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山羊卵巢褪黑素信号特异性载体pcDNA3.1-Pro/GDF9-ASMT与pcDNA3.1-Pro/Cyp17-MTNR1A/B的构建

中国畜牧兽医 2020年第12期47卷 3833-3843页

作者：王晓东杨婵刘清华李振宇吴昊刘国世李翔何长久华中农业大学动物科技学院动物医学院农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室国家级国际联合研究中心武汉430070 中国农业大学动物科学技术学院北京100193

本研究旨在构建褪黑素(melatonin,MLT)合成酶乙酰血清素甲基转移酶(acetylserotonin methytransferase,ASMT)的卵母细胞特异表达载体GDF9-ASMT和MLT受体(MTNR1A与MTNR1B)的颗粒(黄体)细胞特异表达载体Cyp17-MTNR1A、MTNR1B,以期为进一步生产高繁殖力转基因山羊提供载体材料。首先,分别扩增出山羊生长分化因子9(GDF9)与细胞色素P450家族17亚家族A成员1(Cyp17a1)启动子序列备用;然后,扩增ASMT、MTNR1A及MTNR1B基因CDS全长序列,并通过酶切将ASMT连接至GDF9启动子下游,将MTNR1A和MTNR1B连接至Cyp17a1启动子下游,制备出Pro/GDF9-ASMT、Pro/Cyp17-MTNR1A与Pro/Cyp17-MTNR1B表达元件;最后通过酶切连接将上述表达元件整合至pcDNA3.1(+)载体中,从而构建出pcDNA3.1-Pro/GDF9-ASMT、pcDNA3.1-Pro/Cyp17-MTNR1A和pcDNA3.1-Pro/Cyp17-MTNR1B真核表达载体。经测序验证,本研究扩增出的GDF9和Cyp17a1启动子长度分别为2496和2497 bp,与GenBank数据库中山羊GDF9和Cyp17a1基因起始密码子上游2500 bp区域的同源性均为98%;扩增出的ASMT、MTNR1A与MTNR1B的CDS序列长度分别为1037、1100和1130 bp,与GenBank所递交的标准序列同源性分别为98%、98%和99%,氨基酸序列同源性分别为97%、98%和99%。上述载体的成功构建可为进一步生产褪黑素高繁殖力转基因山羊提供参考。

关键词：褪黑素黄体卵母细胞 ASMT MTNR1A MTNR1B

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湖北省神农架林区野猪分布与传播非洲猪瘟风险分析

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兽类学报 2022年第2期42卷 189-195页

作者：饶静徐茹洁余辉亮李巨平叶静曹胜波李翔华中农业大学动物科学技术-动物医学院华中农业大学神农架科技创新中心华中农业大学园艺林学学院神农架国家公园管理局神农架金丝猴保育生物学湖北省重点实验室神农架林业管理局国家动物遗传育种与繁殖国际联合研究中心农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室

野猪是非洲猪瘟(ASF)传播的重要媒介，神农架林区野猪种群数量高、分布广，调查野猪分布对ASF防控有着重要意义。本研究首先通过布设红外相机117台、样线287条调查神农架林区野猪实体和痕迹位点后，应用最大熵模型预测林区野猪分布，再... 详细信息

野猪是非洲猪瘟(ASF)传播的重要媒介，神农架林区野猪种群数量高、分布广，调查野猪分布对ASF防控有着重要意义。本研究首先通过布设红外相机117台、样线287条调查神农架林区野猪实体和痕迹位点后，应用最大熵模型预测林区野猪分布，再根据野猪、居民区、交通要道的空间分布数据，应用核密度估计法分析神农架林区各地野猪传播ASF的风险。调查发现野猪实体及其粪便、足迹链、巢穴等共2 070处，遍布神农架林区全境，预估野猪数量为18 424头；林区松柏镇、阳日镇、新华镇、省道S307和国道G209沿线等野猪密度高、人口集中的地区为野猪传播ASF极高风险区；极高风险区约4 km外的地区为高风险区；其他地区为中低风险区。本研究表明，松柏镇、阳日镇、新华镇、省道S307、国道G209及周围地区是ASF疫情防控工作中的重点区域，应在这些重点区域做好主动监测防控工作，实时监测ASF动态变化。

关键词：神农架林区野猪非洲猪瘟风险分析

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HP-PRRSV人工感染后猪4种血液指标的变化规律及与病毒载量的关系

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华中农业大学学报 2020年第5期39卷 62-67页

作者：王媛刘榜官凯锋徐航苏秋菊王小康周翔张庆德华中农业大学动物科学技术学院武汉430070 生猪健康养殖省部共建协同创新中心武汉430070 华中农业大学农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室武汉430070 华中农业大学实验动物中心武汉430070 湖北省地方猪品种改良工程技术研究中心武汉430070

为研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus,HP-PRRSV)感染后猪血液指标的变化及与病毒载量的关系,以大白猪×通城猪高代横交群体为对象,选用72头平均11周龄的... 详细信息

为研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus,HP-PRRSV)感染后猪血液指标的变化及与病毒载量的关系,以大白猪×通城猪高代横交群体为对象,选用72头平均11周龄的健康仔猪进行HP-PRRSV人工感染,在感染前和感染后第4、7、11、14、21、28天和第35天进行白细胞计数、淋巴细胞百分比、单核细胞计数、粒细胞百分比4种血常规指标的测定,并与病毒载量进行相关分析。结果显示:(1)感染与感染前相比,感染第4、7天的白细胞计数、淋巴细胞百分比、单核细胞计数均极显著降低,粒细胞百分比极显著升高;感染第11、14天的淋巴细胞百分比显著降低,粒细胞百分比显著升高,其他时间点均无显著变化。(2)抗病组和易感组的淋巴细胞百分比和粒细胞百分比在感染第7天存在显著差异,其中抗病组的淋巴细胞百分比显著高于易感组(P<0.05),粒细胞百分比显著低于易感组(P<0.05)。(3)4种血液指标与病毒载量之间均存在中度相关(P<0.01)。以上结果表明,血液指标可以考虑作为PRRS早期抗病性的指示性状。

关键词： HP-PRRSV 人工感染大白猪×通城猪高代横交群体血液指标病毒载量指示性状

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MC1R基因变异分析及其在楚香黑猪毛色选育中的应用研究

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中国畜牧杂志 2023年第10期59卷 190-194页

作者：王立功何雷张志翔范晓萱李新云马云龙徐学文赵书红农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室华中农业大学动物科学技术学院湖北武汉430070 湖北洪山实验室湖北武汉430070 岭南现代农业科学与技术广东省实验室广东广州510642

本研究旨在了解黑色素皮质受体1(Melanocortin-1-Receptor,MC1R)基因在楚香黑猪群体内的遗传变异,以及MC1R基因突变与不同毛色楚香黑猪的相关性。利用汉普夏猪、杜洛克猪和粤东黑猪为祖代,通过杂交合成、横交固定和世代选育的方式培育... 详细信息

本研究旨在了解黑色素皮质受体1(Melanocortin-1-Receptor,MC1R)基因在楚香黑猪群体内的遗传变异,以及MC1R基因突变与不同毛色楚香黑猪的相关性。利用汉普夏猪、杜洛克猪和粤东黑猪为祖代,通过杂交合成、横交固定和世代选育的方式培育兼具高瘦肉率与优良肉质的楚香黑猪,在培育过程中出现了毛色分离。通过直接测序法对不同毛色类型的楚香黑猪进行单核苷酸多态性(SNP)检测,利用LDheatmap软件对突变位点进行连锁不平衡分析。突变位点检测结果表明,楚香黑猪MC1R基因存在8个SNPs,对应MC1R*2、MC1R*3和MC1R*43种单倍型,MC1R*2和MC1R*3单倍型与楚香黑猪群体的黑毛表型相关,MC1R*4单倍型的第491位置T>C和第727位置A>G突变,完全与红色、褐色和白色个体共分离。此外,还建立了检测种猪是否携带MC1R*4单倍型的PCR-RFLP方法,为楚香黑猪的纯黑选育提供技术支持。

关键词：楚香黑猪毛色 MC1R PCR-RFLP

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关于“生猪高产优质高效性状形成的分子调控网络”项目进展

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中国农村科技 2023年第9期 12-14页

作者：侯博文王恒项韬李凤娥华中农业大学动物科学技术学院动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室

我国是世界第一养猪大国,全国生猪存栏、出栏和猪肉产量均居世界第一。而种业位于生猪养殖产业链条的最上游,种猪质量决定了整个养殖链条的生产效率。解析猪重要经济性状的形成机制和调控网络,为基因组精准设计育种理论与技术创新提供依... 详细信息

我国是世界第一养猪大国,全国生猪存栏、出栏和猪肉产量均居世界第一。而种业位于生猪养殖产业链条的最上游,种猪质量决定了整个养殖链条的生产效率。解析猪重要经济性状的形成机制和调控网络,为基因组精准设计育种理论与技术创新提供依据,一直是国内外猪遗传育种研究领域的焦点。重点研发计划项目“生猪高产优质高效性状形成的分子调控网络”,围绕生猪育种的关键科学问题和产业瓶颈.

关键词：高产优质高效猪肉产量精准设计育种理论种猪质量重要经济性状遗传育种研究生猪养殖

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microRNA调控鹿茸再生机制的研究进展

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黑龙江畜牧兽医 2018年第5期 63-67页

作者：赵鹏翔任竹青韩春梅塔里木大学新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室新疆阿拉尔843300 华中农业大学动物科学技术学院/农业部猪遗传育种重点实验室/农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室武汉430070 华中农业大学生猪健康养殖协同创新中心武汉430070 塔里木大学动物科学技术学院新疆阿拉尔843300

鹿茸是雄性鹿科动物马鹿和梅花鹿密生茸毛的茸角,是我国传统名贵中药材,具有很高的药用价值。鹿茸是唯一能够完全再生的哺乳动物附肢,其生长发育和再生具有特殊的机制,多种细胞和调控因子参与其中。文章对鹿茸再生的细胞基础以及microRN... 详细信息

鹿茸是雄性鹿科动物马鹿和梅花鹿密生茸毛的茸角,是我国传统名贵中药材,具有很高的药用价值。鹿茸是唯一能够完全再生的哺乳动物附肢,其生长发育和再生具有特殊的机制,多种细胞和调控因子参与其中。文章对鹿茸再生的细胞基础以及microRNA对鹿茸生长发育调控的研究进展进行简要综述,为更好地研究鹿茸再生机制提供参考。

关键词：鹿茸再生骨膜细胞 microRNA 信号通路

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ADP-核糖基化调控精子形成的研究进展

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畜牧兽医学报 2022年第1期53卷 11-19页

作者：段晨莹李欣赵俊金李茹意赵羚均郭冠华杨利国滑国华王栋中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193 吉林农业大学动物科学技术学院长春130118 全国畜牧总站北京100125 山西农业大学动物科学学院太谷030801 华中农业大学农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室武汉430070

ADP-核糖基化是由ADP-核糖基转移酶((ADP-ribosyl)transferases,ARTs)催化的一种蛋白质翻译后修饰,分为聚-ADP-核糖基化和单-ADP-核糖基化,在着丝点和纺锤体组装、DNA损伤修复及精子染色质重塑等多个精子发生生物学事件中发挥重要调控... 详细信息

ADP-核糖基化是由ADP-核糖基转移酶((ADP-ribosyl)transferases,ARTs)催化的一种蛋白质翻译后修饰,分为聚-ADP-核糖基化和单-ADP-核糖基化,在着丝点和纺锤体组装、DNA损伤修复及精子染色质重塑等多个精子发生生物学事件中发挥重要调控作用。部分ARTs基因缺失使精子形成异常,导致精液质量降低,甚至雄性不育。然而,ADP-核糖基化调控精子形成的详细机制尚不清楚,对单-ADP核糖基化的研究则更少。为此,本文综述了ADP-核糖基化在精子形成中的研究进展,以期为深入揭示精子形成调控机制提供新思路,推动雄性繁殖障碍防控和男性不育治疗取得新突破。

关键词： ADP-核糖基化精子形成聚-ADP-核糖基聚合酶 ecto-ADP-核糖基转移酶

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基于大规模RNA-seq数据绘制猪RNA编辑图谱的研究

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生物技术通报 2024年第10期40卷 288-295页

作者：龙佳佳刘玮玮范新浩黎旺长杨小淦唐中林广西大学动物科学技术学院广西畜禽繁育与疾病防控重点实验室南宁530004 佛山鲲鹏现代农业研究院佛山528226 中国农业科学院深圳农业基因组研究所(岭南现代农业科学与技术广东省实验室深圳分中心)中国农业科学院深圳农业基因组研究所畜禽多组学重点实验室深圳518124 华中农业大学农用动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室农业农村部猪遗传育种重点实验室武汉430070

【目的】A-to-I RNA编辑是一种由ADAR酶家族介导的共转录/转录后修饰,系统绘制猪的RNA编辑图谱,为猪的分子育种提供候选靶标。【方法】收集16种猪组织的3461个RNA-seq数据,采用生物信息学方法检测猪RNA编辑位点。【结果】共检测到130989... 详细信息

【目的】A-to-I RNA编辑是一种由ADAR酶家族介导的共转录/转录后修饰,系统绘制猪的RNA编辑图谱,为猪的分子育种提供候选靶标。【方法】收集16种猪组织的3461个RNA-seq数据,采用生物信息学方法检测猪RNA编辑位点。【结果】共检测到130989个RNA编辑位点,其中,A-to-I RNA编辑位点有124208个。A-to-I RNA编辑位点特征分析表明,98.2%的位点位于重复区域,且主要位于猪特异性的SINE反转录转座子区域的PRE-1/Pre0_SS元件内。只有12.3%的A-to-I RNA编辑位点具有编码意功能。最后,本研究分析了7种组织(脂肪、大脑、大肠、小肠、骨骼肌、肝和肺)的特异性A-to-I RNA编辑位点,脂肪组织特异性位点宿主基因的功能富集分析表明,这些基因在与细胞脂质代谢过程、脂质代谢过程、硫酯代谢过程等相关的信号通路中富集。在这些通路中,与脂肪沉积相关的基因有PDK1、ACSL1和PDE3B等。【结论】绘制了猪的RNA编辑位点图谱,为猪的分子育种提供了候选靶点。

关键词： A-to-I RNA编辑脂肪沉积猪组织组织特异性RNA编辑位点

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澳系进口荷斯坦奶牛CXCR1基因遗传多态性与泌乳性状及体细胞评分的关联性分析

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中国兽医学报 2014年第1期34卷 159-164页

作者：张美荣廖想想陈丹毛永江刘坤陈亮王杏龙杨章平杨利国扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225009 华中农业大学动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室湖北武汉430070 上海牛奶集团海丰奶牛场有限公司江苏大丰2241001

采用聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术对以海丰奶牛场588头澳系进口荷斯坦牛牛趋化因子受体1(Chemokine receptor 1,CXCR1)基因的遗传多态性进行分析;采用混合动物模型分析CXCR1基因2个突变位点与测定日产奶量、乳脂率、乳... 详细信息

采用聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术对以海丰奶牛场588头澳系进口荷斯坦牛牛趋化因子受体1(Chemokine receptor 1,CXCR1)基因的遗传多态性进行分析;采用混合动物模型分析CXCR1基因2个突变位点与测定日产奶量、乳脂率、乳蛋白率、305d产奶量、305d乳脂量、305d乳蛋白量及体细胞评分7个性状的相关性,寻找可用于生产实际的分子标记。结果显示,CXCR1基因5′侧翼区-1830位点发生了A→G的突变,检测到AA、AG和GG 3种基因型,频率分别为0.684、0.289和0.027,等位基因A和G的频率分别为0.828和0.172;GG基因型奶牛的日产奶量、SCS和305d产奶量均极显著高于AA基因型(P<0.01),而其乳脂率和乳蛋白率却显著低于AA基因型奶牛(P<0.05)。编码区783位点仅发现AA和AC 2种基因型,基因型频率分别为0.886和0.114,等位基因A和C的频率分别为0.943和0.057。AA型的个体的日产奶量、305d脂肪产量和305d蛋白产量极显著高于AC型个体,而其乳脂率、乳蛋白率和SCS却极显著低于AC型个体(P<0.01)。结果表明,CXCR1基因遗传突变对澳系进口荷斯坦牛泌乳性状和乳房炎抗性有较大的遗传效应,可用于澳系进口荷斯坦牛的分子标记辅助选择。

关键词：澳系进口荷斯坦牛 CXCR1基因泌乳性状遗传多态性 PCR—SSCP SCS

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6月龄波尔山羊与麻城黑山羊血液指标、屠宰性能差异研究

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中国畜牧兽医 2022年第4期49卷 1332-1342页

作者：杨娟郭帅韩世昌张年张凤陶虎熊琪湖北省农业科学院畜牧兽医研究所动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室武汉430064 长江大学动物科学学院荆州434025 华中农业大学动物科学技术学院农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室武汉430070

【目的】研究6月龄波尔山羊与麻城黑山羊的血液生理生化指标、胴体性状、肌纤维直径、肌内脂肪含量的差异情况,以期为2个品种山羊的饲养管理、引种改良及杂交利用提供参考依据。【方法】分别选取8只3月龄±5 d、健康的波尔山羊与麻... 详细信息

【目的】研究6月龄波尔山羊与麻城黑山羊的血液生理生化指标、胴体性状、肌纤维直径、肌内脂肪含量的差异情况,以期为2个品种山羊的饲养管理、引种改良及杂交利用提供参考依据。【方法】分别选取8只3月龄±5 d、健康的波尔山羊与麻城黑山羊在统一条件下饲养3个月,饲养结束采集血液测定白细胞数(WBC)、红细胞数(RBC)、血红蛋白浓度(HGB)、红细胞比容(HCT)、平均红细胞体积(MCV)等14项血液生理指标及肌酐(CRE)、总胆红素(TBIL)、尿素氮(BUN)、血糖(GLU)、总蛋白(TP)等14项血液生化指标;测定体重、体高、体斜长、胴体重、屠宰率、眼肌面积等12项胴体性状;屠宰后取背最长肌肌肉组织,切片后经苏木素伊红和改良油红O染色,分别检测肌纤维直径和肌内脂肪含量。【结果】血液生理指标中,波尔山羊的红细胞比容、平均红细胞体积均显著低于麻城黑山羊(P<0.05),平均红细胞血红蛋白浓度显著高于麻城黑山羊(P<0.05),其余指标均无显著性差异(P>0.05);血液生化指标中,波尔山羊的总蛋白、球蛋白、血磷含量与淀粉酶活性均极显著低于麻城黑山羊(P<0.01),钾离子含量极显著高于麻城黑山羊(P<0.01),其余指标均无显著性差异(P>0.05);胴体性状中,波尔山羊的体重、平均日增重、背最长肌重、股二头肌重和胴体重均显著高于麻城黑山羊(P<0.05),眼肌面积极显著大于麻城黑山羊(P<0.01),其余指标均无显著性差异(P>0.05);波尔山羊的肌纤维直径极显著大于麻城黑山羊(P<0.01),肌内脂肪含量显著高于麻城黑山羊(P<0.05)。【结论】波尔山羊与麻城黑山羊血液指标、屠宰性能均存在较大的差异,结果可为研究波尔山羊与麻城黑山羊的种质特征提供理论依据。

关键词：波尔山羊麻城黑山羊生理生化指标胴体性状肌纤维肌内脂肪

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