检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：喻正军吴斌何启盖陈焕春华中农业大学动物传染病实验室，武汉，430070 武汉科前动物生物制品有限责任公司，武汉，430070 华中农业大学动物传染病实验室，武汉，430070

近年来，猪病的形式越来越复杂，主要表现为：老病未能完全控制，新病不断出现;多种病原混合感染和继发感染;病原变异，血清型增多;细菌的耐药性增强;部分疫病呈非典型性流行;疫病的流行速度和在规模化养殖场之间传播速度加快。本文介... 详细信息

近年来，猪病的形式越来越复杂，主要表现为：老病未能完全控制，新病不断出现;多种病原混合感染和继发感染;病原变异，血清型增多;细菌的耐药性增强;部分疫病呈非典型性流行;疫病的流行速度和在规模化养殖场之间传播速度加快。本文介绍了当前保育猪疾病流行动态，对当前疾病的病原学和流行趋势进行了分析，提出了疾病预防和控制的策略。

关键词：生猪养殖疫病流行混合感染家畜防疫防治策略

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甲型H1亚型流感病毒单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA方法的建立

甲型H1亚型流感病毒单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA方法的建立

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中国畜牧兽医学会2011学术年会

作者：赵刚但汉并孙小美金梅林华中农业大学动物医学院动物传染病实验室武汉湖北 430070

本课题研究过程中制备了多株抗甲型H1亚型流感病毒血凝素的单克隆抗体，并以此抗体作为原材料，建立甲型H1亚型流感病毒双抗体夹心ELISA检测方法。该方法能够准确、快速检测出畜群及人群中的甲型H1亚型流感病毒，对甲型H1亚型流感病毒... 详细信息

本课题研究过程中制备了多株抗甲型H1亚型流感病毒血凝素的单克隆抗体，并以此抗体作为原材料，建立甲型H1亚型流感病毒双抗体夹心ELISA检测方法。该方法能够准确、快速检测出畜群及人群中的甲型H1亚型流感病毒，对甲型H1亚型流感病毒的评估、预防及流行病学调查具有极其重要的意义。

关键词：甲型H1亚型猪流感病毒单克隆抗体病毒检测双抗体夹心ELISA检测法

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猪链球菌流行病学及其耐药性研究

猪链球菌流行病学及其耐药性研究

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中国畜牧兽医学会2011学术年会

作者：何宏魁孙小美康超陈磊金梅林华中农业大学动物医学院动物传染病实验室武汉湖北 430070

本研究对猪链球菌的流行病学以及耐药性进行研究。试验的分离菌株对青霉素、氯头孢菌、喹诺酮类等药物素表现出了较高的耐药性，表明中国的SS已经对这些药物产生了耐药性。指出要科学的合理使用抗生素，结合药敏试验，轮换使用一些抗生... 详细信息

本研究对猪链球菌的流行病学以及耐药性进行研究。试验的分离菌株对青霉素、氯头孢菌、喹诺酮类等药物素表现出了较高的耐药性，表明中国的SS已经对这些药物产生了耐药性。指出要科学的合理使用抗生素，结合药敏试验，轮换使用一些抗生素，减缓细菌耐药性的产生和传播。

关键词：猪链球菌分子流行病学耐药性抗生素

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猪链球菌2型Ⅲ型溶血素基因的功能研究

猪链球菌2型Ⅲ型溶血素基因的功能研究

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中国畜牧兽医学会2011学术年会

作者：王雅孙小美金梅林华中农业大学动物医学院动物传染病实验室武汉湖北 430070

本研究通过同源重组基因敲除法成功构建了2005年中国四川资阳分离强毒株SS205ZY的slyrp基因缺失菌株(△slyrp)，同时构建了sly基因缺失菌株(△sly)及双基因缺失菌株(△sly △slyrp)，比较野生菌株和突变菌株的溶血能力以及对小鼠的致病... 详细信息

本研究通过同源重组基因敲除法成功构建了2005年中国四川资阳分离强毒株SS205ZY的slyrp基因缺失菌株(△slyrp)，同时构建了sly基因缺失菌株(△sly)及双基因缺失菌株(△sly △slyrp)，比较野生菌株和突变菌株的溶血能力以及对小鼠的致病力。本研究对预测的猪链球菌2型编码的溶血素进行了系统的评价，证实了猪链球菌2型的Ⅲ型溶血素(slyrp)具有一定的溶血能力。小鼠致病力试验表明：slyrp在猪链球菌致病过程中起到了一定作用，但对猪链球菌的毒力不起决定作用。与野生菌株相比，sly基因缺失突变菌株的致病力有一定程度的降低，但仍表现较高的致病力，表明sly是导致猪链球菌高致病力的重要的毒力因子，但很显然猪链球菌的高致病性是多种毒力相关因子协同作用的结果。

关键词：猪链球菌2型 Ⅲ型溶血素基因缺失菌株溶血能力致病力

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副猪嗜血杆菌的耐药性研究

副猪嗜血杆菌的耐药性研究

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：周学利蔡旭旺陈焕春徐晓娟赵雅欣陈品张璇华中农业大学动物传染病实验室武汉 430070 安徽省农科院畜牧兽医研究所合肥 230031 华中农业大学动物传染病实验室武汉 430070

副猪嗜血杆菌(Haemophilus pamsuis，HPS病表现为猪的多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎，该病已成为影响世界养猪业的最重要的细菌性疾病之一。本研究用琼脂稀释法检测了本室2007-2008年分离自我国13个省市的110株副猪嗜血杆菌临床分离株... 详细信息

副猪嗜血杆菌(Haemophilus pamsuis，HPS病表现为猪的多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎，该病已成为影响世界养猪业的最重要的细菌性疾病之一。本研究用琼脂稀释法检测了本室2007-2008年分离自我国13个省市的110株副猪嗜血杆菌临床分离株对22种药物的敏感性，为副猪嗜血杆菌病的基础研究及我国对于该病的预防与控制提供了依据。所有试验菌株对头孢噻肟、头孢噻呋、阿奇霉素、氯霉素、氟苯尼考和替米考星均100％敏感，敏感率较高的有泰妙灵(99.1％)、红霉素(98.2％).四环素(96.4％)，青霉素(93.6％)、氨苄青霉素(90.9％).头孢克洛(91.8％)、左氧氟沙星(93.6％)、庆大霉素(93.6％)和壮观霉索(90.0％)，环丙沙星的敏感率是82.7％;恩诺沙星和甲氧苄氨嘧啶/磺胺甲基异噁唑的耐药率分别高达70.9％和44.5％。该结果为副猪嗜血杆菌病的治疗提供了用药依据。110株副猪嗜血杆菌临床分离株表现有32种抗菌谱，仅有8.2％的副猪嗜血杆菌时本试验的22种药品100％敏感，68.2％的菌株能耐受1-2种药物，23.6％的菌株至少对3种或3种以上的药物不敏感，4.5％的菌株至少对5种药物不敏感，有1株(0.9％)可以耐受7种药物。我国当前的优势血清型是血清5型.4型，13型和12型，分离率分别是26.4％、14.6％，10.9％和9.1％，其耐药率分别为31.8％、16.2％，8.8％和7.8％：而其它血清型的分离率从0.9％到3.6％不等，耐药率从0.5％到2％不等。虽然不同血清型间的分离率及耐药率均相差较大，但统计学分析表明，副猪嗜血杆菌的耐药性与其血清型及毒力之间无明显相关性。

关键词：副猪嗜血杆菌耐药性血清型毒力

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中国养猪现状与猪病防制研究

中国养猪现状与猪病防制研究

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亚洲猪病学会第三届学术会议

作者：陈焕春华中农业大学动物医学院动物传染病学研究室武汉430070

中国养猪业发展迅速,已在世界养猪业中占据了重要地位。近5年来中国养猪存栏量年均递增14％,到2005年中国养猪存栏数已达到世界总存栏的51％。目前影响我国养猪业发展的主要问题是猪传染病问题,而其中最主要的是呼吸系统疾病和繁殖障碍... 详细信息

中国养猪业发展迅速,已在世界养猪业中占据了重要地位。近5年来中国养猪存栏量年均递增14％,到2005年中国养猪存栏数已达到世界总存栏的51％。目前影响我国养猪业发展的主要问题是猪传染病问题,而其中最主要的是呼吸系统疾病和繁殖障碍性疾病,流行的主要病原为猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪乙型脑炎病毒,以及猪传染性胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、猪链球菌、大肠肝菌等。为防制传染病,提高养猪业经济效益,研制了针对各种传染病的新型基因工程疫苗,包括基因缺失疫苗、活病毒/细菌载体疫苗、核酸疫苗等,同时研制了胶体金诊断试纸条、ELISA和乳胶凝集等快速、简便、适于基层和现场使用的诊断试剂盒,适合进行高通量检测的基因芯片和蛋白质芯片技术,以及可用于区分免疫动物和野毒感染、多种病原混合感染的鉴别诊断试剂盒.

关键词：养猪业猪病防治传染病

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猪伪狂犬病活疫苗(HB-98株)的分子特性与免疫效果分析

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兽医导刊 2011年第6期 42-43页

作者：汤细彪刘峰谌磊喻红艳尚书满小营陈楚雄吴斌华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物传染病诊断中心湖北武汉430070

伪狂犬病（Pseudorabies,PR）是危害全球养猪业最严重的急性传染病之一。猪伪狂犬病的临床症状主要表现在：（1）母猪流产、产死胎、木乃伊胎;（2）公猪感染睾丸肿胀、萎缩,失去种用能力;

关键词：猪伪狂犬病效果分析分子特性活疫苗免疫急性传染病母猪流产临床症状

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血清7型胸膜肺炎放线杆菌apxⅡC/apxⅠA+基因缺失重组菌株的构建与鉴定

血清7型胸膜肺炎放线杆菌apxⅡC/apxⅠA+基因缺失重组菌株的构建...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

作者：刘金林林荔雯贝为成陈焕春华中农业大学动物医学院动物传染病研究室武汉湖北430070 华中农业大学动物医学院动物传染病研究室武汉湖北430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物病原分室武汉湖北430070

通过接合转移和SacB负向筛选的方法,我们构建了一株apxⅡC缺失的血清7型胸膜肺炎放线杆菌重组菌株.首先构建重组转移质粒pEHA1.将pEHA1转化供体大肠杆菌β2155,并将其与野生型APP血清7型亲本菌混合培养5小时,然后涂到含霉素抗性的培养... 详细信息

通过接合转移和SacB负向筛选的方法,我们构建了一株apxⅡC缺失的血清7型胸膜肺炎放线杆菌重组菌株.首先构建重组转移质粒pEHA1.将pEHA1转化供体大肠杆菌β2155,并将其与野生型APP血清7型亲本菌混合培养5小时,然后涂到含霉素抗性的培养基上培养,挑取阳性克隆,接种到无抗性液体培养基,培养后涂于含有蔗糖的的培养基,培养一定时间后挑取蔗糖抗性的克隆,即可得到目的突变株.通过PCR、遗传稳定性、外毒素分泌、重组位点。序列分析验证了重组菌构建成功.我们对重组菌生物学特性进行了初步研究,发现其增殖能力未受影响,对小鼠毒力显著降低.该突变株构建体系的建立为猪传染性胸膜肺炎减毒活疫苗的开发以及对胸膜肺炎放线杆菌特定基因的功能研究奠定了良好基础。

关键词：猪传染性胸膜肺炎胸膜肺炎放线杆菌接合转移负向筛选重组菌株生物学特性

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细菌内同源重组法构建O型口蹄疫多基因重组腺病毒

细菌内同源重组法构建O型口蹄疫多基因重组腺病毒

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2006年度学术研讨会

作者：张克山吴斌姚清侠向敏徐卓菲钱平陈焕春华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物传染病实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物传染病实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物传染病实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物传染病实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物传染病实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物传染病实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物传染病实验室

口蹄疫(Foot-and-Mouth Disease,FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的偶蹄兽的急性,烈性传染病,被国际兽医局列为一类传染病。它导致有口蹄疫爆发的地区和国家的畜产品进出口贸易停止,造成巨大的经济损失和政治影响,是一种典型的政治和经济... 详细信息

口蹄疫(Foot-and-Mouth Disease,FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的偶蹄兽的急性,烈性传染病,被国际兽医局列为一类传染病。它导致有口蹄疫爆发的地区和国家的畜产品进出口贸易停止,造成巨大的经济损失和政治影响,是一种典型的政治和经济病。在口蹄疫的基因工程疫苗的研究过程中人们试图将结构蛋白基因P1和蛋白酶基因组合在一起,期望在免疫动物后在细胞内组装成病毒的空衣壳,模拟自然病毒表面的线性和非线性的抗原表位,刺激机体产生与自然病毒感染相近的免疫效果,国外这方面的研究有不少成功的报道。本研究利用细菌内同源重组的方法构建含有O型口蹄疫病毒 P1-2A-3C的多基因重组腺病毒。为口蹄疫重组腺病毒基因工程活载体疫苗的研究及其免疫效果的评价奠定基础。首先通过PCR的方法从阳性质粒PcDNAP1-2A-3C扩增到口蹄疫病毒P1-2A-3C基因,然后将其亚克隆到腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV中,利用多酶切图谱分析、PCR扩增及序列测定的方法证实口蹄疫病毒P1-2A-3C基因正确插入腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV中,用Pmel酶将含有目的基因的穿梭载体线性化后和腺病毒骨架载体pAdeasy-1共同电转化大肠杆菌BJ5183感受态菌,采用细菌内同源重组法构建重组腺病毒质粒ADPSP1-2A-3C,经序列测定,PCR扩增,Pacl酶切鉴定等证实目的基因已正确的插入到腺病毒骨架载体;将鉴定正确的阳性重组质粒转化大肠杆菌XL-10进行大量扩增,用Pacl酶线性化后转染HEK293细胞,并连续在HEK293细胞传10代次,对每一代次的细胞提取基因组后通过PCR的方法扩增口蹄疫病毒P1-2A-3C基因,同时设置正常HEK293细胞对照,结果证实重组腺病毒能够在HEK293细胞稳定遗传。在第8 代中提取HEK293细胞的总RNA用口蹄疫病毒P1-2A-3C特异性引物进行RT-PCR,结果表明目的基因能够表达,在第10代次HEK293细胞的间接免疫荧光也证实口蹄疫基因在 HEK293细胞中得到表达。本研究采用细菌内同源重组的方法构建口蹄疫多基因重组腺病毒,和传统的方法比较大大提高了重组效率,构建的重组病毒的动物试验正在进行中。

关键词：同源重组方法构建口蹄疫病毒重组腺病毒 HEK

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血清7型胸膜肺炎放线杆菌apxIIC-/apxIA+基因缺失重组菌株的构建与鉴定

血清7型胸膜肺炎放线杆菌apxIIC-/apxIA+基因缺失重组菌株的构建...

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

作者：刘金林林荔雯贝为成陈焕春华中农业大学动物医学院动物传染病研究室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物病原分室

通过接合转移和SacB负向筛选的方法,我们构建了一株apxIIC缺失的血清7型胸膜肺炎放线杆菌重组菌株。首先构建重组转移质粒pEHA1。将pEHA1转化供体大肠杆菌β2155,并将其与野生型APP血清7型亲本菌混合培养5小时,然后涂到含霉素抗性的培... 详细信息

通过接合转移和SacB负向筛选的方法,我们构建了一株apxIIC缺失的血清7型胸膜肺炎放线杆菌重组菌株。首先构建重组转移质粒pEHA1。将pEHA1转化供体大肠杆菌β2155,并将其与野生型APP血清7型亲本菌混合培养5小时,然后涂到含霉素抗性的培养基上培养,挑取阳性克隆,接种到无抗性液体培养基,培养后涂于含有蔗糖的的培养基,培养一定时间后挑取蔗糖抗性的克隆,即可得到目的突变株。通过PCR、遗传稳定性、外毒素分泌、重组位点序列分析验证了重组菌构建成功。我们对重组菌生物学特性进行了初步研究,发现其增殖能力未受影响,对小鼠毒力显著降低。该突变株构建体系的建立为猪传染性胸膜肺炎减毒活疫苗的开发以及对胸膜肺炎放线杆菌特定基因的功能研究奠定了良好基础。

关键词：胸膜肺炎放线杆菌接合转移负向筛选重组菌株构建鉴定

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