检索结果-内蒙古大学图书馆

病毒学报 2012年第3期28卷 213-218页

作者：张子重汪雪宰俊杰孙乐强宋云峰陈焕春华中农业大学动物医学院动物传染病室武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

prME和NS1为乙型脑炎病毒两个主要的免疫保护蛋白,且均为N-糖蛋白。为研究N-糖基化对乙型脑炎病毒免疫保护的作用,本研究用PCR介导的定点突变方法,分别消除乙型脑炎病毒prME和NS1基因的不同N-糖基化位点,并构建了prME和NS1突变基因的真... 详细信息

prME和NS1为乙型脑炎病毒两个主要的免疫保护蛋白,且均为N-糖蛋白。为研究N-糖基化对乙型脑炎病毒免疫保护的作用,本研究用PCR介导的定点突变方法,分别消除乙型脑炎病毒prME和NS1基因的不同N-糖基化位点,并构建了prME和NS1突变基因的真核表达质粒。将质粒免疫四周龄雌性小白鼠,经两次免疫后,采集血清检测体液免疫反应,最后对小鼠用强毒进行攻击,观察并记录免疫保护力。研究结果显示,与野生型prME基因免疫组相比,消除单个糖基化位点后prME基因诱导的ELISA抗体、中和抗体和免疫保护力均略有升高,而同时消除两个糖基化位点的则会降低。NS1基因消除单个糖基化位点后保护率高达到100%,但消除两个糖基化位点后则免疫保护率略有降低(75%)。通过本研究证明,N-糖基化在维系乙型脑炎病毒prME和NS1蛋白的免疫保护中具有重要的作用,单个糖基化的缺失可增强蛋白的免疫原性,而两个糖基都缺失后,则造成了免疫效率的降低。

关键词：乙型脑炎病毒 prME基因 NS1基因 N-糖基化免疫

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胸膜肺炎放线杆菌血清7型apxIV基因缺失突变株的构建和鉴定

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畜牧兽医学报 2008年第5期39卷 634-638页

作者：刘金林郭毅谭臣陈砚贝为成陈焕春华中农业大学动物医学院动物传染病研究室武汉430070

ApxIV是胸膜肺炎放线杆菌的一种RTX毒素,为探究其在胸膜肺炎放线杆菌致病过程中的作用,以血清7型APP HB04为亲本菌株,通过接合转移和负向筛选方法,构建了一株apxIV基因缺失突变株。通过PCR、序列分析、Southern blot分析及遗传稳定性分... 详细信息

ApxIV是胸膜肺炎放线杆菌的一种RTX毒素,为探究其在胸膜肺炎放线杆菌致病过程中的作用,以血清7型APP HB04为亲本菌株,通过接合转移和负向筛选方法,构建了一株apxIV基因缺失突变株。通过PCR、序列分析、Southern blot分析及遗传稳定性分析等证明成功构建了突变株。对突变株生物学特性进行初步研究,发现突变株与亲本菌株相比,体外生长速度未发生明显变化,对小鼠的致病力有所降低。结果表明,毒素ApxⅣ在胸膜肺炎放线杆菌致病过程中发挥一定作用。突变株的成功构建及生物学特性研究为进一步阐明胸膜肺炎放线杆菌的致病性及开发更为安全、高效的基因工程疫苗奠定了坚实基础。

关键词：胸膜肺炎放线杆菌 apxIV 突变株构建鉴定

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N-糖基化对乙型脑炎病毒感染与增殖的影响

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农业生物技术学报 2012年第3期20卷 316-320页

作者：张子重汪雪宋云峰陈焕春华中农业大学动物医学院动物传染病室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

N-糖基化对于病毒的感染与增殖中均具有重要作用,切除病毒表面糖链或抑制病毒糖基化修饰的方法已成为登革热病毒等的潜在治疗方法。为阐明日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)表面的糖链在其感染和增殖过程中的作用,本... 详细信息

N-糖基化对于病毒的感染与增殖中均具有重要作用,切除病毒表面糖链或抑制病毒糖基化修饰的方法已成为登革热病毒等的潜在治疗方法。为阐明日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)表面的糖链在其感染和增殖过程中的作用,本研究用肽N-糖苷酶F(peptide N-glycosidase F,PNGase F)和内切糖苷酶H(endoglycosidase H,Endo H)处理乙型脑炎病毒,将酶切后的病毒用Western blot验证糖基化酶切的效果,将酶切的JEV接种BHK-21细胞进行蚀斑试验,观察蚀斑的大小及病毒滴度的变化情况。同时用衣霉素处理BHK-21细胞并同步接种JEV,进行蚀斑试验,观察蚀斑大小的变化与病毒增殖情况。结果显示,用Endo H和PNGase F处理JEV后,病毒形成的蚀斑均显著小于未处理的病毒对照,且病毒增殖滴度显著降低,说明病毒粒子表面的糖基化修饰对于病毒的侵染具有重要作用。衣霉素处理细胞后,病毒产生的蚀斑大小没有明显差异,但增殖滴度却显著降低,说明糖基化在JEV增殖过程中也具有重要的功能。本研究说明JEV的糖基化对于其感染和增殖均具有重要的作用,为开发抑制乙型脑炎病毒药物研究提供一个新的思路。

关键词：日本乙型脑炎病毒糖苷酶 N-糖基化感染增殖

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O型口蹄疫多基因重组腺病毒的构建及其免疫原性

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中国兽医学报 2009年第10期29卷 1286-1289页

作者：张克山向敏吴斌徐卓菲蔡利军王勤刚陈焕春华中农业大学动物医学院动物传染病实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

根据GenBank公布的序列设计1对引物扩增O型口蹄疫病毒P12A3C基因并亚克隆至腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV内。含有目的基因的穿梭质粒(pShuttle-PAC)线性化后和腺病毒骨架载体pAdeasy-1共同电转化入大肠杆菌BJ5183感受态细菌。利用细菌内... 详细信息

根据GenBank公布的序列设计1对引物扩增O型口蹄疫病毒P12A3C基因并亚克隆至腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV内。含有目的基因的穿梭质粒(pShuttle-PAC)线性化后和腺病毒骨架载体pAdeasy-1共同电转化入大肠杆菌BJ5183感受态细菌。利用细菌内同源重组法得到重组腺病毒质粒(pAd-PAC)。在Lipofectamine 2000介导下重组腺病毒质粒转染HEK293细胞得到重组腺病毒(Ad-PAC)。半数组织培养感染剂量(TCID50)测定、免疫荧光试验(IFA)和连续传代后目的基因的PCR扩增,证实重组病毒滴度为105.5TCID50/0.1 mL,重组病毒HEK293细胞中得以表达且遗传稳定性良好;动物试验表明,该重组病毒能够诱导小鼠产生较高水平的针对口蹄疫病毒的特异性抗体;本试验为口蹄疫重组腺病毒活载体疫苗的进一步研究和应用奠定了基础。

关键词：口蹄疫病毒腺病毒重组病毒免疫原性

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猪链球菌分子流行病学研究

猪链球菌分子流行病学研究

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第三届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会

作者：张安定朱伟峰胡攀金梅林华中农业大学动物医学院动物传染病实验室

猪链球菌病不仅严重危害我国乃至世界养猪业,而且已给我国特定从业人群的身体健康造成很大威胁。自从1968年丹麦首次报道人感染猪链球菌引起脑膜脑炎以来,该菌共引起二百多个国家的近400人感染。1998年我国江苏和2005年四川爆发的人

关键词：猪链球菌 mrp分子流行病学

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RNA干扰抗A型流感病毒的研究

RNA干扰抗A型流感病毒的研究

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中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会

作者：周红波金梅林喻正军徐晓娟彭亚平刘金林伍海芽刘虎陈焕春华中农业大学动物医学院动物传染病实验室

本研究选用流感病毒中高度保守的NP和M2基因作为RNA干扰的靶基因,针对NP基因保守区段设计了2对siRNA(NP749,NP1383),针对M2基因保守区段设计了3对siRNA (M48,M754,M949),通过载体介导,研究了这些siRNA对基因表达的影响及其对H1N1和H9N2...

本研究选用流感病毒中高度保守的NP和M2基因作为RNA干扰的靶基因,针对NP基因保守区段设计了2对siRNA(NP749,NP1383),针对M2基因保守区段设计了3对siRNA (M48,M754,M949),通过载体介导,研究了这些siRNA对基因表达的影响及其对H1N1和H9N2流感病毒在体内和体外复制的影响,筛选出能有效抑制流感病毒复制的siRNA序列,为探索RNAi技术应用于抗禽流感研究奠定基础。

关键词：

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猪链球菌流行病学及其耐药性研究

猪链球菌流行病学及其耐药性研究

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第三届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会

作者：金梅林何宏魁孙小美康超陈磊华中农业大学动物医学院动物传染病实验室

猪链球菌(Streptococcus suis,***)是猪群上呼吸道一种常在的革兰氏阳性球菌,主要存在于扁桃体和鼻腔内。其临床症状一般有脑膜炎,败血症,关节炎和肺炎等。猪链球菌病一直是困扰全球养猪业的主要问题,抗生素的使用在对本病的控制起到了

关键词：猪链球菌氟喹诺酮血清型

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RNA干扰抗A型流感病毒的研究

RNA干扰抗A型流感病毒的研究

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中国畜牧兽医学会禽病分会第十三次学术研讨会

作者：周红波金梅林喻正军徐晓娟彭亚平刘金林伍海芽刘虎陈焕春华中农业大学动物医学院动物传染病实验室武汉430070

本研究选用流感病毒中高度保守的NP和M2基因作为RNA干扰的靶基因,针对NP基因保守区段设计了2对siRNA(NP749,NP1383),针对M2基因保守区段设计了3对siRNA(M48,M754,M949),通过载体介导,研究了这些siRNA对基因表达的影响及其对H1N1和H9N2... 详细信息

本研究选用流感病毒中高度保守的NP和M2基因作为RNA干扰的靶基因,针对NP基因保守区段设计了2对siRNA(NP749,NP1383),针对M2基因保守区段设计了3对siRNA(M48,M754,M949),通过载体介导,研究了这些siRNA对基因表达的影响及其对H1N1和H9N2流感病毒在体内和体外复制的影响,筛选出能有效抑制流感病毒复制的siRNA序列,为探索RNAi技术应用于抗禽流感研究奠定基础.

关键词： RNA干扰流感病毒基因表达

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猪链球菌2型研究进展(综述)

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养殖与饲料 2005年第10期4卷 13-18页

作者：张安定金梅林陈焕春华中农业大学动物医学院传染病学研究室武汉430070

猪链球菌(Streptococcus Suis,SS)属于球菌科、链球菌属,是世界范围内引致猪链球菌病最主要的病原.该菌可引起猪脑膜炎以及败血症等疫病,人通过特定的传播途径亦可感染该菌,是一种重要的人畜共患病病原[1,2,3].依据细菌荚膜多糖(CPS)将S... 详细信息

猪链球菌(Streptococcus Suis,SS)属于球菌科、链球菌属,是世界范围内引致猪链球菌病最主要的病原.该菌可引起猪脑膜炎以及败血症等疫病,人通过特定的传播途径亦可感染该菌,是一种重要的人畜共患病病原[1,2,3].依据细菌荚膜多糖(CPS)将SS分为35个血清型,分别为1/2型和1～34型,其中2型SS致病性强、流行广,该型亦是临床分离频率最高的血清型.

关键词：猪链球菌2型综述猪链球菌病人畜共患病链球菌属世界范围传播途径荚膜多糖败血症

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甲型H1亚型流感病毒单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA方法的建立

甲型H1亚型流感病毒单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA方法的建立

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中国畜牧兽医学会2011学术年会

作者：赵刚但汉并孙小美金梅林华中农业大学动物医学院动物传染病实验室武汉湖北 430070

本课题研究过程中制备了多株抗甲型H1亚型流感病毒血凝素的单克隆抗体，并以此抗体作为原材料，建立甲型H1亚型流感病毒双抗体夹心ELISA检测方法。该方法能够准确、快速检测出畜群及人群中的甲型H1亚型流感病毒，对甲型H1亚型流感病毒... 详细信息

本课题研究过程中制备了多株抗甲型H1亚型流感病毒血凝素的单克隆抗体，并以此抗体作为原材料，建立甲型H1亚型流感病毒双抗体夹心ELISA检测方法。该方法能够准确、快速检测出畜群及人群中的甲型H1亚型流感病毒，对甲型H1亚型流感病毒的评估、预防及流行病学调查具有极其重要的意义。

关键词：甲型H1亚型猪流感病毒单克隆抗体病毒检测双抗体夹心ELISA检测法

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