不同生物具有不同的合成途径。它们... 详细信息

自然界中存在许多具有土腥味的化合物,以Geosmin和MIB为代表,它们的嗅阈值极低,即便含量极微,也能嗅到浓烈的土腥味、土臭味、泥土味和霉味。这些土腥味挥发性物质主要是放线菌和藻类的次生代谢产物,不同生物具有不同的合成途径。它们极易影响饮用水的品质,也给渔业和食品业带来极大危害。通过物理、化学和生物处理等方法,可以控制或清除土腥味化合物,其中微生物降解法是最有应用前景的净化方法。综述了土腥味化合物的来源、生物合成途径、分析检测技术及净化方法。

关键词：土腥味化合物放线菌蓝细菌藻类净化方法清除方法化合物微生物腥味生物合成途径

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副猪嗜血杆菌的分离培养和血清型鉴定

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华中农业大学学报 2005年第1期24卷 55-58页

作者：蔡旭旺刘正飞陈焕春吴斌金梅林 Pat Blackall 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 澳大利亚昆士兰州动物研究所

　从全国十多个省市送检的疑似患多发浆膜炎与关节炎猪的病料中分离到 32株细菌,进行了细菌形态观察、培养特性和生化特性鉴定;根据副猪嗜血杆菌 16SrRNA序列设计引物进行PCR扩增, 将 822bp扩增片段连入T 载体后测序, 再与GenBank(M7506... 详细信息

　从全国十多个省市送检的疑似患多发浆膜炎与关节炎猪的病料中分离到 32株细菌,进行了细菌形态观察、培养特性和生化特性鉴定;根据副猪嗜血杆菌 16SrRNA序列设计引物进行PCR扩增, 将 822bp扩增片段连入T 载体后测序, 再与GenBank(M75065 )中的序列进行比对,表明其与国外副猪嗜血杆菌菌株 16SrRNA序列的同源性为 97%以上,确定为副猪嗜血杆菌(Haemophilusparasuis, Hps)。将其中的 15株按Kieletein Rapp Gabriedson(KRG)琼脂扩散血清分型方法进行血清型鉴定,结果为血清 5型 3株、血清 4型 4株、血清 13型2株、血清 12型 2株,另外有 4株不能进行分型。该结果表明副猪嗜血杆菌在我国广泛存在。

关键词：副猪嗜血杆菌分离鉴定 PCR 血清型

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抗伪狂犬病毒Ea株单克隆抗体的制备及鉴定

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华中农业大学学报 2005年第3期24卷 222-225页

作者：汪招雄何启盖黄红亮刘正飞陈焕春华中农业大学动物医学院预防兽医学湖北省重点实验室农业微生物学国家重点实验室武汉430070

将伪狂犬病毒Ea株纯化后免疫雌性Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/O的骨髓瘤细胞融合,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)进行筛选,获得了2株抗PRV的单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为3G7E3和4A6F5,其细胞培养上清及小鼠腹水效价(ELISA)分别为1... 详细信息

将伪狂犬病毒Ea株纯化后免疫雌性Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/O的骨髓瘤细胞融合,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)进行筛选,获得了2株抗PRV的单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为3G7E3和4A6F5,其细胞培养上清及小鼠腹水效价(ELISA)分别为1:212、1:212及1:100×212、1:100×212。特异性试验和免疫荧光结果显示,3G7E3和4A6F5仅与PRV反应,而与PPV、PRRSV、JEV和HCV等病毒不发生交叉反应;用单抗建立的夹心ELISA试验能检出伪狂犬病毒。表明本研究所获得的2株单抗是PRV特异性的。这2株分泌抗PRV单抗的杂交瘤细胞株的获得为进一步建立准确快速的抗原检测方法奠定了基础。

关键词：伪狂犬病毒Ea株单克隆抗体间接免疫荧光试验

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毛细管电泳在细菌分离分析中的应用

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微生物学通报 2005年第3期32卷 125-128页

作者：祝松何进喻子牛华中农业大学生命科学技术学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070

介绍了近年来毛细管电泳技术在细菌分离分析方面的研究进展。毛细管电泳以细菌表面的特征信息为分离的基础,可以快速鉴定相应的菌株,可以对微生物进行快速定量,可以反映细菌特殊时期的生理特征,也可以研究微生物与分子之间的相互作用。... 详细信息

介绍了近年来毛细管电泳技术在细菌分离分析方面的研究进展。毛细管电泳以细菌表面的特征信息为分离的基础,可以快速鉴定相应的菌株,可以对微生物进行快速定量,可以反映细菌特殊时期的生理特征,也可以研究微生物与分子之间的相互作用。同时应用该技术可分离分析自然界不能纯培养的微生物。因而毛细管电泳分离与检测细菌方法的建立及其应用在分离科学和微生物学方面都有很大的实际意义。

关键词：细菌,微生物,毛细管电泳,分离,分析

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VHS蛋白,一种具有mRNA剪切活性的多种功能蛋白质

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生命的化学 2005年第2期25卷 100-103页

作者：马相如肖少波陈焕春中国地质大学环境学院武汉430074 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

单纯疱疹病毒UL41基因编码的病毒宿主关闭蛋白(VHS蛋白)是一种核酸酶,具有mRNA剪切活性,可引起宿主细胞蛋白质合成的快速关闭。通过干扰IFN-α/β介导的抗病毒免疫反应、降低宿主细胞MHCⅠ和MHCⅡ类分子的表达、减少免疫系统中病毒抗原... 详细信息

单纯疱疹病毒UL41基因编码的病毒宿主关闭蛋白(VHS蛋白)是一种核酸酶,具有mRNA剪切活性,可引起宿主细胞蛋白质合成的快速关闭。通过干扰IFN-α/β介导的抗病毒免疫反应、降低宿主细胞MHCⅠ和MHCⅡ类分子的表达、减少免疫系统中病毒抗原的提呈以及抑制宿主先天免疫反应等,VHS蛋白在α疱疹病毒的发病机制和免疫逃避过程中发挥重要作用。

关键词： VHS蛋白宿主关闭 UL41基因 mRNA降解

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豆油对藤仓赤霉菌978菌株产赤霉素GA_3发酵的影响

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华中农业大学学报 2005年第5期24卷 470-473页

作者：王继刚陈守文喻子牛华中农业大学生命科学技术学院农业微生物学国家重点实验室微生物农药国家工程研究中心武汉430070

在藤仓赤霉菌(Gibberella fujikuroi)978菌株产赤霉素GA3的发酵前期,研究了发酵初始培养基中添加不同浓度豆油对发酵过程脂肪酶活性的影响,结果表明:添加1.0%(W/V)的豆油,在发酵48～60 h仍能对脂肪酶进行诱导,从而维持较高的脂肪酶活性... 详细信息

在藤仓赤霉菌(Gibberella fujikuroi)978菌株产赤霉素GA3的发酵前期,研究了发酵初始培养基中添加不同浓度豆油对发酵过程脂肪酶活性的影响,结果表明:添加1.0%(W/V)的豆油,在发酵48～60 h仍能对脂肪酶进行诱导,从而维持较高的脂肪酶活性,有利于菌体利用补加的豆油合成赤霉素GA3.在此基础上进一步探讨了补油发酵过程中豆油补加时间和补加浓度对赤霉素GA3合成的影响,试验表明:补油发酵起始培养基中添加豆油1.0%(W/V)、发酵60 h补加4.0%(W/V)豆油能显著提高赤霉素GA3产量,与全淀粉发酵培养基发酵相比,在摇瓶发酵水平上赤霉素GA3的产量提高了23%,在10 L发酵罐上产量提高了40%.

关键词：藤仓赤霉菌赤霉素GA3 脂肪酶活性豆油补油发酵

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棒状链霉菌lat基因的中断对棒酸产量的影响

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微生物学报 2005年第4期45卷 500-503页

作者：王永华荆琛峰陶美凤杨博徐安龙华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 中山大学生命科学学院生物化学系广州510275 华南理工大学食品与生物工程学院广州510641

从棒状链霉菌中克隆1.8kb的lat基因片段,构建了基因置换质粒pXAL1和pXAL2。运用接合转移方法把中断载体导入棒状链霉菌中进行lat的中断,得到1株接合转移子AmrThios,命名为XAL863。通过Southern杂交分析及赖氨酸转氨酶活性测定,证明此菌... 详细信息

从棒状链霉菌中克隆1.8kb的lat基因片段,构建了基因置换质粒pXAL1和pXAL2。运用接合转移方法把中断载体导入棒状链霉菌中进行lat的中断,得到1株接合转移子AmrThios,命名为XAL863。通过Southern杂交分析及赖氨酸转氨酶活性测定,证明此菌株的lat基因被中断。通过发酵培养,HPLC方法检测棒酸含量,发现棒酸产量明显提高,约为原产量的1.8倍。

关键词：棒状链霉菌,棒酸,lat,基因中断

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苏云金芽胞杆菌基因工程菌WG-001和1125BG在盆栽土壤中的安全性评估

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安全与环境学报 2005年第6期5卷 118-122页

作者：张振宇李林任红燕吴晓明喻子牛孙明华中农业大学生命科学技术学院农业微生物学国家重点实验室微生物农药国家工程研究中心武汉430070

自从遗传改造微生物诞生以来,其安全性问题受到了持续关注和研究。本文报道了苏云金芽胞杆菌基因工程菌WG 001和1125BG在盆栽大白菜的土壤环境中的安全性评估结果。实验结果表明:当用工程菌WG 001和1125BG分别以1013cfu/cm2和1010cfu/cm... 详细信息

自从遗传改造微生物诞生以来,其安全性问题受到了持续关注和研究。本文报道了苏云金芽胞杆菌基因工程菌WG 001和1125BG在盆栽大白菜的土壤环境中的安全性评估结果。实验结果表明:当用工程菌WG 001和1125BG分别以1013cfu/cm2和1010cfu/cm2的高土壤密度喷洒盆栽大白菜后,工程菌菌数迅速上升而后逐渐下降,最后分别以相对较低的菌数水平(105cfu/g干土样和106cfu/g干土样)在实验土壤中稳定存在;对土壤中土著细菌群落在有限时间(15d)内产生了一定影响,而对土著真菌与放线菌无显著影响;未发现工程菌WG 001中特异基因发生丢失;未检测到工程菌WG 001和1125BG中特异基因(WG 001为cry1Aa和cry1Ac,1125BG为gfp)向土著细菌、真菌、放线菌和盆栽大白菜的水平转移。本文实验结果显示,高密度喷洒的两种工程菌未显著影响实验土壤环境,具有很高的安全性。同时发现以不同的喷药量喷洒两种工程菌后,在盆栽土壤中其存活水平、菌数降低的速率以及对土著细菌的影响能力都表现出不同的特点。

关键词：微生物学苏云金芽胞杆菌基因工程菌安全性评估盆栽实验

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球孢白僵菌胞外蛋白酶和几丁质酶活性与对亚洲玉米螟毒力的相关性分析

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华中农业大学学报 2005年第4期24卷 364-368页

作者：刘智辉陈守文郭志红喻子牛华中农业大学生命科学技术学院农业微生物学国家重点实验室微生物农药国家工程研究中心武汉430070 沈阳国家森林病虫害防治总站沈阳110034

以振荡摇瓶培养法培养17株球孢白僵菌(Beauveria bassiana),分析其总胞外蛋白酶和几丁质酶的产生水平,同时用这些菌株的分生孢子粉作为样品,用人工饲养的亚洲玉米螟5 d龄幼虫作为试虫,作毒力生物测定.并分析各个因素之间的相关性,验证... 详细信息

以振荡摇瓶培养法培养17株球孢白僵菌(Beauveria bassiana),分析其总胞外蛋白酶和几丁质酶的产生水平,同时用这些菌株的分生孢子粉作为样品,用人工饲养的亚洲玉米螟5 d龄幼虫作为试虫,作毒力生物测定.并分析各个因素之间的相关性,验证各个酶活性指标作为毒力的生物测定的替代或者补充指标的可能性.结果表明,菌株间同代毒力、酶活之间的差异比较大,LT50的变化范围为4.82～10.06 d,胞外蛋白酶活性的变化范围是0.86×10-2～3.66×10-2 IU/mL,胞外几丁质酶活性的变化范围是0.012～1.47 IU/mL.将后二者分别与各个菌株对玉米螟的LT50进行回归分析,结果发现胞外蛋白酶活性和胞外几丁质酶活性以及测定胞外蛋白酶活性时的干物质增重3个指标,与感染的亚洲玉米螟幼虫的死亡率及LT50的相关性都不显著,不能作为对亚洲玉米螟毒力的生物测定的替代或补充指标.

关键词：球孢白僵菌胞外蛋白酶胞外几丁质酶亚洲玉米螟毒力相关性

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