检索结果-内蒙古大学图书馆

利用大蜡螟幼虫和小鼠感染模型筛选猪链球菌血清2、3和9型三价灭活疫苗候选菌株

畜牧兽医学报 2024年第9期55卷 4077-4090页

作者：朋璐张衡庞思琪乔竹林张小芬谭臣宋云峰周锐黎璐华中农业大学动物医学院农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室生猪健康养殖省部共建协同创新中心武汉430070

旨在评估临床分离的猪链球菌血清2、3、9型强毒株制备的三价灭活疫苗对小鼠的免疫保护效果。使用大蜡螟幼虫感染模型和小鼠感染模型,从临床分离的猪链球菌中筛选出血清2、3和9型强毒株各1株(SS1803、SS1803024、SS1696),检测其生长曲线... 详细信息

旨在评估临床分离的猪链球菌血清2、3、9型强毒株制备的三价灭活疫苗对小鼠的免疫保护效果。使用大蜡螟幼虫感染模型和小鼠感染模型,从临床分离的猪链球菌中筛选出血清2、3和9型强毒株各1株(SS1803、SS1803024、SS1696),检测其生长曲线和毒力因子。将菌株分别灭活及混合灭活后与佐剂混合,用4×10^(7)CFU、8×10^(7)CFU SS1803、2×10^(8)CFU、5×10^(8)CFU SS1803024、1×10^(8)CFU、5×10^(8)CFU SS1696及三价灭活苗(2×10^(7)CFU SS1803^(+)1.5×10^(8)CFU SS1803024^(+)3×10^(7)CFU SS1696)分别对BALB/c小鼠进行两轮免疫,采集血清检测特异性抗体水平,分别用3种菌株致死剂量攻毒后观察小鼠免疫保护率,同时用亚致死剂量攻毒三价苗免疫组,测定小鼠血、脑、肺、脾的组织载菌量和细胞因子IL-6、IL-12水平,并观察脑、肺、脾、肾中的组织病理变化。结果显示:3株疫苗候选菌株的毒力基因鉴定分别为SS1803:gapdh^(+)/sly^(+)/fbps^(+)/orf2^(+)/mrp^(-)/89K^(-)/gdh^(+)/epf^(+),SS1803024:gapdh^(+)/sly^(+)/fbps^(+)/orf2^(+)/mrp^(-)/89K^(-)/gdh^(+)/epf^(-),SS1696:gapdh^(+)/sly-/fbps^(+)/orf2^(+)/mrp^(-)/89K^(-)/gdh^(+)/epf^(-)。单价和三价疫苗免疫组均能产生对应免疫血清型的IgG抗体,以产生IgG1型抗体为主。三价疫苗免疫组能对2、3、9型3个菌株攻毒分别提供83.3%、66.7%和66.7%的保护率,能显著降低感染后小鼠组织中的载菌量,降低血清炎性因子水平和组织病变程度。本研究筛选临床流行率高的2、3、9型强毒株,联合制备三价灭活疫苗,能够对小鼠提供良好的免疫保护力,为猪链球菌多价疫苗的研发提供新的材料。

关键词：猪链球菌疫苗候选菌株三价灭活疫苗免疫保护效果

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基于猪流行性腹泻病毒GⅡb亚型重组荧光病毒中和抗体检测方法的建立

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畜牧兽医学报 2024年第4期55卷 1649-1660页

作者：林莉莉张梦迪朱琳琳马海龙孙琪何启盖张梦佳李文涛华中农业大学动物医学院武汉430070 农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室武汉430070 农业农村部兽用诊断制剂创制重点实验室武汉430070 湖北洪山实验室武汉430070

2010年以来,猪流行性腹泻病毒(PEDV)GⅡ型变异毒株的出现,导致全世界范围内猪流行性腹泻(PED)的病死率显著增加。疫苗免疫是PED有效防控的重要策略之一,疫苗诱导的中和抗体水平是免疫效果评价和疫苗质量评估的重要指标。然而,在Vero-CC... 详细信息

2010年以来,猪流行性腹泻病毒(PEDV)GⅡ型变异毒株的出现,导致全世界范围内猪流行性腹泻(PED)的病死率显著增加。疫苗免疫是PED有效防控的重要策略之一,疫苗诱导的中和抗体水平是免疫效果评价和疫苗质量评估的重要指标。然而,在Vero-CCL81上开展的PEDV经典中和试验中所添加的胰酶会导致试验结果不稳定等问题。本研究拟在构建稳定表达绿色荧光蛋白的重组病毒基础上,建立一种能准确评估样品中和抗体的检测方法。本研究在pUC57载体上克隆插入GⅡb亚型PEDV-GDU株部分ORF1a和ORF1b基因片段与其他结构基因片段,并通过无缝克隆技术将ORF3基因替换为EGFP基因,构建辅助质粒pUC57-PEDV-GDU-dORF3-EGFP,通过RNA定向重组技术拯救重组荧光病毒rPEDV-GDU-dORF3-EGFP。进一步通过间接免疫荧光试验(IFA)、Western blot和病毒生长曲线测定等方法,比较重组荧光病毒和亲本病毒生物学特性。最终利用重组荧光工具病毒筛选在不添加胰酶的条件下仍能支持PEDV有效增殖的细胞系,并建立中和试验方法。结果表明,成功拯救重组荧光病毒rPEDV-GDU-dORF3-EGFP,且在Vero-CCL81细胞上,重组荧光病毒与亲本病毒呈现相似的生物学特性。利用该重组荧光病毒筛选到一株亚克隆Huh7.10细胞可支持PEDV在无外源胰酶添加条件下的有效感染与复制。并利用Huh7.10细胞和重组荧光病毒成功建立了PEDV中和试验方法,相关性试验分析表明,该方法测定结果与ELISA抗体检测结果相关性高于PEDV经典中和试验。以上试验结果表明,本研究成功建立了PEDV-GDU毒株的反向遗传操作平台,为PED新型疫苗候选毒株的快速制备提供了有力的工具。此外,基于重组荧光病毒在Huh7.10细胞上建立的中和试验方法能更准确地测定血清中和抗体水平,为疫苗免疫效果的评估提供了有效的技术支持手段。

关键词：猪流行性腹泻病毒反向遗传学胰蛋白酶报告病毒中和试验

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地衣芽孢杆菌HDTN对817肉鸡生长性能及肠道菌群的影响

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微生物学报 2024年第7期64卷 2479-2492页

作者：丁红霞潘朝阳孟凡丛陈聘聘许萍王婕范鑫李世杰周祖涛石德时肖运才华中农业大学农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室湖北武汉430070 湖北省预防兽医学重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 湖南宝东农牧科技股份有限公司湖南邵阳422000

“饲料禁抗”对于畜牧养殖业而言是个重要转折点,标志着饲料行业和养殖行业步入转型升级的新阶段。【目的】探究饲料中添加地衣芽孢杆菌HDTN对817肉鸡生长性能及肠道菌群的影响。【方法】将地衣芽孢杆菌HDTN菌粉(7.0×10^(10)CFU/g... 详细信息

“饲料禁抗”对于畜牧养殖业而言是个重要转折点,标志着饲料行业和养殖行业步入转型升级的新阶段。【目的】探究饲料中添加地衣芽孢杆菌HDTN对817肉鸡生长性能及肠道菌群的影响。【方法】将地衣芽孢杆菌HDTN菌粉(7.0×10^(10)CFU/g)添加至饲料中饲喂817肉鸡,探究不同添加剂量(高剂量组:1000 g/t;中剂量组:500 g/t;低剂量组:250 g/t;对照组:0 g/t)在1-56 d内对817肉鸡生长性能、血清生化指标、肠道形态及菌群结构的影响。【结果】与对照组相比1-35 d添加低剂量地衣芽孢杆菌HDTN可以使肉鸡平均体重(average body weight,ABW)显著提高105.47 g(P<0.01),料重比显著降低0.25(P<0.05)。肉鸡血清中部分抗氧化指标的含量与HDTN添加量呈正相关,从而减少肉鸡氧化应激。丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量与HDTN添加量呈负相关,提示HDTN可以减少肉鸡细胞损伤。肠道切片结果显示低剂量组十二指肠的肠绒毛高度与隐窝深度比值(villus height/crypt depth,VH/CD)显著高于对照组(P<0.01)。另外中剂量组(P<0.01)、低剂量组(P<0.05)的厚壁菌门(Firmicutes)菌群丰度显著上升,中剂量组拟杆菌属(Bacteroides)的菌群丰度同样出现显著上升(P<0.05)。【结论】在1-35 d添加低剂量地衣芽孢杆菌HDTN,可以提高817肉鸡生长性能、降低料重比、改善肠道形态并加快建立肠道优势菌群。

关键词：地衣芽孢杆菌HDTN 817肉鸡生长性能肠道菌群

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基于高效液相尺寸排阻色谱的猪瘟病毒E2蛋白定量方法的建立和优化

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生物工程学报 2024年

作者：张小娟杨博徐高原任明星汤吉刘洪硕刘占悝李亚菲王湘如华中农业大学动物医学院生猪健康养殖协同创新中心武汉科前生物股份有限公司农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室

本研究旨在建立猪瘟病毒（classical swine fever virus， CSFV）E2蛋白含量测定的高效液相尺寸排阻色谱（high-performance size-exclusion chromatography， HPSEC）检测方法，筛选最优的稳定体系来提高CSFV E2蛋白稳定性。通过优化... 详细信息

本研究旨在建立猪瘟病毒（classical swine fever virus， CSFV）E2蛋白含量测定的高效液相尺寸排阻色谱（high-performance size-exclusion chromatography， HPSEC）检测方法，筛选最优的稳定体系来提高CSFV E2蛋白稳定性。通过优化流动相组分来确定最佳的检测条件，结合SDS-PAGE和Western blotting对特征色谱峰进行鉴定，对方法的专属性、重复性、精密度、线性关系、检测限和定量限进行了验证。应用建立的方法对CSFV E2蛋白抗原以及疫苗成品进行检测。通过差示扫描荧光法（differential scanning fluorimetry， DSF）筛选缓冲液的种类、pH和盐离子浓度，进一步对糖类、氨基酸类和醇类稳定剂进行筛选。结果表明，选择200 mmol/L磷酸盐缓冲液能获得最佳柱效。在保留时间18 min时出现抗原特征色谱峰，经SDS-PAGE和Western blotting验证为CSFV E2蛋白。建立的方法可特异性检测CSFV E2蛋白，而空白对照没有出现吸收峰。6次CSFV E2蛋白重复进样的峰面积相对标准偏差（relative standard deviation， RSD）为0.74%，检测方法的重复性良好。不同实验人员在不同时间对两个不同浓度的CSFV E2蛋白样品进行重复检测，RSD均小于2%，方法的中间精密度良好。CSFV E2蛋白倍比稀释后检测，峰面积与蛋白浓度的回归方程的R2为1.000，线性关系良好。该方法检测限为14.88 μg/mL，定量限为29.75 μg/mL。应用此方法对3批CSFV E2蛋白抗原以及3批疫苗成品的抗原含量检测结果与2，2'-联喹啉-4，4'-二羧酸法（bicinchoninic acid， BCA）检测结果相关性较好，可对CSFV E2蛋白抗原以及疫苗成品抗原含量进行精准测定。通过DSF法筛选，最优的缓冲液为pH 8.0的50 mmol/L Tris-HCl，在缓冲体系中添加糖类和醇类稳定剂能进一步提升CSFV E2蛋白的稳定性。建立的HPSEC方法简单、快速，准确度和重复性良好，能对CSFV E2蛋白含量进行精准测定，有望在猪瘟E2疫苗质量控制上发挥重要作用。本研究建立了提高CSFV E2蛋白稳定性的策略，通过DSF法筛选到最优的缓冲液和稳定剂，对猪瘟E2疫苗稳定性的提升具有重要意义。

关键词：高效液相尺寸排阻色谱差示扫描荧光法猪瘟病毒 E2蛋白疫苗

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粪类圆线虫感染性Ⅲ期幼虫和寄生性雌虫miRNA的鉴定

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2023年第4期41卷 412-420页

作者：覃裴溪周彩显鲁志刚张碧瀛周涛勋胡敏华中农业大学动物医学院农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室湖北武汉430070 威康桑格研究所威康基因组校园幸克斯顿剑桥郡CB101SA英国

目的鉴定粪类圆线虫感染性Ⅲ期幼虫(iL3)和寄生性雌虫(pF)的微小RNA(miRNA),分析差异表达miRNA及其靶基因的功能。方法从粪类圆线虫感染犬粪便中收集iL3。取4000~5000条iL3于颈后皮下注射感染健康犬,感染后21 d,从肠道中采集pF。提取iL3... 详细信息

目的鉴定粪类圆线虫感染性Ⅲ期幼虫(iL3)和寄生性雌虫(pF)的微小RNA(miRNA),分析差异表达miRNA及其靶基因的功能。方法从粪类圆线虫感染犬粪便中收集iL3。取4000~5000条iL3于颈后皮下注射感染健康犬,感染后21 d,从肠道中采集pF。提取iL3和pF的总RNA并测序。测序数据与粪类圆线虫基因组和鼠类圆线虫miRNA比对筛选保守的miRNA,用miRDeep2通过颈环结构分析、成熟序列比对筛选miRNA。分析iL3和pF的miRNA表达谱,筛选差异表达miRNA,预测差异表达miRNA的靶基因,对log2(差异倍数)>1和每百万转录本上的读数(TPM)>1000的未注释miRNA的靶基因功能进行分析。用ClusterProfiler对差异表达miRNA靶基因进行GO富集分析。选取11个未注释或保守的差异表达miRNA进行实时荧光定量PCR(qRT‑PCR)验证,以粪类圆线虫甘油醛‑3‑磷酸脱氢酶基因(GenBank登录号:BI773092.1)为参照基因,计算差异表达miRNA的相对转录水平。结果共鉴定出265个miRNA,包括130个保守的miRNA和135个未注释的miRNA。其中,134个miRNA在iL3和pF之间差异表达(包含77个保守的miRNA和57个未注释的miRNA),251个为iL3和pF所共有,10个为iL3特有,4个为pF特有。差异表达miRNA靶基因预测结果显示,57个未注释的miRNA中,有12个差异倍数>2且TPM>1000,有248个靶基因与秀丽隐杆线虫同源,其中35.08%(87/248)的靶基因与发育相关,其余与应激、运动和蜕皮等相关。大部分在pF高表达未注释的miRNA靶向SSTP_0000114700。差异表达miRNA靶基因的GO分析结果显示,共5595个靶基因被富集,其中富集靶基因数居前5位的分别为膜组成成分(1821个)、核酸结合(561个)、细胞核(450个)、蛋白质水解作用(365个)和信号传导(284个)。qRT‑PCR验证结果显示,sst‑miR‑86‑5p、sst‑84‑5p、sst‑novel‑104、sst‑miR‑92‑3p、sst‑miR‑34a‑3p、sst‑miR‑81a‑5p、sst‑miR‑1‑3p、sst‑novel‑108、sst‑miR‑124‑5p、sst‑miR‑50‑3p、sst‑novel‑51的log2(差异倍数)分别为-2.13、6.39、4.46、-3.69、-3.69、2.34、-2.48、-2.41、-2.30、2.25、-3.32,转录组分析获得的log2(差异倍数)分别为-3.05、4.98、4.07、-4.9、-3.66、0.98、-3.79、-2.61、-0.99、0.63、-1.55。qRT‑PCR与转录组分析获得的上调、下调趋势结果一致。结论获得粪类圆线虫感染性Ⅲ期幼虫和寄生性雌虫的miRNA表达谱和差异表达miRNA,差异表达miRNA与粪类圆线虫的生长发育和繁殖功能相关。

关键词：粪类圆线虫感染性Ⅲ期幼虫寄生性雌虫 miRNA

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我国牛群中牛病毒性腹泻病毒流行的Meta分析

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华中农业大学学报 2023年第2期42卷 48-62页

作者：朱杰杨才俊祁明普杨凯辉王宇陈颖钰陈曦胡长敏郭爱珍华中农业大学动物医学院武汉430070 农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室武汉430070 湖北洪山实验室武汉430070 湖北工业大学工业设计学院武汉430070

为全面评估我国牛群中牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)病原流行率对该病毒感染的防控,在中国知网(CNKI)、万方、维普、PubMed和ScienceDirect 5个数据库中,检索截止到2021年9月1日发表的关于中国牛群BVDV流行情况... 详细信息

为全面评估我国牛群中牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)病原流行率对该病毒感染的防控,在中国知网(CNKI)、万方、维普、PubMed和ScienceDirect 5个数据库中,检索截止到2021年9月1日发表的关于中国牛群BVDV流行情况的文献,并进行系统评价和Meta分析。共筛选出93篇关于BVDV病原学检测的研究论文纳入Meta分析中。分析结果显示:我国牛群中BVDV病原(抗原和核酸)流行率为9.8%(95%CI:7.8,11.9),其中BVDV抗原流行率为3.1%(95%CI:2.1,4.4),BVDV核酸流行率为19.5%(95%CI:16.0,23.3)。各省间比较发现,吉林流行率最高,为26.3%(95%CI:24.3,28.4),其次是湖北和福建省。进一步开展亚组分析和Meta回归分析的结果显示,品种(牦牛vs奶牛:比值比(odds ratio,OR)=1.37,95%CI:1.05~1.79)、饲养模式(散养vs规模化:OR=1.41,95%CI:1.08~1.85)、诊断方法(RT-PCR vs ELISA:OR=1.64,95%CI:1.38~1.94)、牛体健康状况(有临床症状vs无临床症状:OR=1.42,95%CI:1.20~1.68)、高山高原气候(OR=1.54,95%CI:1.20~1.97)和高海拔(>3 000 m;OR=1.64,95%CI:1.21~2.21)等都是BVDV感染流行的风险因子。以上结果表明,BVDV在我国奶牛、肉牛和牦牛群体中广泛流行,有必要持续监测BVDV感染的流行情况。此外,可根据本研究揭示的风险因子,制定相应的防控方案,防止BVDV在我国牛群中传播。

关键词：牛病毒性腹泻病毒牛 Meta分析流行率抗原检测风险因子分析健康养殖

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抗大口黑鲈弹状病毒发酵中草药的筛选及其效果评价

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水生生物学报 2024年第3期48卷 479-487页

作者：曾荣博刘爽张玉军李陈余艳枝李元平肖运才刘学芹华中农业大学水产学院农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室武汉430070 湖北省水生动物病害防控工程技术研究中心武汉430070 湖北华大瑞尔科技有限公司武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070

为筛选出能够对MSRV具有抑制效果的发酵中草药,研究通过MTT法检测8种发酵中草药(L1、L2、L3、L4、L5、X1、X2和ZHS)对EPC细胞的毒性作用,结果表明L1、L2、L3、X1、X2和ZHS未对EPC细胞造成明显的损伤和毒性,L4和L5在4 mg/mL时对细胞造成... 详细信息

为筛选出能够对MSRV具有抑制效果的发酵中草药,研究通过MTT法检测8种发酵中草药(L1、L2、L3、L4、L5、X1、X2和ZHS)对EPC细胞的毒性作用,结果表明L1、L2、L3、X1、X2和ZHS未对EPC细胞造成明显的损伤和毒性,L4和L5在4 mg/mL时对细胞造成损害;通过荧光定量PCR法(qRT-PCR)筛选出X1药物(主要成分为板蓝根、鱼腥草、南芪和杏仁)对MSRV有良好的抗病毒效果;在细胞水平上通过qRT-PCR法发现X1药物能够抑制MSRV的感染;空斑实验结果表明X1药物可以降低约10倍MSRV的病毒滴度。在鱼体水平上设置空白对照组、药物对照组、攻毒组、预防组和治疗组,评价X1药物对MSRV的抗病毒效果,结果表明经X1药物处理后,治疗组可以将大口黑鲈的存活率提高20%;通过qRT-PCR法检测大口黑鲈组织中病毒载量,结果表明X1药物显著抑制MSRV在肝脏、脾脏组织中的复制;通过组织病理学观察发现X1药物可以抑制MSRV引起的在肝脏、脾脏组织病变。研究为发酵中草药在水产养殖中的应用提供新的思路,为开发抗MSRV药物提供参考依据。

关键词：大口黑鲈弹状病毒发酵中草药抗病毒大口黑鲈

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牛溶血性曼氏杆菌可视化LAMP检测方法的建立

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华中农业大学学报 2023年第2期42卷 32-37页

作者：刘宁宁易萍郭爱珍胡长敏陈颖钰华中农业大学动物医学院/农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室武汉430070 湖北省兽医流行病学国际科技合作基地武汉430070 湖北洪山实验室武汉430070

为建立一种能够快速、高效检测牛溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica)的可视化LAMP检测法,利用LAMP引物设计软件,以溶血性曼氏杆菌保守基因lktC序列设计内引物、外引物及环引物,对其反应温度、Mg^(2+)浓度、dNTPs浓度等条件进行优化... 详细信息

为建立一种能够快速、高效检测牛溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica)的可视化LAMP检测法,利用LAMP引物设计软件,以溶血性曼氏杆菌保守基因lktC序列设计内引物、外引物及环引物,对其反应温度、Mg^(2+)浓度、dNTPs浓度等条件进行优化,并检测了方法的敏感性、特异性及实用性。结果显示,该方法在68.2℃、6 mmol/L Mg^(2+)、1.6 mmol/L dNTPs条件下达到最佳,40 min内完成检测并可通过肉眼判定结果,对细菌的最低检测限为6.7×10^(-1)cfu/μL,对lktC重组质粒的最低检测限为7.9×10^(2)copies/μL,敏感性高;与15种病原均不发生交叉反应,特异性好;对背景清晰小鼠肺组织样本检测结果显示该方法实用性良好,且优于普通PCR方法。表明该方法可快速、高效检测牛溶血性曼氏杆菌。

关键词：环介导等温扩增(LAMP) lktC基因溶血性曼氏杆菌可视化检测综合防控

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生物素连接酶BirA及其突变体在病原与宿主互作研究中的应用进展

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生物工程学报 2024年第7期40卷 1981-1996页

作者：张含煜李鹏飞廖浙屿张梦佳孙玉梅张敏何启盖李文涛农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 农业农村部兽用诊断制剂创制重点实验室湖北武汉430070 湖北洪山实验室湖北武汉430070 宜昌市畜牧兽医中心湖北宜昌443000

蛋白质是机体进行生命活动的主要承担者,研究蛋白质的亚细胞定位及蛋白质之间的相互作用对了解蛋白质功能、阐述机体内分子机制至关重要。邻近标记技术是最新发展的能够在活细胞中检测蛋白质相互作用的有效方法之一。相较于传统研究蛋... 详细信息

蛋白质是机体进行生命活动的主要承担者,研究蛋白质的亚细胞定位及蛋白质之间的相互作用对了解蛋白质功能、阐述机体内分子机制至关重要。邻近标记技术是最新发展的能够在活细胞中检测蛋白质相互作用的有效方法之一。相较于传统研究蛋白质相互作用的方法,邻近标记技术具有灵敏度高、特异性强和背景低等优势,被广泛应用于病原与宿主间蛋白质的相互作用研究中。本文对近些年生物素连接酶BirA及其突变体的发展和应用进行了综述,阐述了几种经典生物素连接酶的作用原理,以期进一步明确基于BirA及其突变体的邻近标记技术在病原-宿主间蛋白质相互作用鉴定中的重要作用。

关键词：蛋白质相互作用邻近标记 BirA 生物素

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山羊痘弱毒疫苗(AV41株)接种途径和剂量对牛抗体反应的影响

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华中农业大学学报 2023年第2期42卷 24-31页

作者：王宇熊博彭清洁项志杰袁歆玮王艳邹良勋陈颖钰郭爱珍华中农业大学动物医学院/农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室武汉430070 湖北洪山实验室武汉430070 安琪酵母股份有限公司宜昌443001 湖北良友金牛畜牧科技有限公司襄阳441034

为评估山羊痘弱毒疫苗(AV41株)经皮下和皮内接种牛体后的抗体产生规律,优化牛体免疫程序,选取25头健康成年肉牛分为5组,每组5头,标准单头份剂量为含量1.0×10^(3.5)TCID_(50) AV41株,分别以5倍和10倍羊用剂量进行皮下和皮内免疫,于... 详细信息

为评估山羊痘弱毒疫苗(AV41株)经皮下和皮内接种牛体后的抗体产生规律,优化牛体免疫程序,选取25头健康成年肉牛分为5组,每组5头,标准单头份剂量为含量1.0×10^(3.5)TCID_(50) AV41株,分别以5倍和10倍羊用剂量进行皮下和皮内免疫,于接种后0、15、30、45和60 d,利用病毒中和试验(VNT)和ELISA试剂盒检测血清抗体水平。结果显示:鼻咽拭子和血液PCR结果均为阴性,未出现排毒;VNT与ELISA抗体检测结果相似,免疫后第30天,皮下接种5倍剂量组中有60%牛抗体转阳,中和抗体滴度最高达1∶640。同时,皮内和皮下10倍剂量组各有40%牛抗体转阳,皮内5倍剂量组有20%牛抗体转阳。VNT中和指数与ELISA的S/P值呈现显著正相关。上述结果表明,类似于国际上相关疫苗的接种途径和剂量,皮下注射5倍羊头份剂量山羊痘弱毒疫苗是安全和有效的,可作为临床预防牛结节皮肤病的免疫接种方案。

关键词：牛结节性皮肤病山羊痘弱毒疫苗(AV41株) 免疫剂量免疫途径抗体监测健康养殖

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