检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧兽医学报 2019年第5期50卷 1064-1072页

作者：彭忠梁婉艾伟诚王斐华琳汤细彪陈焕春吴斌华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室生猪健康养殖协同创新中心武汉430070 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室武汉430070

本研究旨在了解我国猪群中流行的多杀性巴氏杆菌(Pm)的主要基因型。利用荚膜基因分型、脂多糖(LPS)基因分型、多位点序列分型(MLST)对2013年12月—2017年12月4年间来源于我国各地区规模化猪场患有疑似呼吸系统疾病的病死猪肺、鼻拭子、... 详细信息

本研究旨在了解我国猪群中流行的多杀性巴氏杆菌(Pm)的主要基因型。利用荚膜基因分型、脂多糖(LPS)基因分型、多位点序列分型(MLST)对2013年12月—2017年12月4年间来源于我国各地区规模化猪场患有疑似呼吸系统疾病的病死猪肺、鼻拭子、气管、肝等样品中分离鉴定的Pm进行基因型分析,并对23种主要毒力基因进行检测。结果表明,当前在我国猪群中流行的Pm的荚膜基因型为A(48.85%)、D(42.75%)、F(2.67%),优势基因型为A和D;LPS基因型为L3(25.00%)和L6(75.00%)型,优势基因型为L6;MLST基因型为ST3(21.25%)、ST10(27.50%)、ST11(42.50%)、ST12(2.50%)、ST16(2.50%)、ST74(1.25%)及ST75(2.50%),优势基因型为ST3、ST10和ST11。如果将荚膜基因型、LPS基因型和MLST基因型组合起来看,当前在我国猪群中流行的Pm的主要基因型为荚膜:脂多糖:MLST基因型A:L3:ST3(20.00%)、A:L6:ST10(26.25%)及D:L6:ST11(42.50%)。毒力基因检测的结果发现部分毒力基因的分布表现出一定的"基因型偏好性"。结果提示,D:L6:ST11是我国猪群中流行的多杀性巴氏杆菌的主要基因型,可能与我国猪群中由多杀性巴氏杆菌导致的呼吸道疾病密切相关。

关键词：猪多杀性巴氏杆菌荚膜基因型脂多糖基因型 MLST基因型毒力基因

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6-溴-靛玉红-3'-肟抑制脂多糖诱导的小鼠乳腺上皮细胞凋亡

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畜牧兽医学报 2018年第12期49卷 2753-2761页

作者：刘畅唐鑫张文劲赵春阳郭爱珍胡长敏华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

研究6-溴-靛玉红-3'-肟(BIO)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠乳腺上皮细胞(mouse mammary epithelial cell,MMEC)凋亡的作用及机制。收集空白对照组、DMSO组、BIO单独处理组及不同浓度BIO(5、25、50nmol·L^(-1))+LPS共同处理组细胞,分别用流式细胞术检测凋亡率,利用qRT-PCR检测Bak、Bax、Bcl-2、Bcl-xl、Caspase-3和Caspase-8 mRNA的变化,Western blot检测Bcl-2、Caspase-3和Caspase-8蛋白水平的变化。结果显示:BIO能够降低LPS诱导的MMECs的凋亡率,抑制凋亡基因Bak和Bax及凋亡通路蛋白Caspase-3和Caspase-8活性(P <0. 001),促进抑凋亡基因Bcl-2及Bcl-xl的活性。BIO通过调节Bax、Bak、Bcl-2、Bcl-xl、Caspase-3和Caspase-8活性抑制LPS诱导的鼠乳腺上皮细胞凋亡。

关键词： BIO LPS 乳腺炎凋亡凋亡因子

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一例猪巴氏杆菌病的诊断与防控

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养猪 2019年第6期 94-96页

作者：王久红孙琪于学祥张丙周库旭钢范盛先何启盖华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学动物疫病诊断中心检测实验室武汉430070

猪巴氏杆菌病(Swine pasteurellosis)是由多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida, Pm)引起猪的一种散发性、热性传染病,常以败血症和炎性出血过程为主要特征。巴氏杆菌病的暴发和流行给养猪业造成了巨大的经济损失。研究对湖北某黑猪场... 详细信息

猪巴氏杆菌病(Swine pasteurellosis)是由多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida, Pm)引起猪的一种散发性、热性传染病,常以败血症和炎性出血过程为主要特征。巴氏杆菌病的暴发和流行给养猪业造成了巨大的经济损失。研究对湖北某黑猪场一例巴氏杆菌病进行诊断,通过猪场实地调查、临床检查、病理剖检和实验室检测,最终确诊该场为A型多杀性巴氏杆菌感染所致发病。并通过药敏试验,筛选敏感药物,改善猪舍环境等一系列针对性措施,效果显著。该案例可为猪场巴氏杆菌病的诊断和防控提供参考。

关键词：猪巴氏杆菌病诊断防控

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猪圆环病毒3型TaqMan荧光定量PCR方法的建立和初步应用

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畜牧兽医学报 2018年第6期49卷 1320-1326页

作者：李畅库旭钢王俊伟李静朱玲何启盖华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070

为了灵敏而便捷的检测猪圆环病毒3型(PCV3),根据PCV3ORF2基因组保守序列设计合成4对引物,先使用荧光染料(SYBR)定量PCR法验证其能否有效扩增目的片段,并根据结果和引物对所扩增序列的交集进一步设计TaqMan探针,通过优化反应条件和反应... 详细信息

为了灵敏而便捷的检测猪圆环病毒3型(PCV3),根据PCV3ORF2基因组保守序列设计合成4对引物,先使用荧光染料(SYBR)定量PCR法验证其能否有效扩增目的片段,并根据结果和引物对所扩增序列的交集进一步设计TaqMan探针,通过优化反应条件和反应体系建立快速检测PCV3的实时荧光定量PCR检测方法。结果显示,SYBR染料法和TaqMan探针法均能有效地扩增PCV3标准质粒以及其他阳性样品,并且对1.29×10~2~1.29×10~9拷贝·μL^(-1)的PCV3标准质粒(Pmd18-t-Cap)呈现良好的线性关系,该方法的检测灵敏度为1.29×10~2拷贝·μL^(-1),比常规PCR的灵敏度高100倍,该方法与猪圆环病毒2型、猪轮状病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等病毒基因以及猪链球菌、猪肺炎支原体等细菌基因均无交叉反应,具有良好的特异性;批次内重复和批次间重复试验结果显示变异系数(CV)均小于1.5%,呈良好的可重复性。用该方法对2016年至2017年间收集的124份来自湖北省等地的猪病料DNA样品进行检测,结果显示本地区PCV3阳性率为8.06%(10/124),PCV2和PCV3共感染率为8.06%(10/124)。上述结果表明,本研究建立TaqMan荧光定量PCR能够灵敏特异的检测圆环病毒3型,为圆环病毒3型的临床检测提供有效手段。

关键词：圆环病毒3型 SYBR荧光定量PCR TaqMan荧光定量PCR 检测

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藤黄酸的药理作用机理研究

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中兽医医药杂志 2019年第5期38卷 33-36页

作者：唐鑫彭永崇张文皓张文劲刘畅郭爱珍胡长敏华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

本文就近年来藤黄酸及其主要衍生物的抗肿瘤、抑炎症、抗细菌、抗病毒及神经保护作用机制和临床应用研究进行综述,为深入研究藤黄酸及其衍生物的功能提供依据,也为其更广泛的临床应用提供相关理论支撑。

关键词：藤黄酸机理抗肿瘤抑炎研究进展

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牛传染性鼻气管炎基因工程疫苗研究进展

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中国预防兽医学报 2019年第4期41卷 426-431页

作者：杨姣陈曦陈颖钰郭爱珍华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 湖北省兽医流行病学国际科技合作基地湖北武汉430070

牛传染性鼻气管炎(Infectious bovine rhinotracheitis,IBR)是由IBR病毒(IBRV)又称牛疱疹病毒Ⅰ型(Bovine herpesvirus type 1,BoHV-1)引起的一种急性、热性、接触性传染病,又称“红鼻病”或“坏死性鼻炎”,是牛呼吸道疾病综合征(Bovine... 详细信息

牛传染性鼻气管炎(Infectious bovine rhinotracheitis,IBR)是由IBR病毒(IBRV)又称牛疱疹病毒Ⅰ型(Bovine herpesvirus type 1,BoHV-1)引起的一种急性、热性、接触性传染病,又称“红鼻病”或“坏死性鼻炎”,是牛呼吸道疾病综合征(Bovine respiratory disease complex,BRDC)和“运输热”(Shipping fever)的重要病原之一。IBR最早见于上世纪50年代美国科罗拉多州,由Madin等人从患病牛中分离得到[1]。我国最早于1980年从新西兰进口的一批牛中分离到该病毒[2],随后发现此病的流行呈上升趋势,不同品种的牛均有感染,血清阳性率可高达70%以上[3]。

关键词：牛传染性鼻气管炎基因工程疫苗牛疱疹病毒Ⅰ型呼吸道疾病综合征 complex 接触性传染病科罗拉多州 IBR

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猪Beclin1基因调控伪狂犬病病毒诱导细胞自噬和凋亡的机制分析

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畜牧兽医学报 2018年第6期49卷 1274-1281页

作者：胡林南良康张敏许苏童杨了寒李帅峰王凯刘正飞张淑君华中农业大学动物科学技术学院农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室武汉430070 华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070

旨在研究伪狂犬病病毒(PRV)感染后细胞自噬和凋亡情况,进一步分析鉴定PRV感染条件下与Beclin1互作的猪宿主凋亡家族蛋白。利用免疫印迹(WB)方法检测PRV感染细胞的自噬水平;利用流式细胞术探讨凋亡水平;最后利用免疫共沉淀试验分析PRV感... 详细信息

旨在研究伪狂犬病病毒(PRV)感染后细胞自噬和凋亡情况,进一步分析鉴定PRV感染条件下与Beclin1互作的猪宿主凋亡家族蛋白。利用免疫印迹(WB)方法检测PRV感染细胞的自噬水平;利用流式细胞术探讨凋亡水平;最后利用免疫共沉淀试验分析PRV感染PK-15细胞中Beclin1与Bcl-2和Bcl-xL的结合水平。结果显示,PRV感染导致LC3-Ⅱ的表达明显增多,而P62显著下降,且AKT(S473)磷酸化水平显著减少;其次,PRV感染诱导细胞凋亡且显著上调剪切型Caspase-9/8的表达水平;最后,免疫共沉淀结果显示PRV感染条件下Beclin1能与Bcl-2和Bcl-xL结合,但结合的水平明显降低。PRV感染诱导的细胞自噬可能依赖于PI3K-Ⅰ/AKT信号通路,PRV感染可能同时激活了线粒体凋亡途经和死亡受体途经从而诱导细胞凋亡,而PRV感染诱导的细胞自噬和细胞凋亡可能通过抑制Beclin1和Bcl-2、Bcl-xL结合而相互关联。

关键词： PRV 细胞自噬细胞凋亡 Beclin1

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牛结核γ-干扰素检测法和比较皮内变态反应在牛临床检测中应用

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中国奶牛 2019年第5期 33-36页

作者：杨莉刘心彭清洁李庆妮陈颖钰胡长敏陈曦李翔郭爱珍华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 武汉科前生物股份有限公司武汉430070 国家动物结核病专业实验室(武汉) 武汉430070 湖北省动物流行病学国际科技合作基地武汉430070 华中农业大学动物科技学院武汉430070

我国已启动牛结核病净化计划和评估论证工作。有效诊断是有效实施牛结核病"检疫-扑杀"控制策略的前提。牛结核γ-干扰素检测法是国际公认的确诊方法。本研究进行不同方法的临床比对试验,旨在指导临床有效选择和应用牛结核检... 详细信息

我国已启动牛结核病净化计划和评估论证工作。有效诊断是有效实施牛结核病"检疫-扑杀"控制策略的前提。牛结核γ-干扰素检测法是国际公认的确诊方法。本研究进行不同方法的临床比对试验,旨在指导临床有效选择和应用牛结核检测的不同方法。使用牛结核菌素比较皮内变态反应(CCT)与牛结核γ-干扰素检测法对某奶牛场200头奶牛实施平行检测,γ-干扰素检测法同时采用了国产试剂盒(KIT1)与进口试剂盒(KIT2)。结果显示:CCT与KIT2具有中等一致性(Kappa值为0.5),但特异性较差(66.4%),阳性预测值低(54.0%),易出现假阳性结果导致大量的错杀。γ-干扰素检测试剂盒KIT1与KIT2具有较好的一致性(Kappa值为0.9),总符合率95.0%,表明二者均能有效检测牛结核,且国产试剂盒能显著降低检测成本。在控制成本的前提下,建议用皮试先初筛,γ-干扰素检测法确诊阳性牛。

关键词：牛结核病 γ-干扰素皮内变态反应检测净化

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多杀性巴氏杆菌转铁结合蛋白TbpA的原核表达及免疫原性

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中国兽医学报 2019年第6期39卷 1151-1156页

作者：王斐张洪峰梁婉彭忠陈焕春吴斌华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室/生猪健康养殖协同创新中心湖北武汉430070 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室湖北武汉430070

为研究多杀性巴氏杆菌转铁结合蛋白TbpA的免疫原性,本试验利用PCR从牛源A型多杀性巴氏杆菌HB01基因组中扩增了TbpA的编码基因tbpA,并将其克隆至原核表达载体pET-30α(+)上,转化至大肠杆菌BL21中进行诱导表达。SDS-PAGE检测结果显示,rTbp... 详细信息

为研究多杀性巴氏杆菌转铁结合蛋白TbpA的免疫原性,本试验利用PCR从牛源A型多杀性巴氏杆菌HB01基因组中扩增了TbpA的编码基因tbpA,并将其克隆至原核表达载体pET-30α(+)上,转化至大肠杆菌BL21中进行诱导表达。SDS-PAGE检测结果显示,rTbpA蛋白成功表达。Western blot证实该蛋白能够与抗多杀性巴氏杆菌HB01血清发生阳性反应。将rTbpA免疫小鼠后,分别于免疫后14,28 d采血,利用ELISA试验检测血清中的抗体滴度,结果显示血清中的抗rTbpA蛋白的IgG抗体显著升高(P<0.05)。感染试验结果显示,免疫rTbpA蛋白能够保护70%的小鼠抵抗多杀性巴氏杆菌的致死性攻击,并且病理切片结果表明,免疫小鼠的肺部损伤相对于对照组小鼠显著降低。本试验为筛选新型的多杀性巴氏杆菌免疫原性蛋白提供依据。

关键词：牛源A型多杀性巴氏杆菌转铁结合蛋白克隆表达小鼠

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猪流行性腹泻防控技术进展

猪流行性腹泻防控技术进展

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中国兽医协会第八届兽医大会

作者：曾威江昌盛李中华李婉何启盖华中农业大学动物医学院华中农业大学动物医学院省部共建生猪健康养殖协同创新中心农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

猪流行性腹泻(Porcine Epidemic Diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(Porcine Epidemic Diarrhea virus,PEDV)引起的一种急性、高度接触性肠道传染病.各年龄阶段猪只均可感染PEDV,新生仔猪感染后的发病率和死亡率接近100％.PED在全球的... 详细信息

猪流行性腹泻(Porcine Epidemic Diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(Porcine Epidemic Diarrhea virus,PEDV)引起的一种急性、高度接触性肠道传染病.各年龄阶段猪只均可感染PEDV,新生仔猪感染后的发病率和死亡率接近100％.PED在全球的广泛流行给世界养猪业造成了巨大的经济损失.PED临床上以水样腹泻、呕吐和脱水为主要特征,是寒冷季节传统的病毒性腹泻疾病.本文以本实验室研究成果为基础,综述了PEDV的病原特性、流行和传播的特点、致病机制以及PED防制方面的实用技术和新进展.

关键词：猪流行性腹泻病原学流行病学临床症状病理变化致病机制诊断防控

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