检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医学报 2021年第1期41卷 192-198页

作者：李雨芮刘晓雅张文劲陈颖钰郭爱珍胡长敏华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

免疫层析技术是一类以纳米级标记物探针作为示踪和标记物的检测技术。此类技术除了具有操作简易、反应迅速和时耗较短等特点外,还兼具低成本和高特异性,尤其适用于临场检测。免疫层析技术的发展随着时代需求也在不断加速和更新,现以经... 详细信息

免疫层析技术是一类以纳米级标记物探针作为示踪和标记物的检测技术。此类技术除了具有操作简易、反应迅速和时耗较短等特点外,还兼具低成本和高特异性,尤其适用于临场检测。免疫层析技术的发展随着时代需求也在不断加速和更新,现以经典的胶体金免疫层析技术为基础,综述时间分辨与镧系元素荧光免疫层析、荧光微球免疫层析、量子点免疫层析、纳米模拟酶免疫层析及结合新技术的免疫层析的原理、研究进展和临床应用,并对免疫层析技术的未来发展做出展望。

关键词：胶体金免疫层析荧光标记侧向免疫层析

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比较初乳乳房拭子与仔猪睾丸处理液对6种猪繁殖障碍相关病毒的监测效果

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畜牧与兽医 2023年第9期55卷 106-112页

作者：祁松张哲玮朱晶罗宇山董德文贝为成华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 广西翔仪生物工程有限公司广西南宁530000 湖北洪山实验室湖北武汉430070 生猪健康养殖协同创新中心湖北武汉430070

为探究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪细小病毒(PPV)和猪圆环病毒3型(PCV-3)这6种与猪繁殖障碍相关的病毒在母猪初乳乳房拭子和仔猪睾丸处理液样品中的检出率及2种样品... 详细信息

为探究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪细小病毒(PPV)和猪圆环病毒3型(PCV-3)这6种与猪繁殖障碍相关的病毒在母猪初乳乳房拭子和仔猪睾丸处理液样品中的检出率及2种样品中的检出差异,采用qPCR的方法对河南某规模猪场的母猪初乳乳房拭子和3~5日龄仔猪睾丸处理液进行检测。结果:在随机不分胎次采集的113份(452头母猪的4混1样)初乳乳房拭子样品中,PCV-2、PCV-3和PPV的检出率分别为0、26.55%和4.42%;在随机不分胎次采集的171份(684窝仔猪的4混1样)仔猪睾丸处理液样品中,PCV-2、PCV-3和PPV的检出率分别为0、5.85%和1.17%。在单独检测的38头1胎母猪的初乳乳房拭子样品中,PCV-2、PCV-3和PPV的检出率分别为2.63%、55.26%和2.62%;对应的3~5日龄仔猪睾丸处理液样本中,PCV-2、PCV-3和PPV的检出率分别为0、44.74%、0;PCV-2+PCV-3和PPV+PCV-3混合感染在初乳乳房拭子中的检出率均为2.63%,在睾丸处理液中未检测到任何混合感染;PRRSV、CSFV、PRV在所有母猪初乳乳房拭子和仔猪睾丸处理液样品中的检出率均为0。本研究证实母猪初乳乳房拭子对PCV-2、PCV-3和PPV的检出率要高于仔猪睾丸处理液,适合作为规模猪场对这些疫病的监测样本,但未比较出PRRSV、CSFV和PRV的检出率差异。

关键词：母猪初乳乳房拭子仔猪睾丸处理液繁殖障碍相关病毒 qPCR

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结核分枝杆菌感染中凋亡相关microRNA的研究进展

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中国兽医学报 2021年第7期41卷 1425-1430页

作者：苏莉竺婷婷师红铃郭爱珍陈颖钰华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学国家动物结核病专业实验室(武汉) 湖北武汉430070

结核病是由结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex, MTBC)引起的慢性消耗性人兽共患传染病。机体为抵御结核分枝杆菌感染,通过产生一系列免疫应答将其清除。细胞凋亡是其中重要的一个环节,通过主动程序性死亡,破坏结... 详细信息

结核病是由结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex, MTBC)引起的慢性消耗性人兽共患传染病。机体为抵御结核分枝杆菌感染,通过产生一系列免疫应答将其清除。细胞凋亡是其中重要的一个环节,通过主动程序性死亡,破坏结核分枝杆菌在细胞内的存活。microRNA(miRNA)是一类非编码的小RNA,在转录后水平调节凋亡相关基因的表达最终影响病原与宿主互作的动态平衡。

关键词：结核分枝杆菌细胞凋亡 microRNA

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马立克氏病病毒相关非编码RNA的研究进展

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中国预防兽医学报 2021年第8期43卷 902-907页

作者：潘其聪蔡旭旺徐晓娟华中农业大学动物医学院/农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

马立克氏病(Marek’s disease,MD)是一种禽类的淋巴组织增生性疾病,其特征是在禽类的多种组织器官中出现急性淋巴瘤并通过渗入外周神经系统导致其瘫痪和麻痹[1]。世界上各养禽地区均有MD的广泛流行且每年因MD造成的经济损失也很惨重[2]... 详细信息

马立克氏病(Marek’s disease,MD)是一种禽类的淋巴组织增生性疾病,其特征是在禽类的多种组织器官中出现急性淋巴瘤并通过渗入外周神经系统导致其瘫痪和麻痹[1]。世界上各养禽地区均有MD的广泛流行且每年因MD造成的经济损失也很惨重[2]。因此,为了有效控制MD在鸡群中的发生和流行,降低MD对养禽业造成的经济影响,对MD病原学和致病机理的研究是必须的。

关键词：马立克氏病病毒外周神经系统养禽业非编码RNA 致病机理禽类病原学组织器官

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ASFV、CSFV、PRRSV多重荧光PCR检测方法的建立与应用

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中国兽医学报 2021年第11期41卷 2107-2113页

作者：牛伟杰于学祥高宇库旭钢何启盖罗锐华中农业大学动物医学学院湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物疫病诊断中心湖北武汉430070

非洲猪瘟病毒(ASFV)、经典猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是目前影响猪群和我国养殖业的重要的3种病原,且3种疾病临床表现相似,因此,建立一种可以快速检测、区分3种病原的方法十分必要。本研究依据ASFV、CSFV、PRRSV的... 详细信息

非洲猪瘟病毒(ASFV)、经典猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是目前影响猪群和我国养殖业的重要的3种病原,且3种疾病临床表现相似,因此,建立一种可以快速检测、区分3种病原的方法十分必要。本研究依据ASFV、CSFV、PRRSV的基因保守片段设计特异性引物和探针,建立了多重荧光PCR检测方法。结果显示,所建立的多重荧光PCR可同时检测ASFV、CSFV、PRRSV 3种病原,特异性好、灵敏度高,对3种病原的检测下限分别达到13,16,26个拷贝;重复性良好,组内及组间重复试验的变异系数(CV)均在2%以内。将ASFV OIE标准、CSFV、PRRSV国家标准荧光qPCR作为金标准,同时对180份样品进行检测对比,结果显示,本研究方法对CSFV灵敏性和特异性分别为94.59%和100.00%,总符合率为98.89%;对PRRSV灵敏性为92.68%,特异性为98.56%,总符合率为97.22%;未检测到ASFV。使用所建立的方法对839份临床样品进行检测,结果显示,CSFV、PRRSV是当前猪群疾病的主要病原,且育肥阶段猪只CSFV、PRRSV核酸检出率均显著高于保育阶段猪只(P<0.01)。结果表明,本研究所建立的方法具有较高的灵敏性和特异性,可用于临床样品检测,猪场在防控非洲猪瘟的同时也须加强对CSF、PRRS的防控工作。

关键词：多重荧光定量PCR 鉴别诊断非洲猪瘟经典猪瘟猪繁殖与呼吸综合征

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环介导等温扩增技术改进及在动物病原检测中的应用

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中国兽医科学 2022年第5期52卷 633-639页

作者：陈秋慧李政志张海艳严蕊杨晶涵陈洁陈曦陈颖钰郭爱珍胡长敏华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 武汉市农业科学院畜牧兽医研究所湖北武汉430070 农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

环介导等温扩增(LAMP)技术是一种能在恒温设备下对靶基因进行扩增的技术,具有精确、快速、简单及低成本的优点,已广泛应用于食品安全、医疗卫生及农业现场检测等多个领域。本文主要从环介导等温技术的原理、反应体系改进、产物检测方法... 详细信息

环介导等温扩增(LAMP)技术是一种能在恒温设备下对靶基因进行扩增的技术,具有精确、快速、简单及低成本的优点,已广泛应用于食品安全、医疗卫生及农业现场检测等多个领域。本文主要从环介导等温技术的原理、反应体系改进、产物检测方法的改进、LAMP与其他技术的联用,以及目前LAMP在动物病原检测方面的应用进行了分析,并展望了LAMP技术的应用前景,以期为同仁提供参考。

关键词：环介导等温扩增环引物 Bst DNA聚合酶 LAMP体系动物病原检测

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PRRSV感染原代和传代PAM的比较转录组学分析

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中国兽医学报 2021年第11期41卷 2091-2100页

作者：周艳荣郝婉君卫莹李洋柯文婷肖少波方六荣华中农业大学动物医学学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)是严重危害世界养猪业的重要病原。PRRSV对原代猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophage,PAM)和传代猪肺泡巨噬细胞系(immortalized porcine alveolar macrophage,IPAM)均易感,但在感染早期,PRRSV在IPAM中的感染率显著高于PAM。为了揭示这2种细胞在PRRSV感染后的应答差异,本研究运用Illumina高通量测序技术对PRRSV感染的IPAM和PAM进行转录组测序,结果表明,PRRSV感染PAM和IPAM后能够诱导相似的免疫应答,但PAM的免疫应答反应更强;与代谢相关的基因在PRRSV感染的IPAM中差异更显著。进一步分析发现,PRRSV感染IPAM后下调细胞周期相关基因的表达水平,导致细胞周期停滞在G0/M期,从而促进PRRSV增殖;IPAM抗原递呈相关基因的缺失或低丰度表达可能是IPAM中免疫应答水平较低的原因;Nod-like receptor(NLR)、Toll-like receptor(TLR)、Target of rapamycin(TOR)、adenosine 5'monophosphate-activated protein kinase(AMPK)和phosphatidylinositol 3-kinase-protein kinase B(PI3K-Akt)等信号通路在PRRSV感染的PAM和IPAM中激活状态不同,可能导致了PRRSV在这2种细胞中的增殖差异。本研究结果为深入了解PRRSV感染原代和传代PAM后的应答差异补充了有用的数据。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒比较转录组学 PAM IPAM

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细菌性脑膜炎概述

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中国感染控制杂志 2022年第1期21卷 97-103页

作者：彭忠李春辉陈焕春王湘如华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室生猪健康养殖协同创新中心湖北武汉430070 中南大学湘雅医院医院感染控制中心湖南长沙410008

社区获得性细菌性脑膜炎依然是一种在世界范围内具有较高发病率和病死率的感染性疾病,也是一种需要被紧急救治的疾病。早期准确诊断、及时治疗以及提前预防是有效降低细菌性脑膜炎发病率的关键因素。本文对引起细菌性脑膜炎的主要病原... 详细信息

社区获得性细菌性脑膜炎依然是一种在世界范围内具有较高发病率和病死率的感染性疾病,也是一种需要被紧急救治的疾病。早期准确诊断、及时治疗以及提前预防是有效降低细菌性脑膜炎发病率的关键因素。本文对引起细菌性脑膜炎的主要病原菌及其流行病学、细菌性脑膜炎的发生机制以及该病的诊断、治疗和预防现状进行综述,为进一步认识细菌性脑膜炎的发生发展及防控治疗提供参考。

关键词：细菌性脑膜炎病原学流行病学发生机制诊断治疗疫苗

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2株Cluster 3鹅源坦布苏病毒的分离鉴定及其致病性研究

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中国畜牧兽医 2025年第4期52卷 1750-1762页

作者：陈作鑫陈宇欣潘彦林黄允真李林林董嘉文向勇徐志宏孙敏华张俊勤黄淑坚廖明广东省农业科学院动物卫生研究所农业农村部禽流感等家禽重大疾病防控重点实验室广东省畜禽疫病防治研究重点实验室广东省动物疫病野外科学观测研究站广州510640 佛山大学生命科学与工程学院佛山528225 仲恺农业工程学院动物科技学院广州510225 华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070

【目的】明确Cluster 3鹅源坦布苏病毒(Tembusu virus, TMUV)基因组变异情况及其对鹅的致病性,为Cluster 3 TMUV的防控提供参考。【方法】利用BHK-21细胞对感染TMUV的鹅肝脏组织样品进行病毒分离,通过RT-PCR、间接免疫荧光试验(IFA)、... 详细信息

【目的】明确Cluster 3鹅源坦布苏病毒(Tembusu virus, TMUV)基因组变异情况及其对鹅的致病性,为Cluster 3 TMUV的防控提供参考。【方法】利用BHK-21细胞对感染TMUV的鹅肝脏组织样品进行病毒分离,通过RT-PCR、间接免疫荧光试验(IFA)、透射电镜观察进行鉴定,并测定分离株的生长曲线。对分离株完成全基因组扩增后,使用ModelFinder、MrBayes等软件对其进行遗传进化分析,并对分离株的E蛋白进行氨基酸突变位点分析;测定分离株病毒滴度后,攻毒30日龄鹅,观察鹅各组织器官临床剖检病变及组织病理变化,使用实时荧光定量PCR检测鹅各组织脏器中的病毒载量。【结果】RT-PCR成功鉴定得到2份TMUV核酸阳性病料,接种至BHK-21细胞后,60 h即可观察到明显病变。将3代病毒液IFA检测可观察到明显红色荧光,透射电镜可观察到直径约50 nm、有囊膜的病毒粒子。从发病鹅肝脏组织成功分离得到2株TMUV,分别命名为JM3与JM1205。病毒一步生长曲线结果显示,JM3和JM1205株分别在培养60和48 h时病毒滴度最高。全基因扩增结果显示,JM3和JM1205株基因组全长均为10 994 bp。遗传进化树显示,JM3和JM1205株均为Cluster 3 TMUV成员,与Cluster 3 TMUV鸡源分离株CTLN遗传距离最近。氨基酸突变位点分析结果显示,与GenBank中最早上传的TMUV毒株MM1775株相比,JM3和JM1205株的E蛋白存在多个氨基酸位点突变,其中V157A突变可能与TMUV毒力增强相关。攻毒后1 d后鹅开始出现排绿色稀粪症状,攻毒后7 d开始出现神经症状。JM3组在攻毒后14 d仍持续排毒,JM1205组排毒持续至攻毒后11 d。攻毒后6 d,鹅出现体重增长减缓、下降的情况,至10 d开始恢复缓慢上升。剖检发现攻毒组鹅出现不同程度的脾脏肿大、胰脏坏死、肝脏发白、大脑充血;此外JM3株攻毒组鹅出现卵巢出血、心包积液;JM1205株攻毒组鹅出现心脏出血。攻毒后各时间点脾脏病毒载量均最高,在攻毒后3 d达到峰值,随后逐渐下降。【结论】本研究自广东地区养鹅场分离得到2株Cluster 3 TMUV:JM3和JM1205,2株分离株均对鹅有致病性,可在鹅体内多个器官复制,引起鹅共济失调、体重下降等症状。

关键词：坦布苏病毒(TMUV) 分支3 分离鉴定鹅致病性

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表达非洲猪瘟病毒p54蛋白重组伪狂犬病病毒的构建及鉴定

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中国畜牧兽医 2021年第11期48卷 4182-4191页

作者：何兴林邹忠龚文孝张宇飞李成飞徐婷陈焕春金梅林华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070 武汉科前生物股份有限公司武汉430070

试验旨在构建能高效表达非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)p54蛋白的重组伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)。通过无缝克隆构建含有PRV TK基因同源臂和绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的PRV通用转移载体pCAGIG-TK_((l+r)),参... 详细信息

试验旨在构建能高效表达非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)p54蛋白的重组伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)。通过无缝克隆构建含有PRV TK基因同源臂和绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的PRV通用转移载体pCAGIG-TK_((l+r)),参考China/2018/AnhuiXCGQ株基因序列,优化合成E183L基因,并连入通用转移载体,构建重组中间转移质粒pCAGIG-TK_((l+r))-p54;重组质粒ScaⅠ酶切线性化后经脂质体介导转染BHK-21细胞,6 h后感染0.1个感染复数(MOI)PRV变异株,出现病变后通过空斑挑选和PCR鉴定纯化重组PRV,进一步通过Western blotting和间接免疫荧光试验(IFA)检测外源蛋白表达,并对重组病毒的遗传稳定性和增殖特性进行研究。结果显示,转染重组质粒pCAGIG-TK_((l+r))-p54的BHK-21细胞24 h后可观察到绿色荧光,说明重组质粒成功转入BHK-21细胞;纯化后的重组病毒表达绿色荧光蛋白且含有ASFV E183L基因,Western blotting和IFA结果证实重组PRV在BHK-21细胞中能表达p54外源蛋白,在26 ku处呈现特异性条带,且能与ASFV阳性血清发生特异性反应,免疫原性较好;重组病毒在BHK-21细胞上连续传代20次均能检测到ASFV E183L基因,遗传稳定性较好;一步生长曲线显示,重组病毒与亲本病毒的增殖特性差异不大,且二者的最高病毒滴度分别为10^(7.34)/0.1 mL和10^(7.61)/0.1 mL,外源片段的插入不影响重组病毒在细胞上的增殖能力。本研究成功获得了表达ASFV p54蛋白的重组病毒rPRV-p54,为进一步研究p54蛋白的免疫原性及开发非洲猪瘟多基因重组PRV载体疫苗奠定了基础。

关键词：非洲猪瘟病毒(ASFV) 伪狂犬病病毒(PRV) p54蛋白

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