检索结果-内蒙古大学图书馆

动物医学进展 2023年第4期44卷 125-129页

作者：耿天天罗莉妍王雅乐申邦方瑞胡敏赵俊龙周艳琴华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070 湖北省预防兽医学重点实验室武汉430070

为了解河南省和湖北省鸡球虫对磺胺氯吡嗪钠的耐药现状,选取河南省18个地区和湖北省17个地区的地方分离株进行鸡体笼养试验,以抗球虫指数(Anticoccidial index,ACI)来评价各虫株耐药性。研究结果显示,在所研究的93株鸡球虫分离株中,河... 详细信息

为了解河南省和湖北省鸡球虫对磺胺氯吡嗪钠的耐药现状,选取河南省18个地区和湖北省17个地区的地方分离株进行鸡体笼养试验,以抗球虫指数(Anticoccidial index,ACI)来评价各虫株耐药性。研究结果显示,在所研究的93株鸡球虫分离株中,河南省共计虫株52株,湖北省共计虫株41株。在河南省52株分离虫株中,有25株对磺胺氯吡嗪钠完全耐药(ACI<160),16株中度耐药(160≤ACI≤180),11株敏感(ACI>180);在湖北省共计41株鸡球虫分离虫株中,有9株完全耐药,9株中度耐药,23株敏感。研究结果为河南省和湖北省鸡球虫的耐药性提供了数据支撑。

关键词：鸡球虫耐药性磺胺氯吡嗪钠,鸡体笼养试验

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佐剂对IBRVΔgG/ΔTK双基因缺失活疫苗牛体攻毒保护效果的影响

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吉林农业大学学报 2023年第4期45卷 476-484页

作者：王琛张一李庆妮陈建国陈颖钰陈曦胡长敏郭爱珍华中农业大学农业微生物学国家重点实验室武汉430070 湖北省洪山实验室武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学湖北省兽医流行病学国际科技合作基地武汉430070 华中农业大学农业部兽用诊断制剂创制重点实验室农业部反刍动物生物制品重点实验室武汉430070

牛传染性鼻气管炎是危害养牛业的一种重要病毒性传染病,疫苗免疫是最主要的防控手段。为研究水性佐剂对牛传染性鼻气管炎TK和gG双基因缺失活疫苗(IBRVΔgG/ΔTK株)的免疫增强作用,将18头1.5~2月龄的奶公犊分成4组,组1~3各5头牛,组4为3... 详细信息

牛传染性鼻气管炎是危害养牛业的一种重要病毒性传染病,疫苗免疫是最主要的防控手段。为研究水性佐剂对牛传染性鼻气管炎TK和gG双基因缺失活疫苗(IBRVΔgG/ΔTK株)的免疫增强作用,将18头1.5~2月龄的奶公犊分成4组,组1~3各5头牛,组4为3头牛。组1滴鼻接种IBRVΔgG/ΔTK疫苗株,组2滴鼻接种IBRVΔgG/ΔTK疫苗株和Gel 01 ST水性佐剂混合物,组3为未免攻毒对照组,组4为不做处理的空白对照组。免疫35 d后,1~3组滴鼻攻击毒力株IBRV HB06株。免疫期间,组1牛体温在正常范围内,有1头牛眼睛和鼻腔出现水样分泌物;组2有1头牛出现一个温次达到40℃,有2头在眼或鼻出现水样分泌物。组1和组2血清特异性抗体和中和抗体水平无显著差异。攻毒后,组1和组2各有1头在第3天体温分别升高一个温次,达到40.25℃和40℃,部分牛眼睛出现水样分泌物;组1鼻腔排毒到第8天,组2中有1头牛在第9天仍检测到排毒;而组3出现流眼泪、鼻分泌物、鼻黏膜出血等临床症状,鼻腔排毒持续到第11天;组1肺部病变与空白对照组(组4)无显著差异,组2略严重于组1,组3表现出明显的肺部病变。按症状分值计算,组1和组2总保护率分别为91.7%和61.41%。参考世界动物卫生组织关于IBRV活疫苗的免疫保护评判标准,组1和组2分别达到100%(5/5)和80%(4/5)保护。综上,此研究所用佐剂未达到预期效果,后期仍需进行更多筛选。

关键词：佐剂牛传染性鼻气管炎标记疫苗免疫病毒

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2020—2022年湖北省生猪屠宰场伪狂犬病病毒的分离鉴定及遗传进化分析

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畜牧兽医学报 2023年第7期54卷 2972-2981页

作者：陈宏建曹艳樊杰甘荣萱宋文博喻盛炜杨婷赵艳霞魏春燕谢锐华琳彭忠吴斌华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070 生猪健康养殖协同创新中心武汉430070 湖北洪山实验室武汉430070

旨在监测湖北省生猪屠宰场中伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)的流行情况。采集2020—2022年湖北省4个区域(鄂东、鄂北、鄂西、鄂中)共9个县市不同规模屠宰场的1795份血液样品和2081份肺样品(肺、肺门淋巴结),分别使用靶向PRV gE... 详细信息

旨在监测湖北省生猪屠宰场中伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)的流行情况。采集2020—2022年湖北省4个区域(鄂东、鄂北、鄂西、鄂中)共9个县市不同规模屠宰场的1795份血液样品和2081份肺样品(肺、肺门淋巴结),分别使用靶向PRV gE基因的ELISA和PCR方法检测血清中的抗体和肺样品中的病原,同时对阳性样品进行病原分离鉴定、全基因组测序和遗传进化分析。血清学检测结果显示,共有104份样品为阳性,平均阳性检出率为5.79%。病原学检测结果显示,共有82份样品为阳性,平均阳性检出率为3.94%。按不同因素对检出率进行分析,显示抗体和病原都在春季检出率最高,分别为18.57%和9.74%;湖北省东部的抗体检出率最高(10.77%),中部的病原检出率最高(4.93%);A类小型屠宰场的病原和抗体检出率都显著高于其他3个类型,分别为16.28%和6.01%。从病原阳性样品中共分离到PRV 17株,经全基因组和gB、gC、gE基因遗传进化分析结果显示均属于基因Ⅱ型变异株,与Bartha、NIA-3、Becker等早期国外分离株处于不同的遗传进化分支。其中HBXG疑似发生了基因Ⅰ型毒株与基因Ⅱ型毒株的重组,与早期报道的重组病毒HuB1/CHN2017同处于独立的clade2.2遗传分支。综上所述,湖北省屠宰场关联的猪场中主要流行PRV变异毒株,且免疫过疫苗的猪场还在发生疫苗株与野毒的重组与变异,因此本研究对PRV的持续监测与新型疫苗的研发工作有十分重要的意义。

关键词：伪狂犬病病毒生猪屠宰场血清学检测病原学检测遗传进化分析

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重组猫干扰素ω2的原核表达及抗病毒效果检测

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中国兽医科学 2023年第8期53卷 997-1002页

作者：陆衍波魏宁曹龙龙曹胜波周登元李秋燕华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 武汉科前生物股份有限公司湖北武汉430070

为开发具有高抗病毒活性且经济的猫用干扰素产品,弥补国内猫用干扰素市场的空白,笔者以原核表达的形式生产重组猫干扰素ω2,将猫干扰素ω2成熟肽基因克隆至pET28-SUMO载体,通过质粒在N端携带的水溶性SUMO标签与干扰素的融合表达来实现... 详细信息

为开发具有高抗病毒活性且经济的猫用干扰素产品,弥补国内猫用干扰素市场的空白,笔者以原核表达的形式生产重组猫干扰素ω2,将猫干扰素ω2成熟肽基因克隆至pET28-SUMO载体,通过质粒在N端携带的水溶性SUMO标签与干扰素的融合表达来实现蛋白在工程菌中的可溶性表达。优化表达体系后的重组猫干扰素ω2产量得到有效提高,重组蛋白产量可高达90 mg/L菌液。抗病毒活性测试结果表明,用该方法生产的猫重组干扰素ω2可显著激活干扰素下游各信号分子的表达,其抗VSV-GFP效价高达1010.23 U/mg,显著高于市面同类产品(P<0.001),同时对猫杯状病毒(FCV)也具有较好的抗病毒功效。本研究提供了一种具有高抗病毒活性的重组猫科动物干扰素ω2,为国内猫干扰素产品提供了更为优质的选择。

关键词：猫干扰素ω2 原核表达抗病毒药物猫杯状病毒

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基于大缸奶样检测两病的应用及挑战

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中国动物传染病学报 2022年第2期30卷 203-207页

作者：陈颖钰李翔郭爱珍国家动物结核病专业实验室(武汉) 武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室华中农业大学武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学动物科技学院武汉430070

牛结核病和布鲁菌病在民间俗称“两病”,不仅是影响奶牛业发展的重要疫病,还给公共卫生也带来巨大威胁。随着“两病”控制及净化力度的不断加大,对两病的安全高效检测及监测手段也提出了更高的要求。奶样检测具有无应激、适合监测、降... 详细信息

牛结核病和布鲁菌病在民间俗称“两病”,不仅是影响奶牛业发展的重要疫病,还给公共卫生也带来巨大威胁。随着“两病”控制及净化力度的不断加大,对两病的安全高效检测及监测手段也提出了更高的要求。奶样检测具有无应激、适合监测、降低成本等天然的优势;基于大缸奶样的检测方法作为群体监测的重要方法在国外很早就有应用,不仅用作常规的监测,还能够作为预警,对新发传染病的传入做出快速反应。我国基于大缸奶样的牛病检测刚刚起步,很多养殖企业或相关单位对该方法还不甚了解。本文从大缸奶样检测的优势、可行性及应用现状等方面进行了介绍,以期为基于大缸奶样检测的临床实践提供指导。

关键词：牛结核病牛布鲁菌病奶样检测

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应用响应面法优化副猪嗜血杆菌冻干保护剂

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中国兽医学报 2023年第4期43卷 713-719页

作者：蔡国华周明光张迪戴昕燕潘建刚徐晓娟何启盖蔡旭旺华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 武汉科前生物有限公司湖北武汉430200

旨在对副猪嗜血杆菌HS1712冻干保护剂进行优化,提高菌株在冷冻干燥后的存活率。以冻干存活率为评价指标,对配方中甘油、海藻糖、甘露醇、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、牛血清白蛋白(BSA)等5种成分缺失,考察其对副猪嗜血杆菌冻干存活率的影响。... 详细信息

旨在对副猪嗜血杆菌HS1712冻干保护剂进行优化,提高菌株在冷冻干燥后的存活率。以冻干存活率为评价指标,对配方中甘油、海藻糖、甘露醇、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、牛血清白蛋白(BSA)等5种成分缺失,考察其对副猪嗜血杆菌冻干存活率的影响。在此基础之上,结合单因素变量试验,应用Box-Behnken响应面法对脱脂奶粉、甘油、海藻糖的添加比例进一步优化。结果表明,配方中甘油、海藻糖缺失后,副猪嗜血杆菌冻干存活率显著下降(P<0.05)。通过对Box-Behnken试验结果进行回归模型拟合,得到最佳添加比例为脱脂奶粉6.8%、甘油2.2%、海藻糖2.7%,具体配方成分及添加比例为脱脂奶粉6.8%、甘油2.2%、海藻糖2.7%、PVP 0.5%。使用优化后配方进行冻干验证,副猪嗜血杆菌HS1712平均冻干存活率为79.20%,与预测值(80.87%)无显著性差异(P>0.05),表示模型可靠。上述结果表明,优化后的冻干保护剂可显著提高副猪嗜血杆菌HS1712冷冻干燥后的存活率。

关键词：副猪嗜血杆菌冻干保护剂 Box-Behnken响应面法优化

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长链非编码RNA在奶牛乳腺炎中作用机制的研究进展

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中国兽医科学 2022年第3期52卷 396-402页

作者：杨晶涵林昌杰许灏钧李政志陈秋慧严蕊陈曦陈颖钰郭爱珍胡长敏华中农业大学动物医学院湖北武汉430070 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

奶牛乳腺炎是导致养牛业巨大经济损失的疾病,如今仍无有效防控方法。长链非编码RNA(LncRNA)既可以直接作用于m RNA,又可以通过调控mi RNA而间接作用于m RNA,从而影响下游靶基因及蛋白表达。LncRNA功能强大,广泛参与了染色体重构、核小... 详细信息

奶牛乳腺炎是导致养牛业巨大经济损失的疾病,如今仍无有效防控方法。长链非编码RNA(LncRNA)既可以直接作用于m RNA,又可以通过调控mi RNA而间接作用于m RNA,从而影响下游靶基因及蛋白表达。LncRNA功能强大,广泛参与了染色体重构、核小体修饰、可变剪接、基因组印记、靶标模拟、功能性蛋白转运、转录干扰、细胞周期及分化等多种机体重要的生理和病理学调控过程。研究证实,lncRNA在奶牛乳腺炎中发挥重要作用。本文综述了奶牛乳腺炎和lncRNA的研究背景、lncRNA的生物学功能、lncRNA在奶牛乳腺炎体内外模型中的作用、lncRNA介导奶牛乳腺炎相关信号通路的机制,并对lncRNA在乳腺炎等炎性疾病的研究与应用前景方面进行了展望。

关键词：奶牛乳腺炎长链非编码RNA 研究进展

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牛球虫病的研究进展

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中国兽医学报 2022年第7期42卷 1504-1509页

作者：叶莉莎陈俭胡敏华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070

牛球虫病(coccidiosis in cattle)是由艾美耳属的几种球虫寄生于牛肠道引起的以急性肠炎、血痢等为特征的寄生虫病。它虽然不像一些烈性传染病和重要寄生虫病的危害那么严重,但是给养殖业造成的损失也不容忽视。目前,由于药物的大量使... 详细信息

牛球虫病(coccidiosis in cattle)是由艾美耳属的几种球虫寄生于牛肠道引起的以急性肠炎、血痢等为特征的寄生虫病。它虽然不像一些烈性传染病和重要寄生虫病的危害那么严重,但是给养殖业造成的损失也不容忽视。目前,由于药物的大量使用以及养殖模式的改变,牛球虫病的防制面临新的挑战。通过对牛球虫的生活史、牛球虫病的流行病学、防控及牛球虫分子生物学等方面研究进展的综述,以期为未来牛球虫病的综合防控提供参考。

关键词：牛球虫病艾美耳球虫流行病学防控

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副猪嗜血杆菌Flp-FRT双基因敲除方法的建立与优化

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畜牧兽医学报 2022年第1期53卷 219-230页

作者：肖静肖坤雪王翘楚陈焕春蔡旭旺徐晓娟华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北省预防兽医学重点实验室武汉430070

本研究旨在利用Flp-FRT位点特异性重组系统建立副猪嗜血杆菌(Glaesserella parasuis)的无抗性标记基因敲除方法,为***的毒力因子、致病机制和基因工程疫苗研究提供有力的遗传操作工具。首先利用λ噬菌体cI857/P_(RM)/P_(R)基因表达调控... 详细信息

本研究旨在利用Flp-FRT位点特异性重组系统建立副猪嗜血杆菌(Glaesserella parasuis)的无抗性标记基因敲除方法,为***的毒力因子、致病机制和基因工程疫苗研究提供有力的遗传操作工具。首先利用λ噬菌体cI857/P_(RM)/P_(R)基因表达调控系统调控Flp重组酶的表达,实现抗性突变体中抗性基因的消除;然后将Flp表达质粒电转化引入*** CF7066,再自然转化介导同源重组的自杀性质粒获得有抗性标记的基因缺失突变株,调节Flp酶表达并筛选无抗突变株,提高培养温度消除表达Flp酶的温敏质粒;进一步通过筛选突变FRT位点以保证基因敲除的效率。结果表明成功构建了温敏穿梭质粒pSHG5C-Flp,证实了λcI857/P_(RM)/P_(R)表达系统可调控Flp重组酶在***中表达并切除抗性突变株ΔnanH::Kan_(R)中的抗性基因;然后用Flp重组酶表达质粒pSHG5C-Flp电转化*** CF7066,再用自杀性质粒pKF-ΔnanH和pKF-Δapd2对其进行两次连续自然转化,依次在自然转化的初代转化子中筛选并获得了无抗的单基因缺失株ΔnanH和双基因缺失株ΔnanHΔapd,提高培养温度至42℃培养消除了Flp重组酶表达质粒。尽管该系统实现了***两个基因的连续敲除,但敲除第2个基因时的效率明显下降,这很可能源于细菌细胞中Flp重组酶表达的积累,对转化质粒介导的同源重组产生了干扰。因此,作者筛选了突变的FRT位点、构建自杀性质粒pKFM-Δapd进行自然转化,显著提高了自然转化后获得突变株的效率,从而保证了该敲除系统的有效性和稳定性。本研究首次报道了可用于***的无抗性标记双基因缺失突变系统,为其分子致病基因与基因工程疫苗的研究奠定了基础。

关键词：副猪嗜血杆菌表达调控 Flp-FRT 基因敲除无抗缺失

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长链非编码RNA CTO-S对伪狂犬病毒复制的影响

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微生物学报 2022年第2期62卷 754-763页

作者：苏乐段龙川姜慧付雯李林涛陈焕春刘正飞华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北洪山实验室湖北武汉430070 温州科技职业学院动物科学学院浙江温州325000

【目的】研究伪狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV)的长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)CTO-S对于病毒复制的影响。【方法】利用3′RACE和5′RACE鉴定CTO-S的全长序列。验证CTO-S是否具有编码多肽的能力。Red重组方法构建CTO-S... 详细信息

【目的】研究伪狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV)的长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)CTO-S对于病毒复制的影响。【方法】利用3′RACE和5′RACE鉴定CTO-S的全长序列。验证CTO-S是否具有编码多肽的能力。Red重组方法构建CTO-S缺失株以及回复突变株。分析野毒株、缺失株和回复突变株复制的差异。利用RNA pull down联合质谱的方法筛选与CTO-S互作的宿主蛋白。利用RNA免疫共沉淀(RNA immunoprecipitation,RIP)方法进行验证。最后利用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测野毒株、缺失株和回复突变株对细胞凋亡的影响。【结果】CTO-S全长267 bp,不具有编码多肽的能力。CTO-S缺失不影响PRV的复制。CTO-S与泛醇细胞色素c还原酶的组成部分cytochrome b-c1 complex subunit 1互作,诱导细胞凋亡。【结论】CTO-S对于PRV的复制是非必需的,CTO-S与泛醇细胞色素c还原酶的组成部分cytochrome b-c1 complex subunit 1互作,诱导细胞凋亡。

关键词：伪狂犬病毒长链非编码RNA CTO-S 突变株复制互作

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