检索结果-内蒙古大学图书馆

MicroRNA-107负向调控结核分枝杆菌牛源人型分离株介导的巨噬细胞炎症反应

中国奶牛 2019年第11期 9-14页

作者：朱一帆陈颖钰刘晗索朗斯珠牛家强郭爱珍西藏农牧学院动物科学学院林芝860000 华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

MicroRNA(miRNA)是一类长度仅为19~22个核苷酸的单链非编码小分子RNA,在多种疾病中发挥着重要作用。本实验室前期从一结核牛体内成功分离到一株结核分枝杆菌1458株,并基于该菌建立了体外感染模型。将1458株感染巨噬细胞系THP-1后进行RNA... 详细信息

MicroRNA(miRNA)是一类长度仅为19~22个核苷酸的单链非编码小分子RNA,在多种疾病中发挥着重要作用。本实验室前期从一结核牛体内成功分离到一株结核分枝杆菌1458株,并基于该菌建立了体外感染模型。将1458株感染巨噬细胞系THP-1后进行RNAseq分析,发现miR-107呈现显著下调表达。为确定miR-107在结核分枝杆菌(***)1458株与巨噬细胞互作中的功能及其相关机制,本研究利用*** 1458株体外感染THP-1细胞,检测了miR-107感染*** 1458株及其热灭活状态下的动态变化,及感染相关信号通路(NF-Κb、P38、JNK和PI3K)调控途径。进一步确定了miR-107所诱发的IL-1β、IL-10、TNF-α和IL-6表达水平及*** 1458株对THP-1细胞侵袭能力的影响。结果显示,*** 1458株感染可显著下调THP-1细胞中miR-107的表达(P<0.001);并受到PI3K信号通路的调控;此外miR-107还能够显著抑制*** 1458株感染的THP-1细胞炎性因子IL-1β(P<0.05)、IL-10(P<0.05)、TNF-α(P<0.05)和IL-6(P<0.01)mRNA水平的表达,并显著促进*** 1458株对THP-1细胞的入侵(P<0.001)。结论:*** 1458株感染可显著下调THP-1细胞中miR-107的表达,依赖于PI3K信号通路,miR-107下调表达能够促进*** 1458株感染诱导的炎性细胞因子表达,抑制*** 1458株的入侵。本研究揭示了巨噬细胞抵抗***感染的新型防御机制。

关键词：结核分枝杆菌巨噬细胞 MicroRNA-107 炎性因子侵袭

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一例猪巴氏杆菌病的诊断与防控

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养猪 2019年第6期 94-96页

作者：王久红孙琪于学祥张丙周库旭钢范盛先何启盖华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学动物疫病诊断中心检测实验室武汉430070

猪巴氏杆菌病(Swine pasteurellosis)是由多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida, Pm)引起猪的一种散发性、热性传染病,常以败血症和炎性出血过程为主要特征。巴氏杆菌病的暴发和流行给养猪业造成了巨大的经济损失。研究对湖北某黑猪场... 详细信息

猪巴氏杆菌病(Swine pasteurellosis)是由多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida, Pm)引起猪的一种散发性、热性传染病,常以败血症和炎性出血过程为主要特征。巴氏杆菌病的暴发和流行给养猪业造成了巨大的经济损失。研究对湖北某黑猪场一例巴氏杆菌病进行诊断,通过猪场实地调查、临床检查、病理剖检和实验室检测,最终确诊该场为A型多杀性巴氏杆菌感染所致发病。并通过药敏试验,筛选敏感药物,改善猪舍环境等一系列针对性措施,效果显著。该案例可为猪场巴氏杆菌病的诊断和防控提供参考。

关键词：猪巴氏杆菌病诊断防控

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多杀性巴氏杆菌转铁结合蛋白TbpA的原核表达及免疫原性

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中国兽医学报 2019年第6期39卷 1151-1156页

作者：王斐张洪峰梁婉彭忠陈焕春吴斌华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室/生猪健康养殖协同创新中心湖北武汉430070 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室湖北武汉430070

为研究多杀性巴氏杆菌转铁结合蛋白TbpA的免疫原性,本试验利用PCR从牛源A型多杀性巴氏杆菌HB01基因组中扩增了TbpA的编码基因tbpA,并将其克隆至原核表达载体pET-30α(+)上,转化至大肠杆菌BL21中进行诱导表达。SDS-PAGE检测结果显示,rTbp... 详细信息

为研究多杀性巴氏杆菌转铁结合蛋白TbpA的免疫原性,本试验利用PCR从牛源A型多杀性巴氏杆菌HB01基因组中扩增了TbpA的编码基因tbpA,并将其克隆至原核表达载体pET-30α(+)上,转化至大肠杆菌BL21中进行诱导表达。SDS-PAGE检测结果显示,rTbpA蛋白成功表达。Western blot证实该蛋白能够与抗多杀性巴氏杆菌HB01血清发生阳性反应。将rTbpA免疫小鼠后,分别于免疫后14,28 d采血,利用ELISA试验检测血清中的抗体滴度,结果显示血清中的抗rTbpA蛋白的IgG抗体显著升高(P<0.05)。感染试验结果显示,免疫rTbpA蛋白能够保护70%的小鼠抵抗多杀性巴氏杆菌的致死性攻击,并且病理切片结果表明,免疫小鼠的肺部损伤相对于对照组小鼠显著降低。本试验为筛选新型的多杀性巴氏杆菌免疫原性蛋白提供依据。

关键词：牛源A型多杀性巴氏杆菌转铁结合蛋白克隆表达小鼠

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仔猪吃初乳前后血清差异蛋白的鉴定和分析

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中国兽医学报 2019年第8期39卷 1577-1580,1590页

作者：徐守兴卢炳州刘华南王国庆吴斌张克山郑海学刘湘涛华中农业大学动物医学学院农业微生物学国家重点实验室预防兽医学湖北省重点实验室湖北武汉430070 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

通过SDS-PAGE方法对仔猪吃初乳前后血清进行检测,找到差异蛋白后,利用LC-MS/MS技术对差异蛋白条带进行鉴定,并使用生物信息学手段对鉴定的蛋白进行GO和KEGG分析。结果显示,仔猪吃初乳前后有很明显的差异蛋白条带,共鉴定出338个蛋白,GO和... 详细信息

通过SDS-PAGE方法对仔猪吃初乳前后血清进行检测,找到差异蛋白后,利用LC-MS/MS技术对差异蛋白条带进行鉴定,并使用生物信息学手段对鉴定的蛋白进行GO和KEGG分析。结果显示,仔猪吃初乳前后有很明显的差异蛋白条带,共鉴定出338个蛋白,GO和KEGG分析结果表明,差异蛋白的功能主要和生长发育和免疫保护相关。这为进一步研究初乳调控仔猪生长发育和免疫调控奠定基础。

关键词：仔猪初乳血清差异蛋白鉴定分析

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猪Beclin1基因调控伪狂犬病病毒诱导细胞自噬和凋亡的机制分析

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畜牧兽医学报 2018年第6期49卷 1274-1281页

作者：胡林南良康张敏许苏童杨了寒李帅峰王凯刘正飞张淑君华中农业大学动物科学技术学院农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室武汉430070 华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070

旨在研究伪狂犬病病毒(PRV)感染后细胞自噬和凋亡情况,进一步分析鉴定PRV感染条件下与Beclin1互作的猪宿主凋亡家族蛋白。利用免疫印迹(WB)方法检测PRV感染细胞的自噬水平;利用流式细胞术探讨凋亡水平;最后利用免疫共沉淀试验分析PRV感... 详细信息

旨在研究伪狂犬病病毒(PRV)感染后细胞自噬和凋亡情况,进一步分析鉴定PRV感染条件下与Beclin1互作的猪宿主凋亡家族蛋白。利用免疫印迹(WB)方法检测PRV感染细胞的自噬水平;利用流式细胞术探讨凋亡水平;最后利用免疫共沉淀试验分析PRV感染PK-15细胞中Beclin1与Bcl-2和Bcl-xL的结合水平。结果显示,PRV感染导致LC3-Ⅱ的表达明显增多,而P62显著下降,且AKT(S473)磷酸化水平显著减少;其次,PRV感染诱导细胞凋亡且显著上调剪切型Caspase-9/8的表达水平;最后,免疫共沉淀结果显示PRV感染条件下Beclin1能与Bcl-2和Bcl-xL结合,但结合的水平明显降低。PRV感染诱导的细胞自噬可能依赖于PI3K-Ⅰ/AKT信号通路,PRV感染可能同时激活了线粒体凋亡途经和死亡受体途经从而诱导细胞凋亡,而PRV感染诱导的细胞自噬和细胞凋亡可能通过抑制Beclin1和Bcl-2、Bcl-xL结合而相互关联。

关键词： PRV 细胞自噬细胞凋亡 Beclin1

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牛结核病免疫学诊断研究进展

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中国兽医学报 2018年第6期38卷 1250-1254,1259页

作者：彭永崇朱小洁王子健陈颖钰郭爱珍华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

牛结核病是一种严重危害养牛业、食品安全和公共卫生的人兽共惠传染病。由于检疫和扑杀是目前控制牛结核病的基本策略，检测技术成为影响牛结核病控制效果的重要因素。理想的检测方法应具有准确、简便、高效、成本低、对动物干扰小、结... 详细信息

牛结核病是一种严重危害养牛业、食品安全和公共卫生的人兽共惠传染病。由于检疫和扑杀是目前控制牛结核病的基本策略，检测技术成为影响牛结核病控制效果的重要因素。理想的检测方法应具有准确、简便、高效、成本低、对动物干扰小、结果可追溯等特点。当前的法定检疫方法为结核菌素皮内变态反应，该方法具有受环境分枝杆菌干扰、诊断特异性低、费时费力、对动物干扰大、结果判断主观性强、不可回溯等缺陷。一些牛结核实验室诊断技术克服了以上缺点，可与皮试法联用或单独使用。新型诊断抗原仍在不断被发掘，新型材料也被不断用于牛结核病诊断技术中。现对相关进展进行了归纳和综述，以期为牛结核病免疫学诊断的合理应用及深入研究提供参考。

关键词：牛结核牛分枝杆菌免疫学诊断抗原人兽共患病

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SIGIRR对奶牛乳腺上皮细胞TLR4致炎信号通路的负调控作用

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中国兽医学报 2018年第2期38卷 404-410页

作者：周秋格刘畅赖金伦郭爱珍胡长敏华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉450070

旨在探究SIGIRR对奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）TLR4信号通路的负调控作用。构建SIGIRR—pEGFP真核表达载体，脂质体法转染HEK293T及BMECs，荧光显微镜观察及Westernblot验证融合蛋白SIGIRR—pEGFP的表达；LPS刺激转染后BMECs，检测TLR4及... 详细信息

旨在探究SIGIRR对奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）TLR4信号通路的负调控作用。构建SIGIRR—pEGFP真核表达载体，脂质体法转染HEK293T及BMECs，荧光显微镜观察及Westernblot验证融合蛋白SIGIRR—pEGFP的表达；LPS刺激转染后BMECs，检测TLR4及其信号通路分子IRAK1、IRAK4和TRAF6的变化，以及下游炎性因子IL-6、IL-8、IL-18和TNF-a的表达量。结果显示，成功构建SIGIRR-pEGFP真核表达载体，荧光检测重组质粒转染到HEK293T和BMECs中；Westernblot鉴定融合蛋白SIGIRR—pEGFP表达正确；重组质粒转染BMECs后，SIGIRR表达量较转染空载质粒组及空白未转染组显著升高（P〈0．01）；炎性因子IL-6、IL-8、IL-10、TNFa、TLR4及下游信号分子IRAK1、IRAK4、TRAF6表达量显著降低（P〈0．01），转染空载质粒组与空白未转染组相比仅IRAKl表达量有差异（P〈0．05）。结果表明，本试验通过研究牛SIGIRR在BMECs中的作用，证实sIGIRR基因具有炎性负调控LPS-TLR4信号通路的作用，具有潜力成为临床治疗奶牛乳腺炎的新靶标。

关键词：奶牛乳腺炎乳腺上皮细胞 SIGIRR TLR4信号通路负性调控

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畜禽中药-益生菌复合微生态制剂的研究进展

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生物工程学报 2019年第6期35卷 972-987页

作者：王瑞蔡文涛王喜亮高瑾黄曼湖北大学生命科学学院省部共建生物催化与酶工程国家重点实验室药物高通量筛选技术国家地方联合工程研究中心生物资源绿色转化湖北省协同创新中心中药生物技术省重点实验室湖北武汉430062 华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北省预防兽医学重点实验室湖北武汉430070

畜禽中药-益生菌复合微生态制剂是指采用现代发酵技术将益生菌与中药联合发酵,发挥两者的协同作用,以提高畜禽免疫功能、保护畜禽健康的一种新型动物微生态制剂。文中通过调研近几年关于益生菌及中药微生态制剂等方面的文献,综述了畜禽... 详细信息

畜禽中药-益生菌复合微生态制剂是指采用现代发酵技术将益生菌与中药联合发酵,发挥两者的协同作用,以提高畜禽免疫功能、保护畜禽健康的一种新型动物微生态制剂。文中通过调研近几年关于益生菌及中药微生态制剂等方面的文献,综述了畜禽中药-益生菌复合微生态制剂的产生背景及菌种特点,并重点阐述了畜禽中药-益生菌复合微生态制剂的作用机制、在畜禽养殖中的应用及存在问题与建议,以期为畜禽中药-益生菌复合微生态制剂的深入研究提供参考和依据。

关键词：益生菌中药协同发酵微生态制剂

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NOD1/2及其在奶牛乳腺炎中作用研究进展

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动物医学进展 2018年第3期39卷 75-78页

作者：刘畅曹钰晗赵春阳徐璐尧张文劲赖金伦陈颖钰郭爱珍胡长敏华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

奶牛乳腺炎是严重危害养牛业的常见疾病,近年来对奶牛乳腺炎的研究不断深入,关于乳腺炎天然免疫进程的研究也不断深化。核苷酸结合寡聚化结构域蛋白(NOD)是天然免疫的重要组成部分,不断有报道称NOD蛋白参与或调控了乳腺炎天然免疫进程,... 详细信息

奶牛乳腺炎是严重危害养牛业的常见疾病,近年来对奶牛乳腺炎的研究不断深入,关于乳腺炎天然免疫进程的研究也不断深化。核苷酸结合寡聚化结构域蛋白(NOD)是天然免疫的重要组成部分,不断有报道称NOD蛋白参与或调控了乳腺炎天然免疫进程,论文以NOD1/2为出发点从NOD家族的结构、NOD1与NOD2的异同、NOD1/2参与天然免疫进程以及NOD1/2与乳腺炎的关系等方面总结相关研究进展,为深入了解NOD1/2及其在奶牛乳腺炎中的作用,给乳腺炎相关治疗方法的优化及相关药物的研发提供参考。

关键词： NOD1/2 天然免疫奶牛乳腺炎

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牛支原体膜蛋白的研究进展

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中国兽医学报 2018年第10期38卷 2011-2014,2019页

作者：刘畅曹钰晗赵春阳徐璐尧张文劲唐鑫赖金伦陈颖钰郭爱珍胡长敏华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

支原体（Mvfoplasma）是目前世界上最小的、进行自我复制的、且能在无生命培养基中生长的原核生物，结构简单．缺乏细胞壁。能通过0．22微米的细菌滤器。支原体种类繁多，对人类和动植物造成的危害大，且易污染体外培养的细胞，给科研... 详细信息

支原体（Mvfoplasma）是目前世界上最小的、进行自我复制的、且能在无生命培养基中生长的原核生物，结构简单．缺乏细胞壁。能通过0．22微米的细菌滤器。支原体种类繁多，对人类和动植物造成的危害大，且易污染体外培养的细胞，给科研工作带来多重不利影响。

关键词：牛支原体膜蛋白结构功能应用

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