检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：杨新朱凯祥漆明伟张宗泽方瑞周艳琴赵俊龙胡敏农业微生物学国家重点实验室华中农业大学动物医学院

目的为了方便有效的开展捻转血矛线虫流行病学调查的需要,建立捻转血矛线虫环介导等温扩增(LAMP)检测方法。方法针对捻转血矛线虫核糖体DNA的ITS-2序列设计了LAMP引物,建立了捻转血矛线虫LAMP检测方法,同时进行了敏感性和特异性实验。另... 详细信息

目的为了方便有效的开展捻转血矛线虫流行病学调查的需要,建立捻转血矛线虫环介导等温扩增(LAMP)检测方法。方法针对捻转血矛线虫核糖体DNA的ITS-2序列设计了LAMP引物,建立了捻转血矛线虫LAMP检测方法,同时进行了敏感性和特异性实验。另外,利用建立的LAMP检测方法检测了湖北省天门市采集的115份山羊样品,并同常规PCR方法进行比较。结果本实验建立的LAMP检测方法的敏感性为常规PCR的100倍左右,并且特异性强,不与蛇形毛圆线虫、环束背带线虫、点状古柏线虫、牛仰口线虫、粗纹食道口线虫、肝片吸虫、鹿前后盘吸虫和莫尼茨绦虫等寄生蠕虫发生交叉反应。115份山羊样品中,LAMP检测方法比PCR方法多检测出30份阳性样品,进一步证实LAMP检测方法的敏感性高于PCR。结论本研究建立的捻转血矛线虫LAMP检测方法灵敏度高,特异性强,经济实用且检测简单,适用于捻转血矛线虫的检测。

关键词：捻转血矛线虫特异性环介导等温扩增检测方法

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儿茶酚胺类激素对胸膜肺炎放线杆菌生长的调节作用及机制

儿茶酚胺类激素对胸膜肺炎放线杆菌生长的调节作用及机制

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：黎璐陈召辉苏志鹏陈焕春周锐农业微生物学国家重点实验室华中农业大学动物医学院

引言微生物能够感应宿主的应激激素,将其作为一种环境信号,调节自身的生长和毒力等行为,进而影响疾病的发生发展过程,这种现象成为了应激能影响感染性疾病发生与发展的一种新的机制,也是病原菌重要的致病机理之一。本人前期的研究发现... 详细信息

引言微生物能够感应宿主的应激激素,将其作为一种环境信号,调节自身的生长和毒力等行为,进而影响疾病的发生发展过程,这种现象成为了应激能影响感染性疾病发生与发展的一种新的机制,也是病原菌重要的致病机理之一。本人前期的研究发现儿茶酚胺类激素能够广泛调控猪的重要病原菌胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)基因的表达,并调节APP一些感染相关特征,说明APP能主动响应宿主的应激激素。本研究从生长调节角度,进一步探索了儿茶酚胺类激素对APP的作用和机制,结果对APP和其它病原菌引起的传染病的发病机制和新型防控策略研究都具有重要意义。材料与方法 APP在人工培养基(CDM)中培养,通过检测OD值和细菌计数检测生长能力。基因缺失突变体由本实验室构建保存。APP全基因组表达谱芯片根据APP已有的基因组序列设计,为Agilent定制芯片。激素及转铁蛋白购自sigma公司。结果与讨论血清抑制了APP在人工培养基(CDM)中的生长,通过添加不同金属离子发现这种抑制与培养基中的铁离子浓度有关。在血清培养基中,三种激素肾上腺素、去甲肾上腺素和多巴胺均能显著促进APP的生长,而高等生物的肾上腺素能受体抑制剂和已知的细菌激素受体基因qseB/C的缺失均不能阻断激素对APP生长的促进作用。检测了添加血清和激素后培养的APP基因表达谱,发现有20个铁代谢相关基因在添加血清后显著上调,而在血清培养基中添加了激素后又都显著下调,说明儿茶酚胺类激素解除了血清给APP造成的铁限制环境。在CDM中添加含铁的转铁蛋白或不含铁的转铁蛋白(ATF)替代血清,发现ATF是血清中抑制APP生长的成分之一。在ATF培养基中,激素也能促进APP的生长,其作用也不是由已知的高等动物激素受体和细菌激素受体介导的,而缺失了tonB2基因后,APP生长再不受到激素的影响,说明在ATF的培养基中,TonB2系统在儿茶酚胺类激素促进APP的生长作用中发挥重要功能。结论本研究从宿主分泌的激素小分子对病原微生物的作用这一角度,研究了儿茶酚胺类激素对APP生长的调节作用和机制。发现了儿茶酚胺类激素能够在铁限制环境下促进APP的生长,其作用机制与高等生物的激素信号通路不同,也不由已知的细菌激素受体介导,而是通过调节APP的铁摄取和代谢过程完成的。这些结果为APP的致病机制提供了新的理论,也为应激能够促进病原菌的感染和传播这一现象提供了新的解释。

关键词：胸膜肺炎放线杆菌应激激素儿茶酚胺类激素 APP

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多杀性巴氏杆菌HN06基因组分泌蛋白的预测与分析

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动物医学进展 2015年第12期36卷 6-10页

作者：彭忠梁婉刘文静徐卓菲谭臣吴斌周锐陈焕春华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室生猪健康养殖协同创新中心湖北武汉430070 华中农业大学动物科学技术学院农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室生猪健康养殖协同创新中心湖北武汉430070

预测分析多杀性巴氏杆菌HN06株的分泌蛋白并筛选多株巴氏杆菌共有Sec途径分泌蛋白,为研究多杀性巴氏杆菌亚单位疫苗候选蛋白奠定基础。利用Signal P、Tmhmm、Phobius、Target P、Lipop、GPI-SOM、Tat P、SecretomeP对已完成全基因组测... 详细信息

预测分析多杀性巴氏杆菌HN06株的分泌蛋白并筛选多株巴氏杆菌共有Sec途径分泌蛋白,为研究多杀性巴氏杆菌亚单位疫苗候选蛋白奠定基础。利用Signal P、Tmhmm、Phobius、Target P、Lipop、GPI-SOM、Tat P、SecretomeP对已完成全基因组测序的多杀性巴氏杆菌HN06株进行分泌蛋白预测及功能分析,并结合已公布全基因组序列的多杀性巴氏杆菌Pm70、3480、36950的基因组序列筛选4株多杀性巴氏杆菌中共有的Sec途径分泌蛋白。结果表明,预测出HN06株分泌蛋白共373个,其中Sec分泌蛋白157个,Tat途径分泌蛋白8个,无信号肽的非经典途径分泌蛋白208个。Sec分泌蛋白中被Ⅰ型信号肽酶识别的有120个,被Ⅱ型信号肽酶识别的有37个。再对Pm70、3480、36950株进行Sec途径分泌蛋白的预测,使用blastp筛选它们共有的Sec蛋白114个。经过统计发现,多杀性巴氏杆菌HN06株不同类型分泌蛋白的功能分布各有侧重,其中ABC转运蛋白和铁摄取相关蛋白对于巴氏杆菌毒力因子的研究具有很重要的意义。因此,对分泌蛋白的深入分析对于更清晰地了解巴氏杆菌的致病机制及筛选免疫原性蛋白具有重要意义。

关键词：多杀性巴氏杆菌分泌蛋白预测与分析

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澳大利亚牛布鲁菌病根除运动

澳大利亚牛布鲁菌病根除运动

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第七届全国牛病防制及产业发展大会

作者：陈颖钰胡长敏郭爱珍华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学动物科技学院华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学动物科技学院华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

牛布鲁氏菌病是由流产布氏杆菌引起的一种以流产为主要症状的接触性人畜共患病,给养牛业和公共卫生带来巨大的损失.澳大利亚自1969年起开始提出牛布鲁式菌病控制和根除计划,1970年开始实施全国性的根除计划,在政府大力的财政支持及技术... 详细信息

牛布鲁氏菌病是由流产布氏杆菌引起的一种以流产为主要症状的接触性人畜共患病,给养牛业和公共卫生带来巨大的损失.澳大利亚自1969年起开始提出牛布鲁式菌病控制和根除计划,1970年开始实施全国性的根除计划,在政府大力的财政支持及技术支持下,通过“检疫-扑杀”并配合“免疫”的策略,澳大利亚于1989年取得无牛布病状态,共花了19年时间,在国际贸易上争取了主动权.通过澳大利亚牛布鲁式菌病根除计划的成功实施,总结发现:工业参与、国家协调、经费保障、技术支撑、科研支持和可追溯体系在动物疫病的根除计划中起着十分重要的作用.澳大利亚的成功经验为我国牛布鲁式菌病的控制提供了启示.

关键词：牛布鲁菌病根除计划经费保障技术支撑可追溯体系

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结核分枝杆菌相关非编码RNA研究进展

结核分枝杆菌相关非编码RNA研究进展

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第七届全国牛病防制及产业发展大会

作者：王天齐陈颖钰郭爱珍华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学动物科技学院武汉430070

结核分枝杆菌引起的结核病仍然是全球危害最严重的疾病之一,由于结核分枝杆菌耐药性增强和艾滋病蔓延,结核病又有卷土重来之势.非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)具有基因调控作用.结核分枝杆菌相关的非编码RNA分为细菌体内的sRNA(small ... 详细信息

结核分枝杆菌引起的结核病仍然是全球危害最严重的疾病之一,由于结核分枝杆菌耐药性增强和艾滋病蔓延,结核病又有卷土重来之势.非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)具有基因调控作用.结核分枝杆菌相关的非编码RNA分为细菌体内的sRNA(small RNA)和宿主体内的非编码RNA两大类,其中现已发现结核分枝杆菌内有5'和3'端非编码RNA、反义转录产物、基因间sRNA等多种ncRNA,其多以与靶基因碱基互补影响靶基因表达.宿主细胞内有微小RNA和长非编码RNA,这两类非编码RNA功能与作用机制不尽相同.微小RNA作用机制与细菌内sRNA类似,其中例如miR-155等是研究的热点;长非编码RNA才刚刚兴起研究,其功能比微小RNA更加广泛,将会成为接下来的热门研究领域.研究这两大类非编码RNA对于理解结核分枝杆菌在宿主细胞中的存活机制及致病机理以帮助研发新型疫苗、药物诊断方法等有着非常重要的意义.

关键词：结核分枝杆菌微小RNA 长非编码RNA 存活机制致病机理

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规模化猪场伪狂犬病的诊断与防控

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养猪 2015年第6期 105-107页

作者：库旭钢许拓谭鑫孟宪荣吴美洲何启盖农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

2015年4月,河北某存栏500头母猪的猪场2栋产房仔猪在出生3～7天后出现以呼吸道和神经症状为主的情况,根据流行病学和病理剖检结果初步诊断为伪狂犬病。后采集发病仔猪扁桃体、淋巴结和肺脏等样品进行病原检测,结果为伪狂犬病病毒阳性,... 详细信息

2015年4月,河北某存栏500头母猪的猪场2栋产房仔猪在出生3～7天后出现以呼吸道和神经症状为主的情况,根据流行病学和病理剖检结果初步诊断为伪狂犬病。后采集发病仔猪扁桃体、淋巴结和肺脏等样品进行病原检测,结果为伪狂犬病病毒阳性,结合血清学检测结果,确诊为伪狂犬病。使用伪狂犬病HB-98弱毒疫苗和伪狂犬病灭活疫苗进行紧急免疫预防,同时结合生物安全措施,猪场生产快速稳定,4个月后对全场种猪进行随机抽样检测,除发病时两栋产房母猪为伪狂犬病野毒抗体阳性为外,其他母猪和公猪为伪狂犬病野毒抗体阴性。结果表明,通过疫苗免疫和生物安全措施可有效控制伪狂犬病的早期发生,阻止该病在全场的蔓延,降低损失。

关键词：规模化猪伪狂犬病诊断防控蔓延

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肉牛疾病感染情况调查与分析

肉牛疾病感染情况调查与分析

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第七届全国牛病防制及产业发展大会

作者：彭清洁晁金邓明亮陈颖钰胡长敏姜鹏郭爱珍华中农业大学动物医学院华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学动物科技学院华中农业大学动物医学院华中农业大学农业微生物学国家重点实验室国家肉牛/牦牛产业技术体系疾病控制功能研究室华中农业大学动物医学院

2014年6月至2015年6月通过出诊和接诊的方式,收集了来自多个省份的21个肉牛场的病料,本文总结了实验室对这些病例的临床症状及细菌学、病毒学检测结果,旨在弄清现阶段肉牛疾病的流行情况,为我国现阶段牛病的综合防控工作提供依据.临床... 详细信息

2014年6月至2015年6月通过出诊和接诊的方式,收集了来自多个省份的21个肉牛场的病料,本文总结了实验室对这些病例的临床症状及细菌学、病毒学检测结果,旨在弄清现阶段肉牛疾病的流行情况,为我国现阶段牛病的综合防控工作提供依据.临床统计发现,呼吸道(发病率38.1％)和腹泻(发病率23.8％)症状是发病肉牛的主要临床症状.检测结果显示,引起呼吸道症状的主要病原为牛支原体,其次为A型多杀性巴氏杆菌、溶血性曼氏杆菌、肺炎克雷伯氏菌;引起腹泻症状的病原主要为沙门氏菌,其次为牛病毒性腹泻/黏膜病及大肠杆菌.另外,贫血和黄疸症状的病原为泰勒虫和牛巴贝斯虫,一例神经症状的诊断确诊为狂犬病毒感染.综上所述,牛支原体是引起我国内牛疾病的主要病原,并以混合感染为主,其他病原(寄生虫感染)在肉牛疾病防控中也不容忽视.

关键词：肉牛疾病临床症状混合感染病原检测

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牛传染性鼻气管炎的流行与防控进展

牛传染性鼻气管炎的流行与防控进展

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第七届全国牛病防制及产业发展大会

作者：李程陈颖钰索朗斯珠郭爱珍西藏大学农牧学院动物科学学院华中农业大学动物医学院华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学动物科技学院武汉430070 西藏大学农牧学院动物科学学院华中农业大学动物医学院华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

牛传染性鼻气管炎是一种牛的接触性传染病,OIE将其列为必须通报的疫病之一.自1955年美国爆发牛传染性鼻气管炎后,欧洲、澳洲、亚洲、南美洲均有IBR爆发,呈世界流行.我国于1980年首次分离鉴定了IBRV,自此后我国各地的各种牛均有IBR感染... 详细信息

牛传染性鼻气管炎是一种牛的接触性传染病,OIE将其列为必须通报的疫病之一.自1955年美国爆发牛传染性鼻气管炎后,欧洲、澳洲、亚洲、南美洲均有IBR爆发,呈世界流行.我国于1980年首次分离鉴定了IBRV,自此后我国各地的各种牛均有IBR感染的报道.现在瑞士、芬兰、丹麦、挪威等少数国家利用免疫、扑杀、检疫等手段已经根除了IBR,为我国防控提供了依据.但由于我国IBR阳性率高,扑杀阳性牛成本大,综合考虑经济等各方面的因素,检疫-扑杀措施在我国不太适用.但可通过实行免疫—扑杀措施,以达到降低IBR阳性率,控制我国IBR的目的.

关键词：牛传染性鼻气管炎流行病学免疫法扑杀法

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两株新发猪伪狂犬病病毒全基因组序列测定和分析

两株新发猪伪狂犬病病毒全基因组序列测定和分析

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中国猪业科技大会暨中国畜牧兽医学会2015年学术年会

作者：余腾陈芳洲库旭钢朱银杏马海龙张晓茜严伟东何启盖华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

引言猪伪狂犬病是由猪伪狂犬病病毒(PRV)感染引起猪的一种急性、热性传染病.曾在多个国家流行,对其养猪业造成巨大的经济损失.随着猪伪狂犬病根除计划的实施和猪伪狂犬病基因缺失疫苗的应用,许多发达国家已经根除猪伪狂犬病,我国的猪伪...

引言猪伪狂犬病是由猪伪狂犬病病毒(PRV)感染引起猪的一种急性、热性传染病.曾在多个国家流行,对其养猪业造成巨大的经济损失.随着猪伪狂犬病根除计划的实施和猪伪狂犬病基因缺失疫苗的应用,许多发达国家已经根除猪伪狂犬病,我国的猪伪狂犬病也得到了很大的控制[1].2011年底至今,我国多个省市规模化猪场都出现了以母猪流产,仔猪出现划水样,转圈等神经症状的猪伪狂犬病[2].而且许多免疫了PRV Bartha-K61疫苗的猪只都感染发病,并出现了死亡[1-2].有研究也表明仔猪免疫了PRV Bartha-K61疫苗,不能抵抗新发PRV的攻击,新分离PRV全基因组与PRV Bartha比对出现了变异,但具体是哪些基因变异导致猪伪狂犬病的发生,值得我们深入研究.本研究从两个发生了猪伪狂犬病的猪场各分离出一株PRV,并对其分别进行了全基因组序列的测定和基因组的比对分析,为发现新发PRV基因组的变异特征和变异规律提供必要的科学依据.

关键词：

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小鼠和奶牛乳腺上皮细胞的分离及培养特性比较

小鼠和奶牛乳腺上皮细胞的分离及培养特性比较

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第七届全国牛病防制及产业发展大会

作者：刘玉辉赖金伦寇明明邓明亮刘瑞宁陈颖钰胡长敏郭爱珍华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

为建立小鼠乳腺上皮细胞(MMECs)及奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)分离培养体系,并比较其生长特性,分别无菌采集健康妊娠后期昆明鼠及泌乳中期荷斯坦奶牛乳腺组织,采用改良混合酶消化结合差速贴壁法分离原代MMECs及BMECs,并进行细胞角蛋白18的... 详细信息

为建立小鼠乳腺上皮细胞(MMECs)及奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)分离培养体系,并比较其生长特性,分别无菌采集健康妊娠后期昆明鼠及泌乳中期荷斯坦奶牛乳腺组织,采用改良混合酶消化结合差速贴壁法分离原代MMECs及BMECs,并进行细胞角蛋白18的免疫荧光鉴定;通过细胞形态跟踪观察评价传代、冻存和复苏后MMECs及BMECs生物学性状;连续培养及细胞计数绘制MMECs及BMECs生长曲线.结果显示,从小鼠及奶牛乳腺组织分离的目的细胞,经角蛋白18免疫荧光鉴定证实为MMECs及BMECs;汇合的单层MMECs多角形,呈铺路石样外观,BMECs呈鹅卵石样;MMECs在传至第2代时细胞特有形状消失,而BMECs传至第9代时仍保持其鹅卵石样外观;相比MMECs只能复苏冻存原代细胞,传代BMECs均可冻存和复苏.采用改良混合酶消化结合差速贴壁法可获得高纯度的MMECs和BMECs,两种细胞在生长培养特性上存在显著差异.

关键词：奶牛乳腺炎乳腺上皮细胞细胞分离生长特性

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