检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧兽医学报 2009年第7期40卷 1054-1058页

作者：张建民吴斌赵战勤卢顺何华向敏李利娅张福涛陈焕春华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华南农业大学兽医学院广州510642

本研究旨在建立猪水肿毒素抗体的快速检测方法。以纯化的猪水肿毒素A亚基基因片段的原核表达产物作为抗原免疫BALB/c小鼠制备单抗,并利用表达蛋白和猪水肿毒素A亚基单抗酶结合物建立了竞争ELISA方法检测猪水肿毒素抗体。经过研究确定抗... 详细信息

本研究旨在建立猪水肿毒素抗体的快速检测方法。以纯化的猪水肿毒素A亚基基因片段的原核表达产物作为抗原免疫BALB/c小鼠制备单抗,并利用表达蛋白和猪水肿毒素A亚基单抗酶结合物建立了竞争ELISA方法检测猪水肿毒素抗体。经过研究确定抗原包被浓度为0.32μ***-1,待检血清最佳稀释度为1∶2,酶标单抗工作浓度为1∶3200,血清抑制率大于40%为阳性。应用单抗竞争ELISA和细胞毒性中和试验同时对60份血清进行猪水肿毒素抗体检测,竞争ELISA的检出率为33.8%,细胞毒性中和试验检出率为30.9%,两者符合率达88.2%。试验结果表明,该ELISA方法特异性强,敏感性高,稳定性和重复性好,操作简便。本方法的建立在实验室诊断的标准化、猪水肿病疫苗免疫效果的评价及流行病学调查方面具有较高的应用价值。

关键词：猪水肿毒素单克隆抗体单抗竞争ELISA 抗体检测

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免疫层析技术及应用的研究进展

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中国兽医学报 2021年第1期41卷 192-198页

作者：李雨芮刘晓雅张文劲陈颖钰郭爱珍胡长敏华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

免疫层析技术是一类以纳米级标记物探针作为示踪和标记物的检测技术。此类技术除了具有操作简易、反应迅速和时耗较短等特点外,还兼具低成本和高特异性,尤其适用于临场检测。免疫层析技术的发展随着时代需求也在不断加速和更新,现以经... 详细信息

免疫层析技术是一类以纳米级标记物探针作为示踪和标记物的检测技术。此类技术除了具有操作简易、反应迅速和时耗较短等特点外,还兼具低成本和高特异性,尤其适用于临场检测。免疫层析技术的发展随着时代需求也在不断加速和更新,现以经典的胶体金免疫层析技术为基础,综述时间分辨与镧系元素荧光免疫层析、荧光微球免疫层析、量子点免疫层析、纳米模拟酶免疫层析及结合新技术的免疫层析的原理、研究进展和临床应用,并对免疫层析技术的未来发展做出展望。

关键词：胶体金免疫层析荧光标记侧向免疫层析

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牛结核病免疫学诊断研究进展

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中国兽医学报 2018年第6期38卷 1250-1254,1259页

作者：彭永崇朱小洁王子健陈颖钰郭爱珍华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

牛结核病是一种严重危害养牛业、食品安全和公共卫生的人兽共惠传染病。由于检疫和扑杀是目前控制牛结核病的基本策略，检测技术成为影响牛结核病控制效果的重要因素。理想的检测方法应具有准确、简便、高效、成本低、对动物干扰小、结... 详细信息

牛结核病是一种严重危害养牛业、食品安全和公共卫生的人兽共惠传染病。由于检疫和扑杀是目前控制牛结核病的基本策略，检测技术成为影响牛结核病控制效果的重要因素。理想的检测方法应具有准确、简便、高效、成本低、对动物干扰小、结果可追溯等特点。当前的法定检疫方法为结核菌素皮内变态反应，该方法具有受环境分枝杆菌干扰、诊断特异性低、费时费力、对动物干扰大、结果判断主观性强、不可回溯等缺陷。一些牛结核实验室诊断技术克服了以上缺点，可与皮试法联用或单独使用。新型诊断抗原仍在不断被发掘，新型材料也被不断用于牛结核病诊断技术中。现对相关进展进行了归纳和综述，以期为牛结核病免疫学诊断的合理应用及深入研究提供参考。

关键词：牛结核牛分枝杆菌免疫学诊断抗原人兽共患病

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肉鸡胫骨软骨发育不良早期钙黏蛋白1(CDH1)差异表达研究

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畜牧兽医学报 2012年第4期43卷 642-646页

作者：田文霞李家奎王瑞覃平宁官保乔建钢李宏全毕丁仁潘思轶郭定宗华中农业大学动物医学院武汉430070 山西农业大学动物科技学院太谷030801 华中农业大学食品科技学院武汉430070 华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070

为研究福美双诱发肉鸡胫骨软骨发育不良(Tibial Dyschondroplasia,TD)早期钙黏蛋白1(CDH1)的差异表达,基础日粮中添加福美双,在试验第1、2、6天,对试验鸡进行剖杀,迅速采取胫骨生长板放入4%多聚甲醛溶液于4℃固定,做CDH1免疫组化分析;... 详细信息

为研究福美双诱发肉鸡胫骨软骨发育不良(Tibial Dyschondroplasia,TD)早期钙黏蛋白1(CDH1)的差异表达,基础日粮中添加福美双,在试验第1、2、6天,对试验鸡进行剖杀,迅速采取胫骨生长板放入4%多聚甲醛溶液于4℃固定,做CDH1免疫组化分析;提取对照组和饲喂福美双组的生长板总RNA,采用Real-time PCR对CDH1基因进行差异表达验证。结果钙黏蛋白1(CDH1/E-cadherin)基因在TD生长板表达上调,在对照和TD软骨生长板,其蛋白合成主要在前肥大、肥大区软骨细胞质,增殖区软骨细胞无表达,钙化区软骨细胞表达少,在饲喂福美双第1、2、6天其表达增加与定量PCR变化结果相一致,且在饲喂福美双第2、6天呈明显高表达。结果表明CDH1参与细胞黏附、血管入侵及调节Wnt/β-cat的信号传递,和其它分子共同调节软骨内骨化。

关键词：福美双肉鸡胫骨软骨发育不良钙黏蛋白1(CDH1) 差异表达

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犬附红细胞体的体外连续培养

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中国兽医学报 2009年第9期29卷 1125-1128页

作者：李晓云石德时李自力肖运才胡思顺刘梅袁宗辉毕丁仁华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 湖南农业大学动物医学院湖南长沙410128

犬血样经Giemsa染色镜检及PCR检测，证实感染附红细胞体。选择添加新生牛血清（BS）、酵母浸出液、葡萄糖等成份的PPLO肉汤（PPLO—S—BS）为培养液，将染虫红细胞稀释后接种到细胞培养板，置37℃、5％CO2的培养箱中培养。24～72h后红... 详细信息

犬血样经Giemsa染色镜检及PCR检测，证实感染附红细胞体。选择添加新生牛血清（BS）、酵母浸出液、葡萄糖等成份的PPLO肉汤（PPLO—S—BS）为培养液，将染虫红细胞稀释后接种到细胞培养板，置37℃、5％CO2的培养箱中培养。24～72h后红细胞溶血变为带虫血影（ghost）；在PPLO-S-BS中虫体生长较好，并能连续培养180d；除首次接种外不添加任何红细胞。对PPLO-S-BS中培养的带虫血影进行了光镜及扫描电镜观察、PCR鉴定、感染阴性红细胞试验、抗生素敏感性试验，结果表明其特征与接种物相同。

关键词：嗜血性霉形体(附红细胞体) 犬 PPLO肉汤体外培养血影

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长链非编码RNA在奶牛乳腺炎中作用机制的研究进展

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中国兽医科学 2022年第3期52卷 396-402页

作者：杨晶涵林昌杰许灏钧李政志陈秋慧严蕊陈曦陈颖钰郭爱珍胡长敏华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

奶牛乳腺炎是导致养牛业巨大经济损失的疾病,如今仍无有效防控方法。长链非编码RNA(LncRNA)既可以直接作用于m RNA,又可以通过调控mi RNA而间接作用于m RNA,从而影响下游靶基因及蛋白表达。LncRNA功能强大,广泛参与了染色体重构、核小... 详细信息

奶牛乳腺炎是导致养牛业巨大经济损失的疾病,如今仍无有效防控方法。长链非编码RNA(LncRNA)既可以直接作用于m RNA,又可以通过调控mi RNA而间接作用于m RNA,从而影响下游靶基因及蛋白表达。LncRNA功能强大,广泛参与了染色体重构、核小体修饰、可变剪接、基因组印记、靶标模拟、功能性蛋白转运、转录干扰、细胞周期及分化等多种机体重要的生理和病理学调控过程。研究证实,lncRNA在奶牛乳腺炎中发挥重要作用。本文综述了奶牛乳腺炎和lncRNA的研究背景、lncRNA的生物学功能、lncRNA在奶牛乳腺炎体内外模型中的作用、lncRNA介导奶牛乳腺炎相关信号通路的机制,并对lncRNA在乳腺炎等炎性疾病的研究与应用前景方面进行了展望。

关键词：奶牛乳腺炎长链非编码RNA 研究进展

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小鼠和奶牛乳腺上皮细胞的分离及培养特性比较

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动物医学进展 2015年第12期36卷 56-61页

作者：刘玉辉赖金伦寇明明邓明亮刘瑞宁陈颖钰胡长敏郭爱珍华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

为建立小鼠乳腺上皮细胞(MMECs)及奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)分离培养体系,并比较其生长特性。分别无菌采集健康妊娠后期昆明鼠及泌乳中期荷斯坦奶牛乳腺组织,采用改良混合酶消化结合差速贴壁法分离原代MMECs及BMECs,并进行细胞角蛋白18... 详细信息

为建立小鼠乳腺上皮细胞(MMECs)及奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)分离培养体系,并比较其生长特性。分别无菌采集健康妊娠后期昆明鼠及泌乳中期荷斯坦奶牛乳腺组织,采用改良混合酶消化结合差速贴壁法分离原代MMECs及BMECs,并进行细胞角蛋白18的免疫荧光鉴定;通过细胞形态跟踪观察评价传代、冻存和复苏后MMECs及BMECs生物学特性;连续培养及细胞计数绘制MMECs及BMECs生长曲线。结果显示,从小鼠和奶牛乳腺组织分离的目的细胞,经角蛋白18免疫荧光鉴定证实为MMECs及BMECs;汇合的单层MMECs多角形,呈铺路石样外观,BMECs呈鹅卵石样;MMECs在传至第2代时细胞特有形状消失,而BMECs传至第9代时仍保持其鹅卵石样外观;MMECs只能复苏冻存原代细胞,传代BMECs均可冻存和复苏。采用改良混合酶消化结合差速贴壁法可获得高纯度的MMECs和BMECs,两种细胞在生长培养特性上存在显著差异。

关键词：小鼠乳腺上皮细胞奶牛乳腺上皮细胞分离培养生长特性

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猪多杀性巴氏杆菌和链球菌混合感染的诊治及防控

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黑龙江畜牧兽医 2021年第9期 78-82,87,164页

作者：阮胜男于学祥孙琪库旭钢何启盖江云波华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学动物疫病诊断中心检测实验室武汉430070

为了确定湖北省某规模化猪场病死猪的发病原因,试验调查了猪场大体概况,解剖发病猪采集肺脏、气管等病料,并进行细菌分离、纯化,采用分子生物学方法进行核酸检测及血清型鉴定,利用药敏试验分析分离菌对常用抗菌药物的耐药性并提出防治... 详细信息

为了确定湖北省某规模化猪场病死猪的发病原因,试验调查了猪场大体概况,解剖发病猪采集肺脏、气管等病料,并进行细菌分离、纯化,采用分子生物学方法进行核酸检测及血清型鉴定,利用药敏试验分析分离菌对常用抗菌药物的耐药性并提出防治方案。结果表明:从样品中未检测到病毒核酸,仅检测到细菌核酸,经测定该猪场病死猪混合感染了猪多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)和猪链球菌(Streptococcus suis,SS),其中Pm的荚膜多糖基因型为D型,SS为血清9型;分离株Pm-D和SS-9对氧氟沙星、强力霉素、恩诺沙星、头孢拉定较敏感。根据药敏试验结果并结合该猪场情况提出综合防控意见,采用后发病猪病情得到有效控制。说明毒力较强的细菌原发致病可造成较大危害,药敏试验对于细菌性疾病的快速治疗和预防起到了至关重要的作用。

关键词：多杀性巴氏杆菌猪链球菌混合感染耐药诊断防控

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牛呼吸道感染细菌病原的致病机理与防控研究进展

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中国兽医学报 2016年第12期36卷 2183-2188页

作者：谢倩茹童胜涛邵咏旋姜鹏陈颖钰胡长敏郭爱珍华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

牛呼吸道疾病综合征(BRDC)是一种急性呼吸道疾病,其主要细菌性病原有多杀性巴氏杆菌、溶血性曼氏杆菌、化脓隐秘杆菌和昏睡嗜血杆菌,常见于断奶、运输等应激后牛群。该病呈世界性分布,可经呼吸道感染,严重影响肉牛及泌乳牛的品质,给养... 详细信息

牛呼吸道疾病综合征(BRDC)是一种急性呼吸道疾病,其主要细菌性病原有多杀性巴氏杆菌、溶血性曼氏杆菌、化脓隐秘杆菌和昏睡嗜血杆菌,常见于断奶、运输等应激后牛群。该病呈世界性分布,可经呼吸道感染,严重影响肉牛及泌乳牛的品质,给养牛业造成巨大的经济损失。国内关于BRDC的研究仍比较匮乏,且尚无可预防BRDC细菌性病原的疫苗,为更好地防控BRDC,现就国内外BRDC细菌性病原的致病机理和防控研究进展做一综述。

关键词：牛呼吸道疾病综合征多杀性巴氏杆菌溶血性曼氏杆菌化脓隐秘杆菌昏睡嗜血杆菌

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牛支原体病诊断技术的研究进展

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中国兽医科学 2020年第10期50卷 1294-1300页

作者：刘晓雅王朝好李婷尹伊娅李雨芮陈颖钰郭爱珍胡长敏华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

牛支原体感染可引起牛呼吸系统综合征、结膜炎、中耳炎、乳腺炎、关节炎甚至流产等疾病,给各国养牛业带来重大经济损失。由于目前尚无疫苗及有效的药物可用于该病的防治,及时诊断牛支原体病有利于牛场采取有效的措施以降低扩散风险,减... 详细信息

牛支原体感染可引起牛呼吸系统综合征、结膜炎、中耳炎、乳腺炎、关节炎甚至流产等疾病,给各国养牛业带来重大经济损失。由于目前尚无疫苗及有效的药物可用于该病的防治,及时诊断牛支原体病有利于牛场采取有效的措施以降低扩散风险,减少经济损失。本文就牛支原体病的临床特征、牛支原体分离培养、牛支原体免疫学检测、血清学诊断及分子诊断技术研究进展等方面进行综述,供同行参考。

关键词：牛支原体病诊断技术防控

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