检索结果-内蒙古大学图书馆

中国畜牧兽医 2019年第3期46卷 931-939页

作者：王迪轩高东阳张天姿刘维周祖涛徐晓娟蔡旭旺华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070

为了探明华中地区种鸡场沙门菌(Salmonella)的优势血清型和耐药情况,本研究从湖北、河南、湖南等省市22个规模化鸡场采集病鸡、死胚及弱雏组织样品3 724份,通过分离培养、生化试验、PCR鉴定及血清型试验确定分离菌种属及其血清型,并采用... 详细信息

为了探明华中地区种鸡场沙门菌(Salmonella)的优势血清型和耐药情况,本研究从湖北、河南、湖南等省市22个规模化鸡场采集病鸡、死胚及弱雏组织样品3 724份,通过分离培养、生化试验、PCR鉴定及血清型试验确定分离菌种属及其血清型,并采用Kirby-Bauer法对分离菌株进行了耐药性分析。结果显示,本试验从3 724份病料中共分离鉴定出124株沙门菌,其中79株为D群肠炎沙门菌(63.71%,79/124),34株为D群鸡白痢沙门菌(27.42%,34/124),8株为B群鼠伤寒沙门菌(6.45%,8/124),有3株沙门菌未能确定血清型。O抗原鉴定79株肠炎沙门菌和34株鸡白痢沙门菌为O9,8株鼠伤寒沙门菌为O4。H抗原鉴定79株肠炎沙门菌为Hg,m,8株鼠伤寒沙门菌为Hi。药敏试验结果显示,124株分离菌株对萘啶酸、氨苄青霉素、四环素和多西环素耐药率分别为95.97%(119/124)、91.94%(114/124)、57.26%(71/124)和70.16%(87/124);对复方新诺明和红霉素耐药率分别为25.81%(32/124)和12.10%(15/124);对氯霉素、庆大霉素、头孢噻肟和卡那霉素耐药率分别为6.45%(8/124)、1.61%(2/124)、1.61%(2/124)和0.81%(1/124);对左氧氟沙星、阿米卡星和多黏菌素B完全敏感。99.19%(123/124)的分离株至少对一种药物耐药,87.10%(108/124)的分离株表现多重耐药。本研究为华中地区养鸡场沙门菌的诊断及防控提供了数据支撑。

关键词：沙门菌分离鉴定血清型耐药性

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一例猪瘟混合感染副猪嗜血杆菌和猪蛔虫的案例诊治

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猪业科学 2020年第7期37卷 76-80页

作者：陈晓雨于学祥孙琪库旭钢范盛先何启盖华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物疫病诊断中心检测实验室湖北武汉430070

2019年11月底,湖北某商品猪场保育猪只出现厌食、消瘦、呼吸困难、咳嗽等症状,偶有病猪急性死亡,为查找病因,控制疫情,减少损失,依次通过流行病学调查、病理剖检和实验室检测,最终确定该发病猪场为感染猪瘟病毒,进而继发感染Hps-4混合感... 详细信息

2019年11月底,湖北某商品猪场保育猪只出现厌食、消瘦、呼吸困难、咳嗽等症状,偶有病猪急性死亡,为查找病因,控制疫情,减少损失,依次通过流行病学调查、病理剖检和实验室检测,最终确定该发病猪场为感染猪瘟病毒,进而继发感染Hps-4混合感染,并伴随蛔虫感染导致。通过筛选敏感药物治疗,优化生产管理,成功控制了此次疫情。该案例对此次疫情进行了分析总结,就加强生物安全建设,优化养殖管理,实现生产质量可控提供了参考建议。也为猪瘟混合感染呼吸系统细菌性疾病的防控提供参考。

关键词：保育猪混合感染诊断防控

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MicroRNA在结核病诊断中的作用

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动物医学进展 2020年第5期41卷 121-124页

作者：王子健竺婷婷陈颖钰郭爱珍华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 湖北省兽医流行病学国际科技合作基地湖北武汉430070

MicroRNA(miRNA)是一类进行基因转录后调控的非编码小RNA,它们广泛存在于真核细胞之中,参与机体调节。结核病严重危害人类与其他生物健康,除潜伏期长、胞内寄生以外,还缺少有效的快速的早期诊断方法。尽管已经在结核病诊断的研究中预测... 详细信息

MicroRNA(miRNA)是一类进行基因转录后调控的非编码小RNA,它们广泛存在于真核细胞之中,参与机体调节。结核病严重危害人类与其他生物健康,除潜伏期长、胞内寄生以外,还缺少有效的快速的早期诊断方法。尽管已经在结核病诊断的研究中预测并证实了多种miRNA,但miRNA在结核菌感染中的功能及其靶基因的相互作用机制尚不完全清晰。研究表明,结核病的发生、发展及转化过程与miRNA有着密不可分的联系。深入研究miRNA在结核病早期诊断中的应用,阐明结核菌感染过程中miRNA的生物学作用,充分挖掘其在诊断和治疗中的价值,将有助于人类防治结核病。

关键词： MicroRNA 结核病诊断

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基因编辑动物模型制备虚拟仿真实验教学平台的设计开发

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中国组织化学与细胞化学杂志 2020年第3期29卷 291-295页

作者：张霞苗义良华中农业大学动物医学国家级实验教学示范中心武汉430070 华中农业大学动科动医学院干细胞与再生生物学研究所武汉430070 华中农业大学农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室武汉430070

基因缺失或突变动物模型的制备对于研究基因功能和构建人类疾病模型具有重要的作用。目前在大动物上构建疾病模型主要通过体细胞基因编辑和动物克隆技术相结合来实现,但这两项技术涉及环节众多,技术要求高,特别是显微操作技术。为了能... 详细信息

基因缺失或突变动物模型的制备对于研究基因功能和构建人类疾病模型具有重要的作用。目前在大动物上构建疾病模型主要通过体细胞基因编辑和动物克隆技术相结合来实现,但这两项技术涉及环节众多,技术要求高,特别是显微操作技术。为了能让更多的本科生、研究生生和技术人员学习和掌握该技术,特以猪为对象利用虚拟仿真技术开发出基因编辑克隆动物制备的虚拟仿真实验系统。该系统不但节约了操作的成本和时间,学习者可以身临其境地进行高难度的实验操作,本文将具体介绍该系统的设计和开发。

关键词：虚拟仿真实验基因编辑动物克隆实验教学

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利用实时荧光定量方法进行副猪嗜血杆菌分子血清分型的研究

利用实时荧光定量方法进行副猪嗜血杆菌分子血清分型的研究

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中国微生物学会兽医微生物学专业委员会暨中国畜牧兽医学会生物制品学分会2021年学术论坛

作者：崔一芳郭芳芳蔡旭旺曹晓亚王宏俊杨兵周宏专苏霞徐福洲畜禽疫病防控技术北京市重点实验室北京市农林科学院畜牧兽医研究所农业微生物学国家重点实验室华中农业大学动物医学院

副猪嗜血杆菌（Glaesserella parasuis,GPS）是引起猪格拉泽氏病（Gl?sser's disease）的细菌性病原,可感染猪出现多发性浆膜炎、关节炎、脑膜炎及败血症等多种临床表现和病理变化,是当前我国养猪业最重要的细菌性疫病之一。GPS目... 详细信息

副猪嗜血杆菌（Glaesserella parasuis,GPS）是引起猪格拉泽氏病（Gl?sser's disease）的细菌性病原,可感染猪出现多发性浆膜炎、关节炎、脑膜炎及败血症等多种临床表现和病理变化,是当前我国养猪业最重要的细菌性疫病之一。GPS目前至少鉴定出15个血清型,不同血清型菌株存在高毒力、中等毒力和无毒力等显著差异,因而鉴定GPS血清型对该病的诊断、防治以及流行病学调查具有重要意义。通过对GPS 15个血清型荚膜多糖合成编码基因座的基因结构进行分析发现,不同血清型菌株之间存在显著差异,基于不同血清型的特异性基因进行多重PCR的分子血清分型方法已有报道,此种分子血清分型方法比传统的血清分型方法具有高效、准确、快速等显著优势。为克服多重PCR方法中需要跑胶、通过条带判断时不易区分大小等缺点,本试验建立了一种简便、快速的基于实时荧光定量（qPCR）检测方法中Ct值大小进行GPS血清型判定的检测方法,即利用报道的GPS不同血清型特异性基因片段,设计不同血清型的特异性qPCR引物,建立基于Sybr Green荧光染色的qPCR检测方法。通过对GPS15种血清型国际参考菌株检测结果显示,对应血清型菌株的Ct值均小于12,而其它血清型菌株均大于19,扩增效率介于85.5%至110.4%之间,相关系数R>0.98。通过对83个临床分离株检测结果显示,本试验建立的qPCR与多重PCR检测方法符合率为98.8%（82/83）,其中经琼脂扩散试验（GID）鉴定的43株血清型菌株中41株与qPCR检测结果相符,2株血清12型菌株被鉴定为血清5型。本试验结果显示,基于Ct值的实时荧光定量检测方法应用于GPS分子血清分型具有简便、快速、准确等显著优点,对临床上GPS流行病学调查、快速诊断和防控具有重要的应用价值。

关键词：副猪嗜血杆菌分子血清分型实时荧光定量方法

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牛支原体免疫学及免疫学诊断研究进展

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中国兽医学报 2019年第9期39卷 1868-1872页

作者：张文劲张文皓唐鑫李雨芮陈曦陈颖钰郭爱珍胡长敏华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

牛支原体是一种能够感染任何年龄牛的致病微生物,导致患牛严重的呼吸系统疾病、生殖系统疾病、角膜炎、乳腺炎及关节炎等。1961年,首次从美国乳腺炎患牛中分离到了牛支原体[1],全球范围内均报道了由牛支原体感染导致奶牛乳房炎所造成的... 详细信息

牛支原体是一种能够感染任何年龄牛的致病微生物,导致患牛严重的呼吸系统疾病、生殖系统疾病、角膜炎、乳腺炎及关节炎等。1961年,首次从美国乳腺炎患牛中分离到了牛支原体[1],全球范围内均报道了由牛支原体感染导致奶牛乳房炎所造成的经济损失案例。在我国,于2008年首次在重症肺炎的患牛中发现了牛支原体[2],并在2011年完成了测序[3],比较基因组学分析表明牛支原体不同分离株之间毒力存在着明显差异[4-7]。

关键词：牛支原体牛支原体病传染病免疫学诊断研究进展

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鸡传染性贫血病毒湖北分离株XH16全基因组序列分析

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中国兽医杂志 2020年第12期56卷 1-4,8,I0001页

作者：靳泽华黄英王泽宇张安定华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 湖北省预防兽医学重点实验室生猪健康养殖协同创新中心湖北武汉430070 农业农村部兽医诊断制剂创制重点实验室湖北武汉430070 科技部动物疫病联合研究中心湖北武汉430070

为了解鸡传染性贫血病毒(CAV)的基因组特征及遗传变异情况,本试验对湖北某家禽养殖场中疑似CAV感染的肉鸡进行剖检,从其肝脏中分离得到1株病毒。通过聚合酶链式反应(PCR)试验验证为CAV,并将其命名为CAV-XH16。克隆该毒株全基因组,测序... 详细信息

为了解鸡传染性贫血病毒(CAV)的基因组特征及遗传变异情况,本试验对湖北某家禽养殖场中疑似CAV感染的肉鸡进行剖检,从其肝脏中分离得到1株病毒。通过聚合酶链式反应(PCR)试验验证为CAV,并将其命名为CAV-XH16。克隆该毒株全基因组,测序拼接得到全基因组序列,并将该毒株与国内外已发表的其他病毒序列进行遗传进化分析。结果显示,该分离株具有高毒力毒株的分子特征,属于亚洲CAV分离株所属的主要亚群A1亚群。与中国分离株JL14023(NCBI登记号KY486145)有99.65%的相似性。本试验为CAV分子流行病学研究和新型疫苗研发提供了参考依据。

关键词：鸡传染性贫血病毒全基因组序列分析

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一例夏南牛大肠杆菌与链球菌混合感染的病例报告

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中国奶牛 2020年第5期 32-34页

作者：刘心彭清洁郭爱珍陈曦陈颖钰华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学农业微生物国家重点实验室武汉430070 湖北省兽医流行病学国际科技合作基地武汉430070

本文就一例夏南公牛混合感染大肠杆菌O158与链球菌导致死亡的病例进行了报告分析,提出了大肠杆菌O158与链球菌混合感染的诊断、治疗方法以及防范措施。为临床大肠杆菌O158与链球菌混合感染的识别及处置提供参考,为该病的防治提供支持。

关键词：牛大肠杆菌O158 链球菌病例报告

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表达H1N1亚型猪流感病毒HA蛋白的重组伪狂犬病病毒rPRV-optiHA的构建及生物学特性

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中国兽医学报 2019年第7期39卷 1303-1309,1335页

作者：范桂芳徐守兴杨斓宋文博华琳吴斌华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 预防兽医学湖北省重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

为研发针对猪流感病毒流行毒株和猪伪狂犬病病毒变异毒株更为有效的基因工程疫苗,本研究以变异伪狂犬病病毒基因缺失毒株(rPRVΔTKΔgI/gE)为载体,采用同源重组的方法,成功构建了表达经密码子优化的H1N1亚型猪流感病毒HA基因的重组病毒r... 详细信息

为研发针对猪流感病毒流行毒株和猪伪狂犬病病毒变异毒株更为有效的基因工程疫苗,本研究以变异伪狂犬病病毒基因缺失毒株(rPRVΔTKΔgI/gE)为载体,采用同源重组的方法,成功构建了表达经密码子优化的H1N1亚型猪流感病毒HA基因的重组病毒rPRVΔTKΔgI/gE-optiHA。对获得的重组病毒在多种细胞上的增殖特性、一步生长曲线、遗传稳定性以及对小鼠的安全性等生物学特性进行了研究。结果表明,构建的rPRVΔTKΔgI/gE-optiHA重组病毒能够稳定表达HA蛋白,并且经过优化后,目的基因的表达量有明显提高。该重组病毒在ST、PK-15、Vero和BHK-21细胞上的增殖滴度均高于10-7.0/0.1mL,对PK-15细胞的敏感性最高。一步生长曲线结果表明,重组病毒的增殖特性未受影响。连续传代20代后,该重组病毒依然具有较好的遗传稳定性,并且对小鼠安全性良好。本研究为重组病毒rPRV-optiHA的进一步研究与应用奠定了基础。

关键词： PRV变异毒株猪流感病毒 HA基因生物学特性

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基于PCV3-Cap蛋白间接ELISA检测方法的建立及临床应用

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畜牧兽医学报 2019年第2期50卷 454-460页

作者：王俊伟陈芳洲库旭钢李畅何启盖华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070 湖北省预防兽医学重点实验室武汉430070 生猪健康养殖协同创新中心武汉430070

为了建立一种敏感和特异的猪圆环病毒3型(PCV3)抗体检测方法,对PCV3-Cap蛋白抗原表位预测发现其抗原表位多聚集在C端(羧基端),而N端前33氨基酸为核定位序列。以截断N端前120个氨基酸后的PCV3ORF2序列为靶基因,设计引物。以PCV3阳性病料... 详细信息

为了建立一种敏感和特异的猪圆环病毒3型(PCV3)抗体检测方法,对PCV3-Cap蛋白抗原表位预测发现其抗原表位多聚集在C端(羧基端),而N端前33氨基酸为核定位序列。以截断N端前120个氨基酸后的PCV3ORF2序列为靶基因,设计引物。以PCV3阳性病料为模板,PCR扩增截短的ORF2基因,并将其克隆至pET-30a载体构建重组质粒,并转染至大肠杆菌*** BL21感受态细胞,获得重组菌后选择最佳诱导表达条件,采用Ni-NTA亲和层析柱纯化表达产物。以纯化后的重组Cap蛋白作为包被抗原,建立PCV3间接ELISA (indirectELISA)诊断方法,并初步用于临床样品检测。结果:从阳性病料中扩增出大小为285bp的PCV3ORF2基因片段,重组质粒经双酶切和测序鉴定构建成功。采用1mmol·L-1 IPTG诱导,在37℃条件下培养6h重组菌,重组蛋白获最佳表达。Western blot结果表明,该重组蛋白与PCV3阳性血清具有较好的反应原性。ELISA的最佳包被抗原质量浓度为1μg·mL-1,待检血清最佳稀释度为1∶20,酶标抗体最佳工作浓度为1∶5 000。阳性判定值为S/P≥0.273。批内和批间系数均小于10%,表明该方法具有较好的重复性。PCV2阳性血清用本方法检测为阴性,表明该方法有较好的特异性。检测采集的439份临床猪血清,PCV3抗体阳性检出率为60.59%(266/439)。结果表明,本研究建立了一种快速、简便、敏感、特异的猪圆环病毒3型(PCV3)抗体检测方法。

关键词：猪圆环病毒3型 ORF2基因 Cap蛋白原核表达 ELISA检测

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