检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医学报 2018年第2期38卷 428-432页

作者：葛盼王洁茹王杰赖金伦陈颖钰郭爱珍华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物科技学院湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉480070 湖北省兽医流行病学国际科技合作基地湖北武汉430070

鹿结核病是由牛分枝杆菌引起的鹿的慢性、消耗性传染病，广泛流行于世界各地，严重危害着养鹿业的发展，同时也威胁着人类健康和其他动物的安全。为保证养鹿业的发展和人类的健康，对该病进行有效防控显得十分重要。美国、新西兰等国家... 详细信息

鹿结核病是由牛分枝杆菌引起的鹿的慢性、消耗性传染病，广泛流行于世界各地，严重危害着养鹿业的发展，同时也威胁着人类健康和其他动物的安全。为保证养鹿业的发展和人类的健康，对该病进行有效防控显得十分重要。美国、新西兰等国家通过对可疑感染的鹿群进行持续性监测和利用捕猎季节减少感染鹿群的数量等策略，成功实现了对鹿结核的控制。现对国内外鹿结核病的流行现状、诊断技术及疫苗研究进行综述，以期为鹿结核病的防控提供借鉴。

关键词：鹿结核病牛分枝杆菌防控

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猪伪狂犬病病毒流行株遗传进化及序列比对分析

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中国兽医学报 2018年第1期38卷 1-10页

作者：高泽文范桂芳赵婷婷徐守兴吴斌华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北省生猪健康养殖协同创新中心

为了了解我国不同地区规模化猪场2014年以来猪伪狂犬病病毒（PRV）流行株的现状、分子生物学特点和遗传演化规律，本试验从我国15个省份不同地区分离得到29株PRV，并对其gB，gC和gE基因进行遗传变异分析。结果显示，这29株PRV分离株主要... 详细信息

为了了解我国不同地区规模化猪场2014年以来猪伪狂犬病病毒（PRV）流行株的现状、分子生物学特点和遗传演化规律，本试验从我国15个省份不同地区分离得到29株PRV，并对其gB，gC和gE基因进行遗传变异分析。结果显示，这29株PRV分离株主要为PRV变异毒株，与Bartha株等国外经典毒株亲缘关系较远，与Ea株等国内经典毒株亲缘关系较近。氨基酸序列比对发现，29株PRV变异毒株在gB，gC及gE基因上均发生了多个位点的突变：gB氨基酸序列均存在75S、76P和77G的连续缺失，94位点均存在甘氨酸（G）的插入；gC氨基酸序列存在多处改变，其中P87Q和Y142C使gc糖蛋白与宿主细胞表面的硫酸乙酰肝素受体结合功能域发生改变；gE氨基酸序列第48位点均存在天冬氨酸（D）的插入。这些特征性变异位点可作为分子诊断依据，并且从分子水平揭示了临床Bar—tha—K61株等经典毒株疫苗免疫效果下降的可能原因。

关键词：伪狂犬病病毒序列分析分子特征变异毒株

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基于NGS技术的仔猪腹泻病毒检测

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西南林业大学学报（自然科学） 2018年第4期38卷 112-118页

作者：罗文涛何启盖陈芳洲李静周杰珑西南林业大学生命科学学院云南昆明650224 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

为探究四川某猪场反复暴发仔猪腹泻的原因,利用下一代测序技术(NGS)对该猪场的仔猪肠道样品进行检测,结合常规PCR、测序方法进行验证分析。结果表明:该猪场存在猪流行性腹泻病毒PEDV,通过对该场PEDV S1基因的进化树分析,发现该PEDV毒株... 详细信息

为探究四川某猪场反复暴发仔猪腹泻的原因,利用下一代测序技术(NGS)对该猪场的仔猪肠道样品进行检测,结合常规PCR、测序方法进行验证分析。结果表明:该猪场存在猪流行性腹泻病毒PEDV,通过对该场PEDV S1基因的进化树分析,发现该PEDV毒株属于独立的一个分支;同时还在该场病料中检测到猪圆环病毒3型(PCV3),该猪场腹泻问题可能是由于新型PEDV毒株和PCV3毒株混合感染导致。

关键词： NGS 猪腹泻病毒 PEDV PCV3

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牛传染性鼻气管炎病毒gG iELISA抗体检测方法的建立

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中国兽医学报 2018年第8期38卷 1504-1512页

作者：张芳陈颖钰郭爱珍华中农业大学农业微生物国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 农业部兽用诊断制剂创制重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学湖北省兽医流行病学国际科技合作基地湖北武汉430070

为了建立有效鉴别牛传染性鼻气管炎病毒（BoHV-1）gg-／tk-基因缺失疫苗人工免疫和BoHV-1野毒株自然感染的鉴别诊断方法，以BoHV-1gG蛋白为抗原建立了间接ELISA（iELISA）抗体检测方法。根据编码BoHV1gG蛋白的基因序列设计特异性扩增引... 详细信息

为了建立有效鉴别牛传染性鼻气管炎病毒（BoHV-1）gg-／tk-基因缺失疫苗人工免疫和BoHV-1野毒株自然感染的鉴别诊断方法，以BoHV-1gG蛋白为抗原建立了间接ELISA（iELISA）抗体检测方法。根据编码BoHV1gG蛋白的基因序列设计特异性扩增引物，以BoHV1基因组DNA为模板扩增gg基因截短片段，克隆至原核表达载体pGEX-6p-1并进行IPTG诱导表达。SDS-PAGE和Westernblot分析表明，gg基因在大肠杆菌BL21（DE3）中呈可溶性及包涵体2种形式表达，纯化的gG蛋白具有良好的反应原性。将可溶性gG蛋白纯化后作为包被抗原，建立了BoHV-1gGiELISA抗体检测方法，并优化了各反应条件。使用该方法与商业化试剂盒BoHV-1gE和gB阻断ELIsA进行比较检测，并与其他5种牛常见病原体的阳性血清进行交叉反应检测，同时进行了该方法的重复性试验、保存期试验及消长规律试验；最后使用该方法对临床1031份牛血清进行了检测，血清流行率为83．71%,4（95%CI：81．30％～85．90％）。结果显示，该方法的阴、阳性血清检测的临界值（S／P值）为0．398，与进口试剂盒比较显示该方法具有良好的诊断敏感性和特异性，且本试剂盒可在1：50倍样本稀释下进行检测，而商业化试剂盒是1：1倍样本稀释检测。此外，该方法分析特异性良好，与其他非相关病原体的阳性血清无交叉反应；检测重复性良好；在4℃条件下可保存6个月。该方法在人工感染BoHV～1野毒株和人工免疫BoHv-1gg-／tk-疫苗株20d后可以明显区分疫苗株免疫和野毒株感染。综上所述，本研究成功建立了BoHV-1 gG iELISA抗体检测方法，敏感性和特异性良好，既可以用于有效鉴别疫苗免疫和自然感染，也可作为BoHV-1的血清学诊断方法。

关键词：牛传染性鼻气管炎牛疱疹病毒1型 gG蛋白 iELISA 鉴别诊断

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信鸽新城疫病毒的分离、鉴定及F基因的进化分析

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中国家禽 2018年第8期40卷 56-59页

作者：李治范俊清李冉任海洋万颖易辰阳王泽宇付磊张安定华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 武汉科前生物制品有限公司湖北武汉430070 农业部兽用诊断制剂创制重点实验室湖北武汉430070

2014~2016年,湖北、安徽、山东、河北、四川、陕西、天津等地的数家信鸽公棚疑似暴发鸽新城疫,导致大部分信鸽死亡或运动功能障碍,经济损失巨大。通过对病料利用鸡胚病毒分离法进行病毒分离,并结合血凝试验和血凝抑制试验,初步确定病料... 详细信息

2014~2016年,湖北、安徽、山东、河北、四川、陕西、天津等地的数家信鸽公棚疑似暴发鸽新城疫,导致大部分信鸽死亡或运动功能障碍,经济损失巨大。通过对病料利用鸡胚病毒分离法进行病毒分离,并结合血凝试验和血凝抑制试验,初步确定病料中均含有新城疫病毒。进一步通过RT-PCR方法对病毒的F基因进行扩增并测序和序列分析,发现分离毒株裂解位点均具有强毒的序列特点。F基因遗传进化分析显示,分离株基因型均为VIb型。研究结果与目前报道的导致信鸽新城疫的病原主要为VIb型一致。本研究将信鸽新城疫的有效防控提供了参考。

关键词：鸽新城疫病毒 F基因 VIb型分离鉴定

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产志贺毒素大肠杆菌噬菌体vB_EcoM_PHB05的生物学特性及全基因组分析

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中国兽医科学 2018年第4期48卷 428-437页

作者：陈义宝孙二超杨斓童贻刚宋娇阳吴斌农业微生物学国家重点实验室华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071

产志贺毒素大肠杆菌又称产Vero细胞毒素大肠杆菌，是一种可引起水样腹泻、溶血性尿毒综合征、出血性结肠炎等的人兽共患肠道致病菌。以一株产志贺毒素大肠杆菌为宿主菌，从湖北桌规模化养猪场的污水中分离得到一株烈性产志贺毒素大肠杆... 详细信息

产志贺毒素大肠杆菌又称产Vero细胞毒素大肠杆菌，是一种可引起水样腹泻、溶血性尿毒综合征、出血性结肠炎等的人兽共患肠道致病菌。以一株产志贺毒素大肠杆菌为宿主菌，从湖北桌规模化养猪场的污水中分离得到一株烈性产志贺毒素大肠杆茵噬茵体，命名为vB_EcoM_PHB05。采用双层平板法筛选并纯化得到一株噬菌体．采用透射电镜观察噬菌体颗粒：使用Ion Torrent测序平台进行噬菌体全基因组测序，同时对噬菌体最佳感染复数（MOI）、一步生长曲线、裂解谱等生物学特性进行研究。结果表明，噬茵体vB_EcoM_PHB05在电镜下可见有一正多面体立体对称头部（直径约72nm），含收缩性尾部（尾长约45nm，尾宽20nm）．为肌尾科噬菌体；提取基因组，酶切鉴定该噬菌体核酸类型为双链DNA；其最佳感染复数为0．1；一步生长曲线试验结果显示，噬菌体vB_EcoM_PHB05潜伏期约为20min，平均裂解量约58PFU／cell；基因测序结果表明．该噬菌体全基因组全长147659bp，G＋C含量37．5％。噬菌体vB_EcoM_PHB05除对本身宿主茵产志贺毒素大肠杆菌（Escherichia coli034）产生裂解外，还裂解其它产志贺毒素大肠杆菌和沙门茵。噬菌体vB_EcoM_PHB05为一株广谱烈性噬菌体，其基因组中不合耐药基因及毒力基因，具有开发为抗产志贺毒素大肠杆菌制剂的潜力。

关键词：产志贺毒素大肠杆菌噬菌体分离鉴定生物学特征全基因组测序基因组分析

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牛支原体PepO原核表达及功能验证

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中国奶牛 2018年第8期 1-6页

作者：董亚旗朱习芳陈颖钰索朗斯珠郭爱珍西藏农牧学院动物科学学院林芝860000 华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070

牛支原体是严重危害养牛业的重要病原体,阐明其毒力因子和致病机制有助于防控技术的研发。内肽酶O(PepO)参与肺炎链球菌在猪体的致病过程,本研究旨在探讨PepO在牛支原体中是否具有毒力相关功能。利用巢式PCR将牛支原体PepO中的色氨酸密... 详细信息

牛支原体是严重危害养牛业的重要病原体,阐明其毒力因子和致病机制有助于防控技术的研发。内肽酶O(PepO)参与肺炎链球菌在猪体的致病过程,本研究旨在探讨PepO在牛支原体中是否具有毒力相关功能。利用巢式PCR将牛支原体PepO中的色氨酸密码子TGA突变为大肠杆菌的色氨酸密码子TGG,进一步克隆至大肠杆菌原核表达载体,成功表达重组蛋白PepO。利用重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备针对PepO的高免血清,经Western-blot分析显示出多抗血清结合,可激活PLG的结构域,从而发挥降解特异性底物S-2251的纤溶酶功能。比较分析牛支原体PepO突变菌株T5.37与野毒株HB0801的生长及对牛肺上皮细胞EBL的黏附特性,其结果显示PepO缺失显著降低牛支原体对EBL的黏附。本研究证实了牛支原体PepO具有活性,参与宿主细胞黏附过程,是一个潜在的毒力相关因子,为进一步研究阐明牛支原体致病机制奠定了基础。

关键词：牛支原体 PepO 纤溶酶原黏附

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单增李斯特菌食品分离株LM201的双组分信号转导系统的生物信息学分析

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微生物学杂志 2018年第1期38卷 96-104页

作者：张娜欧娅郑金水刘梅华中农业大学动物医学院兽医微生物学与免疫学实验室湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学预防兽医学湖北省重点实验室湖北武汉430070

用生物信息学方法对已完成基因组测序的单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)食品分离株LM201的双组分信号转导系统(Two-component signal transduction systems,TCSs)进行了数量统计、结构分析和功能预测。结果发现:LM201有14对TCSs和2个孤儿应答调控子(Response regulator,RR);其组氨酸激酶(Histidine kinase,HK)具有11种组成结构;其RRs分属于7个亚家族;有3对TCSs和1个孤儿RR的预测功能在Lm中未见报道,有1对TCS功能预测为未知。该研究结果能为构建Lm的TCSs交叉调控网络提供参考,以明确TCSs在Lm毒力调控方面的机制。

关键词：单增李斯特菌双组分信号转导系统生物信息学分析

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丁酸梭菌CB1对肉鸡免疫器官指数、黏膜SIgA抗体和血清生化指标的影响

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中国兽医学报 2018年第5期38卷 998-1002,1007页

作者：何菊胡迪郭云清李筱雯肖运才王喜亮石德时李自力毕丁仁周祖涛华中农业大学动物医学院、湖北省预防兽医学重点实验室湖北武汉430070 湖北省校企共建微生态制剂研发中心湖北武汉430070 农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

试验选取1日龄Cobb500肉鸡15000只，随机分为5组，每组3000只，每组3个重复，试验周期为42d，前期1～21d和后期22～42d。试验分组为基础日粮（A组）、基础日粮＋50g／t金霉素（B组）、基础日粮＋100g／t丁酸梭菌CBl制剂（C1组）、基础... 详细信息

试验选取1日龄Cobb500肉鸡15000只，随机分为5组，每组3000只，每组3个重复，试验周期为42d，前期1～21d和后期22～42d。试验分组为基础日粮（A组）、基础日粮＋50g／t金霉素（B组）、基础日粮＋100g／t丁酸梭菌CBl制剂（C1组）、基础日粮＋200g／t丁酸梭菌CB1制剂（C2组）、基础日粮＋200g／t丁酸梭菌CB1复合菌制剂（D组），分别在21d和42d时每个重复随机抽取10只鸡进行屠宰取样，测定相关指标。结果显示：丁酸梭菌CB1制剂添加组C1、C2和D组42d法氏囊指数比A组、B组分别提高了347．37％，520％和400％（P〈0．01），脾脏指数比B组显著提高了61．11％，46．67％和31．1l％。c1、c2、D组气管黏膜SIgA水平显著高于A组和B组，c2组、D组肠道黏膜SIgA水平显著高于A组和B组。21d和42d，血糖含量c1、C2、D组与A、B组相比均有所提高，D组显著高于A和B组（P〈0．05）；尿素氮含量C1、C2、D组均低于A组和B组，D组显著低于A和B组（P〈0．05）。21d，D组总胆固醇、肌酐也显著低于A和B组（P〈O．05），但42d差异不显著。结果表明：丁酸梭菌CB1及其复合菌制剂能有效促进法氏囊和脾脏的生长发育，对于后期法氏囊的生长维持作用优于抗生素和基础日粮组；能有效刺激肉鸡气管和肠道体黏膜SIgA的分泌；在一定程度上改善了肉鸡血液生化指标，复合菌制剂组在血糖含量、尿素氮指标显著优于抗生素组。

关键词：丁酸梭菌CB1 肉鸡免疫器官指数黏膜SIgA抗体血清生化指标

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支原体分泌蛋白研究进展

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畜牧兽医学报 2017年第9期48卷 1572-1578页

作者：胡古月赵刚陈颖钰郭爱珍华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070

支原体是人和动物的重要病原体,因缺乏特效药物和疫苗用于治疗和预防,常造成很大损失。支原体致病与免疫机制不清是阻碍防治手段研发的重要原因。分泌蛋白直接参与病原体与宿主的交流,是病原体发挥致病和免疫作用的重要组分,可望作为药... 详细信息

支原体是人和动物的重要病原体,因缺乏特效药物和疫苗用于治疗和预防,常造成很大损失。支原体致病与免疫机制不清是阻碍防治手段研发的重要原因。分泌蛋白直接参与病原体与宿主的交流,是病原体发挥致病和免疫作用的重要组分,可望作为药物和疫苗的潜在靶标。然而支原体分泌蛋白研究尚处于初级阶段,已鉴定的支原体分泌蛋白很少,其在致病与免疫中的作用有待研究。笔者介绍了已发现的支原体分泌蛋白、分泌方式以及其研究方法,以期为支原体分泌蛋白相关研究提供参考。

关键词：支原体分泌蛋白靶标疫苗致病性免疫

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