检索结果-内蒙古大学图书馆

中国奶牛 2012年第21期 4-9页

作者：肖淦文陈颖钰彭清洁胡长敏崔朋巴晓亮陈焕春郭爱珍华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学动物科技学院武汉430070 武汉科前动物生物制品有限公司武汉430070

本试验旨在建立一种可同时鉴别牛支原体、巴氏杆菌A型和化脓隐秘杆菌的多重PCR方法。分别针对多杀性巴氏杆菌A型特异的hyaC—hyaD基因区段、化脓隐秘杆菌的16S rRNA基因上保守区段和牛支原体的UvrC基因设计特异性引物,多重PCR的最佳扩... 详细信息

本试验旨在建立一种可同时鉴别牛支原体、巴氏杆菌A型和化脓隐秘杆菌的多重PCR方法。分别针对多杀性巴氏杆菌A型特异的hyaC—hyaD基因区段、化脓隐秘杆菌的16S rRNA基因上保守区段和牛支原体的UvrC基因设计特异性引物,多重PCR的最佳扩增条件确定为:95℃10min预变性;95℃1min,56℃50s,72℃1min,循环30次;72℃10min延伸。结果表明,该多重PCR方法可同时扩增出以上三种致病菌的特异性片段,不能扩增出其他病原菌的相关片段;对多杀性巴氏杆菌A型、化脓隐秘杆菌和牛支原体的最低检测浓度分别为8×105CFU/mL、8×105CFU/mL和4×106CFU/mL。同时用该方法检测了牛支原体肺炎患牛的鼻拭子与肺组织,发现12h预增菌后,肺组织检测与牛支原体培养的阳性符合率为92%。对临床样本进行牛支原体分离培养需要3～4d时间,而采用多重PCR方法检测12h预增菌则能在24h内出结果。该多重PCR方法显著加快了临床诊断速度,具有推广应用价值。

关键词：多重PCR 牛支原体多杀性巴氏杆菌A型化脓隐秘杆菌牛呼吸疾病综合征

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猪群中戊型肝炎的流行病学调查与分析

猪群中戊型肝炎的流行病学调查与分析

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会

作者：张厚勇陈东升张佳思侯康伟伍宜权张瑞竹张仪刘正飞华中农业大学农业与微生物学国家重点实验室华中农业大学动物医学院武汉 430070

(目的)调查华中地区不同猪群中戊型肝炎病毒(HEV)感染情况和流行特征,为控制HEV在人畜间的传播提供依据。(方法)随机采集4个不同养猪场血清样品80份,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测抗-HEV IgG抗体,用统一制定的流行病学调查表进行分... 详细信息

(目的)调查华中地区不同猪群中戊型肝炎病毒(HEV)感染情况和流行特征,为控制HEV在人畜间的传播提供依据。(方法)随机采集4个不同养猪场血清样品80份,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测抗-HEV IgG抗体,用统一制定的流行病学调查表进行分析。在此基础上,从2007/2010年我们收集湖北、河南、安徽及湖南四省猪临床肝脏样品及肛拭子样品共583份,应用巢式PCR(逆转录套式聚合酶链,RT-nPCR)方法进行HEV RNA检测,将PCR扩增产物克隆到pMD18-T载体上,构建重组质粒并测序,利用生物学软件进行并对其进行遗传进化分析和绘制进化树。(结果)4个猪场80份血清中HEV阳性血清56份,抗-HEV抗体阳性高达70.0%。四个猪场阳性率分别为分别为70%,80%,70%和60%。HEVRNA总阳率为9.6%(56/583),肝脏中阳性率为15.55%(21/135),肛拭子样品中阳性率为7.81%(35/448)。13个猪场中有8个猪场同时存在HEV,猪场阳性率达61.53%,其中肛拭子HEV RNA阳性率2.0%-18.33%,肝脏中阳性率为3.84%-28.37%,表明肝脏中HEV RNA的检出率明显高于肛拭子。遗传进化分析表明:所分离毒株均属于基因4型,38株阳性毒株之间同源性为92-100%,与戊型肝炎病毒基因Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型同源性分别为77%、77%、87%、96%。以该核苷酸片段绘制的遗传进化树显示,从肛拭子中分离的毒株(FJ445406)均与毒株DQ279091株处在同一分支上,属于基因4型;但其中肝脏中分离的毒株(GQ202266.1)虽然处在4型分子上,但和4型人源毒株处在一个亚支,属于4型中另一亚型,提示该毒株可能是由人源毒株演化而来。结论:研究表明华中地区猪HEV在不同猪场普遍存在,但总体来讲,华中地区猪源HEV基因型相对稳定,属同一基因型,提示猪是HEV的主要传染源之一。该研究为掌握华中地区的猪HEV的流行及基因型分布奠定了基础。

关键词：戊型肝炎病毒猪群 HEV 流行病学

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猪病毒性腹泻的流行病学调查及分析

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养猪 2012年第5期 101-102页

作者：库旭钢刘云波凌泽熹赵洪翠廖荣斌张坤肖文何启盖农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

2010年入秋以来,国内暴发了大规模的腹泻疫情,此次疫情发生范围之广前所未有,全国各地无论是规模化养猪企业还是个体养殖户都出现了严重的疫情。疫情主要集中在产房小猪,而刚出生的仔猪自身免疫力差,出现腹泻后机体快速脱水,各种治疗及... 详细信息

2010年入秋以来,国内暴发了大规模的腹泻疫情,此次疫情发生范围之广前所未有,全国各地无论是规模化养猪企业还是个体养殖户都出现了严重的疫情。疫情主要集中在产房小猪,而刚出生的仔猪自身免疫力差,出现腹泻后机体快速脱水,各种治疗及常规疫苗的紧急免疫效果都不理想,正是由于这样的原因,

关键词：病毒性腹泻养猪企业流行病学调查自身免疫力发生范围免疫效果常规疫苗疫情

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牛结核病的流行病学特点及其预防控制

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中国动物保健 2012年第4期14卷 7-9页

作者：陈颖钰陈焕春郭爱珍农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物科技学院湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

牛结核病是一种慢性消耗性人畜共患病,能够在人和牛之间相互传播,为人类健康带来巨大威胁。文章阐述了结核病在人和牛之间传播的流行病学特点,并对目前牛结核病的最新诊断方法、预防措施和处理手段进行了介绍,旨在为牛结核病的控制和根... 详细信息

牛结核病是一种慢性消耗性人畜共患病,能够在人和牛之间相互传播,为人类健康带来巨大威胁。文章阐述了结核病在人和牛之间传播的流行病学特点,并对目前牛结核病的最新诊断方法、预防措施和处理手段进行了介绍,旨在为牛结核病的控制和根除提供依据。

关键词：牛结核病传播流行病学检测防控

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牛支原体、巴氏杆菌A型和化脓隐秘杆菌多重PCR快速检测方法的建立

牛支原体、巴氏杆菌A型和化脓隐秘杆菌多重PCR快速检测方法的建立

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次人兽共患病学术研讨会暨第六届第十四次教学专业委员会

作者：肖淦文陈颖钰彭清洁胡长敏崔朋巴晓亮陈焕春郭爱珍华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学动物医学院华中农业大学动物科技学院武汉科前动物生物制品有限公司

本实验旨在建立一种多重PCR方法,用于同时鉴别牛支原体和两种常见混合感染菌。分别针对多杀性巴氏杆菌A型特异的hyaC-hyaD基因区段、化脓隐秘杆菌的16S rRNA基因上保守区段和牛支原体的UvrC基因设计特异性引物,多重PCR的最佳扩增条件确... 详细信息

本实验旨在建立一种多重PCR方法,用于同时鉴别牛支原体和两种常见混合感染菌。分别针对多杀性巴氏杆菌A型特异的hyaC-hyaD基因区段、化脓隐秘杆菌的16S rRNA基因上保守区段和牛支原体的UvrC基因设计特异性引物,多重PCR的最佳扩增条件确定为:95℃10分钟预变性后;95℃1min,56℃50s,72℃1min,循环30次;72℃10分钟进行延伸反应。特异性试验证明,该多重PCR可同时扩增出以上三种致病菌的特异性片段,不能扩增出其他病原菌的相关片段;敏感性试验证明可检测到多杀性巴氏杆菌A型、化脓隐秘杆菌和牛支原体的最低浓度分别为8×105CFU/mL,8×105CFU/mL和4×106CFU/mL,用该方法检测了牛支原体肺炎患牛的鼻拭子与肺组织,发现12 h预增菌后肺组织检测与牛支原体培养的阳性符合率为92%。鉴于对临床样本进行牛支原体分离培养需要3-4天时间,而该多重PCR结合12h预增菌,能在24h内出结果,显著加快了临床诊断速度,具有推广应用价值。

关键词：多重PCR 牛支原体多杀性巴氏杆菌A型化脓隐秘杆菌牛呼吸疾病综合征

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肉牛牛支原体肺炎感染的细菌学研究

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中国牛业科学 2012年第3期38卷 22-26页

作者：肖淦文彭清洁崔朋胡长敏陈颖钰巴晓亮陈焕春郭爱珍华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 武汉科前动物生物制品有限公司湖北武汉430070 华中农业大学动物科技学院湖北武汉430070

[目的]牛支原体肺炎是严重危害国内外肉牛养殖业的一种重要疾病,病原混合感染将加剧病情,增加临床治疗难度。本研究通过阐明我国牛支原体肺炎混合感染情况,为探讨更加有效的防控手段提供参考依据。[方法]近4年来采用门诊和出诊的方式,... 详细信息

[目的]牛支原体肺炎是严重危害国内外肉牛养殖业的一种重要疾病,病原混合感染将加剧病情,增加临床治疗难度。本研究通过阐明我国牛支原体肺炎混合感染情况,为探讨更加有效的防控手段提供参考依据。[方法]近4年来采用门诊和出诊的方式,收集了全国范围内35个临床初诊为牛支原体肺炎的牛场病牛样本,进行牛支原体及混合感染细菌的分离和分型鉴定。[结果]确定了这类疾病的细菌学感染特征,表现为牛支原体感染占绝对优势,混合感染模式主要以牛支原体合并多杀性巴氏杆菌A型感染、牛支原体合并和化脓隐秘杆菌感染为主。[结论]经实验室检测证实临床初诊病例绝大部分为牛支原体肺炎,但混合感染很普遍。

关键词：牛支原体巴氏杆菌化脓隐秘杆菌肺炎混合感染应激

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SIP亚单位疫苗对无乳链球菌诱导小鼠乳腺炎的保护力评价

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中国奶牛 2012年第3期 1-4页

作者：胡长敏徐海洋陈颖钰彭清洁郭爱珍华中农业大学动物医学院武汉430070 国家肉牛产业技术体系疾病控制功能研究室武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

无乳链球菌是导致奶牛乳腺炎的重要病原菌,本研究评价了SIP(surface immunogenic protein)亚单位疫苗对小鼠无乳链球菌乳腺炎的免疫保护效果。制备无乳链球菌SIP亚单位疫苗和灭活疫苗,对小鼠进行免疫,并设PBS阴性对照。免疫前后采血测定... 详细信息

无乳链球菌是导致奶牛乳腺炎的重要病原菌,本研究评价了SIP(surface immunogenic protein)亚单位疫苗对小鼠无乳链球菌乳腺炎的免疫保护效果。制备无乳链球菌SIP亚单位疫苗和灭活疫苗,对小鼠进行免疫,并设PBS阴性对照。免疫前后采血测定IgG及IgG亚类的抗体滴度。免疫小鼠分娩后第4天,进行无乳链球菌乳腺攻毒试验。24h后扑杀攻毒鼠,进行乳腺内CFU的测定,制作并观察乳腺组织病理切片。结果显示,SIP亚单位疫苗免疫组IgG及IgG亚类抗体滴度显著高于灭活疫苗组(P<0.01)。免疫哺乳小鼠乳腺攻毒后,SIP亚单位疫苗免疫组小鼠乳腺CFU显著低于灭活疫苗组及对照组(P<0.001)。乳腺病理切片显示SIP亚单位疫苗组乳腺组织结构较对照组完整,且中性粒细胞浸润程度最小。本研究表明,无乳链球菌SIP亚单位疫苗有望作为奶牛无乳链球菌乳腺炎的候选亚单位疫苗。

关键词：无乳链球菌乳腺炎 SIP 亚单位疫苗

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牛支原体GAPDH定点突变、原核表达及生物学特性初步分析

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中国奶牛 2012年第5期 1-4页

作者：石磊胡长敏彭清洁郭爱珍华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 国家肉牛产业技术体系疾病控制功能研究室武汉430070

根据已发表的牛支原体GAPDH基因序列设计引物,从牛支原体湖北分离株扩增出GAPDH基因,亚克隆于载体pET-30a。设计定点突变引物,采用环状PCR法对载体上GAPDH基因进行两轮定点突变,原核表达突变成功的重组质粒,获得重组牛支原体GAPDH蛋白,... 详细信息

根据已发表的牛支原体GAPDH基因序列设计引物,从牛支原体湖北分离株扩增出GAPDH基因,亚克隆于载体pET-30a。设计定点突变引物,采用环状PCR法对载体上GAPDH基因进行两轮定点突变,原核表达突变成功的重组质粒,获得重组牛支原体GAPDH蛋白,经Western-blot证实该重组蛋白具有较好的反应原性,为其在牛支原体病防控中的应用奠定了基础。

关键词：牛支原体 GAPDH 定点突变表达生物学特性

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人兽共患猪链球菌--环境适应与致病的分子机制

人兽共患猪链球菌--环境适应与致病的分子机制

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纪念中国微生物学会成立六十周年大会暨2012年中国微生物学会学术年会

作者：周锐华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉市洪山区狮子山街1号430070

本文阐述了人兽共患病猪链球菌的致病性，但其对致病机制尚不明确。病原菌适应宿主体内环境是其存活和致病的前提，运用转录组学方法鉴定出SS2中的79个基因在感染猪体内表达上调这些基因中多数与细菌毒力、代谢相关。对其中的2个调控蛋... 详细信息

本文阐述了人兽共患病猪链球菌的致病性，但其对致病机制尚不明确。病原菌适应宿主体内环境是其存活和致病的前提，运用转录组学方法鉴定出SS2中的79个基因在感染猪体内表达上调这些基因中多数与细菌毒力、代谢相关。对其中的2个调控蛋白PerR和Rel及3个功能未知的表面蛋白HP1311, HP0245和SntA的功能进行了研究。

关键词：人兽共患病猪链球菌致病机制基因转录

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肉牛大肠杆菌、志贺氏菌与牛支原体混合感染的诊断与分析

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养殖与饲料 2012年第11期11卷 36-41页

作者：彭清洁王冲胡长敏陈颖钰晁金闻晓敏姜鹏郭爱珍华中农业大学动物医学院武汉430070 武汉科前动物生物制品有限责任公司武汉430070 武汉市蔡甸区畜牧兽医局武汉430100 国家肉牛产业技术体系疾病控制功能研究室武汉430070 华中农业大学动物科技学院武汉430070 武汉海康尔牧业有限公司武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

湖北天门某肉牛养殖场2012年4月初从长春营城子购入一批250kg左右的西杂牛,自购入15d左右肉牛开始发病。为确诊病因,本试验对病牛进行剖检取样、致病菌常规分离纯化、病原菌16sRNA鉴定、小鼠攻毒试验,综合诊断肉牛的发病原因为大肠杆菌... 详细信息

湖北天门某肉牛养殖场2012年4月初从长春营城子购入一批250kg左右的西杂牛,自购入15d左右肉牛开始发病。为确诊病因,本试验对病牛进行剖检取样、致病菌常规分离纯化、病原菌16sRNA鉴定、小鼠攻毒试验,综合诊断肉牛的发病原因为大肠杆菌、志贺氏菌与牛支原体的混合感染。另外,采用纸片扩散法检测分离到的细菌对青霉素等13种临床常用药物的敏感性,结果显示大肠杆菌、志贺氏菌对新霉素敏感,牛支原体对环丙沙星、恩诺沙星敏感。

关键词：大肠杆菌志贺氏菌支原体药敏试验病理切片 HE染色

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