检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧兽医学报 2017年第10期48卷 1939-1948页

作者：谭鑫库旭钢于学祥郭恒科何东贤范盛先何启盖华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070 生猪健康养殖协同创新中心武汉430070

鉴于常用的抗体检测方法不能完整反映免疫猪获得针对猪伪狂犬病毒的保护力,有必要建立猪伪狂犬病病毒(PRV)特异性IFN-γ的酶联免疫斑点检测(ELISpot)方法,并评估伪狂犬病疫苗细胞免疫的免疫效果。依照ELISpot基本操作流程,摸索PRV作为... 详细信息

鉴于常用的抗体检测方法不能完整反映免疫猪获得针对猪伪狂犬病毒的保护力,有必要建立猪伪狂犬病病毒(PRV)特异性IFN-γ的酶联免疫斑点检测(ELISpot)方法,并评估伪狂犬病疫苗细胞免疫的免疫效果。依照ELISpot基本操作流程,摸索PRV作为刺激原的最适浓度、外周血单个核细胞(PBMC)密度和作用时间以建立并优化该方法。将20头gB抗体检测阴性猪,随机分为单独弱毒疫苗免疫组、单独灭活疫苗免疫组、弱毒疫苗-灭活疫苗联合组及对照组,免疫后攻毒。利用所建方法,结合gB-ELISA、中和试验及攻毒保护试验,评价上述三种免疫程序的效果。试验结果表明:IFN-γ-ELISpot最佳条件为刺激原浓度2μg·孔^(-1)、外周血单核细胞(PBMC)浓度106·孔^(-1),培养时间36h。一免弱毒疫苗二免灭活疫苗组二免后2周,试验猪中和抗体效价可达1∶14.48,ELISpot斑点数可达(151.8±26.61)个·孔^(-1),且该免疫程序下,试验猪攻毒后体温、鼻拭子排毒及临床症状均低于其余试验组,攻毒8d后仅表现呼吸道症状;单独灭活疫苗免疫组二免后2周,试验猪的中和抗体效价可达1∶32.36,而ELISpot斑点数仅为(40.4±9.07)个·孔^(-1);单独弱毒疫苗免疫组二免后2周,试验猪的中和抗体效价仅为1∶1.36,但ELISpot斑点数可达(189.6±27.36)个·孔^(-1)。综合分析攻毒试验结果和ELISpot斑点数之间的相关性,本试验所建立的IFN-γ-ELISpot可用于猪伪狂犬病疫苗的细胞免疫评估,为免疫程序的评价和选择提供有效手段。

关键词：猪伪狂犬病 IFN-γ-ELISpot 细胞免疫疫苗免疫程序

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牛支原体膜蛋白的研究进展

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中国兽医学报 2018年第10期38卷 2011-2014,2019页

作者：刘畅曹钰晗赵春阳徐璐尧张文劲唐鑫赖金伦陈颖钰郭爱珍胡长敏华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

支原体（Mvfoplasma）是目前世界上最小的、进行自我复制的、且能在无生命培养基中生长的原核生物，结构简单．缺乏细胞壁。能通过0．22微米的细菌滤器。支原体种类繁多，对人类和动植物造成的危害大，且易污染体外培养的细胞，给科研... 详细信息

支原体（Mvfoplasma）是目前世界上最小的、进行自我复制的、且能在无生命培养基中生长的原核生物，结构简单．缺乏细胞壁。能通过0．22微米的细菌滤器。支原体种类繁多，对人类和动植物造成的危害大，且易污染体外培养的细胞，给科研工作带来多重不利影响。

关键词：牛支原体膜蛋白结构功能应用

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Bartha K61株活疫苗对猪伪狂犬变异毒株和传统毒株的免疫保护效力分析

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中国兽医杂志 2020年第7期56卷 15-18,23,I0001页

作者：严伟东李畅于学祥何启盖杨汉春中国农业大学动物医学院北京海淀100193 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

为了分析猪伪狂犬病活疫苗Bartha K61株预防流行变异毒株的效力。以经典PRV-EA株和变异PRV-XT株为攻毒毒株,评价Bartha K61活疫苗免疫仔猪对伪狂犬病病毒变异株的保护效力。用Bartha K61株活疫苗免疫4~5周龄断奶仔猪,免疫28 d后,分别用P... 详细信息

为了分析猪伪狂犬病活疫苗Bartha K61株预防流行变异毒株的效力。以经典PRV-EA株和变异PRV-XT株为攻毒毒株,评价Bartha K61活疫苗免疫仔猪对伪狂犬病病毒变异株的保护效力。用Bartha K61株活疫苗免疫4~5周龄断奶仔猪,免疫28 d后,分别用PRV-EA株和流行变异PRV-XT株攻毒,观察仔猪的临床症状和病理变化,检测鼻腔排毒情况。结果显示,Bartha K61株活疫苗可对经典PRV-EA株攻毒提供良好的免疫保护,但对变异毒株PRV-XT仅能提供部分保护。PRV-EA株攻毒组所有猪只未出现明显临床症状,而PRV-XT攻毒组出现较为明显的临床症状。表明Bartha K61株活疫苗对传统毒株有良好保护效果,而对流行变异毒株不能提供完全保护。

关键词：猪伪狂犬病 Bartha K61株活疫苗 PRV-EA株变异强毒PRV-XT株攻毒保护试验

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山东某猪场一起猪伪狂犬病的诊断与控制

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畜牧与兽医 2016年第9期48卷 111-113页

作者：谭鑫库旭钢周春陵许拓郭恒科何启盖华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

从疑似发生猪伪狂犬病（PR）的山东某猪场中,采集流产母猪的血清及发病仔猪和死胎等样品,进行实验室血清学和病原学检测。检测结果是：流产母猪血清PRV-g E抗体检测阳性率为100%（12/12）;同群表现正常母猪血清g E抗体阳性率100%（10/1... 详细信息

从疑似发生猪伪狂犬病（PR）的山东某猪场中,采集流产母猪的血清及发病仔猪和死胎等样品,进行实验室血清学和病原学检测。检测结果是：流产母猪血清PRV-g E抗体检测阳性率为100%（12/12）;同群表现正常母猪血清g E抗体阳性率100%（10/10）。病料提取DNA的g E-PCR检测阳性率为80%（8/10）;同时从阳性病料中分离到猪伪狂犬病病毒SD2015,对分离株g B、g C、g E、TK、RR1和RR2基因进行测序发现,该分离株与Ea株和Bartha株的g B基因同源性分别为99.5%和98.1%,且与我国近年分离的PRV毒株同源性高,亲缘关系近。此外,该场分离株与我国2012年以来流行毒株在g C、g E、TK、RR1和RR2基因序列同源性在99.3%-99.9%。结合临床表现,可确诊该场发生了猪伪狂犬病。使用伪狂犬病疫苗（HB98株）紧急接种,1个月后,疫情得到有效控制。

关键词：猪伪狂犬病血清学检测 PCR检测基因测序

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牛支原体免疫学及免疫学诊断研究进展

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中国兽医学报 2019年第9期39卷 1868-1872页

作者：张文劲张文皓唐鑫李雨芮陈曦陈颖钰郭爱珍胡长敏华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

牛支原体是一种能够感染任何年龄牛的致病微生物,导致患牛严重的呼吸系统疾病、生殖系统疾病、角膜炎、乳腺炎及关节炎等。1961年,首次从美国乳腺炎患牛中分离到了牛支原体[1],全球范围内均报道了由牛支原体感染导致奶牛乳房炎所造成的... 详细信息

牛支原体是一种能够感染任何年龄牛的致病微生物,导致患牛严重的呼吸系统疾病、生殖系统疾病、角膜炎、乳腺炎及关节炎等。1961年,首次从美国乳腺炎患牛中分离到了牛支原体[1],全球范围内均报道了由牛支原体感染导致奶牛乳房炎所造成的经济损失案例。在我国,于2008年首次在重症肺炎的患牛中发现了牛支原体[2],并在2011年完成了测序[3],比较基因组学分析表明牛支原体不同分离株之间毒力存在着明显差异[4-7]。

关键词：牛支原体牛支原体病传染病免疫学诊断研究进展

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禽霍乱巴氏杆菌的分离鉴定与致病性研究

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中国兽医杂志 2013年第2期49卷 21-24,I0001页

作者：于成接丁优玲华亚峰金梅林张安定华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

禽巴氏杆菌病又称禽霍乱,是由多杀性巴氏杆菌所引起的鸡、火鸡、鸭、鹅等禽类的一种出血性、败血性传染病。禽巴氏杆菌病在我国有些地区的养鸡场发病严重,常造成严重的经济损失,是危害养禽业的重要传染病之一。2011年10月广西某鸡场发... 详细信息

禽巴氏杆菌病又称禽霍乱,是由多杀性巴氏杆菌所引起的鸡、火鸡、鸭、鹅等禽类的一种出血性、败血性传染病。禽巴氏杆菌病在我国有些地区的养鸡场发病严重,常造成严重的经济损失,是危害养禽业的重要传染病之一。2011年10月广西某鸡场发生产蛋鸡急性致死病例,流行病学与临床剖检结果疑似禽巴氏杆菌感染所致疾病。分离的病原镜检可见革兰染色阴性、瑞氏染色两极浓染的小杆菌,16SrRNA序列分析表明,该菌与禽巴氏杆菌的同源性为98%,经分型PCR鉴定该菌为A型巴氏杆菌。致病性试验结果表明,该菌对鸡表现为较高的致病性,人工感染100CFU即能导致10周龄的鸡3d内死亡。药敏试验结果表明,该菌对环丙沙星、恩诺沙星、四环素、痢特灵、氧氟沙星敏感,通过鸡场彻底消毒并结合使用恩诺沙星和四环素进行治疗,控制了该病的发生。

关键词：多杀性巴氏杆菌 PCR 实验室诊断

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梅花鹿γ-干扰素在不同真核细胞系中稳定表达的研究

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中国畜牧兽医 2010年第5期37卷 85-89页

作者：刘颖王冰于清龙熊家军杨利国陈焕春郭爱珍华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学动物医学院预防兽医学省重点实验室武汉430070 华中农业大学动物科技学院武汉430070

提取经植物血凝素诱导培养的梅花鹿外周血淋巴细胞总RNA,应用RT-PCR方法扩增出梅花鹿γ-干扰素成熟蛋白基因,经克隆测序表明与GenBank上发表的干扰素序列同源性为100%。将其重组到含有CMV增强子的真核表达载体质粒pCI-neo上。利用磷酸... 详细信息

提取经植物血凝素诱导培养的梅花鹿外周血淋巴细胞总RNA,应用RT-PCR方法扩增出梅花鹿γ-干扰素成熟蛋白基因,经克隆测序表明与GenBank上发表的干扰素序列同源性为100%。将其重组到含有CMV增强子的真核表达载体质粒pCI-neo上。利用磷酸钙介导转染法将重组载体质粒pCI-neo-CerIFN-γ转染入中国仓鼠肾细胞(BHK-21)和牛肾细胞(MDBK)中,在G418抗性压力下进行筛选培养获得了稳定分泌表达的转染细胞系。通过Western blotting检测确定表达产物的相对分子质量分别为23、20、16ku,与预测大小一致。本研究成果为进一步开发梅花鹿生物制品类治疗制剂奠定了基础。

关键词：梅花鹿 γ-干扰素细胞系真核表达

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PEDV IgG抗体时间分辨荧光免疫层析(TRFIA)检测方法的建立

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中国兽医学报 2020年第11期40卷 2085-2089页

作者：朱玲程育芳曹华陈淑华孟宪荣何启盖华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

为了建立一种快速定量检测血清中猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)IgG抗体时间分辨荧光免疫层析(TRFIA)的检测方法,本研究采用竞争法和荧光免疫层析技术,以羧基荧光微球与PEDV S蛋白偶联,以抗IgG FC片段单抗和PE... 详细信息

为了建立一种快速定量检测血清中猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)IgG抗体时间分辨荧光免疫层析(TRFIA)的检测方法,本研究采用竞争法和荧光免疫层析技术,以羧基荧光微球与PEDV S蛋白偶联,以抗IgG FC片段单抗和PEDV S1单抗作为试纸条检测线(T线)和质控线(C线),制备PEDV IgG抗体检测荧光定量免疫层析试纸条。通过对蛋白与荧光微球偶联方法、包被抗体量等对本研究工艺进行优化,并通过线性范围、最低检出限、精密性等性能指标以及与临床样品检测结果比对,对PEDV IgG抗体时间分辨荧光层析检测方法进行评价。结果显示,本研究所制备的PEDV IgG抗体检测试纸条线性范围为25~2 500 g/L,低检出限为25 g/L,批内变异系数与批间变异系数均小于15%,平均添加回收率为100.88%~102.70%,检测时间为15 min,试纸条与5种其他猪病血清抗体无交叉反应。临床样品检测发现,其与实验室间接免疫荧光检测结果符合率为95.6%。综上,本研究所研制的PEDV IgG抗体检测时间分辨荧光免疫层析试纸条灵敏度较高、特异性较高、准确度高、操作简便、快速,可用于临床PEDV IgG抗体的检测。

关键词：猪流行性腹泻(PED) IgG抗体时间分辨荧光免疫层析(TRFIA) 定量检测快检

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非人灵长类病毒性腹泻病研究进展

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中国兽医学报 2017年第1期37卷 183-189页

作者：祁明普汪乾坤陈颖钰郭爱珍华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学动物科技学院湖北武汉430070

非人灵长类动物是一类以猕猴为主的灵长类动物，包括猕猴、恒河猴、长尾黑颚猴、普通绒猴、绵头绢猴、大猩猩等，其在遗传物质、组织结构、生理代谢和生活习性等方面与人类高度相似，是医学领域中最具研究和应用价值的实验动物。但其在... 详细信息

非人灵长类动物是一类以猕猴为主的灵长类动物，包括猕猴、恒河猴、长尾黑颚猴、普通绒猴、绵头绢猴、大猩猩等，其在遗传物质、组织结构、生理代谢和生活习性等方面与人类高度相似，是医学领域中最具研究和应用价值的实验动物。但其在研究过程中常由于感染病毒而导致腹泻。

关键词：非人灵长类动物腹泻病毒轮状病毒杯状病毒腺病毒

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miRNA在奶牛乳腺炎疾病中的研究进展

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中国兽医学报 2020年第8期40卷 1660-1664页

作者：李婷尹伊娅唐鑫张文劲李雨芮陈颖钰郭爱珍胡长敏华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

奶牛乳腺炎是一种常见的奶牛疾病,多发而且病因复杂,除饲养管理不良或遗传因素外,其他多种病原微生物也会引起该病,如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌及支原体等,给养牛业造成了巨大的经济损失([1])。miRNA作为小的非编码RNA,与mRNA结... 详细信息

奶牛乳腺炎是一种常见的奶牛疾病,多发而且病因复杂,除饲养管理不良或遗传因素外,其他多种病原微生物也会引起该病,如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌及支原体等,给养牛业造成了巨大的经济损失([1])。miRNA作为小的非编码RNA,与mRNA结合,从而抑制蛋白的翻译或者引起mRNA的降解,参与细胞生长、分化、增殖以及凋亡等多种生物学功能。

关键词：奶牛乳腺炎 miRNA

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