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中国动物传染病学报 2023年第1期31卷 213-221页

作者：张蕙畅方谱县方六荣肖少波华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070 湖北省生猪健康养殖协同创新中心武汉430070

猪δ冠状病毒(PDCoV)是一种新发现的猪肠道冠状病毒,可引起新生仔猪的腹泻、呕吐、脱水、死亡,而且具有跨种感染潜能,给养猪业和公共卫生构成了巨大威胁。冠状病毒的辅助蛋白(accessory protein)是一类功能特殊的蛋白,不同属甚至同属不... 详细信息

猪δ冠状病毒(PDCoV)是一种新发现的猪肠道冠状病毒,可引起新生仔猪的腹泻、呕吐、脱水、死亡,而且具有跨种感染潜能,给养猪业和公共卫生构成了巨大威胁。冠状病毒的辅助蛋白(accessory protein)是一类功能特殊的蛋白,不同属甚至同属不同种的冠状病毒编码的辅助蛋白数量、同源性均存在较大差异,具有属或种特异性。虽然辅助蛋白是冠状病毒增殖非必需的,但在调控宿主天然免疫、病毒复制与致病性中发挥重要作用。目前,已证实PDCoV至少编码3个辅助蛋白,而且近年来在PDCoV辅助蛋白的功能研究方面取得了显著进展。本文简要介绍了PDCoV辅助蛋白的鉴定及其在免疫调控和致病性中的作用,并对今后的研究进行了展望。

关键词：猪δ冠状病毒辅助蛋白感染免疫抑制致病性

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长链非编码RNA在奶牛乳腺炎中作用机制的研究进展

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中国兽医科学 2022年第3期52卷 396-402页

作者：杨晶涵林昌杰许灏钧李政志陈秋慧严蕊陈曦陈颖钰郭爱珍胡长敏华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

奶牛乳腺炎是导致养牛业巨大经济损失的疾病,如今仍无有效防控方法。长链非编码RNA(LncRNA)既可以直接作用于m RNA,又可以通过调控mi RNA而间接作用于m RNA,从而影响下游靶基因及蛋白表达。LncRNA功能强大,广泛参与了染色体重构、核小... 详细信息

奶牛乳腺炎是导致养牛业巨大经济损失的疾病,如今仍无有效防控方法。长链非编码RNA(LncRNA)既可以直接作用于m RNA,又可以通过调控mi RNA而间接作用于m RNA,从而影响下游靶基因及蛋白表达。LncRNA功能强大,广泛参与了染色体重构、核小体修饰、可变剪接、基因组印记、靶标模拟、功能性蛋白转运、转录干扰、细胞周期及分化等多种机体重要的生理和病理学调控过程。研究证实,lncRNA在奶牛乳腺炎中发挥重要作用。本文综述了奶牛乳腺炎和lncRNA的研究背景、lncRNA的生物学功能、lncRNA在奶牛乳腺炎体内外模型中的作用、lncRNA介导奶牛乳腺炎相关信号通路的机制,并对lncRNA在乳腺炎等炎性疾病的研究与应用前景方面进行了展望。

关键词：奶牛乳腺炎长链非编码RNA 研究进展

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2019-2020年湖北部分地区G9P型人轮状病毒基因特征

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中国人兽共患病学报 2022年第4期38卷 359-365页

作者：杨立君陈月米文琴唐一通范久波王媛廖诗英陈焕春何启盖江云波华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070 湖北文理学院医学部武汉430070

目的对人A组轮状病毒进行检测及分离鉴定,并研究其各基因片段的遗传进化关系。方法2019-2020年对湖北武汉市和襄阳市临床腹泻病人的粪便样品进行采集,共319份。设计特异性轮状病毒VP6基因引物,RT-PCR检测轮状病毒的感染情况。将阳性样... 详细信息

目的对人A组轮状病毒进行检测及分离鉴定,并研究其各基因片段的遗传进化关系。方法2019-2020年对湖北武汉市和襄阳市临床腹泻病人的粪便样品进行采集,共319份。设计特异性轮状病毒VP6基因引物,RT-PCR检测轮状病毒的感染情况。将阳性样品接种于MA104细胞进行轮状病毒的分离。RT-PCR特异性扩增VP6基因和特异性间接免疫荧光对其进行病毒鉴定及病毒增殖检测;并进一步通过RT-PCR扩增轮状病毒的11个基因片段,在线工具Rota C V2.0对测序结果进行分型分析。Mega软件对其全基因组序列进行遗传进化分析。结果轮状病毒感染阳性标本共69份,阳性率为21.63%。成功分离获得11株人轮状病毒,主要衣壳蛋白VP7和VP4基因型均为G9P[8]型。其中3株轮状病毒归属于类Wa株毒株,基因型图谱为G9-P[8]-I1-R1-C1-M1-A1-N1-T1-E1-H1。8株毒株在Wa-like的基因型中具有DS-1-like的NSP4为E2基因型特征。基因型图谱为G9-P[8]-I1-R1-C1-M1-A1-N1-T1-E2-H1。结论G9P[8]型人轮状病毒毒株在2019-2020年湖北部分地区占主导趋势,且其NSP4基因以E2基因型为主要流行形式。

关键词：轮状病毒分离鉴定基因型遗传进化分析

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佐剂对IBRVΔgG/ΔTK双基因缺失活疫苗牛体攻毒保护效果的影响

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吉林农业大学学报 2023年第4期45卷 476-484页

作者：王琛张一李庆妮陈建国陈颖钰陈曦胡长敏郭爱珍华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 湖北省洪山实验室武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学湖北省兽医流行病学国际科技合作基地武汉430070 华中农业大学农业部兽用诊断制剂创制重点实验室农业部反刍动物生物制品重点实验室武汉430070

牛传染性鼻气管炎是危害养牛业的一种重要病毒性传染病,疫苗免疫是最主要的防控手段。为研究水性佐剂对牛传染性鼻气管炎TK和gG双基因缺失活疫苗(IBRVΔgG/ΔTK株)的免疫增强作用,将18头1.5~2月龄的奶公犊分成4组,组1~3各5头牛,组4为3... 详细信息

牛传染性鼻气管炎是危害养牛业的一种重要病毒性传染病,疫苗免疫是最主要的防控手段。为研究水性佐剂对牛传染性鼻气管炎TK和gG双基因缺失活疫苗(IBRVΔgG/ΔTK株)的免疫增强作用,将18头1.5~2月龄的奶公犊分成4组,组1~3各5头牛,组4为3头牛。组1滴鼻接种IBRVΔgG/ΔTK疫苗株,组2滴鼻接种IBRVΔgG/ΔTK疫苗株和Gel 01 ST水性佐剂混合物,组3为未免攻毒对照组,组4为不做处理的空白对照组。免疫35 d后,1~3组滴鼻攻击毒力株IBRV HB06株。免疫期间,组1牛体温在正常范围内,有1头牛眼睛和鼻腔出现水样分泌物;组2有1头牛出现一个温次达到40℃,有2头在眼或鼻出现水样分泌物。组1和组2血清特异性抗体和中和抗体水平无显著差异。攻毒后,组1和组2各有1头在第3天体温分别升高一个温次,达到40.25℃和40℃,部分牛眼睛出现水样分泌物;组1鼻腔排毒到第8天,组2中有1头牛在第9天仍检测到排毒;而组3出现流眼泪、鼻分泌物、鼻黏膜出血等临床症状,鼻腔排毒持续到第11天;组1肺部病变与空白对照组(组4)无显著差异,组2略严重于组1,组3表现出明显的肺部病变。按症状分值计算,组1和组2总保护率分别为91.7%和61.41%。参考世界动物卫生组织关于IBRV活疫苗的免疫保护评判标准,组1和组2分别达到100%(5/5)和80%(4/5)保护。综上,此研究所用佐剂未达到预期效果,后期仍需进行更多筛选。

关键词：佐剂牛传染性鼻气管炎标记疫苗免疫病毒

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屎肠球菌对感染柔嫩艾美耳球虫肉鸡生长性能和肠道屏障的影响

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畜牧兽医学报 2022年第4期53卷 1210-1219页

作者：焦宇洲杨欢欢卢垚史聪聪徐晓娟蔡旭旺华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070 武汉科缘生物发展有限责任公司武汉430206

旨在探究屎肠球菌(Enterococcus faecium)对人工感染柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)肉鸡生长性能、存活率、盲肠损伤、粪便卵囊排出和肠道屏障功能的影响。选取体重相近的1日龄肉鸡(罗斯308)180羽,随机分为5组,包括空白对照组(NC)、... 详细信息

旨在探究屎肠球菌(Enterococcus faecium)对人工感染柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)肉鸡生长性能、存活率、盲肠损伤、粪便卵囊排出和肠道屏障功能的影响。选取体重相近的1日龄肉鸡(罗斯308)180羽,随机分为5组,包括空白对照组(NC)、感染对照组(PC)、70 mg·kg^(-1)盐霉素添加组(SAL)、*** 1.0×10^(8) CFU·kg^(-1)添加组(EA)和*** 2.5×10^(9)CFU·kg^(-1)添加组(EB)。NC和PC组饲喂基础饲粮,SAL、EA、EB组在分组后即开始饲喂添加盐霉素和***的饲粮,持续至试验结束。在15 d时,除NC组外所有试验组的鸡均口服感染1.0×10^(5)个***孢子化卵囊。通过分析平均日增重(ADG)、克粪便卵囊数(OPG)、盲肠损伤评分、组织病理学检查和盲肠屏障相关分子(iNOS、MUC2、Occludin、JAM2、ZO-1)的基因表达量来评价***的抗球虫效果。结果表明:1)相比于NC组,EA和EB组可以显著增加感染前ADG(P<0.05),并且感染后SAL和EB组ADG显著高于PC组(P<0.05);2)SAL、EA和EB组粪便中的卵囊数显著低于PC组(P<0.05),PC组可以观察到明显的病理损伤、炎性细胞浸润和肠绒毛断裂,而预防组(SAL、EA、EB)病变较轻微,但是所有感染组盲肠损伤评分并没有差异(P>0.05);3)在整个试验期间各组存活率分别为100%(NC)、58.33%(PC)、83.33%(SAL)、58.33%(EA)、75.00%(EB);4)相比于NC组,PC组肠道iNOS、MUC2、Occludin、JAM2和ZO-1的表达均显著下降(P<0.05),而SAL、EA、EB组均能显著提高iNOS的表达量(P<0.05);EB组肠道MUC2、Occludin和JAM2的表达量也显著高于PC组(P<0.05)。综上所述,***具有一定的抗球虫效果,可能通过调节肠道屏障相关分子的表达发挥作用。

关键词：屎肠球菌柔嫩艾美耳球虫肠道屏障

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2021年我国饲料原料中常见霉菌毒素污染情况调查

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中国家禽 2023年第10期45卷 70-75页

作者：刘建高厉学武彭哲孙铝辉赵玲华中农业大学动物科技学院、动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北洪山实验室湖北武汉430070 新希望六和股份有限公司北京100102

为调查2021年我国各省饲料原料中黄曲霉毒素B1(AFB1)、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)和玉米赤霉烯酮(ZEN)的污染情况,试验分别对从中国不同地区采集的3166、3335和1407个饲料原料样品进行AFB1、DON和ZEN含量检测。结果显示,样品中AFB1、DON和... 详细信息

为调查2021年我国各省饲料原料中黄曲霉毒素B1(AFB1)、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)和玉米赤霉烯酮(ZEN)的污染情况,试验分别对从中国不同地区采集的3166、3335和1407个饲料原料样品进行AFB1、DON和ZEN含量检测。结果显示,样品中AFB1、DON和ZEN总污染率分别为79.2%、90.0%和82.2%,分别有6.8%、2.3%和12.2%的样品中AFB1、DON和ZEN浓度超过我国饲料卫生标准。值得注意的是,AFB1在花生粕和菜籽粕中的污染率为100%,其中花生粕中AFB1的超标率高达19.6%;DON在玉米胚芽粕中的超标率为24.0%,ZEN在玉米胚芽粕和玉米蛋白粉中的超标率分别高达56.3%和60.0%。研究表明,在2021年期间,我国饲料原料普遍受到AFB1、DON和ZEN的污染,其中花生粕的AFB1污染情况较为严重,玉米胚芽粕的DON和ZEN污染情况均较为严重,应在霉菌毒素防控中重点关注。

关键词：饲料原料黄曲霉毒素B1 呕吐毒素玉米赤霉烯酮污染情况

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益生菌调控肠道屏障功能预防家禽球虫病的研究进展

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微生物学报 2021年第5期61卷 1064-1072页

作者：焦宇洲于江旭高东阳王颢然蔡旭旺华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

球虫病给养禽业带来巨大经济损失,人们对绿色健康食品的迫切需求使球虫病的防控面临新的挑战。伴随世界“禁抗”进程的不断推进,家禽养殖业亟需一种安全有效的新型抗球虫方法。益生菌可竞争性排斥病原菌定殖以防止球虫病继发感染,可刺... 详细信息

球虫病给养禽业带来巨大经济损失,人们对绿色健康食品的迫切需求使球虫病的防控面临新的挑战。伴随世界“禁抗”进程的不断推进,家禽养殖业亟需一种安全有效的新型抗球虫方法。益生菌可竞争性排斥病原菌定殖以防止球虫病继发感染,可刺激宿主抗菌肽、黏蛋白和紧密连接蛋白的分泌以抵御球虫入侵,还可激活免疫反应以增强机体抗球虫感染的能力。本文从调控肠道微生物群、改善肠黏膜屏障和调节免疫系统功能等方面综述了益生菌在预防和控制家禽球虫病中的作用,以期为高效抗球虫益生菌制剂的研发提供参考。

关键词：球虫病益生菌肠道屏障

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羊弓形虫病间接ELISA诊断方法的建立

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中国动物传染病学报 2022年第1期30卷 127-133页

作者：李迎迎侯伦王敏李亚琼李明俊周艳琴赵俊龙申邦华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070 湖北省预防兽医学重点实验室武汉430070

为比较5种弓形虫抗原的诊断效果,建立实用的羊弓形虫病诊断方法,本研究制备了弓形虫速殖子全虫抗原和4个重组蛋白(GRA1、MIC3、MAG、BAG1),正交试验比较其免疫反应性,从中筛选出相对优势抗原并建立羊弓形虫病间接ELISA(iELISA)诊断方法... 详细信息

为比较5种弓形虫抗原的诊断效果,建立实用的羊弓形虫病诊断方法,本研究制备了弓形虫速殖子全虫抗原和4个重组蛋白(GRA1、MIC3、MAG、BAG1),正交试验比较其免疫反应性,从中筛选出相对优势抗原并建立羊弓形虫病间接ELISA(iELISA)诊断方法,用于检测弓形虫特异的IgG抗体。研究结果表明:除BAG1外上述4种抗原均具有较好的免疫反应性,综合考虑选择致密颗粒蛋白1(GRA1)作为诊断抗原建立了GRA1-iELISA,其检测弓形虫抗体灵敏度大于1∶100(血清稀释度),且不与羊莫氏巴贝斯虫、吕氏泰勒虫、捻转血毛线虫阳性血清发生交叉反应,特异性良好;运用建立的方法和改良凝集试验分别对采自山羊屠宰场的80份血清样品进行检测,测得的弓形虫感染阳性率分别为28.75%(23/80)和31.25%(25/80),二者总符合率为82.5%。本研究建立的ELISA检测方法对羊弓形虫病的诊断以及商业化试剂盒的开发具有重要参考价值。

关键词：羊弓形虫病 GRA1 间接ELISA

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1种植物瞬时表达捻转血矛线虫氨基肽酶基因和Hc23基因方法的建立

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中国兽医学报 2022年第12期42卷 2420-2426页

作者：叶莉莎张挺廖聪李婷婷田振东胡敏华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学农业农村部马铃薯生物学与生物技术重点实验室湖北武汉430070

为建立利用植物细胞瞬时表达反刍动物寄生线虫捻转血矛线虫优势抗原的方法,选取了氨基肽酶基因Hc-ap-10和优选抗原分子基因Hc23作为目标基因,将经过密码子优化的Hc-ap-10(AP10^(op))和Hc23分别插入pH7lic-EGFP表达载体并在N、C两端均添... 详细信息

为建立利用植物细胞瞬时表达反刍动物寄生线虫捻转血矛线虫优势抗原的方法,选取了氨基肽酶基因Hc-ap-10和优选抗原分子基因Hc23作为目标基因,将经过密码子优化的Hc-ap-10(AP10^(op))和Hc23分别插入pH7lic-EGFP表达载体并在N、C两端均添加核定位信号(nuclear localization sequence,NLS),使用电转法将pH7dNLSAP10^(op)和pH7dNLSHc23分别转入GV3101根癌农杆菌中,随后将根癌农杆菌悬液侵染本氏烟草,最后通过荧光显微镜观察目标蛋白定位情况,并提取侵染烟草叶片总蛋白,使用Western blot检测蛋白的表达量。结果显示,成功构建了植物双元表达载体pH7dNLSAP10^(op)和pH7dNLSHc23,荧光显微镜观察发现在目的基因N、C两端添加了核定位信号后的质粒转化根癌农杆菌。该方法外源表达的膜蛋白pH7dNLSAP10^(op)和pH7dNLSHc23都成功表达在本氏烟草叶片的细胞核上,Western blot也成功检测到Hc23和AP10^(op)蛋白,且Hc23蛋白的表达水平相对较高。结果表明,添加了核定位信号能成功将目的蛋白表达在植物细胞核上;密码子优化有利于大分子蛋白的高效表达,但对于一些相对分子质量相对较小的蛋白可能是非必要的。该研究成功将2种抗原分子表达在植物细胞中,为后续疫苗的研究奠定了基础。

关键词：瞬时表达捻转血矛线虫氨基肽酶 Hc23基因核定位信号根癌农杆菌本氏烟草

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引起牛乳腺炎的凝固酶阴性葡萄球菌研究进展

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中国兽医学报 2022年第8期42卷 1719-1723页

作者：李政志陈秋慧杨晶涵刘晓雅严蕊陈颖钰陈曦郭爱珍胡长敏华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

凝固酶阴性葡萄球菌(CoNS)通常引起牛隐性乳腺炎,导致奶牛业巨大经济损失。为有效防控牛CoNS性乳腺炎的发生,现对牛乳腺炎源CoNS的病原学、致病机理、耐药机制及其检测鉴定方法进行阐述,系统性分析牛凝固酶阴性乳腺炎的治疗与预防关键技... 详细信息

凝固酶阴性葡萄球菌(CoNS)通常引起牛隐性乳腺炎,导致奶牛业巨大经济损失。为有效防控牛CoNS性乳腺炎的发生,现对牛乳腺炎源CoNS的病原学、致病机理、耐药机制及其检测鉴定方法进行阐述,系统性分析牛凝固酶阴性乳腺炎的治疗与预防关键技术,并对CoNS的研究热点与前景进行展望,供同行参考。

关键词：凝固酶阴性葡萄球菌乳腺炎致病机理耐药性预防及治疗

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