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中国畜牧兽医学会2010学术年会暨第二届中国兽医临床大会

作者：李文涛李文洁刘淑清汪洋杨昆邹浩勇何启盖华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉 430070

本研究旨在建立一种针对猪圆环病毒2型特异、敏感的定量PCR方法.根据GsnBank中猪圆环病毒2型ORF 2基因序列的保守区域设计合成引物和探针，以该PMD-ORF2阳性重组质粒为标准品模板制作荧光定量PCR标准曲线.用该方法对临床采集的54份血清... 详细信息

本研究旨在建立一种针对猪圆环病毒2型特异、敏感的定量PCR方法.根据GsnBank中猪圆环病毒2型ORF 2基因序列的保守区域设计合成引物和探针，以该PMD-ORF2阳性重组质粒为标准品模板制作荧光定量PCR标准曲线.用该方法对临床采集的54份血清样品进行检测，并与常规PCR方法进行敏感性和特异性比较，结果显示：所建立的方法灵敏度可达10拷贝·μL-1，比常规PCR方法灵敏度高100倍，并且与猪细小病毒(PPV)、猪圆环病毒1型(PCV1)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)没有交叉反应;田间试验表明，54份血清样品中，常规PCR结果显示，50份呈PCR阳性;而荧光定量PCR检测结果显示，52份血清为阳性;其中50份PCR阳性的样品，定量PCR均为阳性.上述结果显示该方法适合用于PCV2的流行病学调查和临床诊断.

关键词：猪圆环病毒2型实时荧光定量PCR TaqMan探针

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ClfA亚单位疫苗对金黄色葡萄球菌诱导小鼠乳腺炎的保护力评价

ClfA亚单位疫苗对金黄色葡萄球菌诱导小鼠乳腺炎的保护力评价

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中国畜牧兽医学会2010学术年会暨第二届中国兽医临床大会

作者：胡长敏龚瑞继素坤郭爱珍华中农业大学动物医学院／农业微生物学国家重点实验室武汉 430070

金黄色葡萄球菌是引起该病主要致病菌.本研究通过制备金黄色葡萄球菌ClfA亚单位疫苗和金黄色葡萄球菌灭活疫苗，以小鼠为试验模型，分别进行ELISA、血清粘附试验、血清调理的中性粒细胞吞噬实验和乳腺内金黄色葡萄球菌灌注攻毒等实验.... 详细信息

金黄色葡萄球菌是引起该病主要致病菌.本研究通过制备金黄色葡萄球菌ClfA亚单位疫苗和金黄色葡萄球菌灭活疫苗，以小鼠为试验模型，分别进行ELISA、血清粘附试验、血清调理的中性粒细胞吞噬实验和乳腺内金黄色葡萄球菌灌注攻毒等实验.结果发现CIfA组较灭活组和对照组能够诱导机体产生的更高水平的IgG抗体、更强的粘附能力及免疫血清调理吞噬能力.哺乳小鼠乳腺金黄色葡萄球菌灌注后，ClfA免疫组乳腺细菌回收数目较灭活疫苗组和对照组明显降低.本研究证实了ClfA金黄色葡萄球菌亚单位疫苗比金黄色葡萄球菌灭活疫苗能对机体产生更强和更有效的保护力，初步评价了此亚单位疫苗的免疫效力和保护力.

关键词：奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌 ClfA亚单位疫苗

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猪病毒性腹泻的流行现状及防治策略

猪病毒性腹泻的流行现状及防治策略

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第十一届全国规模化猪场主要疫病监控与净化专题研讨会

作者：张坤徐丽丽库旭钢何启盖华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉 430070

在寒冷季节，猪流行性腹泻病毒(PEDV)，猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)及猪A群轮状病毒(RV-A)是引起猪腹泻的主要因素，具有高接触性传染的特点，严重影响饲料转化率，常造成严重的经济损失。本实验室利用己建立的猪流行性腹泻病毒(PEDV)、... 详细信息

在寒冷季节，猪流行性腹泻病毒(PEDV)，猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)及猪A群轮状病毒(RV-A)是引起猪腹泻的主要因素，具有高接触性传染的特点，严重影响饲料转化率，常造成严重的经济损失。本实验室利用己建立的猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)及猪A群轮状病毒(RV-A)多重RT-PCR检测方法分别对来自湖北、河南、湖南、江西、广西的197份腹泻粪样进行了鉴别诊断。鉴于2009年1月份至2010年2月份的腹泻样品检测结果，本文介绍了这三种病毒性腹泻的临床症状、流行现状和防治策略。

关键词：猪病毒性腹泻防治策略鉴别诊断临床症状

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表达O型口蹄疫病毒P12A3C基因的重组伪狂犬病毒的构建

表达O型口蹄疫病毒P12A3C基因的重组伪狂犬病毒的构建

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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会

作者：郝根喜张华伟杨应立赵俊娜曹齐树李祥敏钱平华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉 430070

伪狂犬病毒具有基因组容量大，有效表达外源基因多，安全并可以诱导有效的细胞免疫和体液免疫。到目前为止，已有多种外源基因以伪狂犬病毒为载体获得表达，并取得了良好的免疫效果。口蹄疫病毒前体衣壳蛋白(P1-2A)含有FMDV全部的免疫... 详细信息

伪狂犬病毒具有基因组容量大，有效表达外源基因多，安全并可以诱导有效的细胞免疫和体液免疫。到目前为止，已有多种外源基因以伪狂犬病毒为载体获得表达，并取得了良好的免疫效果。口蹄疫病毒前体衣壳蛋白(P1-2A)含有FMDV全部的免疫原性位点，并能在3C蛋白酶的作用下进行切割，加工，形成空衣壳。这种没有感染性核酸的空衣壳具有与全病毒相同的免疫效果，是今后口蹄疫基因工程疫苗发展的方向。本研究以伪狂犬病毒TK-/gE-/LacZ+为载体，构建了表达O型口蹄疫病毒衣壳前体蛋白(P1-2A)，3C蛋白酶基因的重组伪狂犬病毒，为研制口蹄疫基因工程疫苗候选株，最终为有效预防和控制口蹄疫流行奠定基础。

关键词： FMDV P12A3C基因重组病毒

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多西环素人工抗原的合成与鉴定

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中国兽药杂志 2010年第1期44卷 30-34,55页

作者：乐涛严佩峰王喜亮郭延成沈亚安毕丁仁华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室武汉430070 信阳农业高等专科学校动物科学系河南信阳464000

将多西环素（doxycycline，DOX）进行化学修饰引入羧基或氨基等活性基团，然后与牛血清白蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）偶联合成人工免疫原DOX—PABA—BSA、DOX—BSA和包被原DOX—PABA—OVA、DOX～OVA，并用紫外吸收（UV）、凝胶电泳（... 详细信息

将多西环素（doxycycline，DOX）进行化学修饰引入羧基或氨基等活性基团，然后与牛血清白蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）偶联合成人工免疫原DOX—PABA—BSA、DOX—BSA和包被原DOX—PABA—OVA、DOX～OVA，并用紫外吸收（UV）、凝胶电泳（SDS—PAGE）和EUSA方法对人工抗原进行鉴定；将合成的人工抗原DOX—PABA—BSA、DOX—BSA分别免疫BALB／C小鼠，用间接ELISA方法测定多抗（pAb）效价，用竞争ELISA方法鉴定其敏感性，用交叉反应试验鉴定其特异性。结果表明，二个免疫组6只小鼠血清抗体效价均在1：6400以上，DOXpAb对DOX的50％抑制浓度（IC50）在39．79～53．13μg/L，抗血清与四环素类药物交叉反应很低。本实验为建立多西环素ELISA残留免疫学检测方法和并制备多西环素试剂盒奠定了基础。

关键词：多西环素半抗原完全抗原合成鉴定

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基因芯片筛选肉鸡胫骨软骨发育不良差异表达基因

基因芯片筛选肉鸡胫骨软骨发育不良差异表达基因

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中国畜牧兽医学会2010学术年会暨第二届中国兽医临床大会

作者：田文霞郭定宗李家奎覃平王瑞宁官保乔建钢李宏全毕丁仁潘思轶华中农业大学动物医学院湖北武汉 430070 山西农业大学动物科技学院山西太谷 030801 华中农业大学食品科技学院湖北武汉 430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉 430070 山西农业大学动物科技学院山西太谷 030801 华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室湖北武汉 430070 华中农业大学食品科技学院湖北武汉 430070

为研究肉鸡胫骨软骨发育不良发病机理，本文应用基因芯片技术筛选福美双诱导的胫骨软骨发育不良早期的差异表达基因。提取对照组和饲喂福美双组第1、2、6天的生长板总RNA，分别与18张基因芯片杂交，采用real-time PCR对7个基因进行差异... 详细信息

为研究肉鸡胫骨软骨发育不良发病机理，本文应用基因芯片技术筛选福美双诱导的胫骨软骨发育不良早期的差异表达基因。提取对照组和饲喂福美双组第1、2、6天的生长板总RNA，分别与18张基因芯片杂交，采用real-time PCR对7个基因进行差异表达验证。结果表明，基因芯片筛选到第1，2、6天1.5倍以上差异表达基因敷分别为108、385和468。赖氨酸氧化酶(LOX)、热休克蛋白25(Hsp25)、DNA结合1抑制剂(ID1)、动联蛋白1(KTN1)、分泌性卷曲相关蛋白(SFRP4)、钙黏蛋白1(CDH1)和烯醇酶2(ENO2)等7个基因上调表达与芯片结果一致。为认识肉鸡TD的病因、从分子水平阐明其发病机制提供了可靠的生物信息学依据。

关键词：福美双肉鸡胫骨软骨发育不良基因芯片技术差异表达基因

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我国南方部分省市仔猪球虫病的流行病学调查

我国南方部分省市仔猪球虫病的流行病学调查

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第十一届全国规模化猪场主要疫病监控与净化专题研讨会

作者：张文杰周艳琴赵俊龙孙志勇唐万勇刘莹莹徐林海李法财张庆丽熊冰清宋淇淇农业微生物学国家重点实验室华中农业大学动物医学院拜耳(四川)动物保健有限公司

应用饱和食盐水溶液漂浮法,对我国南方部分省市10个地区30个猪场仔猪298份粪样进行球虫病的流行病学调查。结果发现,仔猪球虫阳性场占66.67％(20／30),猪场内阳性率096～60.00％,总阳性率15.77％。经初步鉴定,感染球虫的种类主要为混合... 详细信息

应用饱和食盐水溶液漂浮法,对我国南方部分省市10个地区30个猪场仔猪298份粪样进行球虫病的流行病学调查。结果发现,仔猪球虫阳性场占66.67％(20／30),猪场内阳性率096～60.00％,总阳性率15.77％。经初步鉴定,感染球虫的种类主要为混合感染,共有2个属6个种,为猪等孢球虫、蒂氏艾美耳球虫、猪艾美耳球虫、粗糙艾美耳球虫、平滑艾美耳球虫、极细艾美耳球虫。其感染率依次为48.93％、40.43％、19.15％、10.64％、29.79％、14.89％。

关键词：仔猪球虫病流行病学调查感染率

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一例奶牛发生牛支原体肺炎的诊断

一例奶牛发生牛支原体肺炎的诊断

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第五届中国牛业发展大会

作者：胡长敏彭清洁陈颖钰巴晓亮白智迪郭爱珍华中农业大学动物医学院国家肉牛产业技术体系疾病控制功能研究室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

牛支原体是严重影响养牛业发展的重要病原。2008年我们报道牛支原体导致"肉牛传染性牛支原体肺炎"以来,主要在肉牛发现该病。本文从临床出现类似症状的运输后发病奶牛采集样本,经细菌培养和支原体培养、特异性PCR扩增和16s r... 详细信息

牛支原体是严重影响养牛业发展的重要病原。2008年我们报道牛支原体导致"肉牛传染性牛支原体肺炎"以来,主要在肉牛发现该病。本文从临床出现类似症状的运输后发病奶牛采集样本,经细菌培养和支原体培养、特异性PCR扩增和16s rRNA测序等病原学检测证实为牛支原体感染。

关键词：牛支原体奶牛感染呼吸系统疾病

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一例奶牛牛支原体乳房炎的诊断

一例奶牛牛支原体乳房炎的诊断

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第五届中国牛业发展大会

作者：彭清洁胡长敏陈颖钰巴晓亮白智迪郭爱珍华中农业大学动物医学院国家肉牛产业技术体系疾病控制功能研究室华中农业大学农业微生物学国家重点实验室

牛支原体(Mycoplasma bovis)是引起成牛乳房炎和犊牛肺炎、关节炎的主要病原之一。本文从有乳房炎临床症状的奶牛中采集牛奶样本,经细菌培养和支原体培养、特异性PCR与LAMP扩增和16s rRNA测序等病原学检测证实为牛支原体感染,同时还有... 详细信息

牛支原体(Mycoplasma bovis)是引起成牛乳房炎和犊牛肺炎、关节炎的主要病原之一。本文从有乳房炎临床症状的奶牛中采集牛奶样本,经细菌培养和支原体培养、特异性PCR与LAMP扩增和16s rRNA测序等病原学检测证实为牛支原体感染,同时还有其它细菌的混合感染。

关键词：奶牛牛支原体感染乳房炎

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猪胸膜肺炎放线杆菌转铁结合蛋白基因(TbpB)分析及建模

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生物信息学 2010年第1期8卷 47-51页

作者：李任峰田香勤何启盖胡建和赵朴李学斌王三虎河南科技学院动物科学学院新乡453003 新乡医学院医学研究中心新乡453003 华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室动物病原分室武汉430070

为了深入研究猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumonie,App)转铁结合蛋白基因(Transferrin Binding Proteins,Tbp)的生物学特性,采用生物信息学方法,对GenBank中的5株App的TbpB的核酸及其氨基酸序列进行比对,选取其中的中国... 详细信息

为了深入研究猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumonie,App)转铁结合蛋白基因(Transferrin Binding Proteins,Tbp)的生物学特性,采用生物信息学方法,对GenBank中的5株App的TbpB的核酸及其氨基酸序列进行比对,选取其中的中国湖北分离株(JL03)对其分子结构、理化性质及功能域、蛋白质二级和三级结构等重要参数进行了预测和分析,并在三级结构的基础上进行了同源建模。结果表明,不同APP菌株之间核酸序列相似性较大,而氨基酸序列存在较大差异,二级结构以延伸链和随机卷曲为主要构件,其空间结构与脑膜炎双球菌GNA1870蛋白相似性较高,以此为模板成功构建了三维结构分子模型,为TbpB基因功能的深入研究提供了线索和参考依据。

关键词：猪胸膜肺炎放线杆菌脚B基因同源建模

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