检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧兽医学报 2025年第2期56卷 860-869页

作者：李枝卉罗金林谢虹李明坤林杨张宇姣徐引弟陈焕春蔡旭旺徐晓娟华中农业大学动物医学院农业微生物资源发掘与利用重点实验室湖北省预防兽医学重点实验室武汉430070 河南省农业科学院畜牧兽医研究所郑州450002

本研究旨在增加副猪格拉瑟菌寡肽渗透酶(oligopeptide permease,OppA)表达量,构建可以过表达OppA的副猪格拉瑟菌株,并对其进行小鼠的免疫保护试验以评价其作为格拉瑟病弱毒活疫苗的潜力。以副猪格拉瑟菌CF7066株为亲本株,利用自然转化和... 详细信息

本研究旨在增加副猪格拉瑟菌寡肽渗透酶(oligopeptide permease,OppA)表达量,构建可以过表达OppA的副猪格拉瑟菌株,并对其进行小鼠的免疫保护试验以评价其作为格拉瑟病弱毒活疫苗的潜力。以副猪格拉瑟菌CF7066株为亲本株,利用自然转化和Flp-FRT无抗突变系统构建副猪格拉瑟菌OppA过表达株,通过Western blot检测OppA的表达量,通过阿拉伯糖诱导和提高培养温度消除抗性基因和Flp表达质粒。进行小鼠免疫保护试验,通过检测血清中抗体水平及脾淋巴细胞增殖、观察小鼠死亡率。结果显示:构建了3株副猪格拉瑟菌OppA过表达株ΔnanH::oppA^(R),ΔnanH::oppA和ΔnanH::P qseB-oppA。由于ΔnanH::oppA^(R)株中OppA的表达量显著高于CF7066(P<0.001),所以选择该过表达株进行小鼠免疫保护试验。小鼠在免疫后进行rOppA-ELISA的抗体检测,结果表明,ΔnanH::oppA^(R)免疫组的OppA抗体水平比CF7066组、ΔnanH组和PBS组高,但低于灭活疫苗组。用rOppA蛋白刺激脾淋巴细胞,ΔnanH::oppA^(R)和CF7066组小鼠脾淋巴细胞的增殖量显著高于刺激前(P<0.05),而ΔnanH、灭活疫苗组和PBS对照组没有改变。用CF7066菌株进行攻毒,其中灭活疫苗组、ΔnanH::oppA^(R)组、CF7066组对小鼠的保护率均为100%,ΔnanH组为75%。当前研究构建的3株副猪格拉瑟菌重组菌株中,ΔnanH::oppA^(R)的OppA表达水平最高,用该菌株免疫小鼠后产生OppA特异性的体液免疫和细胞免疫,而且可对CF7066攻毒提供有效保护。基于此,副猪格拉瑟菌OppA过表达株ΔnanH::oppA^(R)有望作为副猪格拉瑟菌的减毒活疫苗。

关键词：副猪格拉瑟菌寡肽渗透酶过表达基因工程弱毒疫苗

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牛源溶血性曼氏杆菌和多杀性巴氏杆菌的分离与鉴定

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微生物学通报 2025年第3期52卷 1281-1294页

作者：于凡淞赵梦莹熊丽雯郭爱珍陈颖钰胡长敏陈建国华中农业大学动物医学院农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物科学技术学院、动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学生猪健康养殖协同创新中心华中农业大学湖北省兽医流行病学国际科技合作基地湖北武汉430070

【背景】牛呼吸疾病综合征(bovine respiratory disease complex,BRDC)是由多病原和多因素互作引起的以支气管肺炎为主的牛呼吸系统疾病。引起BRDC的细菌性病原主要有溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica,Mh)、多杀性巴氏杆菌(Pasteu... 详细信息

【背景】牛呼吸疾病综合征(bovine respiratory disease complex,BRDC)是由多病原和多因素互作引起的以支气管肺炎为主的牛呼吸系统疾病。引起BRDC的细菌性病原主要有溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica,Mh)、多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)、睡觉嗜组织菌(Histophilus somni,Hs)等。【目的】了解我国引起BRDC相关的Mh、Pm分布和血清型种类。【方法】自2022年7月到2024年1月间,通过PCR技术对来自河南、湖南、湖北、浙江、安徽、山东、宁夏、甘肃、贵州、黑龙江、内蒙古等16个地区的54个牧场共698头牛的698份样本(鼻拭子359份、气管拭子321份,肺脏组织18份)进行溶血性曼氏杆菌及多杀性巴氏杆菌的检测,对阳性样品进行细菌分离和血清型鉴定。【结果】溶血性曼氏杆菌和多杀性巴氏杆菌检测为阳性的样本量分别为15/698和72/698,阳性检出率分别为2.15%(95%CI:1.2%-3.5%)及10.32%(95%CI:8.2%-12.8%),二者混合感染有5/698份,阳性率为0.72%(95%CI:0.2%-1.7%)。PCR检测后进一步对阳性样品进行细菌分离,共获得8株溶血性曼氏杆菌,其中A1型1株,A2型3株,A6型4株,多位点序列分型(multi locus sequence typing,MLST)结果为ST1型5株(5/8),均为血清型A1和A6型;ST2型3株(3/8),为血清型A2型;21株多杀性巴氏杆菌,其中A:L3型17株,A:L6型4株,MLST分型结果为ST1型和ST7型,ST1型17株(17/21),均为A:L3型;ST7型4株(4/21)为A:L6型。【结论】通过对部分地区具有呼吸道症状的病牛进行细菌分离鉴定,对牛呼吸疾病综合征主要致病的细菌性病原进行分型以及生物学特性分析,确定了病原流行的优势血清型、毒力基因和耐药基因等,为相关疫苗的制备提供了基础,为防控该病提供了理论依据。

关键词：牛呼吸疾病综合征溶血性曼氏杆菌多杀性巴氏杆菌细菌分离 PCR鉴定

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神农架川金丝猴血液学指标及其影响因素分析

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野生动物学报 2025年第2期46卷 291-300页

作者：祁明普汪乾坤赵刚杨敬元黄天鹏李书航赵宠南陈颖钰胡长敏郭爱珍农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070 神农架金丝猴保育生物学湖北省重点实验室神农架442421 湖北省洪山实验室武汉430070 华中农业大学湖北省兽医流行病学国际科技合作基地武汉430070

川金丝猴(Rhinopithecus roxellana)是国家一级重点保护野生动物。为有效保护该珍稀物种,建立川金丝猴血液指标数据库,本研究于2014年6月—2016年1月,在神农架国家公园采集24只临床健康的川金丝猴血液样本。利用全自动血液分析仪检测血... 详细信息

川金丝猴(Rhinopithecus roxellana)是国家一级重点保护野生动物。为有效保护该珍稀物种,建立川金丝猴血液指标数据库,本研究于2014年6月—2016年1月,在神农架国家公园采集24只临床健康的川金丝猴血液样本。利用全自动血液分析仪检测血常规和血生化指标,分析不同年龄、性别、季节、饲养方式和血清病毒抗体阳性对川金丝猴血液指标的影响。结果共获取22项血常规和18项血生化指标数据和参考范围,发现饲养方式、季节和血清病毒抗体阳性对血液指标的影响强度大于年龄和性别的影响。研究结果为川金丝猴的健康监测、物种保护和疾病防控提供了基础数据参考。

关键词：神农架川金丝猴血液指标健康监测

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牛结核病大罐奶抗体检测方法的评估

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中国兽医杂志 2025年第1期61卷 75-79页

作者：陈颖钰张琼文王杰陈洁郭爱珍华中农业大学农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室湖北武汉430070 华中农业大学动物科技学院动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学湖北省兽医流行病学国际科技合作基地湖北武汉430070 华中农业大学国家动物结核病专业实验室(武汉) 湖北武汉430070 武汉市畜牧兽医科学研究所湖北武汉430065

为了评估大罐奶抗体检测是否可用于牛结核病的监测和预警,本试验利用酶联免疫吸附试验(ELISA)抗体检测法,对采自湖北省3家规模化奶牛场的85头奶牛的奶样与其对应的血样进行牛结核病抗体相关性分析;并通过检测27家奶牛场的大罐奶和2998... 详细信息

为了评估大罐奶抗体检测是否可用于牛结核病的监测和预警,本试验利用酶联免疫吸附试验(ELISA)抗体检测法,对采自湖北省3家规模化奶牛场的85头奶牛的奶样与其对应的血样进行牛结核病抗体相关性分析;并通过检测27家奶牛场的大罐奶和2998份个体奶样,分析大罐奶抗体水平与牛结核病流行率之间的相关性,建立基于大罐奶抗体检测的牛结核病的流行率预测模型;为确定不同效价阳性奶样在大罐奶中的检测能力,通过对不用阳性奶样进行稀释后混样检测,分析阳性奶样的效价和具有相近大罐奶S/P值的牛群中动物个体的抗体水平经验分布函数的差异性。结果显示,奶样和血样的牛结核病抗体检测结果之间具有高度一致性(Kappa=0.862)和相关性(Pearson相关系数r=0.976,P<0.01)。大罐奶抗体水平检测结果与牛结核病流行率之间具有中度相关性(Pearson相关系数r=0.681,P<0.01),流行率预测模型y=e4.7010+1.8784ln(x)-0.01(R2=0.8933)的预测能力为89.33%。分别稀释不同效价的阳性奶样,牛结核弱阳性奶样2倍稀释后阳性检出率为16.67%,中阳性奶样16倍稀释后阳性检出率为50.00%,高阳性奶样16倍稀释后阳性检出率为100%。结果表明,奶样可用于牛结核病的抗体检测,且大罐奶抗体水平与牛结核病流行率之间具有相关性,并可以通过模型预测牛结核病的流行率。大罐奶抗体检测可作为一项经济快捷的检测手段用于牛结核病的监测和预警,对于有着较高流行率或存在有强阳性个体的牛场,该检测方法敏感性更高,更为适用。

关键词：牛结核病大罐奶效价预测模型

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致犊牛腹泻常见病毒的检测及风险因素分析

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华中农业大学学报 2025年第1期44卷 174-182页

作者：何艳飞覃城皇徐肖文冼茵儿项志杰陈颖钰郭爱珍农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室/华中农业大学动物科学技术学院、动物医学院武汉430070 生猪健康养殖协同创新中心/湖北省兽医流行病学国际科技合作基地武汉430070 湖北洪山实验室武汉430070

为了解犊牛腹泻主要病毒的流行现状和优势毒株,2021年11月至2023年10月间,运用RT-PCR技术对来自湖北、湖南、河南、广西、贵州、甘肃、山东和内蒙古等地41个牧场的264头腹泻犊牛的264份样品(58份肛拭子、15份肠组织和191份粪便)进行了... 详细信息

为了解犊牛腹泻主要病毒的流行现状和优势毒株,2021年11月至2023年10月间,运用RT-PCR技术对来自湖北、湖南、河南、广西、贵州、甘肃、山东和内蒙古等地41个牧场的264头腹泻犊牛的264份样品(58份肛拭子、15份肠组织和191份粪便)进行了牛轮状病毒(bovine rotavirus,BRV)、牛冠状病毒(bovine coronavirus,BCoV)、牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)的检测,进一步对以上3种病毒在不同地区、年龄、季节和品种的分布进行了分析。结果显示,BRV、BCoV和BVDV的个体阳性检出率分别为14.02%(95%CI:8.44~16.68)、10.23%(95%CI:6.85~14.53)和12.12%(95%CI:10.06~18.80),78.05%(95%CI:62.39~89.44)的牧场为犊牛腹泻病毒阳性场,29.27%(95%CI:16.13~45.54)的牧场存在有混合感染,BRV与BCoV是最为常见的混合感染组合,检出率为3.42%(95%CI:1.32~5.88)。BRV在我国北方地区、冬季和≤5周龄的犊牛中检出率较高,BCoV在我国北方地区和夏冬季节检出率高,而BVDV在各地区、年龄、品种等方面,检出率无显著差异。结果表明3种病毒在我国11个省份地区的41个牧场的腹泻犊牛中普遍存在,BRV和BCoV是导致犊牛腹泻的主要病毒,并且其流行情况受到地区、季节和年龄的影响,这提示在防控措施中应该考虑这些因素。

关键词：犊牛腹泻 BRV BCoV BVDV 检测风险因素分析

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基于荧光定量PCR检测和原位杂交技术分析湖北省蛋鸡滑液支原体的感染情况

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畜牧兽医学报 2025年第3期56卷 1396-1407页

作者：王纯王晴吴晓倩胡婷崔卫涛裴洁宋铁平胡思顺张万坡李自力周祖涛华中农业大学动物医学院/湖北省预防兽医学重点实验室武汉430070 湖北省动物疫病预防控制中心武汉430070 宜昌天佑华牧科技有限公司宜昌443000

近年来,滑液支原体(Mycoplasma synoviae,MS)在鸡群中的感染率日益上升。湖北省蛋鸡存栏规模较大,各蛋鸡品种均有饲养,目前湖北省蛋鸡群MS感染情况尚不清楚。因此,本研究开展湖北省规模蛋鸡养殖场鸡群MS感染情况的调查并探究MS在产蛋壳... 详细信息

近年来,滑液支原体(Mycoplasma synoviae,MS)在鸡群中的感染率日益上升。湖北省蛋鸡存栏规模较大,各蛋鸡品种均有饲养,目前湖北省蛋鸡群MS感染情况尚不清楚。因此,本研究开展湖北省规模蛋鸡养殖场鸡群MS感染情况的调查并探究MS在产蛋壳顶端异常(eggshell apex abnormality,EAA)蛋鸡输卵管中的分布。采集湖北省36个规模蛋鸡养殖场82个鸡群血清和气管棉拭子各1637份,利用建立的荧光定量PCR(real-time qPCR)方法检测MS载量,ELISA试剂盒检测免疫鸡群和非免疫鸡群血清抗体,并对产EAA蛋的蛋鸡输卵管进行MS载量、病理切片和MS定位分析。结果显示,临床样本中,喉气管拭子MS阳性率9.41%;血清抗体阳性率92.24%,其中非免疫鸡群抗体阳性率89.04%,且6月龄抗体达100%阳性,免疫鸡群抗体阳性率95%;36个规模场中有26个(72.22%)MS感染阳性场,82个鸡群中有61个(74.39%)感染阳性群;10个蛋鸡品种均有MS感染。产EAA蛋的鸡输卵管部位检出MS且膨大部的载量极显著高于子宫部、峡部和漏斗部(P<0.01),子宫部显著高于峡部和漏斗部(P<0.05);在产EAA蛋的蛋鸡输卵管中,峡部和子宫部出现黏膜上皮细胞变性和腺体肿大以及膨大部出现腺体上皮细胞脱落和坏死,子宫部和峡部的黏膜上皮以及膨大部的黏膜上皮和管状腺周围都有MS阳性信号检出,其中膨大部和子宫部阳性信号最强。综上,湖北省蛋鸡场MS感染严重,不同品种均有感染,MS主要定植在蛋鸡输卵管子宫部和膨大部中并造成病理损伤。本研究为湖北省蛋鸡MS感染情况的认识和MS引起EAA蛋的研究提供了数据支撑。

关键词：滑液支原体蛋壳顶端异常荧光定量PCR 原位杂交组织分布

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乳源外泌体的研究进展

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中国奶牛 2025年第4期 16-21页

作者：张越郑好董霞陈星史良玉余博周傲张淑君动物遗传繁育与精准养殖实验室/武汉轻工大学动物科学与营养工程学院武汉430023 动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室/湖北省农业科学院畜牧兽医研究所武汉430064 华中农业大学动物科学技术学院、动物医学院武汉430070

乳源外泌体是由乳腺上皮细胞分泌的一种茶杯样纳米级功能性囊泡,其含有多种生物活性物质,具有多种生物学功能,其在靶向载体、药物递送等方面的应用具有天然优势。本文综述了乳源外泌体结构组成、分离鉴定与保存方法、生物学功能及其应用... 详细信息

乳源外泌体是由乳腺上皮细胞分泌的一种茶杯样纳米级功能性囊泡,其含有多种生物活性物质,具有多种生物学功能,其在靶向载体、药物递送等方面的应用具有天然优势。本文综述了乳源外泌体结构组成、分离鉴定与保存方法、生物学功能及其应用,为乳源外泌体的研究应用提供有价值的参考。

关键词：乳源外泌体分离与鉴定生物学功能应用保存

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牛呼吸道疾病综合征主要病毒的流行病学调查

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畜牧兽医学报 2025年第3期56卷 1324-1335页

作者：赵婉玥徐肖文常舒舒项志杰郭爱珍陈颖钰华中农业大学动物科技学院动物医学院华中农业大学农业微生物学资源发掘与利用全国重点实验室武汉430070 华中农业大学生猪健康养殖协同创新中心湖北省兽医流行病学国际科技合作基地武汉430070 华中农业大学湖北洪山实验室武汉430070

牛呼吸道疾病综合征(bovine respiratory disease complex,BRDC)是危害全球养牛业健康发展的疫病之一。引起该病的病毒主要包括牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)、牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)、牛副流感病毒3型(bovine parainfluenza virus 3,BPIV3)和牛呼吸道合胞体病毒(bovine respiratory syncytial virus,BRSV)等。掌握引发BRDC的主要病毒的分布情况是对该病进行精准防控、疫苗研发的重要基础。本研究以我国不同地区肉牛、奶牛、牦牛及屠宰场牛为研究对象,利用PCR和RT-PCR技术对来自全国30个牧场的750份临床样品进行了BRDC主要病毒的检测。结果表明,我国牛群中BRDC主要病毒的个体检出率为9.47%(95%CI:7.5,11.8),群体检出率为33.33%(95%CI:17.9,54.3);优势病毒为BVDV,阳性检出率为5.07%(95%CI:3.6,6.9);IBRV的群阳性检出率最高,达到20.00%(95%CI:7.7,38.6),其余三种病毒的群阳性率也都大于10%。肉牛中主要病毒为BVDV,阳性检出率为5.62%(95%CI:3.9,7.8);奶牛中仅检出BVDV,阳性检出率为13.33%(95%CI:3.8,30.7);牦牛仅检出IBRV,阳性检出率为6.09%(95%CI:2.5,12.1)。相关性分析结果显示,不同品种、区域间,患有BRDC的风险无统计学差异。夏季和秋季相较春季更为易感。>14周龄牛相较≤14周龄牛感染的风险显著高,尤其是感染BVDV的风险。在有呼吸道症状牛中,BRDC主要病毒为BVDV,且有BVDV分别与BPIV3、BRSV混合感染的情况。在无呼吸道症状牛群中,IBRV的阳性检出率最高。综上,本研究确定了我国牛群中BRDC主要病毒的携带分布情况,确定了不同地区、季节、品种感染BRDC病毒的风险,为BRDC的精准防控提供了重要基础。

关键词：牛呼吸道疾病综合征牛传染性鼻气管炎病毒牛病毒性腹泻病毒牛副流感病毒3型牛呼吸道合胞体病毒流行病学调查时空分析

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胸膜肺炎放线杆菌RTX毒素与宿主的相互作用

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微生物学报 2009年第2期49卷 141-146页

作者：范盛先刘辉陈杨陈焕春何启盖华中农业大学动物医学院预防兽医学湖北省重点实验室武汉430070

胸膜肺炎放线杆菌引起猪传染性胸膜肺炎,给养猪业造成严重的经济损失。RTX毒素是胸膜肺炎放线杆菌主要的毒力因子,在该病原的感染与免疫中发挥"双刃剑"的作用。本文综述了近十多年来国内外在胸膜肺炎放线杆菌RTX毒素的研究进... 详细信息

胸膜肺炎放线杆菌引起猪传染性胸膜肺炎,给养猪业造成严重的经济损失。RTX毒素是胸膜肺炎放线杆菌主要的毒力因子,在该病原的感染与免疫中发挥"双刃剑"的作用。本文综述了近十多年来国内外在胸膜肺炎放线杆菌RTX毒素的研究进展,提出了毒素与宿主互作研究的必要性和技术可行性,认为毒素与宿主相互作用研究将诠释此病原的分子致病机理。

关键词：胸膜肺炎放线杆菌 RTX毒素蛋白质相互作用分子致病机理

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禽流感病毒感染与疫苗免疫鉴别诊断试纸条的研制及应用

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中国农业科学 2009年第2期42卷 694-700页

作者：胡思顺郑兴华蔡开妹彭伏虎张文泽李自力肖运才刘梅毕丁仁华中农业大学动物医学院/湖北省预防兽医学重点实验室

【目的】结合胶体金免疫层析技术建立一种适合养鸡业基层生产人员使用的便捷的快速诊断禽流感病毒感染鸡群的方法。【方法】将含禽流感病毒非结构基因ns1的表达载体KG-NS1转化入BL21(DE3)感受态细胞,筛选阳性克隆进行诱导表达,表达产物... 详细信息

【目的】结合胶体金免疫层析技术建立一种适合养鸡业基层生产人员使用的便捷的快速诊断禽流感病毒感染鸡群的方法。【方法】将含禽流感病毒非结构基因ns1的表达载体KG-NS1转化入BL21(DE3)感受态细胞,筛选阳性克隆进行诱导表达,表达产物用GST亲和层析柱进行纯化和Western-blot分析;以NS1重组蛋白为诊断抗原,抗鸡IgFc的单抗标记的胶体金为示踪物,结合免疫层析技术,组装禽流感病毒NS1抗体的免疫胶体金鉴别诊断试纸条,评价其灵敏度和特异性,并对试验感染和临床采集的血样进行检测。【结果】NS1重组蛋白分子量约为52kD,具有免疫学活性。在25min内用肉眼观察到禽流感病毒感染鸡血清和NS1蛋白免疫鸡血清在试纸条的检测线处出现明显的棕红色,呈明显的阳性反应,而其它病原的血清在试纸条的检测线处不出现任何颜色,呈阴性反应。而且感染鸡群的NS1抗体在感染后3d即可检测到,感染后1～2周为高峰期,维持时间约1周,检测阳性率为80%左右。临床样品的阳性率为9.1%。【结论】试纸条使用方便,操作简单,25min内可以用肉眼判断结果,可区分禽流感疫苗免疫和野毒感染家禽,具有很大的推广应用价值。

关键词：禽流感 NS1蛋白胶体金试纸条

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