检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：胡进康超金梅林华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室农业部兽用诊断制剂创制重点实验室生猪健康养殖协同创新中心

擅要,随着养殖业大规模、集约化的快速发展,人类期望得到更加安全、高效的饲料添加剂来促进动物的生长和提高饲料利用率,同时能改善肉、牛奶和鸡蛋的品质,并能减少养殖业对生态环境的污染。随着抗生素的禁用,益生菌作为饲用抗生素的替... 详细信息

擅要,随着养殖业大规模、集约化的快速发展,人类期望得到更加安全、高效的饲料添加剂来促进动物的生长和提高饲料利用率,同时能改善肉、牛奶和鸡蛋的品质,并能减少养殖业对生态环境的污染。随着抗生素的禁用,益生菌作为饲用抗生素的替代品备受关注,它的功能主要是改善动物肠道微生态平衡,促进宿主健康进而抵抗对动物和人类构成威胁的病原菌。本文主要概述了益生菌在养殖业中的应用和对动物健康的影响。

关键词：益生菌机体免疫健康养殖

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IFN-γ-ELISpot方法用于评价猪伪狂犬病疫苗免疫效果

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畜牧兽医学报 2017年第10期48卷 1939-1948页

作者：谭鑫库旭钢于学祥郭恒科何东贤范盛先何启盖华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070 生猪健康养殖协同创新中心武汉430070

鉴于常用的抗体检测方法不能完整反映免疫猪获得针对猪伪狂犬病毒的保护力,有必要建立猪伪狂犬病病毒(PRV)特异性IFN-γ的酶联免疫斑点检测(ELISpot)方法,并评估伪狂犬病疫苗细胞免疫的免疫效果。依照ELISpot基本操作流程,摸索PRV作为... 详细信息

鉴于常用的抗体检测方法不能完整反映免疫猪获得针对猪伪狂犬病毒的保护力,有必要建立猪伪狂犬病病毒(PRV)特异性IFN-γ的酶联免疫斑点检测(ELISpot)方法,并评估伪狂犬病疫苗细胞免疫的免疫效果。依照ELISpot基本操作流程,摸索PRV作为刺激原的最适浓度、外周血单个核细胞(PBMC)密度和作用时间以建立并优化该方法。将20头gB抗体检测阴性猪,随机分为单独弱毒疫苗免疫组、单独灭活疫苗免疫组、弱毒疫苗-灭活疫苗联合组及对照组,免疫后攻毒。利用所建方法,结合gB-ELISA、中和试验及攻毒保护试验,评价上述三种免疫程序的效果。试验结果表明:IFN-γ-ELISpot最佳条件为刺激原浓度2μg·孔^(-1)、外周血单核细胞(PBMC)浓度106·孔^(-1),培养时间36h。一免弱毒疫苗二免灭活疫苗组二免后2周,试验猪中和抗体效价可达1∶14.48,ELISpot斑点数可达(151.8±26.61)个·孔^(-1),且该免疫程序下,试验猪攻毒后体温、鼻拭子排毒及临床症状均低于其余试验组,攻毒8d后仅表现呼吸道症状;单独灭活疫苗免疫组二免后2周,试验猪的中和抗体效价可达1∶32.36,而ELISpot斑点数仅为(40.4±9.07)个·孔^(-1);单独弱毒疫苗免疫组二免后2周,试验猪的中和抗体效价仅为1∶1.36,但ELISpot斑点数可达(189.6±27.36)个·孔^(-1)。综合分析攻毒试验结果和ELISpot斑点数之间的相关性,本试验所建立的IFN-γ-ELISpot可用于猪伪狂犬病疫苗的细胞免疫评估,为免疫程序的评价和选择提供有效手段。

关键词：猪伪狂犬病 IFN-γ-ELISpot 细胞免疫疫苗免疫程序

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非人灵长类病毒性腹泻病研究进展

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中国兽医学报 2017年第1期37卷 183-189页

作者：祁明普汪乾坤陈颖钰郭爱珍华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学动物科技学院湖北武汉430070

非人灵长类动物是一类以猕猴为主的灵长类动物，包括猕猴、恒河猴、长尾黑颚猴、普通绒猴、绵头绢猴、大猩猩等，其在遗传物质、组织结构、生理代谢和生活习性等方面与人类高度相似，是医学领域中最具研究和应用价值的实验动物。但其在... 详细信息

非人灵长类动物是一类以猕猴为主的灵长类动物，包括猕猴、恒河猴、长尾黑颚猴、普通绒猴、绵头绢猴、大猩猩等，其在遗传物质、组织结构、生理代谢和生活习性等方面与人类高度相似，是医学领域中最具研究和应用价值的实验动物。但其在研究过程中常由于感染病毒而导致腹泻。

关键词：非人灵长类动物腹泻病毒轮状病毒杯状病毒腺病毒

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猪丹毒流行菌株耐药特性研究

猪丹毒流行菌株耐药特性研究

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第二届狮子山养猪高峰论坛暨第十八届全国规模化猪场主要疫病监控与净化专题研讨会

作者：胡进王雅康超金梅林华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室农业部兽用诊断制剂创制重点实验室生猪健康养殖协同创新中心武汉430070

本研究通过分析临床分离的红斑丹毒丝菌耐药谱及对其喹诺酮耐药分子特征进行研究,发现红斑丹毒丝菌对卡那霉素、链霉素、阿米卡星、多粘菌素B和万古霉素的耐药率为100％,庆大霉素和复方新诺明的耐药率分别为97.6％和87.8％,环丙沙星、... 详细信息

本研究通过分析临床分离的红斑丹毒丝菌耐药谱及对其喹诺酮耐药分子特征进行研究,发现红斑丹毒丝菌对卡那霉素、链霉素、阿米卡星、多粘菌素B和万古霉素的耐药率为100％,庆大霉素和复方新诺明的耐药率分别为97.6％和87.8％,环丙沙星、氧氟沙星、壮观霉素、林可霉素和四环素的耐药率分别为48.8％,26.8％,24.4％,22.0％和14.6％.强力霉素、阿莫西林、恩诺沙星、头孢曲松、青霉素、氨苄西林、头孢拉定、阿奇霉素和克林霉素的耐药率均为0.从耐药率来看,当前最适合防控红斑丹毒丝菌的药物依次是：β-内酰胺类、林可酰胺类和四环素类.

关键词：红斑丹毒丝菌耐药谱喹诺酮耐药相关基因

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猪支气管败血波氏杆菌hcp基因缺失株构建及其生物学特性研究

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微生物学报 2017年第2期57卷 264-269页

作者：常宇慧张洪峰彭忠李慧陈焕春吴斌农业微生物学国家重点实验室生猪健康养殖协同创新中心华中农业大学动物科学技术学院动物医学院湖北武汉430070

【目的】构建猪支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)Ⅵ型分泌系统(T6SS)溶血素共调节蛋白hcp基因缺失株,并对其基本生物学特性进行初步的研究。【方法】使用自杀性质粒介导同源重组的方法敲除猪支气管败血波氏杆菌QH0814... 详细信息

【目的】构建猪支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)Ⅵ型分泌系统(T6SS)溶血素共调节蛋白hcp基因缺失株,并对其基本生物学特性进行初步的研究。【方法】使用自杀性质粒介导同源重组的方法敲除猪支气管败血波氏杆菌QH0814菌株hcp基因,并比较hcp基因缺失前后,菌体对细胞的黏附入侵、小鼠毒力及组织载菌量上的差异。【结果】成功构建支气管败血波氏杆菌hcp基因缺失株QH0814Δhcp,连续传50代且遗传稳定;缺失株与亲本株生长无明显差异;缺失株的黏附能力与亲本株差异不显著,但入侵能力显著降低(P<0.05);与亲本株相比,半数致死量提高,同时,缺失株对昆明鼠的感染能力也显著降低(P<0.05)。【结论】hcp基因的缺失对支气管败血波氏杆菌增殖无影响,但缺失后其入侵能力和定殖能力显著降低,由此推测hcp基因与支气管败血波氏杆菌的入侵和定殖相关。

关键词：支气管败血波氏杆菌 hcp基因缺失

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明尼苏达大学兽医诊断实验室工作一年的感悟-致远去的莫教授

明尼苏达大学兽医诊断实验室工作一年的感悟-致远去的莫教授

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第二届狮子山养猪高峰论坛暨第十八届全国规模化猪场主要疫病监控与净化专题研讨会

作者：陈芳洲刘爱民 Douglas Marthaler 何启盖华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070 明尼苏达大学动物医学院圣保罗 55108美国明尼苏达州堪萨斯州立大学兽医诊断实验室曼哈顿 66506美国堪萨斯州

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猪伪狂犬病病毒直接免疫荧光检测方法的建立及初步应用

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中国预防兽医学报 2017年第12期39卷 993-997页

作者：徐黎晖彭忠赵婷婷徐守兴陈焕春吴斌华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室/湖北省生猪健康养殖协同创新中心湖北武汉430070

为建立一种快速、敏感、准确的猪伪狂犬病病毒(PRV)直接免疫荧光检测方法(DFM),本研究通过制备并纯化PRV gE蛋白单克隆抗体(MAb),将其标记异硫氰酸荧光素(FITC)后对荧光抗体的最佳工作条件进行摸索;并对荧光抗体的特异性、敏感性、重复... 详细信息

为建立一种快速、敏感、准确的猪伪狂犬病病毒(PRV)直接免疫荧光检测方法(DFM),本研究通过制备并纯化PRV gE蛋白单克隆抗体(MAb),将其标记异硫氰酸荧光素(FITC)后对荧光抗体的最佳工作条件进行摸索;并对荧光抗体的特异性、敏感性、重复性和稳定性进行测定;应用DFM对从临床收集的83份疑似病料进行检测,同时用PCR检测作为对照,计算符合率。结果显示,本研究制备FITC标记抗体的F/P比值为2.578±0.012,符合标准;荧光抗体的最佳工作条件为:使用固定剂(60%丙酮+40%乙醇)于-20℃固定20 min,抗体工作浓度为15μg/mL,抗体孵育时间为1 h;荧光抗体能在10~7病毒稀释度(1×TCID50)检出阳性信号,与PCV2、PPV、PRRSV、CSFV、PRV Bartha-K61均无交叉反应;批内和批间重复性良好,-20℃保存5个月染色后荧光强度仍稳定;83份临床样品检测结果显示,DFM与PCR的符合率为74.7%,其中淋巴结和扁桃体的符合率较高,分别为85.7%和93.3%。本研究建立的PRV直接免疫荧光检测方法为临床PRV检测和复合诊断奠定基础,适用于临床推广。

关键词：猪伪狂犬病病毒单克隆抗体荧光抗体直接免疫荧光检测方法

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胞内劳森菌巢式PCR检测方法的建立及初步临床应用

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中国兽医学报 2017年第1期37卷 40-46页

作者：彭忠涂志勤梁婉胡睿铭王豪男寿琎董超李宗华陈焕春吴斌华中农业大学动物医学院/农业微生物学国家重点实验室/生猪健康养殖协同创新中心湖北武汉430070

为了掌握胞内劳森菌在湖北省5个疑似猪增生性肠炎暴发规模化猪场中的流行情况,我们建立了一种从粪便中检测胞内劳森菌的巢式PCR方法,并利用该方法对采集于这5个规模化猪场不同生产阶段不同临床表现猪群的1 003份粪便样品进行监测。结果... 详细信息

为了掌握胞内劳森菌在湖北省5个疑似猪增生性肠炎暴发规模化猪场中的流行情况,我们建立了一种从粪便中检测胞内劳森菌的巢式PCR方法,并利用该方法对采集于这5个规模化猪场不同生产阶段不同临床表现猪群的1 003份粪便样品进行监测。结果显示:5个猪场的胞内劳森菌检出率在11.5%~19.4%之间,平均阳性率为15.5%;就临床表现而言,腹泻猪粪便样品中胞内劳森菌的检出率高于非腹泻猪;就生产阶段而言,保育及育肥猪中胞内劳森菌的检出率高于断奶仔猪、母猪和公猪。我们还利用粪便检测胞内劳森菌呈阳性、疑似临床症状明显的猪的肠道制备的感染溶液进行了病例复制,试验猪在灌服感染溶液后出现了与胞内劳森菌感染相似的临床症状及病理变化,并且从感染猪的肠道组织和粪便中检测到了胞内劳森菌的存在。本试验对于进一步了解胞内劳森菌在我国猪群中的流行情况及致病性具有一定的意义。

关键词：胞内劳森菌猪群阳性率巢式PCR 病例复制

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金丝猴源益生粪肠球菌dlt7a的发酵工艺

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华中农业大学学报 2017年第5期36卷 74-80页

作者：白文妹李雪梅申立泉石德时杨敬元姚辉龙兴权欧阳潮肖运才农业微生物学国家重点实验室/华中农业大学动物医学院武汉430070 湖北神农架金丝猴保育生物学湖北省重点实验室神农架442411 湖北华大瑞尔科技有限公司荆州434000

从神农架金丝猴的粪便中分离出1株益生菌株dlt7a,经鉴定为粪肠球菌。为进一步提高发酵液中dlt7a的活菌数量,对菌株dlt7a的发酵工艺进行优化。通过单因素水平试验,确定dlt7a的最佳培养条件为装液量20%(50mL/250mL),接种量2%,培养基初始pH... 详细信息

从神农架金丝猴的粪便中分离出1株益生菌株dlt7a,经鉴定为粪肠球菌。为进一步提高发酵液中dlt7a的活菌数量,对菌株dlt7a的发酵工艺进行优化。通过单因素水平试验,确定dlt7a的最佳培养条件为装液量20%(50mL/250mL),接种量2%,培养基初始pH 6.5。设计Plackett-Burman(PB)试验和响应面试验,找出发酵培养基中影响dlt7a活菌数的主要成分是蔗糖、鱼粉和KH_2PO_4,并优化3种重要成分的含量,确定最优发酵培养基配方为:蔗糖2.55%,鱼粉2.63%,豆粕2.5%,酵母膏0.4%,CaCO_3 1.0%,KCl 0.1%,MgSO_4·7H_2O 0.1%,KH_2PO_4 0.014%。在此条件下培养dlt7a菌株,活菌数可达58.83×108cfu/mL,比优化前提高了46.53%。

关键词：金丝猴粪肠球菌发酵工艺响应面法优化

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猪瘟病毒基因型概述

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动物医学进展 2017年第11期38卷 107-111页

作者：吴丹丹彭忠陈焕春吴斌华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室生猪健康养殖协同创新中心湖北武汉430070

猪瘟的发生和流行严重危害我国及世界养猪业的健康发展。由于猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)只有一个血清型,所以基于传统的血清学方法针对临床上CSFV开展流行病学研究较为困难。随着分子生物学的发展,人们在对CSFV基因结... 详细信息

猪瘟的发生和流行严重危害我国及世界养猪业的健康发展。由于猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)只有一个血清型,所以基于传统的血清学方法针对临床上CSFV开展流行病学研究较为困难。随着分子生物学的发展,人们在对CSFV基因结构进行研究的过程中发现,基于其部分基因序列可以将该病毒分为若干基因型和基因亚型,进而揭示CSFV的区域分布和进化规律,有效地追踪CSFV的起源和传播特点。论文结合我国已有的CSFV流行病学数据,对现有的CSFV基因分型标准进行介绍,为进一步研究CSFV的变化规律、监测新型病毒出现,以及制定有效的防控净化措施提供参考。

关键词：猪瘟病毒遗传进化分析基因型

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