检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医杂志 2013年第2期49卷 21-24,I0001页

作者：于成接丁优玲华亚峰金梅林张安定华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

禽巴氏杆菌病又称禽霍乱,是由多杀性巴氏杆菌所引起的鸡、火鸡、鸭、鹅等禽类的一种出血性、败血性传染病。禽巴氏杆菌病在我国有些地区的养鸡场发病严重,常造成严重的经济损失,是危害养禽业的重要传染病之一。2011年10月广西某鸡场发... 详细信息

禽巴氏杆菌病又称禽霍乱,是由多杀性巴氏杆菌所引起的鸡、火鸡、鸭、鹅等禽类的一种出血性、败血性传染病。禽巴氏杆菌病在我国有些地区的养鸡场发病严重,常造成严重的经济损失,是危害养禽业的重要传染病之一。2011年10月广西某鸡场发生产蛋鸡急性致死病例,流行病学与临床剖检结果疑似禽巴氏杆菌感染所致疾病。分离的病原镜检可见革兰染色阴性、瑞氏染色两极浓染的小杆菌,16SrRNA序列分析表明,该菌与禽巴氏杆菌的同源性为98%,经分型PCR鉴定该菌为A型巴氏杆菌。致病性试验结果表明,该菌对鸡表现为较高的致病性,人工感染100CFU即能导致10周龄的鸡3d内死亡。药敏试验结果表明,该菌对环丙沙星、恩诺沙星、四环素、痢特灵、氧氟沙星敏感,通过鸡场彻底消毒并结合使用恩诺沙星和四环素进行治疗,控制了该病的发生。

关键词：多杀性巴氏杆菌 PCR 实验室诊断

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水牛IFN-γ在毕赤酵母中的表达及其单克隆抗体的制备

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动物医学进展 2013年第6期34卷 71-77页

作者：邹新峰郭爱珍陈颖钰胡长敏王冰刘晓乐谢倩姜勇张策陈焕春华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学动物科技学院湖北武汉430070

本研究旨在建立水牛IFN-γ(Bubalus bubalus IFN-γ,Bb IFN-γ)体外释放检测法,为定量检测水牛IFN-γ、开发水牛结核病及其他疫病的检测技术奠定基础。克隆了水牛IFN-γ成熟肽基因片段,根据测序结果,在不改变氨基酸序列的情况下,将密码... 详细信息

本研究旨在建立水牛IFN-γ(Bubalus bubalus IFN-γ,Bb IFN-γ)体外释放检测法,为定量检测水牛IFN-γ、开发水牛结核病及其他疫病的检测技术奠定基础。克隆了水牛IFN-γ成熟肽基因片段,根据测序结果,在不改变氨基酸序列的情况下,将密码子替换成毕赤酵母偏爱密码子并合成全基因,进一步用毕赤酵母GS115表达了水牛IFN-γ成熟肽基因。通过水疱性口炎病毒(VSV)在牛肾细胞(MDBK)上检测了其抗病毒活性,抗VSV活性为7.44×105 U/mL。利用酵母表达的水牛IFN-γ蛋白免疫Balb/c小鼠,并筛选阳性杂交瘤细胞,获得5株高效价的单克隆抗体。利用该重组蛋白免疫日本长耳大白兔,得到高效价的抗水牛IFN-γ多克隆抗体。用所获得的单克隆抗体及多克隆抗体建立了检测水牛IFN-γ的双抗体夹心ELISA方法,检测灵敏度达到125pg/mL。通过建立的方法分别检测了原核表达的奶牛IFN-γ、梅花鹿IFN-γ、弥猴IFN-γ以及其他7种非相关重组蛋白,结果表明所建立的方法灵敏度高,特异性好。

关键词：水牛 γ干扰素毕赤酵母双抗体夹心酶联免疫吸附试验单克隆抗体

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牛A型多杀性巴氏杆菌分离株的鉴定和免疫原性研究

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中国兽医杂志 2013年第10期49卷 3-6,10页

作者：汪漫胡长敏陈颖钰彭清洁姜鹏崔鹏陈焕春郭爱珍华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学动物科技学院湖北武汉430070 武汉科前动物生物制品有限公司湖北武汉430070

从湖北黄冈、洪湖、钟祥和河南驻马店发病肉牛场送检病变肺中分离到4株病原菌,经过菌落形态观察、培养特性、生化反应、PCR鉴定等检测,确定这4株临床分离株均为荚膜A型多杀性巴氏杆菌,分别命名为Pm-HG、Pm-HH、Pm-ZX和Pm-ZMD。比较4株... 详细信息

从湖北黄冈、洪湖、钟祥和河南驻马店发病肉牛场送检病变肺中分离到4株病原菌,经过菌落形态观察、培养特性、生化反应、PCR鉴定等检测,确定这4株临床分离株均为荚膜A型多杀性巴氏杆菌,分别命名为Pm-HG、Pm-HH、Pm-ZX和Pm-ZMD。比较4株临床分离株与参考株的生长特性,发现生长曲线与参考株无明显差异。小鼠毒力试验表明,Pm-HG、PmHH和Pm-ZX接种10个菌以下即可将小鼠致死,毒力均很强。将4株菌灭活后免疫小鼠,二免后2周,血清抗体效价都在1∶20 000以上,其中Pm-ZMD和Pm-HG抗体效价最高。用各株菌进行交叉攻击,结果Pm-HG的交叉保护率最高,除能完全保护同种菌的攻击外,对其他3株菌的交叉保护率都在90%以上。因此Pm-HG可望作为进一步研发A型多杀性巴氏杆菌灭活疫苗的制苗菌株。

关键词：巴氏杆菌 A型多杀性巴氏杆菌疫苗毒力免疫牛

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亚细胞蛋白质组研究进展

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动物医学进展 2013年第6期34卷 167-171页

作者：孔汉金张克山刘永杰尚佑军吴斌刘湘涛中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046 华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

随着蛋白质组学研究的不断细化和深入,亚细胞水平的蛋白质组成为当前蛋白组学研究的热点之一。亚细胞蛋白质组学研究可以减少全细胞蛋白组分析的复杂性,其研究内容主要包括亚细胞水平的蛋白质组组成、功能、定位及其相互作用。比较、鉴... 详细信息

随着蛋白质组学研究的不断细化和深入,亚细胞水平的蛋白质组成为当前蛋白组学研究的热点之一。亚细胞蛋白质组学研究可以减少全细胞蛋白组分析的复杂性,其研究内容主要包括亚细胞水平的蛋白质组组成、功能、定位及其相互作用。比较、鉴定、分析正常生理状态和病理状态下亚细胞蛋白质组的差异表达蛋白并研究其功能,成为寻找疾病特异生物标记,揭示致病机理的有效途径之一。论文就蛋白质组学在不同亚细胞水平的应用和研究现状、面临的挑战以及未来的发展方向做一综述。

关键词：蛋白质组学亚细胞功能

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新型结核病疫苗的研究与应用进展

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中国奶牛 2013年第16期 22-27页

作者：曹德君陈颖钰晋丛任宁宁王洁茹陈焕春郭爱珍华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学动物科技学院武汉430070

结核病是由结核杆菌复合群引起的一种人兽共患病。全球约三分之一的人感染结核,约10%发展为活动性结核病,严重者导致死亡。动物结核病除导致动物生产的损失外,还是人结核病的重要来源。BCG是人结核病预防的唯一疫苗,但存在一定缺陷。已... 详细信息

结核病是由结核杆菌复合群引起的一种人兽共患病。全球约三分之一的人感染结核,约10%发展为活动性结核病,严重者导致死亡。动物结核病除导致动物生产的损失外,还是人结核病的重要来源。BCG是人结核病预防的唯一疫苗,但存在一定缺陷。已报道了多种新型结核疫苗,如重组BCG、减毒活疫苗、亚单位疫苗、DNA疫苗,病毒活载体疫苗等,其中一部分已经进入人体临床试验。动物结核疫苗的研究刚刚起步。獾BCG疫苗是第一个获执照的动物结核疫苗,牛、鹿、刷尾负鼠等动物的结核疫苗正在研究之中。但目前为止,还没有一个能取代BCG的商业化新型疫苗,结核疫苗研发工作任重道远。

关键词：结核病疫苗卡介苗重组卡介苗人兽共患病

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BHV-1gG^-/tk^-/GM-CSF^+重组病毒的构建及其免疫效果的评价

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中国奶牛 2013年第17期 3-8页

作者：纪素坤邓明亮费文涛胡长敏陈颖钰郭爱珍陈焕春农业微生物学国家重点实验室华中农业大学武汉430070 华中农业大学动物科技学院武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070

通过引入免疫增强因子GM-CSF,提高重组病毒的免疫原性。将牛GM-CSF克隆到pcDNA3.1载体中,构建GM-CSF基因表达盒;将tk基因上游同源臂、GM-CSF基因表达盒、tk基因下游同源臂克隆到pcDNA3.1载体中,得到转移载体pTK-GM-CSF。将亲本病毒BHV-1... 详细信息

通过引入免疫增强因子GM-CSF,提高重组病毒的免疫原性。将牛GM-CSF克隆到pcDNA3.1载体中,构建GM-CSF基因表达盒;将tk基因上游同源臂、GM-CSF基因表达盒、tk基因下游同源臂克隆到pcDNA3.1载体中,得到转移载体pTK-GM-CSF。将亲本病毒BHV-1 gG-/TK-/EGFP+基因组与转移载体pTK-GM-CSF采用磷酸钙法共转染MDBK细胞,得到重组病毒BHV-1 gG-/TK-/GM-CSF+。并对重组病毒的生物学特性和对日本大耳白兔的免疫原性进行了评价。利用PCR和RT-PCR证实GM-CSF基因表达盒已正确插入重组病毒的tk基因位置,并具有转录活性。亲本株和重组株的空斑形态、空斑直径大小无明显差异;两者病毒滴度无明显变化,生长曲线相似;体外遗传稳定性良好。兔体试验表明,在免疫早期重组毒株能产生较亲本株更高水平的IFN-β(P<0.05)。但中和抗体水平、攻毒后的临床症状及病毒排毒时间等各项指标检测表明,亲本株和重组毒株之间无明显差异。在免疫早期重组株刺激机体产生的IFN-β高于亲本株,具有一定的应用前景。

关键词：牛传染性鼻气管炎牛疱疹病毒Ⅰ型 GM-CSF 重组病毒基因工程疫苗

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BHV-1 gG-/tk-/GM-CSF+重组病毒的构建及其免疫效果评价

BHV-1 gG-/tk-/GM-CSF+重组病毒的构建及其免疫效果评价

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中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会

作者：纪素坤邓明亮费文涛胡长敏陈颖钰郭爱珍陈焕春农业微生物学国家重点实验室华中农业大学华中农业大学动物科技学院农业微生物学国家重点实验室华中农业大学华中农业大学动物医学院

目的：通过引入免疫增强因子GM-CSF,提高重组病毒的免疫原性。方法：将牛GM-CSF克隆到pcDNA3.1载体中,构建GM-CSF基因表达盒;将tk基因上游同源臂、GM-CSF基因表达盒、tk基因下游同源臂克隆到pcDNA3.1载体中,得到转移载体pTK-GM-CSF.将... 详细信息

目的：通过引入免疫增强因子GM-CSF,提高重组病毒的免疫原性。方法：将牛GM-CSF克隆到pcDNA3.1载体中,构建GM-CSF基因表达盒;将tk基因上游同源臂、GM-CSF基因表达盒、tk基因下游同源臂克隆到pcDNA3.1载体中,得到转移载体pTK-GM-CSF.将亲本病毒BHV-1gG–/TK–/EGFP+基因组与转移载体pTK-GM-CSF采用磷酸钙法共转染MDBK细胞,得到重组病毒BHV-1 gG–/TK–/GM-CSF+.并对重组病毒的生物学特性和对日本大耳白兔的免疫原性进行了评价。结果：利用PCR和RT-PCR证实GM-CSF基因表达盒已正确插入重组病毒的tk基因位置,并具有转录活性。亲本株和重组株的空斑形态、空斑直径大小无明显差异;两者病毒滴度无明显变化,生长曲线相似;体外遗传稳定性良好。兔体实验表明在免疫早期重组毒株能产生较亲本株更高水平的IFN-β(P＜0.05).但中和抗体水平、攻毒后的临床症状及病毒排毒时间等各项指标检测表明,亲本株和重组毒株之间无明显差异。结论：在免疫早期重组株刺激机体产生的IFN-β高于亲本株,具有一定的应用前景。

关键词：牛疱疹病毒Ⅰ型重组病毒基因工程疫苗免疫效果

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胸膜肺炎放线杆菌双组份ArcA基因缺失弱毒疫苗的初步研究

胸膜肺炎放线杆菌双组份ArcA基因缺失弱毒疫苗的初步研究

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第14届全国规模化猪场主要疫病监控与净化专题研讨会

作者：游武进贝为成华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物病原分室武汉430070 华中农业大学动物医学院动物传染病研究室武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室动物病原分室武汉430070

本研究在以本实验室承慧硕士构建的APP血清1型多基因缺失菌株CH04(APP-1,△apxIC/△apxⅡC/△apxⅣ-orf1/△cpxAR)为亲本菌基础上,通过同源重组技术,进一步缺失ArcA毒力因子,获得YWJ05(△apxIC/△apxⅡC/△apx Ⅳ-orf1/△cpxAR/△ arcA... 详细信息

本研究在以本实验室承慧硕士构建的APP血清1型多基因缺失菌株CH04(APP-1,△apxIC/△apxⅡC/△apxⅣ-orf1/△cpxAR)为亲本菌基础上,通过同源重组技术,进一步缺失ArcA毒力因子,获得YWJ05(△apxIC/△apxⅡC/△apx Ⅳ-orf1/△cpxAR/△ arcA)多基因缺失缺失疫苗菌株,研究其生物学特性及安全性和免疫效力,并再在临床上初步使用,评价其效果.以期获得在临床上安全、高效的弱毒疫苗.

关键词：养猪业胸膜肺炎放线杆菌基因缺失弱毒疫苗免疫效力

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鸡场土壤中大肠杆菌的检测与化学消毒剂筛选

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中国兽药杂志 2013年第6期47卷 31-35页

作者：赵月毕丁仁李自力王振豹崔惠娟高小聪于洋周祖涛刘梅金卉王香萍华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

应用平板计数法和大肠菌群最大或然数(MPN)法对44份养鸡场土壤样品污染情况进行测定,结果表明春秋季土壤污染较夏冬季严重;以从养鸡场土壤样品中分离鉴定的大肠杆菌作为指示菌,对戊二醛和二氧化氯的杀菌效力进行了测定,定量悬浮试验结... 详细信息

应用平板计数法和大肠菌群最大或然数(MPN)法对44份养鸡场土壤样品污染情况进行测定,结果表明春秋季土壤污染较夏冬季严重;以从养鸡场土壤样品中分离鉴定的大肠杆菌作为指示菌,对戊二醛和二氧化氯的杀菌效力进行了测定,定量悬浮试验结果表明0.01%戊二醛作用30 min、0.02%戊二醛作用5 min、25 mg/L二氧化氯作用10 min,对大肠杆菌的杀灭率均达到100%。以土壤为载体的消毒试验结果表明0.01%戊二醛作用30 min、0.02%戊二醛作用10 min和300 mg/L二氧化氯作用30 min、400 mg/L二氧化氯作用10 min,对大肠杆菌的杀灭率均达到100%,两种消毒剂均具有良好的杀灭效果。

关键词：大肠杆菌土壤污染化学消毒剂杀灭效果

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规模化猪场猪流行性腹泻的诊断与防控探索

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养猪 2013年第6期 101-103页

作者：丁振江万胜锋闫贵伟陈淑华库旭钢何启盖华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

2010年底以来,猪流行性腹泻的暴发给我国养猪业带来巨大的经济损失。传统意义上,本病主要发生在冬春季节,以腹泻仔猪的高死亡率为主要特征,夏季发病报道较少。一些病例为免疫母猪群所产仔猪,给本病的防治带来新的挑战。本文报道某规模... 详细信息

2010年底以来,猪流行性腹泻的暴发给我国养猪业带来巨大的经济损失。传统意义上,本病主要发生在冬春季节,以腹泻仔猪的高死亡率为主要特征,夏季发病报道较少。一些病例为免疫母猪群所产仔猪,给本病的防治带来新的挑战。本文报道某规模化猪场猪流行性腹泻的控制过程,希望对同行有所帮助。

关键词：猪流行性腹泻规模化猪场防控诊断经济损失冬春季节控制过程养猪业

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