检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：彭永崇朱小洁陈颖钰郭爱珍华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物医学院华中农业大学国家动物结核病专业实验室

目的结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis）是导致人类结核病（Tuberculosis,TB）的主要病原菌;宿主先天免疫调节蛋白对结核分枝杆菌的致病起着不可估量的作用。本研究前期在结核分枝杆菌RD区蛋白中发现了一种具有抑制炎性作用的... 详细信息

目的结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis）是导致人类结核病（Tuberculosis,TB）的主要病原菌;宿主先天免疫调节蛋白对结核分枝杆菌的致病起着不可估量的作用。本研究前期在结核分枝杆菌RD区蛋白中发现了一种具有抑制炎性作用的蛋白Rv0309,并通过表达、纯化该蛋白在细胞水平对其进行了验证。为进一步在菌体水平研究其功能,确定该蛋白在结核分枝杆菌中的重要作用,我们对其进行了深入研究。方法本研究分别构建了表达Rv0309蛋白的重组耻垢分枝杆菌Msv0309和缺失该基因的牛分枝杆菌BCG缺失株BCGΔrv0309,通过Western blot确定了该蛋白在分枝杆菌的细胞亚定位,并对细菌的生长速率、菌落形态、细胞壁通透性的影响进行了研究。利用RAW264.7细胞感染模型,以MOI=10:1分别感染Msv0309、BCGΔrv0309以及野生型菌株,对不同时间点细胞炎性因子在mRNA和蛋白质水平的变化进行了检测,进一步分析了分枝杆菌的胞内存活以及炎性相关天然免疫细胞信号通路的磷酸化水平的变化。最后,利用BCGΔrv0309、回补菌株和野生株感染小鼠模型,通过体内感染实验验证了Rv0309在调控宿主固有免疫反应的作用。结果研究表明,Rv0309定位于分枝杆菌细胞壁并与细胞壁通透性有关。纯化的重组rRv0309蛋白能够抑制脂多糖诱导的IL-6的释放,并呈现剂量依赖性。与野生株相比,Msv0309能够显著抑制IL-6,IL-1β和TNF-α的产生。相比之下,与野生型BCG和回补菌株cBCGΔrv0309::rv0309相比,BCGΔrv0309强烈诱导这些细胞因子的表达。进一步研究表明,Rv0309是通过降低NF-κB p65/IκBα和MAPK ERK/JNK的磷酸化水平来抑制炎性细胞因子的产生。重要的是,表达Rv0309蛋白的BCG和耻垢分枝杆菌增强了巨噬细胞中分枝杆菌的存活率。体内研究结果表明,感染BCGΔrv0309的小鼠肺部在感染早期表达出高水平的TNF-α和IFN-γ,以及大量淋巴细胞和中性粒细胞,而在晚期感染中肺部载菌量和炎症病理损伤最小。结论 Rv0309蛋白能够抑制感染过程中宿主的炎症反应并提高感染后结核分枝杆菌的存活率,为结核疫苗的研发提供了理论基础。

关键词：结核分枝杆菌 Rv0309 牛分枝杆菌BCG 炎症致病性

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牛源A型多杀性巴氏杆菌的免疫检测

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分析科学学报 2020年第5期36卷 765-769页

作者：郑冰洁胡长敏胡涌刚郭爱珍华中农业大学生命科学技术学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

本文建立了一种有效捕获和快速检测牛源A型多杀性巴氏杆菌(Pm)的免疫检测方法。该方法将本实验室筛选的一株单克隆抗体(Mc Ab)作为捕获探针偶联到磁珠表面构建免疫磁珠(IMB),并用于特异性捕获牛源A型Pm,辣根过氧化物酶(HRP)标记的另一株... 详细信息

本文建立了一种有效捕获和快速检测牛源A型多杀性巴氏杆菌(Pm)的免疫检测方法。该方法将本实验室筛选的一株单克隆抗体(Mc Ab)作为捕获探针偶联到磁珠表面构建免疫磁珠(IMB),并用于特异性捕获牛源A型Pm,辣根过氧化物酶(HRP)标记的另一株McAb作为检测探针与捕获的牛源A型Pm相互作用,建立了一种基于磁珠的“双抗夹心”免疫显色方法实现该菌的快速检测。在最优条件下,牛源A型Pm在1.0×10~5~1.0×10~7CFU/m L范围内与信号强度呈良好的线性关系(R^2=0.99),检测限(S/N=3)为1.0×10~5CFU/m L。本方法具有良好的特异性和重现性,对模拟实际样品的检测结果取得了令人满意的效果。

关键词：免疫磁珠多杀性巴氏杆菌牛免疫检测

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不同免疫背景母猪血清中猪流行性腹泻病毒中和抗体效价评估

不同免疫背景母猪血清中猪流行性腹泻病毒中和抗体效价评估

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十九次全国学术研讨会

作者：雷铭楷周昕悦吴昊库旭钢范盛先何启盖华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室华中农业大学动物疫病诊断中心检测实验室

引言猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的一种急性、高度传染性肠道疾病,可导致7日龄内仔猪严重腹泻、脱水,死亡率高达100%,给养猪业造成了巨大经济损失[1]。虽然G1型PED疫苗为该病的防控做出巨大贡献,但是,2010年后我...

引言猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的一种急性、高度传染性肠道疾病,可导致7日龄内仔猪严重腹泻、脱水,死亡率高达100%,给养猪业造成了巨大经济损失[1]。虽然G1型PED疫苗为该病的防控做出巨大贡献,但是,2010年后我国出现的G2型变异毒株导致很多使用G1型疫苗的猪场出现严重的PED疫情。

关键词：

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河北省一株猪流行性腹泻病毒S1基因的遗传变异与重组分析

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黑龙江畜牧兽医 2021年第12期 56-62页

作者：翟新国周琼琼郑培培李庆阳陈小霞陈琦石德时李朋辉河北工程大学生命科学与食品工程学院河北邯郸056038 华中农业大学动物医学院/农业微生物学国家重点实验室武汉430070 河北工程大学人事处河北邯郸056038 河北大北农农牧食品有限公司河北衡水053900

为了解近年来河北地区猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)的流行性和遗传变异性,试验采集河北省某发病猪场仔猪的小肠组织,提取RNA,对S1基因进行RT-PCR,对扩增的阳性产物进行克隆与测序,对测序结果进行同源性分析... 详细信息

为了解近年来河北地区猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)的流行性和遗传变异性,试验采集河北省某发病猪场仔猪的小肠组织,提取RNA,对S1基因进行RT-PCR,对扩增的阳性产物进行克隆与测序,对测序结果进行同源性分析,对S1蛋白进行亲水性、表面可触性、抗原指标及T细胞基序分析,利用MEGA X 10.0.5软件对PEDV S1基因进行最大似然法(maximum likelihood, ML)遗传进化分析,利用RDP4软件进行PEDV S1基因的重组分析。结果表明:成功克隆出pMD18-T-PEDV-S1,将该毒株命名为HB/HS/2019株,其包含N末端域和C末端域的S1基因近全长序列,长度为2 163 bp,编码721个氨基酸;成功预测S1潜在的B细胞表位和T细胞基序。经同源性分析,HB/HS/2019与四川株CH/SCJY/2018 S1基因的相似性最高,为99.8%;与比利时CV777毒株的基因相似性为91.4%,存在插入和缺失现象。经进化分析,40株PEDV分为GⅠ群和GⅡ群,HB/HS/2019属于GⅡ群。在GⅡ群内,我国流行株均为2010年后出现,HB/HS/2019与市售疫苗株AJ1102和LW/L亲缘关系较近,与CV777和attenuated CV777株亲缘关系较远。经重组分析,未发现HB/HS/2019 S1序列含有潜在的重组事件,发现GⅠ群和GⅡ群的毒株之间S1基因存在3个重组事件。说明HB/HS/2019 S1基因与2010年以后我国报道的变异毒株亲缘关系较近,虽然该基因存在一些核酸位点变异,但是尚未发生基因重组事件。

关键词：河北省猪流行性腹泻病毒 S1基因遗传变异重组分析

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猪传染性胸膜肺炎的防控进展

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养殖与饲料 2021年第5期20卷 77-80页

作者：何啟云闫康贝为成华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 广西扬翔农牧有限责任公司广西贵港537100 华中农业大学动物医学院武汉430070 生猪健康养殖协同创新中心武汉430070

猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌引起的猪的一种严重的呼吸道传染病,导致养猪业严重的经济损失,该病在世界各地广泛分布,在我国的流行日益严重。该病主要经呼吸道传播发病,猪和带菌猪是主要传染源;病猪临床表现以呼吸道症状为主,... 详细信息

猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌引起的猪的一种严重的呼吸道传染病,导致养猪业严重的经济损失,该病在世界各地广泛分布,在我国的流行日益严重。该病主要经呼吸道传播发病,猪和带菌猪是主要传染源;病猪临床表现以呼吸道症状为主,分为急性型、亚急性型和慢性型3种;急性和亚急性病例以纤维素性出血性胸膜肺炎为特点,慢性病例以纤维素性坏死性胸膜肺炎为特征和隐性感染。随着养猪业的规模化发展,该病造成的危害日益严重,因此如何有效防控该病的发生,以此减少经济损失非常重要。本文就近年来猪传染性胸膜肺炎的防控进展进行综述,为提高猪传染性胸膜肺炎的防控效果、减少经济损失提供理论参考。

关键词：猪传染性胸膜肺炎胸膜肺炎放线杆菌防控

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2018年湖北省猪源沙门菌的分离鉴定及耐药性分析

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中国兽医学报 2020年第6期40卷 1142-1147,1152页

作者：罗郑彭忠杨迪王湘如杨斓杨丹王斐华琳陈焕春吴斌华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室生猪健康养殖协同创新中心湖北武汉430070

为了解规模化猪场沙门菌的流行和耐药情况,本研究于2018年10-12月采集湖北武汉、钟祥、大冶、襄阳、黄冈地区5个规模化猪场各年龄段猪的肛门拭子进行沙门菌的分离鉴定,并对所分离的菌株进行耐药表型分析和耐药基因检测。采用沙门菌选择... 详细信息

为了解规模化猪场沙门菌的流行和耐药情况,本研究于2018年10-12月采集湖北武汉、钟祥、大冶、襄阳、黄冈地区5个规模化猪场各年龄段猪的肛门拭子进行沙门菌的分离鉴定,并对所分离的菌株进行耐药表型分析和耐药基因检测。采用沙门菌选择性培养基进行细菌的分离培养,并通过生化试验和PCR扩增invA基因确定所分离的细菌为沙门菌;采用玻片凝集法对所分离的沙门菌进行血清分型;采用微量肉汤稀释法进行6种抗菌药物的耐药表型检测,并采用PCR方法对相关的15种耐药基因的携带情况进行检测。结果显示,从采集的640份肛门拭子分离鉴定出39株沙门菌,分离率为6.09%,其中来源于保育猪的样品中沙门菌的分离率最高,为16.25%;所分离沙门菌的血清型主要为鼠伤寒沙门菌(69.23%),其次是德比沙门菌(15.38%),其他血清型所占比例为15.38%。药敏试验发现所分离的沙门菌至少对1种抗生素耐药,其中94.87%的分离株对氨苄西林表现出耐药性,对氯霉素和卡那霉素表现出耐药性的分离株所占的比例分别为58.97%和53.84%,仅有20.51%的分离株对阿奇霉素表现出耐药性;此外,53.84%的菌株对3种以上的受试抗生素同时表现出抗性,其中20.51%的分离株同时对5种受试抗生素表现出耐药性。用PCR方法共检测出12种耐药基因,其中blaCMY(79.49%)、aph(3′)-Ⅱ(76.92%)、catA1(76.92%)的检出率较高。研究结果为湖北地区猪场制定沙门菌病的综合防控措施提供参考。

关键词：沙门菌分离鉴定血清型耐药性耐药基因

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一株重组类NADC30猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离鉴定及基因组分析

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中国兽药杂志 2021年第8期55卷 1-11页

作者：杨康袁林茂张维达李自力农业微生物学国家重点实验室华中农业大学动物医学院湖北省预防兽医学重点实验室武汉430070 上海新农饲料股份有限公司上海201600

为分离上海地区猪繁殖与呼吸综征病毒(PRRSV)并分析其分子遗传进化关系,对来自该地区某猪场疑似PRRSV感染病猪的2份肺样进行RT-PCR检测,阳性样品接种猪肺泡巨噬细胞(PAMs),将盲传3代后出现细胞病变的PAMs经间接免疫荧光鉴定,通过RT-PCR... 详细信息

为分离上海地区猪繁殖与呼吸综征病毒(PRRSV)并分析其分子遗传进化关系,对来自该地区某猪场疑似PRRSV感染病猪的2份肺样进行RT-PCR检测,阳性样品接种猪肺泡巨噬细胞(PAMs),将盲传3代后出现细胞病变的PAMs经间接免疫荧光鉴定,通过RT-PCR扩增分离株全基因组序列,测序后与GenBank登录的参考株全基因组序列进行同源性及遗传进化分析,分析了分离株Nsp2、GP5氨基酸序列的遗传进化关系,并对分离株做了重组分析和细胞嗜性试验。结果显示,成功分离出1株PRRSV,命名为SH2019,其全基因组开放阅读框大小为14677 bp,分离株与NADC30的核苷酸同源性最高,属于目前流行于中国的类NADC30 PRRSV,其Nsp2存在131个氨基酸缺失的分子特征;分离株是以谱系1毒株为主要亲本,以谱系3、谱系5或谱系8毒株为次要亲本,在12601~12901 nt(ORF2~ORF4)发生了基因重组的重组毒株,分离株不能感染Marc-145细胞。本研究分离鉴定一株重组类NADC30 PRRSV,可为该地区猪繁殖与呼吸综合征的防控提供参考。

关键词：类NADC30猪繁殖与呼吸综合征病毒分离鉴定基因重组:细胞嗜性

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猪圆环病毒2型感染PK-15细胞差异表达miRNA和mRNA互作网络

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畜牧兽医学报 2019年第1期50卷 115-125页

作者：李畅李静何启盖华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070

旨在筛选猪圆环病毒2型感染猪肾上皮细胞(PK-15)后差异表达miRNA和mRNA,并探究miRNA和mRNA之间的互作关系。使用茎环定量PCR检测多个热点miRNA在PCV2感染组和未接种病毒组之间的差异表达水平以发现差异表达miRNA,分析PCV2感染后第12小... 详细信息

旨在筛选猪圆环病毒2型感染猪肾上皮细胞(PK-15)后差异表达miRNA和mRNA,并探究miRNA和mRNA之间的互作关系。使用茎环定量PCR检测多个热点miRNA在PCV2感染组和未接种病毒组之间的差异表达水平以发现差异表达miRNA,分析PCV2感染后第12小时的蛋白质组学研究结果(GEO登录号:GSE71945)以获得差异表达mRNA,并分析差异表达miRNA和mRNA之间的互相作用关系。结果显示,在PCV2感染后第12小时miR-10b、miR-128、miR-155-5p、miR-21、miR-29b、miR-361-3p等表达量显著性变化,使用miRecords预测其靶基因,分别发现7 105、9 741、7 451、7 183、7 971、8 793个靶基因;PCV2感染后第12小时共有158个差异表达mRNA,分属于多种细胞结构成分并参与多条重要的细胞生物途径,且差异miRNA的靶基因和差异mRNA之间有大量的交集基因。上述结果表明,PCV2感染能导致细胞内多种miRNA差异表达,造成miRNA的靶基因表达紊乱,进而影响细胞正常的生命进程。

关键词：猪圆环病毒2型 PK-15细胞 miRNA mRNA 互作关系

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鸡马立克氏病病毒和疫苗毒株PCR诊断方法的建立及其应用

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现代畜牧兽医 2022年第8期 50-54页

作者：周冬玉李国红靳泽华徐巧霞徐蓉张安定华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 湖北省预防兽医学重点实验室生猪健康养殖协同创新中心湖北武汉430070 农业农村部兽医诊断制剂创制重点实验室湖北武汉430070 武汉科前生物股份有限公司湖北武汉430070 科技部动物疫病联合研究中心湖北武汉430070

研究旨在快速有效地诊断鸡马立克氏病(MD),区分MD血清Ⅰ型病毒(MDV-Ⅰ)与疫苗毒株。试验对Gen Bank发表的140余株MDV序列进行全基因组比对,选定MDV-Ⅰ型特有的meq基因设计1对引物,通过优化退火温度等条件建立了MDV-Ⅰ的PCR诊断方法,评... 详细信息

研究旨在快速有效地诊断鸡马立克氏病(MD),区分MD血清Ⅰ型病毒(MDV-Ⅰ)与疫苗毒株。试验对Gen Bank发表的140余株MDV序列进行全基因组比对,选定MDV-Ⅰ型特有的meq基因设计1对引物,通过优化退火温度等条件建立了MDV-Ⅰ的PCR诊断方法,评估该方法的特异性、灵敏度及重复性。结果显示,设定退火温度64℃、35个循环时,以MDV-Ⅰ型毒株为模板可扩增得到286 bp的片段;以CVI988或814疫苗毒株为模板时,可扩增得到463 bp的片段;该方法特异性强、灵敏度高,扩增结果稳定,可区分MDV-Ⅰ型毒株和疫苗毒株。应用该方法诊断1例免疫后仍有MD症状的鸡,可同时扩增约286和463 bp的片段;2个片段的测序结果显示,扩增出的片段分别与MDV-Ⅰ型毒株和疫苗毒株相匹配。研究表明,试验建立的PCR方法可快速有效地诊断MDV-Ⅰ型毒株感染鸡并筛选免疫失败的鸡群。

关键词：鸡马立克氏病马立克氏病病毒疫苗毒聚合酶链式反应

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请勿谈“冠”色变——人和动物冠状病毒的那些事

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中国奶牛 2020年第2期 1-4页

作者：祁明普郭爱珍陈颖钰胡长敏华中农业大学动物医学院武汉430070 农业微生物学国家重点实验室华中农业大学武汉430070

新型冠状病毒疫情的爆发和持续扩散已经对我国经济、社会和人民生活产生了一定的影响。本文就人们关心的几个问题进行了探讨和澄清,如:冠状病毒家族有哪些成员,目前流行新型冠状病毒与已知人和动物冠状病毒间有什么关系,新型冠状病毒可... 详细信息

新型冠状病毒疫情的爆发和持续扩散已经对我国经济、社会和人民生活产生了一定的影响。本文就人们关心的几个问题进行了探讨和澄清,如:冠状病毒家族有哪些成员,目前流行新型冠状病毒与已知人和动物冠状病毒间有什么关系,新型冠状病毒可能的来源,养殖场在当前新冠疫情下如何维持生产和降低损失等,以期增加人们对新型冠状病毒的认识,重视当前疫情,同时减少不必要的"新冠"恐惧。

关键词：新型冠状病毒冠状病毒分类基因相似度来源宿主措施

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