检索结果-内蒙古大学图书馆

2020—2022年湖北省生猪屠宰场伪狂犬病病毒的分离鉴定及遗传进化分析

畜牧兽医学报 2023年第7期54卷 2972-2981页

作者：陈宏建曹艳樊杰甘荣萱宋文博喻盛炜杨婷赵艳霞魏春燕谢锐华琳彭忠吴斌华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070 生猪健康养殖协同创新中心武汉430070 湖北洪山实验室武汉430070

旨在监测湖北省生猪屠宰场中伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)的流行情况。采集2020—2022年湖北省4个区域(鄂东、鄂北、鄂西、鄂中)共9个县市不同规模屠宰场的1795份血液样品和2081份肺样品(肺、肺门淋巴结),分别使用靶向PRV gE... 详细信息

旨在监测湖北省生猪屠宰场中伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)的流行情况。采集2020—2022年湖北省4个区域(鄂东、鄂北、鄂西、鄂中)共9个县市不同规模屠宰场的1795份血液样品和2081份肺样品(肺、肺门淋巴结),分别使用靶向PRV gE基因的ELISA和PCR方法检测血清中的抗体和肺样品中的病原,同时对阳性样品进行病原分离鉴定、全基因组测序和遗传进化分析。血清学检测结果显示,共有104份样品为阳性,平均阳性检出率为5.79%。病原学检测结果显示,共有82份样品为阳性,平均阳性检出率为3.94%。按不同因素对检出率进行分析,显示抗体和病原都在春季检出率最高,分别为18.57%和9.74%;湖北省东部的抗体检出率最高(10.77%),中部的病原检出率最高(4.93%);A类小型屠宰场的病原和抗体检出率都显著高于其他3个类型,分别为16.28%和6.01%。从病原阳性样品中共分离到PRV 17株,经全基因组和gB、gC、gE基因遗传进化分析结果显示均属于基因Ⅱ型变异株,与Bartha、NIA-3、Becker等早期国外分离株处于不同的遗传进化分支。其中HBXG疑似发生了基因Ⅰ型毒株与基因Ⅱ型毒株的重组,与早期报道的重组病毒HuB1/CHN2017同处于独立的clade2.2遗传分支。综上所述,湖北省屠宰场关联的猪场中主要流行PRV变异毒株,且免疫过疫苗的猪场还在发生疫苗株与野毒的重组与变异,因此本研究对PRV的持续监测与新型疫苗的研发工作有十分重要的意义。

关键词：伪狂犬病病毒生猪屠宰场血清学检测病原学检测遗传进化分析

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猪δ冠状病毒辅助蛋白研究进展

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中国动物传染病学报 2023年第1期31卷 213-221页

作者：张蕙畅方谱县方六荣肖少波华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070 湖北省生猪健康养殖协同创新中心武汉430070

猪δ冠状病毒(PDCoV)是一种新发现的猪肠道冠状病毒,可引起新生仔猪的腹泻、呕吐、脱水、死亡,而且具有跨种感染潜能,给养猪业和公共卫生构成了巨大威胁。冠状病毒的辅助蛋白(accessory protein)是一类功能特殊的蛋白,不同属甚至同属不... 详细信息

猪δ冠状病毒(PDCoV)是一种新发现的猪肠道冠状病毒,可引起新生仔猪的腹泻、呕吐、脱水、死亡,而且具有跨种感染潜能,给养猪业和公共卫生构成了巨大威胁。冠状病毒的辅助蛋白(accessory protein)是一类功能特殊的蛋白,不同属甚至同属不同种的冠状病毒编码的辅助蛋白数量、同源性均存在较大差异,具有属或种特异性。虽然辅助蛋白是冠状病毒增殖非必需的,但在调控宿主天然免疫、病毒复制与致病性中发挥重要作用。目前,已证实PDCoV至少编码3个辅助蛋白,而且近年来在PDCoV辅助蛋白的功能研究方面取得了显著进展。本文简要介绍了PDCoV辅助蛋白的鉴定及其在免疫调控和致病性中的作用,并对今后的研究进行了展望。

关键词：猪δ冠状病毒辅助蛋白感染免疫抑制致病性

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猪δ冠状病毒N蛋白单克隆抗体的制备及初步应用

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中国动物传染病学报 2023年第6期31卷 1-10页

作者：方谱县张蕙畅夏思进江晓翠孙倩倩肖少波方六荣华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070 湖北省生猪健康养殖协同创新中心武汉430070

为制备猪δ冠状病毒(PDCoV)N蛋白的特异性单克隆抗体,并初步应用于临床样品中PDCoV抗原的免疫组织化学(IHC)检测,本研究以原核表达的PDCo V N蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合,基于纯化的N蛋白建立的间接ELISA方法筛... 详细信息

为制备猪δ冠状病毒(PDCoV)N蛋白的特异性单克隆抗体,并初步应用于临床样品中PDCoV抗原的免疫组织化学(IHC)检测,本研究以原核表达的PDCo V N蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合,基于纯化的N蛋白建立的间接ELISA方法筛选获得稳定分泌N蛋白特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞,并对单克隆抗体的免疫反应特异性、亚类进行系统鉴定。结果显示:通过3次亚克隆筛选获得8株可分泌PDCo V N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株。经IFA和Western blot分析,证实制备的单克隆抗体均与猪δ冠状病毒反应,且不与猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)反应,特异性良好。单克隆抗体亚类鉴定结果表明,1A11、3C6、1E7、1E12株单克隆抗体属Ig G1型,4F3、2A3株单克隆抗体为Ig G2a型,3E4单克隆抗体为Ig M型,8株单克隆抗体的轻链均为κ链。利用1A11单克隆抗体对PDCo V、PDEV、TGEV感染猪的空肠、回肠组织进行IHC检测,结果表明1A11能与感染PDCo V的组织发生特异性免疫反应,而不与感染PDEV和TGEV的组织发生反应,特异性良好。本研究制备的PDCo V N蛋白单克隆抗体可为PDCo V诊断方法的建立以及N蛋白的功能研究奠定基础。

关键词：猪δ冠状病毒 N蛋白原核表达系统单克隆抗体免疫组化

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致脑膜炎多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及全基因组重测序

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畜牧兽医学报 2022年第12期53卷 4346-4355页

作者：王斐杨洁吕庆杰王米雪刘鹏张若愚史聪聪王雪莹林琳华琳宋文博梁婉陈焕春吴斌彭忠华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070 生猪健康养殖协同创新中心武汉430070 湖北洪山实验室武汉430070

旨在了解致脑膜炎多杀性巴氏杆菌的生物学特性及其引起脑部感染的生物学基础。本研究从有神经症状的病死猪脑组织中分离鉴定1株多杀性巴氏杆菌SD001,对其开展血清杀菌试验、胞内存活试验、小鼠感染试验,并利用纳米孔测序技术对其进行全... 详细信息

旨在了解致脑膜炎多杀性巴氏杆菌的生物学特性及其引起脑部感染的生物学基础。本研究从有神经症状的病死猪脑组织中分离鉴定1株多杀性巴氏杆菌SD001,对其开展血清杀菌试验、胞内存活试验、小鼠感染试验,并利用纳米孔测序技术对其进行全基因组测序。SD001相对于猪其他器官中分离的多杀性巴氏杆菌而言表现出更强的抗血清杀菌的能力,其在小鼠巨噬细胞内存活的能力也较强。小鼠感染试验显示,相同剂量的细菌经血液感染后,SD001在小鼠血液和脑组织中的载菌量显著高于猪肺炎型多杀性巴氏杆菌(P≤0.01),并且SD001造成了小鼠脑组织发生炎症等病理损伤,提示SD001可能造成血流感染并引起小鼠脑膜炎。纳米孔测序显示,SD001的全基因组大小约为2.45 Mb,平均GC含量为40.25%,编码2281个蛋白以及77个RNA;SD001基因组中含有2条CRISPR结构、5个基因岛、7条前噬菌体序列;毒力基因预测结果显示,SD001含有233个毒力基因;基因分型结果显示,SD001为荚膜:LPS:MLST基因型A:L6:ST10。SD001感染可以引起脑膜炎,其较强的抗血清杀菌能力以及能形成血流感染的能力可能是SD001引起脑部感染的重要原因,在兽医临床关于中枢神经系统感染的诊断中应该纳入多杀性巴氏杆菌感染的可能性。

关键词：多杀性巴氏杆菌脑膜炎猪血清杀菌试验胞内存活试验小鼠感染试验纳米孔测序

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哺乳仔猪轮状病毒和肠产毒性大肠杆菌混合感染病例的诊治

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黑龙江畜牧兽医 2023年第22期 76-82,142,143页

作者：祁松张哲玮朱晶罗宇山董德文贝为成华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070 广西翔仪生物工程有限公司南宁530000 湖北洪山实验室武汉430070 生猪健康养殖协同创新中心武汉430070

2022年8月中旬广西地区某规模化养猪场产房中7~15日龄哺乳仔猪发生严重腹泻和呕吐,甚至死亡,且死亡率较高。为查明病因和控制该病,试验首先根据临床症状和病理剖检结果进行初步判断;然后采集病料,分别对病毒性病原和细菌性病原进行进一... 详细信息

2022年8月中旬广西地区某规模化养猪场产房中7~15日龄哺乳仔猪发生严重腹泻和呕吐,甚至死亡,且死亡率较高。为查明病因和控制该病,试验首先根据临床症状和病理剖检结果进行初步判断;然后采集病料,分别对病毒性病原和细菌性病原进行进一步检测,并针对细菌性病原进行药敏试验;最后根据诊断结果进行有针对性的治疗。结果表明:腹泻哺乳仔猪小肠壁呈薄的半透明状,部分肠段呈灰黄色和灰黑色;肠壁充血,内容物为絮状的黄色或灰色液体;胃内充满黄色液体,可见少量凝乳块;初步判断为轮状病毒(RV)或猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)和大肠杆菌的混合感染。进一步检测发现,病料中A群轮状病毒(RVA)呈阳性,猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和PDCoV呈阴性。从病料中分离到1株肠产毒性大肠杆菌(ETEC);该分离株对头孢曲松、庆大霉素和卡那霉素敏感,对氟苯尼考、多西环素和恩诺沙星中介,对阿莫西林、替米考星、泰万菌素和新霉素耐药。对产房腹泻仔猪按2~3 mL/头的剂量灌服10%庆大霉素进行治疗,每天1次,连续3 d,仔猪腹泻情况得到了有效控制。说明导致该场哺乳仔猪发生严重腹泻的主要原因为RV和ETEC混合感染,采取的治疗措施具有良好的效果。

关键词：哺乳仔猪轮状病毒(RV) 肠产毒性大肠杆菌(ETEC) 腹泻混合感染诊治

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猪多杀性巴氏杆菌OmpW、TbpA蛋白的原核表达及免疫原性研究

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中国畜牧兽医 2023年第4期50卷 1489-1498页

作者：张哲玮代小童韦祖丹陈云鹏甘晶贝为成华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070 湖北洪山实验室武汉430070 广西扬翔农牧有限责任公司贵港537100 生猪健康养殖协同创新中心武汉430070

【目的】研究猪多杀性巴氏杆菌OmpW和TbpA蛋白的免疫原性,探索其作为疫苗候选抗原的可能。【方法】对NCBI中不同血清群猪多杀性巴氏杆菌中OmpW和TbpA蛋白氨基酸序列进行相似性比对,并对OmpW和TbpA蛋白进行生物信息学分析。基于此,构建... 详细信息

【目的】研究猪多杀性巴氏杆菌OmpW和TbpA蛋白的免疫原性,探索其作为疫苗候选抗原的可能。【方法】对NCBI中不同血清群猪多杀性巴氏杆菌中OmpW和TbpA蛋白氨基酸序列进行相似性比对,并对OmpW和TbpA蛋白进行生物信息学分析。基于此,构建重组表达菌株pET28a-OmpW-BL21和pET28a-TbpA-BL21,重组OmpW和TbpA蛋白经镍柱亲和层析纯化后与氢氧化铝佐剂混匀制备亚单位疫苗,免疫小鼠后使用猪多杀性巴氏杆菌GX-PmD4菌株攻毒,评估OmpW和TbpA蛋白的免疫原性。【结果】相似性比对发现,OmpW和TbpA蛋白在不同血清群猪多杀性巴氏杆菌中高度保守;SignalP 6.0 Server和TMHMM Server v.2.0软件预测发现OmpW蛋白有信号肽和跨膜区,而TbpA蛋白有信号肽无跨膜区;ABCpred软件分析显示,OmpW和TbpA蛋白分别有14和22个B细胞抗原表位;SOPMA和SWISS-MODEL软件进一步预测蛋白结构表明:OmpW和TbpA蛋白的α-螺旋、β-转角、延伸链和无规则卷曲分别占16.18%、5.39%、36.76%、41.67%和40.42%、5.69%、16.77%、37.13%。经原核表达获得的重组OmpW和TbpA蛋白均具有较强的抗原性。在免疫小鼠后的14和28 d,与对照组相比,血清中OmpW、TbpA特异性抗体水平极显著上升(P<0.01)。小鼠免疫攻毒试验结果显示,重组OmpW组和TbpA组的小鼠存活率分别为50.0%和37.5%。【结论】本研究成功表达了猪多杀性巴氏杆菌OmpW和TbpA蛋白,且重组OmpW蛋白免疫原性较强,可作为猪多杀性巴氏杆菌亚单位疫苗的有效候选抗原。

关键词：猪多杀性巴氏杆菌 OmpW TbpA 表达免疫原性

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猪多杀性巴氏杆菌的分离鉴定、血清分型及耐药性分析

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中国兽医学报 2023年第5期43卷 930-936页

作者：张哲玮曹维维代小童甘晶饶静袁龙贝为成华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 湖北洪山实验室湖北武汉430070 广西扬翔农牧有限责任公司广西贵港537100 生猪健康养殖协同创新中心湖北武汉430070

为了探究猪多杀性巴氏杆菌在规模化养猪场的流行情况,对来自广西、湖北、内蒙古3个地区规模化猪场中有呼吸道症状猪的口鼻拭子及组织病料进行病原菌的分离培养、染色镜检、生化鉴定及PCR检测鉴定。结果显示,分离得到6株猪多杀性巴氏杆菌... 详细信息

为了探究猪多杀性巴氏杆菌在规模化养猪场的流行情况,对来自广西、湖北、内蒙古3个地区规模化猪场中有呼吸道症状猪的口鼻拭子及组织病料进行病原菌的分离培养、染色镜检、生化鉴定及PCR检测鉴定。结果显示,分离得到6株猪多杀性巴氏杆菌,其中血清A型1株(命名为GX-PmA),血清D型5株(命名为GX-PmD1、GX-PmD2、GX-PmD3、GX-PmD4、NMG-PmD5)。耐药性分析结果显示,GX-PmD1、GX-PmD2、GX-PmD3、GX-PmD4未见耐药现象,而NMG-PmD5表现出明显的新霉素及庆大霉素耐药现象。小鼠致病性分析发现血清A型菌株毒力显著强于血清D型菌株,且PmA和GX-PmD4菌株对小鼠的致病力明显强于其他分离菌株。综上,本研究对猪场猪多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及防治措施提供了科学依据和防控方案。

关键词：猪多杀性巴氏杆菌分离鉴定血清分型耐药性分析

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比较初乳乳房拭子与仔猪睾丸处理液对6种猪繁殖障碍相关病毒的监测效果

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畜牧与兽医 2023年第9期55卷 106-112页

作者：祁松张哲玮朱晶罗宇山董德文贝为成华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 广西翔仪生物工程有限公司广西南宁530000 湖北洪山实验室湖北武汉430070 生猪健康养殖协同创新中心湖北武汉430070

为探究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪细小病毒(PPV)和猪圆环病毒3型(PCV-3)这6种与猪繁殖障碍相关的病毒在母猪初乳乳房拭子和仔猪睾丸处理液样品中的检出率及2种样品... 详细信息

为探究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪细小病毒(PPV)和猪圆环病毒3型(PCV-3)这6种与猪繁殖障碍相关的病毒在母猪初乳乳房拭子和仔猪睾丸处理液样品中的检出率及2种样品中的检出差异,采用qPCR的方法对河南某规模猪场的母猪初乳乳房拭子和3~5日龄仔猪睾丸处理液进行检测。结果:在随机不分胎次采集的113份(452头母猪的4混1样)初乳乳房拭子样品中,PCV-2、PCV-3和PPV的检出率分别为0、26.55%和4.42%;在随机不分胎次采集的171份(684窝仔猪的4混1样)仔猪睾丸处理液样品中,PCV-2、PCV-3和PPV的检出率分别为0、5.85%和1.17%。在单独检测的38头1胎母猪的初乳乳房拭子样品中,PCV-2、PCV-3和PPV的检出率分别为2.63%、55.26%和2.62%;对应的3~5日龄仔猪睾丸处理液样本中,PCV-2、PCV-3和PPV的检出率分别为0、44.74%、0;PCV-2+PCV-3和PPV+PCV-3混合感染在初乳乳房拭子中的检出率均为2.63%,在睾丸处理液中未检测到任何混合感染;PRRSV、CSFV、PRV在所有母猪初乳乳房拭子和仔猪睾丸处理液样品中的检出率均为0。本研究证实母猪初乳乳房拭子对PCV-2、PCV-3和PPV的检出率要高于仔猪睾丸处理液,适合作为规模猪场对这些疫病的监测样本,但未比较出PRRSV、CSFV和PRV的检出率差异。

关键词：母猪初乳乳房拭子仔猪睾丸处理液繁殖障碍相关病毒 qPCR

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细菌性脑膜炎概述

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中国感染控制杂志 2022年第1期21卷 97-103页

作者：彭忠李春辉陈焕春王湘如华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室生猪健康养殖协同创新中心湖北武汉430070 中南大学湘雅医院医院感染控制中心湖南长沙410008

社区获得性细菌性脑膜炎依然是一种在世界范围内具有较高发病率和病死率的感染性疾病,也是一种需要被紧急救治的疾病。早期准确诊断、及时治疗以及提前预防是有效降低细菌性脑膜炎发病率的关键因素。本文对引起细菌性脑膜炎的主要病原... 详细信息

社区获得性细菌性脑膜炎依然是一种在世界范围内具有较高发病率和病死率的感染性疾病,也是一种需要被紧急救治的疾病。早期准确诊断、及时治疗以及提前预防是有效降低细菌性脑膜炎发病率的关键因素。本文对引起细菌性脑膜炎的主要病原菌及其流行病学、细菌性脑膜炎的发生机制以及该病的诊断、治疗和预防现状进行综述,为进一步认识细菌性脑膜炎的发生发展及防控治疗提供参考。

关键词：细菌性脑膜炎病原学流行病学发生机制诊断治疗疫苗

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一株猪源盖塔病毒的分离鉴定及遗传演化分析

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病毒学报 2022年第6期38卷 1405-1410页

作者：严伟东杨郑欣马宁宁张梦佳邵伟何启盖李文涛华中农业大学动物科学技术学院动物医学院武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 武汉科前生物股份有限公司武汉4300072 生猪健康养殖协同创新中心武汉430070 湖北洪山实验室武汉430070

盖塔病毒(Getah virus,GETV)是一种人畜共患病毒,近年来在动物中的感染时有发生,监测其流行情况以及控制其传播对公共卫生方面至关重要。本研究对一猪场流产胎儿脾脏样品进行二代测序,与NCBI数据库比对后,发现该序列与GETV HNJZ-S2毒株... 详细信息

盖塔病毒(Getah virus,GETV)是一种人畜共患病毒,近年来在动物中的感染时有发生,监测其流行情况以及控制其传播对公共卫生方面至关重要。本研究对一猪场流产胎儿脾脏样品进行二代测序,与NCBI数据库比对后,发现该序列与GETV HNJZ-S2毒株的基因组高度相似。对组织样品进行无菌处理,接种至PK-15细胞,经连续传代培养和空斑纯化,获得一株能在PK-15细胞上稳定生长的分离物,命名为GETV-YL株,并对其进行电镜观察与遗传演化分析。电镜结果显示,病毒颗粒呈球状,直径约为70 nm,有囊膜,表面有甲病毒典型的纤突结构。遗传演化分析结果显示,GETV-YL基因组全长11689bp,与GenBank中现有的30株GETV全基因组序列相似性为94.4%~99.8%,与中国猪源毒株HNJZ-S2序列相似性最高(99.8%)并处于同一分支。在本研究中,从感染的猪中检测并分离到了GETV,表明该地区应加强对该病毒在猪群中流行情况的监测,并对该地区的蚊子进行病原检测。

关键词：猪盖塔病毒分离鉴定遗传演化分析

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