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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：王旭白毅杰程古月郝海红刘振利袁宗辉华中农业大学国家兽药残留基准实验室(HZAU)/农业部食品安全评价重点开放实验室华中农业大学动物医学院

喹烯酮是人工合成、含有喹噁啉-l,4-二氧化物基本结构的化学合成抗菌药物,在提高饲料转化率、促进动物生长方面具有相当好的活性。高剂量喹烯酮对肾上腺具有损伤作用。为阐述喹烯酮对肾上腺的毒性机制,以人肾上腺皮质癌细胞NCI-H295R细... 详细信息

喹烯酮是人工合成、含有喹噁啉-l,4-二氧化物基本结构的化学合成抗菌药物,在提高饲料转化率、促进动物生长方面具有相当好的活性。高剂量喹烯酮对肾上腺具有损伤作用。为阐述喹烯酮对肾上腺的毒性机制,以人肾上腺皮质癌细胞NCI-H295R细胞系为细胞模型进行基因组学研究。结果显示,10μM喹烯酮处理组与空白组相比有349个差异表达基因,其中上调基因有210个(名称和功能己知的基因有150个),下调基因有139个(己知基因有98个);20μM喹烯酮处理组与空白组相比有4583个差异表达基因,上调的有2835个(名称和功能已知的基因有1931个),下调的有1748个(已知基因有1095个)。将这些差异基因按生物学进程分为6类:与细胞内物质和能量合成代谢相关、与转运相关、与细胞应激相关、与信号转导相关、与细胞发育过程相关及与转录调控相关。分析相关基因功能,与无机离子、氨基酸、神经递质、糖类、嘌呤和脂肪酸等物质转运相关的基因的表达量发生改变,提示喹烯酮干扰了细胞内正常的生命活动。参与类固醇激素合成和代谢的基因表达量也发生了改变,特别是与胆固醇合成相关的一些基因的表达量均上调,而负责将胆固醇外排出细胞的脂质转运体也发生上调表达;同时,胆固醇合成原料乙酰辅酶A提供者-脂肪酸在一种高度上调表达的SREBF1的作用下合成甘油三酯的进程加剧,三者协同作用影响醛固酮合成原料-胆固醇的浓度;控制类固醇激素合成方向的基因CYP17A1表达量上调,导致醛固酮合成受阻;另外调控CYP11B2转录的一种重要转录因子NR4A2的表达量下调,抑制其转录;同时与氧化应激相关的一些基因表达量下调,提示QCT可能通过抑制Nrf2/Keap1/ARE通路的下游基因NQO1、HMOX1、G6PD和SRXN1等的表达,加剧药物造成的氧化应激现象,进而造成ROS的大量蓄积,引起肾上腺皮质细胞毒性。综上所述,本研究首次运用基因组技术发现ABCG1、SREBF1等与调控胆固醇浓度的相关基因及CYP1 7A1、NR4A2、G6PD等与醛固酮合成相关基因是喹烯酮下调醛固酮合成和分泌的重要分子靶点。

关键词：喹烯酮 H295R细胞毒性醛固酮基因组肾上腺

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喹赛多在猪体内残留的生理药动学预测模型研究

喹赛多在猪体内残留的生理药动学预测模型研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：黄玲利林周梦周璇祝美玲 Ronette Gehring Jim E.Riviere 袁宗辉农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室(武汉) 美国堪萨斯州立大学兽医学院信息化比较药理学研究中心华中农业大学动物医学院国家兽药残留基准实验室(HZAU)/农业部兽药残留检测重点实验室

生理药动学模型(PBPK)是预测药物在食品动物体内组织分布与消除的有效工具。目前PBPK模型在食品安全领域的应用主要集中于预测原形药物的残留消除,对于代谢物的残留预测鲜有报道。本研究首次构建了能同时描述喹赛多(Cyadox,CYA)及其残... 详细信息

生理药动学模型(PBPK)是预测药物在食品动物体内组织分布与消除的有效工具。目前PBPK模型在食品安全领域的应用主要集中于预测原形药物的残留消除,对于代谢物的残留预测鲜有报道。本研究首次构建了能同时描述喹赛多(Cyadox,CYA)及其残留标志物脱二氧喹赛多(Bisdesoxycyadox,BDCYA)在猪体内残留消除动态过程的PBPK模型。该模型包括CYA和BDCYA两个子模型,各子模型分别设置7个房室,包括血液、肝脏、肾脏、胃肠道、肌肉、脂肪和其他组织。模型假设CYA和BDCYA的分布仅受到血流速率限制,肝脏和肠道均可代谢发生代谢,主要经粪、尿和胆汁消除。通过文献调研获得猪各项生理参数和部分药动学参数。采用平衡透析法和稳态给药法分别测定了CYA和BDCYA的血浆蛋白结合率与组织/血浆分配系数,通过静脉输注给药测定CYA和BDCYA的肾清除率。利用文献报道的喹赛多口服给药5天的药动学和残留消除数据构建出CYA和BDCYA模型,然后外推至连续2个月混饲给药的暴露方式,最后利用连续混饲给药14天的残留消除数据对模型预测的准确性进行验证。结果表明,模型能同时准确模拟喹赛多和脱二氧喹赛多在口服和混饲两种给药方式下肌肉、肝脏、肾脏和脂肪中停药后24-120h的残留消除特征。模型对混饲给药后6-12h肌肉中CYA和肾脏中BDCYA残留量的预测偏高。灵敏度分析表明,体重、吸收速率常数、生物利用度、肝脏代谢速率常数、肠道代谢速率常数、肾清除率均对模型预测结构有显著影响。蒙特卡洛分析结果表明,模型预测的CYA和BDCYA在各组织中残留量的分布范围较好地涵盖了目前文献报道的实测结果,证明模型具有良好的适用性。本研究构建的PBPK模型为喹赛多在食品动物的残留监控提供了新型预测手段,同时为实现PBPK模型同时预测兽药原形及其代谢物在食品动物体内的残留奠定了良好的基础。

关键词：喹赛多脱二氧喹赛多 PBPK模拟组织消除残留预测灵敏度分析蒙特卡洛分析

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香烟烟雾暴露对中国树鼩肺脏、心肌及支气管CXCR4,MHC-1,TNF-α,MCP mRNA表达的影响

香烟烟雾暴露对中国树鼩肺脏、心肌及支气管CXCR4,MHC-1,TNF-α,M...

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第十五届中南地区实验动物科技交流会

作者：周顺长吴健鸿张景辉袁宗辉曾繁典华中科技大学同济医学院实验动物学部湖北武汉430030 华中科技大学同济医学院临床药理研究所湖北武汉430030 华中科技大学同济医学院附属协和医院普外科湖北武汉430022 华中农业大学国家兽药残留基准实验室湖北武汉430070

目的：观察香烟烟雾暴露对中国树鼩(Tupaia Belangeri Chinensis)肺脏、心肌及支气管CXCR4、MHC-1、TNF-α、MCP mRNA 表达的影响，探讨香烟烟雾与炎性病理相关细胞因子表达量的影响，建立中国树鼩烟雾暴露动物模型生物学标志物的评价... 详细信息

目的：观察香烟烟雾暴露对中国树鼩(Tupaia Belangeri Chinensis)肺脏、心肌及支气管CXCR4、MHC-1、TNF-α、MCP mRNA 表达的影响，探讨香烟烟雾与炎性病理相关细胞因子表达量的影响，建立中国树鼩烟雾暴露动物模型生物学标志物的评价方法。

关键词：烟雾暴露树鼩 CXCR4 MHC-1 TNF-α MCP

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启发式教学在动物毒理学教学中的应用

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科技创新导报 2014年第21期11卷 164-165页

作者：程古月王旭郝海红谢书宇翟玮华中农业大学动物医学院国家兽药残留基准实验室(HZAU) 湖北武汉430070

动物毒理学是一门理论和实践兼具的科学,也是一门新兴交叉性学科。将启发式教学方式引入动物毒理学的理论和实践教学中,使得学生由被动学习变为主动学习,学习质量明显提高,师生双方相互沟通和启发,实现"教学相长"。

关键词：启发式理论教学实践教学考核方式

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喹烯酮的食品安全性研究进展

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中国兽药杂志 2013年第6期47卷 56-59页

作者：黄玲利李娟王旭潘源虎袁宗辉国家兽药残留基准实验室(HZAU)/农业部兽药残留检测重点实验室华中农业大学动物医学院武汉430070

概述了喹烯酮的临床前毒理学研究进展及代谢与残留研究现状,分析了存在的问题,提出了开展深入研究的内容与方法,为进一步完善喹烯酮的食品安全性评价,建立科学的食品安全性标准提供参考。

关键词：喹烯酮毒理学代谢残留食品安全性评价

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欧盟兽用抗菌药耐药性管理概述

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中国兽药杂志 2013年第2期47卷 38-42页

作者：张苗苗戴梦红黄玲利王玉莲袁宗辉湖北生物科技职业学院动物科学系武汉430070 华中农业大学动物科技-动物医学院国家兽药残留基准实验室武汉430070

介绍负责管理欧盟兽用抗菌药耐药性的欧洲药品局下设的兽用药品委员会、健康与消费者保护司和食品安全局等相关管理机构以及成立耐药性管理工作组、进行耐药性风险分析、制定相关文件和实施耐药性监测等的管理措施,为我国兽药耐药性相... 详细信息

介绍负责管理欧盟兽用抗菌药耐药性的欧洲药品局下设的兽用药品委员会、健康与消费者保护司和食品安全局等相关管理机构以及成立耐药性管理工作组、进行耐药性风险分析、制定相关文件和实施耐药性监测等的管理措施,为我国兽药耐药性相关政策的制定和措施的实行提供参考。

关键词：欧盟兽用抗菌药耐药性管理机构管理措施

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快速溶剂萃取和高效液相色谱-串联质谱法测定动物源食品中黄曲霉毒素和赭曲霉毒素

快速溶剂萃取和高效液相色谱-串联质谱法测定动物源食品中黄曲霉...

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2013年中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十二次学术讨论会

作者：陈冬梅曹小琴陶燕飞潘源虎刘振利黄伶俐王玉莲袁宗辉农业部兽药残留检测重点实验室/国家兽药残留基准实验室(HZAU) 华中农业大学动物医学院 430070

[目的]黄曲霉毒素和赭曲霉毒素具有多种毒性,对人和动物健康有很大的潜在危害.因此对这些真菌毒素进行残留监控十分必要.目前没有同时检测动物源性食品中7种霉菌毒素残留方法的报道.本方法旨在应用高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法建... 详细信息

[目的]黄曲霉毒素和赭曲霉毒素具有多种毒性,对人和动物健康有很大的潜在危害.因此对这些真菌毒素进行残留监控十分必要.目前没有同时检测动物源性食品中7种霉菌毒素残留方法的报道.本方法旨在应用高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法建立动物性食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1、M2和赭曲霉毒素A的多残留检测方法.[方法]样品采用快速溶剂萃取,HLB固相萃取柱净化.快速溶剂萃取条件是：11mL萃取斧,萃取溶剂乙腈/正己烷,萃取压力1500psi.采用C18色谱柱分离,乙腈和甲酸溶液为流动相,LC-MS/MS检测.[结果]黄曲霉毒素和赭曲霉毒素在动物源食品中检测限为0.07μg/kg ～0.59μg/kg,回收率大于60％,批间变异系数小于20％.[结论]本方法首次采用快速溶剂萃取提取动物源食品中黄曲霉毒素和赭曲霉毒素,样品前处理简单,方法回收率高,易于实现自动化操作,有机试剂用量少.本方法采用LC-MS/MS同时测定7种霉菌毒素,检测限低,特异性好,方法性能参数满足兽药残留监控要求.本方法弥补了真菌毒素在动物性食品中定量确证检测方法的空白,为保障人类和动物健康具有十分重要的意义.

关键词：黄曲霉毒素赭曲霉毒素高效液相色谱-串联质谱快速溶剂萃取动物源食品

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喹赛多在大鼠、猪、鸡和鱼肠道中的代谢研究

喹赛多在大鼠、猪、鸡和鱼肠道中的代谢研究

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2013年中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十二次学术讨论会

作者：黄玲利胥宁潘源虎陈冬梅刘振利袁宗辉国家兽药残留基准实验室(HZAU)/农业部兽药残留检测重点实验室华中农业大学动物医学院武汉430070

[目的]肠道是喹噁啉类药物主要作用部位.为探讨喹噁啉类新品种喹赛多的肠道代谢特点,研究了喹赛多在猪、鸡、鱼和大鼠肠微粒体、肠黏膜、结肠内容物和回肠内容代谢体系中的代谢,为全面揭示喹赛多代谢及药理学机制提供理论依据.[方法]猪... 详细信息

[目的]肠道是喹噁啉类药物主要作用部位.为探讨喹噁啉类新品种喹赛多的肠道代谢特点,研究了喹赛多在猪、鸡、鱼和大鼠肠微粒体、肠黏膜、结肠内容物和回肠内容代谢体系中的代谢,为全面揭示喹赛多代谢及药理学机制提供理论依据.[方法]猪、鸡、鱼、大鼠肠微粒体和肠道黏膜与NADPH再生系统进行孵育,采用CYP3A探针药物硝苯地平验证体系活性.厌氧条件下制备结肠内容物和回肠内容物体外孵育液,通过对肠道细菌典型代表菌计数及与探针酶底物孵育验证体系的代谢活性.在此基础上分别考察喹赛多在各体系中的代谢特点.[结果]喹赛多在四种动物肠微粒体和黏膜代谢中无明显差异,主要发生脱氧代谢.四种动物肠微粒体中均只发现脱一氧代谢物(Cy2);猪、鸡和大鼠肠黏膜中均发现脱二氧代谢产物(Cyl)和脱一氧代谢物(Cy2和Cy10);鱼肠黏膜中发现Cy1和Cy2.猪和鸡结肠内容物中发现Cy1和Cy2外,还发现侧链代谢物Cy4和Cy5,大鼠结肠内容物中还发现Cy10,鱼肠道中另发现侧链氢化代谢物***1和Cy4是猪、鸡和大鼠结肠细菌代谢系统中的主要代谢物.猪、鸡和大鼠回肠内容物中均检测到Cy1、Cy2和Cy10,还检出水解代谢物Cy13和羟化代谢物Cy16.[结论]肠道是喹赛多代谢的重要位点.喹赛多在肠黏膜和微粒体中只发生脱氧代谢,在肠道细菌中主要发生脱氧和氢化代谢.肠道对喹赛多的代谢能力依次为：结肠细菌＞回肠细菌＞肠黏膜＞肠微粒体.

关键词：喹赛多 LC/MS-IT-TOF 代谢肠微粒体肠粘膜肠内容物

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喹烯酮在大鼠、猪和鸡体内的代谢研究

喹烯酮在大鼠、猪和鸡体内的代谢研究

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2013年中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十二次学术讨论会

作者：李娟黄玲利袁宗辉国家兽药残留基准实验室(HZAU)/农业部兽药残留检测重点实验室华中农业大学动物医学院武汉湖北430070

[目的]喹烯酮(Quinocetone)是中国农科院兰州畜牧与兽药研究所研制的畜禽抗菌、止泻、促生长新药,是我国首创的一类动物专用药,但迄今无残留靶组织、残留标示物等食品安全性标准.本研究采用放射性示踪技术和液质联用技术,开展[3H]-喹烯... 详细信息

[目的]喹烯酮(Quinocetone)是中国农科院兰州畜牧与兽药研究所研制的畜禽抗菌、止泻、促生长新药,是我国首创的一类动物专用药,但迄今无残留靶组织、残留标示物等食品安全性标准.本研究采用放射性示踪技术和液质联用技术,开展[3H]-喹烯酮在大鼠、猪和鸡体内的代谢研究,旨在阐明喹烯酮的体内特点和可能的代谢机制,探讨其代谢的种属差异,为评价喹烯酮的食品安全性提供理论依据.[方法]大鼠、猪和鸡按200mg/kg饲料单次灌服氚标喹烯酮,收集给药后不同时间段粪尿.测定各样品中放射性物质含量变化.样品提取净化后,采用LC/MS-IT-TOF对样品中化合物进行分离和鉴定.[结果]65％以上药物经粪便排泄.给药后72h,80％以上药物排出体外,14d内,药物排出率达95％,即达到物料平衡.大鼠和猪尿排泄率分别为25.0％和27％,粪排泄率均为65％.在大鼠、猪和鸡体内分别发现5种代谢物.喹烯酮在动物体内主要发生N1和N4-脱氧、羰基还原、双键还原和苯环羟基化.[结论]喹烯酮在动物体内吸收、排泄迅速,主要经粪便排泄.在动物体内可发生广泛代谢,代谢产物存在种属差异.本研究为评价喹烯酮食品安全性提供了科学可靠的资料,为揭示喹烯酮药理和毒性作用机制奠定了理论基础.

关键词： [3H]-喹烯酮示踪物料平衡 LC/MS-IT-TOF 代谢

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甲氧西林耐药金葡菌的关键基因成分和调控系统研究进展

甲氧西林耐药金葡菌的关键基因成分和调控系统研究进展

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2013年中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十二次学术讨论会

作者：郝海红戴梦红王玉莲黄伶利袁宗辉国家兽药残留基准实验室(华中农业大学)/农业部食品兽药残留检测重点实验室湖北省武汉市洪山区华中农业大学动物医学院 430070

超级细菌MRSA,包括医源性-MRSA(HA-MRSAs)、社区源性MRSA(CA-MRSA)和家畜源性MRSA(LA-MRSA),具有多重耐药性、高致病性和高转移性,给动物和人类健康造成了巨大的威胁.MRSA对β-内酰胺类药物的耐药机制包括表达β-内酰胺酶和PBP2a蛋白.β... 详细信息

超级细菌MRSA,包括医源性-MRSA(HA-MRSAs)、社区源性MRSA(CA-MRSA)和家畜源性MRSA(LA-MRSA),具有多重耐药性、高致病性和高转移性,给动物和人类健康造成了巨大的威胁.MRSA对β-内酰胺类药物的耐药机制包括表达β-内酰胺酶和PBP2a蛋白.β-内酰胺酶的表达受blaZblaI-blaR1的调控.PBP2a的表达受mecA-mecI-mecRI系统调控.其他基因成分,如murE和femA,对介导β-内酰胺耐药性的贡作用机制尚待研究.金葡菌SCCmec基因盒的进化决定了MRSA的多重耐药性和流行性.Mec复合体和ccr复合体构成SCCmec基因盒的保守区.SCCmnec基因盒的可变区往往含有质粒(pT181,pUB110、p1258)、转座子(Tn554、Tn4001)和耐药基因(aacA-aphD、ermA)等.目前十多种SCCmec基因盒已被鉴别出来.质粒携带的cfr基因对MRSA的多重耐药性和转移性也具有重要意义.agr系统通过群体感应机制,调控PVL和δ-溶血素等毒力因子的表达,影响MRSA的致病性、生物被膜形成、SCVs形成以及异质性耐药.SaeR/S可影响毒力因子(hla,hlgA,hlgB,hlgC,sbi)和粘附因子的表达,并调控mecA基因的表达.VraSR系统可以正向调控细胞壁肽聚糖的合成.

关键词：甲氧西林耐药金葡菌 β-内酰胺类药物耐药机制基因表达调控系统

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