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中国兽药杂志 2016年第5期50卷 65-69页

作者：郭璞刘相莲白毅洁王旭刘振利袁宗辉国家兽药残留基准实验室(华中农业大学) 农业部兽药残留检测重点实验室武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070 农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室(武汉) 武汉430070

喹噁啉类药物的肾上腺毒性作用主要表现为对醛固酮合成和分泌的影响。随着喹噁啉类药物作为抗菌促生长剂在畜牧业中的广泛应用,其肾上腺毒性逐渐受到关注。本文从醛固酮合成过程和肾素-血管紧张素-醛固酮系统这两方面,综述了近年来该类... 详细信息

喹噁啉类药物的肾上腺毒性作用主要表现为对醛固酮合成和分泌的影响。随着喹噁啉类药物作为抗菌促生长剂在畜牧业中的广泛应用,其肾上腺毒性逐渐受到关注。本文从醛固酮合成过程和肾素-血管紧张素-醛固酮系统这两方面,综述了近年来该类药物对醛固酮影响的研究进展,旨在为后期进一步揭示喹噁啉类药物的肾上腺毒性做出贡献。

关键词：喹噁啉醛固酮毒性肾上腺喹烯酮乙酰甲喹

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单端孢霉烯族毒素抑制动物生长作用的研究进展

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动物医学进展 2016年第10期37卷 94-97页

作者：郭璞黄德玉刘相莲程古月戴梦红袁宗辉王旭国家兽药残留基准实验室(华中农业大学)/农业部兽药残留检测重点实验室/农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室/华中农业大学动物医学院湖北武汉430070

单端孢霉烯族毒素是主要的饲料污染物,包括T-2毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)等,具有较强的毒性作用,能引起动物体多种病理变化。其毒性作用能改变真核翻译起始因子2α(EIF2α)、丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)、热休克蛋白90(Hsp90)、胰... 详细信息

单端孢霉烯族毒素是主要的饲料污染物,包括T-2毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)等,具有较强的毒性作用,能引起动物体多种病理变化。其毒性作用能改变真核翻译起始因子2α(EIF2α)、丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)、热休克蛋白90(Hsp90)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)等细胞因子的活性,调节多种胺酰tRNA合成酶的活性,进而抑制蛋白质合成,阻滞动物生长。论文从单端孢霉烯族毒素对生长激素影响的角度,综述了该类毒素对动物生长的抑制作用,以期为阐明单端孢霉烯族毒素抑制动物生长的毒性作用机制奠定基础。

关键词： T-2毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇生长激素毒理机制生长阻滞

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全氟和多氟烷基物质在动物中的代谢研究进展

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环境化学 2016年第10期35卷 1994-2007页

作者：崔永荟高金芳陶燕飞王玉莲彭大鹏袁宗辉陈冬梅国家兽药残留基准实验室(HZAU)农业部兽药残留检测重点实验室武汉430070 农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070

本文综述了目前动物模型中全氟羧酸类和全氟磺酸类前体物质的生物转化研究.绝大多数的代谢研究以大鼠和小鼠为对象,而以鱼为对象进行的研究相对较少.氟调聚丙烯酸酯类(8∶2 FTAc)和多氟烷基磷酸酯类(PAPs)均可先代谢为氟调聚醇类(FTOHs)... 详细信息

本文综述了目前动物模型中全氟羧酸类和全氟磺酸类前体物质的生物转化研究.绝大多数的代谢研究以大鼠和小鼠为对象,而以鱼为对象进行的研究相对较少.氟调聚丙烯酸酯类(8∶2 FTAc)和多氟烷基磷酸酯类(PAPs)均可先代谢为氟调聚醇类(FTOHs),最终代谢为全氟羧酸类(PFCAs).全氟磺酰胺类可最终代谢为全氟磺酸类(PFSAs).目前,以8∶2氟调聚醇(8∶2 FTOH)和N-乙酰全氟辛烷磺酰氨乙醇(N-Et FOSE)为主要研究物质,且工业中使用的全氟和多氟烷基物质碳链长度逐渐变短,所以有关短链物质的代谢研究也越来越多.

关键词：全氟和多氟烷基物质代谢途径代谢机制动物

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畜禽长链非编码RNA的功能及其研究方法

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中国畜牧兽医 2016年第9期43卷 2425-2434页

作者：陆启荣刘孟轲李丽程古月郝海红王旭戴梦红袁宗辉华中农业大学动物医学院国家兽药残留基准实验室(HZAU)农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室(武汉)农业部兽药残留检测重点开放实验室武汉430070

长链非编码RNA(long noncoding RNA,LncRNA)是一类转录本长度超过200nt的RNA分子,不具有编码蛋白质的能力,主要参与脂肪代谢、肌肉发育、胚胎发育、性别决定与分化等多种生物过程和疾病的调控。在LncRNA研究中,研究方法的建立和应用起... 详细信息

长链非编码RNA(long noncoding RNA,LncRNA)是一类转录本长度超过200nt的RNA分子,不具有编码蛋白质的能力,主要参与脂肪代谢、肌肉发育、胚胎发育、性别决定与分化等多种生物过程和疾病的调控。在LncRNA研究中,研究方法的建立和应用起着至关重要的作用。作者简述了LncRNA的生物学特性和生物学功能,重点介绍了LncRNA的主要研究方法:基因芯片、RNA-seq、Northern blotting、荧光原位杂交(FISH)、实时荧光定量PCR、RNA结构平行分析(PARS)、快速预测RNA和蛋白质相互作用(CatRAPID)等,同时介绍了LncRNA与DNA、RNA及蛋白质的相互作用的方法:RNA-pulldown、RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)、光活性增强的核糖核苷交联和免疫共沉淀(PAR-CLIP)、RNA反义纯化(RAP)、RNA纯化的染色质分离(CHIRP)及RNA靶标的捕获杂交分析(CHART)、交联,连接以及混合测序(CLASH),为畜禽动物中LncRNA的研究提供借鉴。

关键词：长链非编码RNA 畜禽生物学功能研究方法

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放射性同位素标记药物在药物代谢与处置研究中的应用

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中国新药杂志 2016年第13期25卷 1475-1484页

作者：斯琴朝克图黄玲利袁宗辉国家兽药残留基准实验室(HZAU)/农业部食品安全评价重点开放实验室国家兽药安全评价实验室华中农业大学动物医学院湖北工程学院生命科学技术学院特色果蔬质量安全控制湖北省重点实验室

放射性标记药物是广泛应用于新药研究和药物残留分析等领域,用来阐明药物代谢和处置过程的完美工具。常用标记核素有;H,;C,;F,;I等。在新药研究和药物残留分析研究中药物的吸收、分布、生物转化、排泄途径、残留时间及物料平衡等都需要... 详细信息

放射性标记药物是广泛应用于新药研究和药物残留分析等领域,用来阐明药物代谢和处置过程的完美工具。常用标记核素有;H,;C,;F,;I等。在新药研究和药物残留分析研究中药物的吸收、分布、生物转化、排泄途径、残留时间及物料平衡等都需要利用标记在药物的代谢稳定部位上的放射性标记化合物完成。本文阐述放射性同位素示踪技术在药物代谢及处置研究中的应用,并举例说明了相关研究中的检测方法和手段,介绍了放射性标记药物的检测方法及相关仪器设备的发展、种类,未来发展的可能方向。

关键词：放射性标记药物代谢处置研究残留

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转录因子AKNA功能调控的研究进展

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现代生物医学进展 2016年第15期16卷 2980-2982,2961页

作者：刘相莲黄德玉王旭刘振利袁宗辉华中农业大学国家兽药残留基准实验室(HZAU)农业部食品兽药残留检测重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室湖北武汉430070

转录因子AKNA是具有AT-hook模体的核内蛋白质,与富含AT碱基的DNA区域相结合调控靶基因的转录。AKNA主要在B淋巴细胞、T淋巴细胞、自然杀伤性细胞和干细胞上表达,介导免疫反应的发生。转录因子AKNA的单核苷酸多态性(SNP)可增加宫颈癌的风... 详细信息

转录因子AKNA是具有AT-hook模体的核内蛋白质,与富含AT碱基的DNA区域相结合调控靶基因的转录。AKNA主要在B淋巴细胞、T淋巴细胞、自然杀伤性细胞和干细胞上表达,介导免疫反应的发生。转录因子AKNA的单核苷酸多态性(SNP)可增加宫颈癌的风险,AKNA功能的丧失导致子宫颈肿瘤性病变。敲除AKNA基因可导致炎性因子、蛋白酶和趋化因子的富集,诱发中性粒细胞介导的炎性反应。本文从转录因子AKNA的结构特征、生物学功能和功能调控三方面进行综述,旨在为后续关于AKNA转录调控网络和信号通路的研究提供依据。

关键词：转录因子 AKNA 功能调控

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生物可降解纳米靶向细胞内传递抗菌药物的研究进展

生物可降解纳米靶向细胞内传递抗菌药物的研究进展

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：谢书宇潘源虎程冬梅陶燕飞刘振利袁宗辉华中农业大学动物科学技术动物医学院国家兽药残留基准实验室

胞内感染性疾病是危害动物和人类健康与生命的全球性顽疾之一,例如布氏杆菌病、结核病、李斯特杆菌病等。胞内菌可通过多种巧妙机制逃避宿主的杀灭作用,在不损伤宿主细胞的前提下持续繁殖和不断传播,从而导致持续、严重和潜在的感染。... 详细信息

胞内感染性疾病是危害动物和人类健康与生命的全球性顽疾之一,例如布氏杆菌病、结核病、李斯特杆菌病等。胞内菌可通过多种巧妙机制逃避宿主的杀灭作用,在不损伤宿主细胞的前提下持续繁殖和不断传播,从而导致持续、严重和潜在的感染。高效治疗胞内感染的前提是敏感抗菌药物在细菌寄居的细胞和部位具有足够的浓度和抗菌活性,但大多数抗菌药物不易穿透细胞膜且在细胞内极易被排除或失活。如恩诺沙星等氟喹诺酮类等抗菌药物虽然能有效进入细胞内但易被吞噬细胞膜表面的有机阴离子载体迅速外排导致细胞内浓度随着细胞外液浓度的下降迅速减少。研究报道蓄积在肺巨噬细胞和多型核白细胞中80%和90%的恩诺沙星在10min内就被排除到细胞培养基中,在外周血白细胞内也随着血浆药物浓度的下降快速消除。又如氨基糖苷类和β-内酰胺类极性太强、不易进入细胞,在溶酶体极易失活。大环内脂类在溶酶体和相关囊泡失活,外排速度快、滞留能力弱、药效持续时间短。另外抗菌药物常规制剂进入机体后呈自由的分布,半衰期短、消除快,在感染细胞内不能维持有效的治疗浓度,需长时间大量用药才能消除沙门氏菌的携带状态。长时间高剂量用药会增加药物的毒副作用、动物应激、养殖成本、药物残留和环境污染。因此,胞内感染疾病的临床治疗面临诸多瓶颈,亟需开发新的治疗策略。生物可降解纳米因其表面效应、量子尺寸效应、小尺寸效应等独特的优点已经成为靶向细胞内传递抗菌药物的一种有效载体。为了发展、丰富和完善生物可降解纳米靶向细胞内传递抗菌药物的理论和研发策略,本文分为四个章节详细论述了纳米靶向细胞内传递抗菌药物的研究进展以及面临的问题和挑战。本论文将有助于兽医药理工作者系统掌握生物可降解纳米靶向细胞内传递抗菌药物的理论、挑战和机遇,从而开发更加有效的生物可降解纳米传递系统,用于畜禽胞内感染疾病的治疗。

关键词：靶向细胞抗菌药物生物可降解

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高效液相色谱-串联质谱法测定动物可食性组织中镰刀菌毒素

高效液相色谱-串联质谱法测定动物可食性组织中镰刀菌毒素

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：陈冬梅陶燕飞潘源虎谢书宇黄玲利王玉莲袁宗辉农业部兽药残留检测重点实验室/国家兽药残留基准实验室(HZAU)华中农业大学动物医学院

【目的】镰刀菌毒素类在自然界分布极为广泛,它不但可以引起人畜急、慢性中毒,还具有致癌、致畸、致突变的潜在危害,对人类的健康造成严重危害。因此对这些真菌毒素进行残留监控十分必要。但是现有的检测镰刀菌毒素类的检测方法并不完善... 详细信息

【目的】镰刀菌毒素类在自然界分布极为广泛,它不但可以引起人畜急、慢性中毒,还具有致癌、致畸、致突变的潜在危害,对人类的健康造成严重危害。因此对这些真菌毒素进行残留监控十分必要。但是现有的检测镰刀菌毒素类的检测方法并不完善,还存在一些问题,如检测的毒素种类少,只检测毒素毒素原型,对于代谢物关注极少;检测的样品种类单一,动物可食性组织的检测较少;样品前处理复杂、价格昂贵。针对以上问题,本方法旨在建立简便、快速,测定多种动物可食性组织中多种镰刀菌毒素的多残留方法。【方法】采用高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）建立猪牛羊肌肉、肝脏中19种镰刀菌毒素的多残留检测方法。组织样品采用β-葡萄糖醛苷酶水解,乙腈和水提取,正己烷脱脂,Bond Elut Mycotoxin柱净化。采用MRM监测模式,正负离子同时扫描。采用C18色谱柱,乙腈和水溶液为流动相,梯度洗脱方式进行色谱分离。【结果】19种镰刀菌毒素在不同样品中最低定量限为0.37μg/kg.41μg/kg,在添加不同定量限浓度水平上,平均回收率介于64.8%05.0%之间,变异系数≤18.6%。【结论】本方法采用采用乙腈和水萃取提取动物可食性组织中19种镰刀菌毒素,样品前处理简单,方法回收率高,有机试剂用量少。采用Bond Elut Mycotoxin固相萃取柱进行样品净化,操作简单,同文献报道的免疫亲和柱相比,降低了检测成本,避免了样品基质干扰。本方法首次采用高效液相色谱-串联质谱同时测定了19种镰刀菌毒素,检测限低,特异性好,方法性能参数满足兽药残留监控要求。本方法弥补了真菌毒素在动物性食品中定量确证检测方法的空白,为保障人类和动物健康具有十分重要的意义。

关键词：镰刀菌毒素高效液相色谱-串联质谱固相萃取动物可食性组织

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放射性标记技术在兽药安全评价中的应用

放射性标记技术在兽药安全评价中的应用

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：潘源虎朱洪鹏谢书宇陶燕飞陈冬梅黄玲利刘振利袁宗辉农业部兽药残留检测重点实验室/国家兽药残留基准实验室(HZAU)华中农业大学动物医学院

兽药的安全评价的最重要的的目的之一就是为了保障人的食品安全,包括系统开展兽药的毒理学、代谢动力学和残留消除研究,确定人日允许摄入量（ADI）,残留标示物和靶组织,进而制订出最高残留限量（MRL）和休药期,从而对兽药进行最好的风... 详细信息

兽药的安全评价的最重要的的目的之一就是为了保障人的食品安全,包括系统开展兽药的毒理学、代谢动力学和残留消除研究,确定人日允许摄入量（ADI）,残留标示物和靶组织,进而制订出最高残留限量（MRL）和休药期,从而对兽药进行最好的风险管理。FAO/WHO食品添加剂联合专家委员会（JECFA）对于MRL的制订方法,推荐采用放射标记药物在靶动物的代谢研究来确定靶组织和标示残留物,进行药物在靶动物的总残留消除试验确定总残留物与标示残留物的比率,制订出科学合理的MRL值。本文将从放射性示踪技术在兽药在动物体内的ADME及残留消除研究方面的运用来阐述该技术在兽药的安全评价中的重要性。研究药物在体内的吸收时采用放射性标记药物,借助液闪计数器可以直接测定给药后不同时间点生物样品中的放射性浓度,计算得到药物吸收速率、达峰时间和生物利用度等参数。全面研究药物在体内的代谢,可以阐明兽药在动物体内的代谢途径,预测药物的药效及其潜在的毒性作用。但是药物在体内往往代谢生成多种代谢产物,而放射性示踪技术则可以明确区分与药物相关的代谢物,随着高效液相与放射性检测和质谱联用,能够实现对兽药相关的代谢物同时进行定性和定量分析,而且可以方便地比较药物在不同种属的代谢情况。对于药物排泄研究,即使不知道代谢物具体信息,利用放射性特点通过分别测定粪便、尿液和胆汁样品的总放射量,从而获得物料平衡的准确信息。如对阿维菌素同系物MAB1a的研究采用和C双标记方法研究其鸡体内代谢。连续口服给药7d（1mg/kg bw/d）,收集每天的鸡蛋和粪便,分离鸡蛋的蛋白和蛋黄,停药后20h宰杀鸡,收集肝脏、肾脏、心脏、肌肉、脂肪、卵巢、肌胃、消化道和内容物、尸体等检测。在粪便和消化道及其内容物中回收到总给药放射性的70%,组织和鸡蛋中回收了6%。分离和鉴定了两个代谢产物及其8个结合物,占组织和鸡蛋的总放射性的8～70%,并证明了MAB1a在禽类和哺乳动物体内生物转化不同。放射性示踪技术在兽药的安全评价中最具特色可能就是在残留消除研究中的应用。通过对不同的靶动物使用放射性标记的药物,在不同的时间点检测不同组织中的放射性水平,确定残留靶组织,并对靶组织中的各个代谢产物先定性（确定其结构）、后定量（确定其含量）,从而确定靶组织的主要代谢产物（含量>10%）和其结构,然后在主要代谢产物中,将那些与总残留呈稳定比例关系又能在体外稳定存在的一种或几种代谢产物拟定为残留标示物。如研究罗硝唑在火鸡和猪体内的残留消除,给火鸡和猪服用C标记的罗硝唑,到休药期第10天的时候残留量分别为鸡肉0.26 mg/kg,肾脏0.14mg/kg和肝脏0.05mg/kg。休药期42天时,罗硝唑在猪体内残留量分别为肌肉130μg/kg,肝脏、肾脏和脂肪大约50-60μg/kg。由于在猪和火鸡的残留消除实验中肌肉在休药期后药物的残留量最高,最终确定罗硝唑在火鸡和猪中的残留靶组织均为肌肉。又如对头孢噻呋残留标示物的确定,利用C标记的头孢噻呋动物体内进行残留研究。在肾脏中,主要的存在物是去呋喃甲酰基头孢噻呋半胱氨酸二硫化物;在肝脏中,主要的代谢物是去呋喃甲酰基头孢噻呋和3,3'-去呋喃甲酰基头孢噻呋二硫二聚物,最终确定了残留标示物是去呋喃甲酰基头孢噻呋。低能量的4C和H是药物ADME研究中最常用的放射性核素。由于具有标记位点稳定的优点,C作为最常用的放射性核素通常标记在分子的骨架结构上,缺点是C的来源较少且价格高。而H标记具有合成方便,氚源相对容易而且检测灵敏度高的优点,也常做为示踪剂,但是存在可能会与易与环境中的氢发生交换,稳定性不如C,一般要求氚水交换比例小于5%。作者所在实验室近几年陆续开展了喹噁啉类兽药喹赛多,喹烯酮和喹乙醇在实验动物和猪鸡鱼的放射性示踪研究,阐明了这些药物在动物体内的代谢差异及分布和残留消除规律,为制定这类药物残留限量和休药期进行探索性工作。随着国家对食品安全的日益重视,为了进一步加强兽药的食品安全性评价,放射性同位素示踪技术在兽药的新药研发及一些兽药的再评价中的地位应该得到重视,与国外的法规和指南接轨。

关键词：兽药安全评价放射性示踪代谢残留消除

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兽用喹噁啉类毒理学研究进展

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中国农学通报 2015年第17期31卷 16-21页

作者：王旭程古月周秋格刘嘉婧郝海红戴梦红刘振利袁宗辉华中农业大学国家兽药残留基准实验室(HZAU)/农业部食品兽药残留检测重点实验室农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室(武汉)华中农业大学兽药研究所武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070

喹噁啉-1,4-二-N-氧化物类抗菌促生长化合物广泛用于畜禽生产和疾病防治,主要包括喹乙醇、卡巴氧、喹赛多、喹烯酮和乙酰甲喹。因其毒副作用,卡巴氧和喹乙醇已被禁止或限制使用,中国相继批准了乙酰甲喹和喹烯酮的使用,并正在开发较为安... 详细信息

喹噁啉-1,4-二-N-氧化物类抗菌促生长化合物广泛用于畜禽生产和疾病防治,主要包括喹乙醇、卡巴氧、喹赛多、喹烯酮和乙酰甲喹。因其毒副作用,卡巴氧和喹乙醇已被禁止或限制使用,中国相继批准了乙酰甲喹和喹烯酮的使用,并正在开发较为安全的喹赛多等同类产品。文章对喹噁啉类抗菌促生长化合物的毒性作用做一综述,主要包括短、长期毒性、遗传毒性和光敏毒性,为评价其安全性,指导其合理使用,避免其危害提供参考。

关键词：喹噁啉喹乙醇乙酰甲喹喹烯酮喹赛多毒理

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