检索结果-内蒙古大学图书馆

中国人兽共患病学报 2019年第6期35卷 518-524页

作者：韩茜许红彬冯云田俊华章少在吴敏张婧潘虹李元元梁国栋云南省地方病防治所云南省自然疫源性疾病防控技术重点实验室大理671000 江西省疾病预防控制中心南昌330029 华中农业大学武汉430072 赣州市疾病预防控制中心赣州341099 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家传染病预防和控制重点实验室北京100052

目的了解江西省赣州市蜱的种类及其携带的病原体,为蜱传疾病的防控提供科学依据。方法在野外用布旗法和在动物体表采集蜱,进行种类鉴定。用PCR法扩增立克次体(Rickettsia sp.)gltA基因和埃立克体(Ehrlichia sp.)16S rRNA基因片段并测... 详细信息

目的了解江西省赣州市蜱的种类及其携带的病原体,为蜱传疾病的防控提供科学依据。方法在野外用布旗法和在动物体表采集蜱,进行种类鉴定。用PCR法扩增立克次体(Rickettsia sp.)gltA基因和埃立克体(Ehrlichia sp.)16S rRNA基因片段并测序,进行系统进化分析。结果江西省赣州市4县采集的395只蜱的种类包括2属4种,分别为血蜱属的长角血蜱(Haemaphysalislongicornis)、嗜群血蜱(***)、具角血蜱(***)和扇头蜱属的微小扇头蜱(Rhipicephalus microplus)。395只蜱分为43批检测立克次体和埃立克体,共有18批阳性。系统进化分析显示,龙南县22批蜱中检测到16批阳性,来源于具角血蜱的LN1615株与扇头蜱立克次体(***)处于同一分支,来源于微小扇头蜱的LN1620株与马赛立克次体(***)处于同一分支,其余的12株来源于具角血蜱和2株来源于微小扇头蜱,与日本立克次体(***)处于同一分支。崇义县CY1602株来源于嗜群血蜱与***处于同一分支。于都县YD1606株为来源于长角血蜱的埃立克体,与2010年Yonaguni206(HQ697589)、Yonaguni138(HQ697588)和2009年HLAE178(GU075695)处于同一分支。安远县微小扇头蜱检测均为阴性。结论本文对江西省赣州市采集的蜱进行了鉴定,首次在江西省赣州市的蜱中检测到日本立克次体、扇头蜱立克次体、马赛立克次体、***和埃立克体,为江西省蜱种类的调查及其传播疾病的预防控制提供根据。

关键词：蜱立克次体埃立克体

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胸膜肺炎放线杆菌双组份ArcA基因缺失弱毒疫苗的初步研究

胸膜肺炎放线杆菌双组份ArcA基因缺失弱毒疫苗的初步研究

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第14届全国规模化猪场主要疫病监控与净化专题研讨会

作者：游武进贝为成华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物病原分室武汉430070 华中农业大学动物医学院动物传染病研究室武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物病原分室武汉430070

本研究在以本实验室承慧硕士构建的APP血清1型多基因缺失菌株CH04(APP-1,△apxIC/△apxⅡC/△apxⅣ-orf1/△cpxAR)为亲本菌基础上,通过同源重组技术,进一步缺失ArcA毒力因子,获得YWJ05(△apxIC/△apxⅡC/△apx Ⅳ-orf1/△cpxAR/△ arcA... 详细信息

本研究在以本实验室承慧硕士构建的APP血清1型多基因缺失菌株CH04(APP-1,△apxIC/△apxⅡC/△apxⅣ-orf1/△cpxAR)为亲本菌基础上,通过同源重组技术,进一步缺失ArcA毒力因子,获得YWJ05(△apxIC/△apxⅡC/△apx Ⅳ-orf1/△cpxAR/△ arcA)多基因缺失缺失疫苗菌株,研究其生物学特性及安全性和免疫效力,并再在临床上初步使用,评价其效果.以期获得在临床上安全、高效的弱毒疫苗.

关键词：养猪业胸膜肺炎放线杆菌基因缺失弱毒疫苗免疫效力

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N-糖基化对乙型脑炎病毒prME和NS1基因免疫效果影响的研究

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病毒学报 2012年第3期28卷 213-218页

作者：张子重汪雪宰俊杰孙乐强宋云峰陈焕春华中农业大学动物医学院动物传染病室武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

prME和NS1为乙型脑炎病毒两个主要的免疫保护蛋白,且均为N-糖蛋白。为研究N-糖基化对乙型脑炎病毒免疫保护的作用,本研究用PCR介导的定点突变方法,分别消除乙型脑炎病毒prME和NS1基因的不同N-糖基化位点,并构建了prME和NS1突变基因的真... 详细信息

prME和NS1为乙型脑炎病毒两个主要的免疫保护蛋白,且均为N-糖蛋白。为研究N-糖基化对乙型脑炎病毒免疫保护的作用,本研究用PCR介导的定点突变方法,分别消除乙型脑炎病毒prME和NS1基因的不同N-糖基化位点,并构建了prME和NS1突变基因的真核表达质粒。将质粒免疫四周龄雌性小白鼠,经两次免疫后,采集血清检测体液免疫反应,最后对小鼠用强毒进行攻击,观察并记录免疫保护力。研究结果显示,与野生型prME基因免疫组相比,消除单个糖基化位点后prME基因诱导的ELISA抗体、中和抗体和免疫保护力均略有升高,而同时消除两个糖基化位点的则会降低。NS1基因消除单个糖基化位点后保护率高达到100%,但消除两个糖基化位点后则免疫保护率略有降低(75%)。通过本研究证明,N-糖基化在维系乙型脑炎病毒prME和NS1蛋白的免疫保护中具有重要的作用,单个糖基化的缺失可增强蛋白的免疫原性,而两个糖基都缺失后,则造成了免疫效率的降低。

关键词：乙型脑炎病毒 prME基因 NS1基因 N-糖基化免疫

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临床分离猪链球菌和副猪嗜血杆菌多重耐药性监测

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华中农业大学学报 2012年第5期31卷 623-628页

作者：胡军勇汤细彪汤电刘望宏倪德斌吴斌华中农业大学动物科技学院武汉430070 华中农业大学动物传染病诊断中心武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

为了解我国规模化猪场链球菌和副猪嗜血杆菌的耐药情况,用纸片扩散法对临床分离的112株猪链球菌和92株副猪嗜血杆菌进行23种药物的敏感性试验。结果表明,猪链球菌对林可胺类、大环内酯类、硝基呋喃类药物的耐药率均在90%以上,对链霉素... 详细信息

为了解我国规模化猪场链球菌和副猪嗜血杆菌的耐药情况,用纸片扩散法对临床分离的112株猪链球菌和92株副猪嗜血杆菌进行23种药物的敏感性试验。结果表明,猪链球菌对林可胺类、大环内酯类、硝基呋喃类药物的耐药率均在90%以上,对链霉素、庆大霉素、卡那霉素、阿米卡星、多西环素的耐药率在60%～90%之间,而对β-内酰胺类和氟喹诺酮类的耐药率相对较低。副猪嗜血杆菌对四环素耐药率最高(78.3%),对螺旋霉素、复方磺胺甲噁唑、克林霉素、阿米卡星、林可霉素、新霉素的耐药率在50%～70%之间,对头孢类和氟喹诺酮类耐药率相对较低。2种细菌对不同种类药物的敏感性各异,并且多重耐药性严重,主要耐药谱具有多样性。

关键词：猪链球菌副猪嗜血杆菌多重耐药性耐药率

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猪库布病毒RT-PCR检测方法的建立及湖北省流行病学初步调查

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华中农业大学学报 2012年第4期31卷 485-489页

作者：胡军勇汤细彪胡睿铭刘望宏倪德斌吴斌华中农业大学动物科技学院武汉430070 华中农业大学动物传染病诊断中心武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

根据猪库布病毒的3 D基因设计1对引物,建立了两步法RT-PCR检测方法,使用该方法分别对CSFV、PRRSV、JEV、SIV、PEDV、TGEV、GARV阳性模板及包含猪肠道病毒3 D基因和口蹄疫病毒3 D基因的重组质粒进行PCR检测,结果从以上9种常见猪病病原的... 详细信息

根据猪库布病毒的3 D基因设计1对引物,建立了两步法RT-PCR检测方法,使用该方法分别对CSFV、PRRSV、JEV、SIV、PEDV、TGEV、GARV阳性模板及包含猪肠道病毒3 D基因和口蹄疫病毒3 D基因的重组质粒进行PCR检测,结果从以上9种常见猪病病原的阳性模板中均不能扩增出323bp大小的PCR产物,说明该检测方法的特异性很好,能够用作临床样品的检测。敏感性试验显示,本试验建立的检测方法能够检测到的模板最低质量浓度为180fg/mL。应用该方法对湖北省各大猪场进行了临床病料检测,在采集的165份病料中有118份样品检测为猪库布病毒阳性。在4个发生腹泻疫情的规模化猪场进行了分群抽样调查,结果显示,猪库布病毒在猪群中集中分布在发生腹泻疫情的猪群,说明猪库布病毒和现阶段的腹泻疫情有紧密的联系。

关键词：猪库布病毒 RT-PCR 检测方法腹泻流行病学调查

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猪博卡病毒PCR检测方法的建立及其初步流行病学调查

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中国预防兽医学报 2012年第8期34卷 632-636页

作者：胡军勇张倩王丹丹涂志勤胡睿铭汤细彪吴斌华中农业大学动物科技学院湖北武汉430070 华中农业大学动物传染病诊断中心湖北武汉430070 农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

猪博卡病毒(PBoV)是一种新出现的病毒,可以导致仔猪急性腹泻。为建立该病毒的检测方法,本实验根据PBoV的NS1基因序列设计一对引物,建立了PCR检测方法。特异性试验结果表明,该方法能够从PBoV阳性样品中特异性的扩增出482 bp的片段,而对... 详细信息

猪博卡病毒(PBoV)是一种新出现的病毒,可以导致仔猪急性腹泻。为建立该病毒的检测方法,本实验根据PBoV的NS1基因序列设计一对引物,建立了PCR检测方法。特异性试验结果表明,该方法能够从PBoV阳性样品中特异性的扩增出482 bp的片段,而对猪伪狂犬病毒、猪细小病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒、沙门氏菌、大肠杆菌、猪链球菌、副猪嗜血杆菌的核酸样品均无非特异性扩增反应。敏感性试验显示,该PCR方法对PBoV的最低检测量为213.6拷贝。此外,应用该方法对湖北、湖南、河南省的各大猪场进行了流行病学调查,在79个规模化猪场采集的248份病料样品中有172份样品为PBoV阳性。其中,对4个发生腹泻疫情的规模化猪场进行了分群抽样调查,结果显示PBoV在腹泻猪群中的阳性率达到73.95%,并显著高于非腹泻猪群(47.83%)。本研究调查结果显示PBoV在国内猪群中流行广泛而且感染率高。

关键词：猪博卡病毒 PCR检测方法腹泻流行病学调查

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N-糖基化对乙型脑炎病毒感染与增殖的影响

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农业生物技术学报 2012年第3期20卷 316-320页

作者：张子重汪雪宋云峰陈焕春华中农业大学动物医学院动物传染病室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

N-糖基化对于病毒的感染与增殖中均具有重要作用,切除病毒表面糖链或抑制病毒糖基化修饰的方法已成为登革热病毒等的潜在治疗方法。为阐明日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)表面的糖链在其感染和增殖过程中的作用,本... 详细信息

N-糖基化对于病毒的感染与增殖中均具有重要作用,切除病毒表面糖链或抑制病毒糖基化修饰的方法已成为登革热病毒等的潜在治疗方法。为阐明日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)表面的糖链在其感染和增殖过程中的作用,本研究用肽N-糖苷酶F(peptide N-glycosidase F,PNGase F)和内切糖苷酶H(endoglycosidase H,Endo H)处理乙型脑炎病毒,将酶切后的病毒用Western blot验证糖基化酶切的效果,将酶切的JEV接种BHK-21细胞进行蚀斑试验,观察蚀斑的大小及病毒滴度的变化情况。同时用衣霉素处理BHK-21细胞并同步接种JEV,进行蚀斑试验,观察蚀斑大小的变化与病毒增殖情况。结果显示,用Endo H和PNGase F处理JEV后,病毒形成的蚀斑均显著小于未处理的病毒对照,且病毒增殖滴度显著降低,说明病毒粒子表面的糖基化修饰对于病毒的侵染具有重要作用。衣霉素处理细胞后,病毒产生的蚀斑大小没有明显差异,但增殖滴度却显著降低,说明糖基化在JEV增殖过程中也具有重要的功能。本研究说明JEV的糖基化对于其感染和增殖均具有重要的作用,为开发抑制乙型脑炎病毒药物研究提供一个新的思路。

关键词：日本乙型脑炎病毒糖苷酶 N-糖基化感染增殖

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甲型H1亚型流感病毒单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA方法的建立

甲型H1亚型流感病毒单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA方法的建立

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中国畜牧兽医学会2011学术年会

作者：赵刚但汉并孙小美金梅林华中农业大学动物医学院动物传染病实验室武汉湖北 430070

本课题研究过程中制备了多株抗甲型H1亚型流感病毒血凝素的单克隆抗体，并以此抗体作为原材料，建立甲型H1亚型流感病毒双抗体夹心ELISA检测方法。该方法能够准确、快速检测出畜群及人群中的甲型H1亚型流感病毒，对甲型H1亚型流感病毒... 详细信息

本课题研究过程中制备了多株抗甲型H1亚型流感病毒血凝素的单克隆抗体，并以此抗体作为原材料，建立甲型H1亚型流感病毒双抗体夹心ELISA检测方法。该方法能够准确、快速检测出畜群及人群中的甲型H1亚型流感病毒，对甲型H1亚型流感病毒的评估、预防及流行病学调查具有极其重要的意义。

关键词：甲型H1亚型猪流感病毒单克隆抗体病毒检测双抗体夹心ELISA检测法

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猪链球菌流行病学及其耐药性研究

猪链球菌流行病学及其耐药性研究

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中国畜牧兽医学会2011学术年会

作者：何宏魁孙小美康超陈磊金梅林华中农业大学动物医学院动物传染病实验室武汉湖北 430070

本研究对猪链球菌的流行病学以及耐药性进行研究。试验的分离菌株对青霉素、氯头孢菌、喹诺酮类等药物素表现出了较高的耐药性，表明中国的SS已经对这些药物产生了耐药性。指出要科学的合理使用抗生素，结合药敏试验，轮换使用一些抗生... 详细信息

本研究对猪链球菌的流行病学以及耐药性进行研究。试验的分离菌株对青霉素、氯头孢菌、喹诺酮类等药物素表现出了较高的耐药性，表明中国的SS已经对这些药物产生了耐药性。指出要科学的合理使用抗生素，结合药敏试验，轮换使用一些抗生素，减缓细菌耐药性的产生和传播。

关键词：猪链球菌分子流行病学耐药性抗生素

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猪链球菌2型Ⅲ型溶血素基因的功能研究

猪链球菌2型Ⅲ型溶血素基因的功能研究

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中国畜牧兽医学会2011学术年会

作者：王雅孙小美金梅林华中农业大学动物医学院动物传染病实验室武汉湖北 430070

本研究通过同源重组基因敲除法成功构建了2005年中国四川资阳分离强毒株SS205ZY的slyrp基因缺失菌株(△slyrp)，同时构建了sly基因缺失菌株(△sly)及双基因缺失菌株(△sly △slyrp)，比较野生菌株和突变菌株的溶血能力以及对小鼠的致病... 详细信息

本研究通过同源重组基因敲除法成功构建了2005年中国四川资阳分离强毒株SS205ZY的slyrp基因缺失菌株(△slyrp)，同时构建了sly基因缺失菌株(△sly)及双基因缺失菌株(△sly △slyrp)，比较野生菌株和突变菌株的溶血能力以及对小鼠的致病力。本研究对预测的猪链球菌2型编码的溶血素进行了系统的评价，证实了猪链球菌2型的Ⅲ型溶血素(slyrp)具有一定的溶血能力。小鼠致病力试验表明：slyrp在猪链球菌致病过程中起到了一定作用，但对猪链球菌的毒力不起决定作用。与野生菌株相比，sly基因缺失突变菌株的致病力有一定程度的降低，但仍表现较高的致病力，表明sly是导致猪链球菌高致病力的重要的毒力因子，但很显然猪链球菌的高致病性是多种毒力相关因子协同作用的结果。

关键词：猪链球菌2型 Ⅲ型溶血素基因缺失菌株溶血能力致病力

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