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中国毒理学会兽医毒理学委员会与中国畜牧兽医学会兽医食品卫生学分会联合学术研讨会暨中国毒理学会兽医毒理学委员会第5次全国会员代表大会

作者：戴梦红李俊程古月郝海红袁宗辉国家兽药残留基准实验室(HZAU)/农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室华中农业大学

【目的】鸡球虫病是养鸡生产中最常见、危害最大的一种流行性寄生虫病,由于普通的消毒方法难以彻底消灭环境中的球虫,因此球虫存在于任何养鸡的地方。恩诺沙星是养鸡生产中常用的广谱抗菌药,在养鸡实际生产中恩诺沙星和球虫感染会同时... 详细信息

【目的】鸡球虫病是养鸡生产中最常见、危害最大的一种流行性寄生虫病,由于普通的消毒方法难以彻底消灭环境中的球虫,因此球虫存在于任何养鸡的地方。恩诺沙星是养鸡生产中常用的广谱抗菌药,在养鸡实际生产中恩诺沙星和球虫感染会同时出现在鸡肠道内。本研究旨在通过建立人工感染鸡球虫病模型,采用不同剂量恩诺沙星处理后探讨球虫感染应激条件下鸡肠道大肠杆菌对恩诺沙星的耐药变化规律。【方法】本实验选用20只16日龄SPF健康雏鸡人工感染柔嫩艾美尔球虫,疾病模型构建成功后,将雏鸡随机分为一个空白对照组和三个给药组。雏鸡20日龄时开始经口灌服高剂量(100mg/kg)、中剂量(PK-PD剂量,4mg/kg)、低剂量(亚治疗剂量,0.1mg/kg)和0mg/kg恩诺沙星。给药周期为两轮,每轮给药7天,停药7天。分别在给药后第1d、4、7d,停药后第1、4、7d通过鸡肛门拭子采集新鲜粪便,重悬于无菌生理盐水后涂布在含恩诺沙星0mg/L、0.25 mg/L、0.5 mg/L和2mg/L麦康凯琼脂平板上,37℃恒温培养12h,记数平极克隆数(CFUs)。在计数平极上挑取单菌落,于伊红美蓝固体培养基上纯化后,挑取单菌落通过琼脂稀释法测定恩诺沙星对鸡肠道大肠杆菌的MIC。提取基因组DNA,PCR扩增耐药基因gyrA、gyrB、parC、parE、qnrA、qnrB、qnrS、aac6Ibcr、oqxAB、qepA并测序。【结果】低剂量给药组一直未出现敏感性下降的大肠杆菌;中剂量给药组在第二次给药期间出现耐药大肠杆菌,在停药后耐药菌数量又逐渐下降;高剂量给药组在第二次给药期间出现耐药大肠杆菌,停药后数量虽然有所下降但仍保持较高水平。在筛选出的570株鸡源肠道大肠杆菌中耐药菌株203株,低敏感菌株69株,敏感菌株298株。这些耐药菌株主要来自4mg/kg剂量组和100mg/kg剂量组,且都发生了gyrA的D87G突变,但gyrB、parE基因未发生突变。在gyrA双突变的情况下,只有MIC为16μg/mL的菌株中检测到了parC突变E84K,说明parC的突变E84K可以引起更高水平的耐药。而在MIC为4μg/mL、8μg/mL的耐药菌株中parC只出现了突变S80R。在敏感性下降和耐药菌株中均未检测出qnrA、qnrB、qnrS、aac6Ibcr、oqxAB、qepA基因,说明无耐药质粒介导的耐药机制。【结论】恩诺沙星对球虫感染鸡肠道大肠杆菌的耐药性产生了显著的影响,多次低剂量给药只能诱导出低敏感菌株,而多次高剂量给药可以诱导出鸡肠道大肠杆菌的高水平耐药,这些耐药菌以耐药基因突变为主,不产生耐药质粒介导的耐药机制。

关键词：恩诺沙星 SPF鸡球虫肠道大肠杆菌耐药性

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饲料添加剂检测方法研究进展

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中国畜牧兽医 2016年第7期43卷 1785-1791页

作者：朱愈斐谢书宇陈冬梅王玉莲潘源虎彭大鹏陶燕飞袁宗辉华中农业大学国家兽药残留基准实验室(HZAU)/农业部食品安全评价重点开放实验室武汉430070

随着畜牧业的发展,饲料添加剂的使用日益广泛,但饲料添加剂的乱用、滥用已成为当前饲料行业亟待解决的一大问题。作者综述了饲料添加剂中抗氧化剂、着色剂及严禁在饲料中使用的药物检测方法的研究进展,对目前饲料添加剂检测技术存在的... 详细信息

随着畜牧业的发展,饲料添加剂的使用日益广泛,但饲料添加剂的乱用、滥用已成为当前饲料行业亟待解决的一大问题。作者综述了饲料添加剂中抗氧化剂、着色剂及严禁在饲料中使用的药物检测方法的研究进展,对目前饲料添加剂检测技术存在的不足进行了分析,与此同时阐述了饲料添加剂高通量筛查技术的发展趋势,旨在评价饲料及动物可食性产品中饲料添加剂的检测技术,为绿色、安全的畜产品提供技术保障。

关键词：饲料添加剂抗氧化剂着色剂检测方法高通量技术

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饲料和畜禽产品中阿维菌素类药物快速检测技术研究进展

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中国畜牧兽医 2016年第9期43卷 2344-2351页

作者：倪腾腾彭大鹏谢书宇陈冬梅王玉莲潘源虎陶燕飞袁宗辉华中农业大学国家兽药残留基准实验室(HZAU)/农业部食品安全评价重点开放实验室武汉430070

阿维菌素类药物(AVMs)是目前应用最为广泛的抗寄生虫药物,但其在动物体内的残留时间较长,因此简单、快速、高灵敏度、高通量且低成本的残留快速检测方法尤为重要。作者综述了应用于饲料和畜禽产品中阿维菌素类药物残留检测的生物传感器... 详细信息

阿维菌素类药物(AVMs)是目前应用最为广泛的抗寄生虫药物,但其在动物体内的残留时间较长,因此简单、快速、高灵敏度、高通量且低成本的残留快速检测方法尤为重要。作者综述了应用于饲料和畜禽产品中阿维菌素类药物残留检测的生物传感器、生物芯片、荧光免疫分析法、免疫亲和色谱技术及酶联免疫吸附试验等快速检测技术,并对快速筛选方法的发展前景作出展望,以期对目前多残留筛选方法的选择和应用提供参考。

关键词：阿维菌素类药物饲料畜禽产品快速检测技术

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兽药喹噁啉类遗传毒性机制研究

兽药喹噁啉类遗传毒性机制研究

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中国畜牧兽医学会2017年学术年会

作者：刘倩莹雷志鑫罗讯王旭袁宗辉国家兽药残留基准实验室农业部兽药残留检测重点实验室农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室(武汉)华中农业大学动物医学院

引言喹噁啉类药物是一类具有广谱抗菌促生长作用的化合物,主要品种有卡巴氧、喹乙醇、乙酰甲喹、喹烯酮和喹赛多(Liu,et al.,2017)。尽管其遗传毒性的研究已开展多年,但研究的关注点主要在原型药物上,无法证实遗传毒性与原型和代谢物之... 详细信息

引言喹噁啉类药物是一类具有广谱抗菌促生长作用的化合物,主要品种有卡巴氧、喹乙醇、乙酰甲喹、喹烯酮和喹赛多(Liu,et al.,2017)。尽管其遗传毒性的研究已开展多年,但研究的关注点主要在原型药物上,无法证实遗传毒性与原型和代谢物之间的关系(Liu et al.,2016;Wang et al.,2015)。材料与方法我们采用四项遗传毒性组合实验,即小鼠淋巴瘤细胞基因突变实验,鼠伤寒沙门氏菌基因突变试验,体外染色体畸变实验,体内小鼠骨髓微核试验,对喹噁啉类的主要6个N-O基团还原的代谢物进行了遗传毒性研究。另外,采用小鼠淋巴瘤细胞基因突变实验对喹噁啉类的5个原型进行了遗传毒性评价。结果与讨论

关键词：喹噁啉类乙酰甲喹基因突变试验毒性机制

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恩诺沙星治疗鸡沙门氏菌感染对其肠道微生物多样性影响的研究

恩诺沙星治疗鸡沙门氏菌感染对其肠道微生物多样性影响的研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十四次学术讨论会

作者：戴梦红李俊程古月郝海红袁宗辉国家兽药残留基准实验室(HZAU)/农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室华中农业大学湖北武汉430070

[目的]兽用氟喹诺酮类药物恩诺沙星是治疗鸡沙门氏菌感染的重要药物,本实验旨在采用不同剂量恩诺沙星治疗鸡沙门氏菌感染,研究治疗过程中鸡肠道微生物菌群组成、结构和功能随给药的变化。[方法]本实验选用20只4日龄SPF健康雏鸡人工感染... 详细信息

[目的]兽用氟喹诺酮类药物恩诺沙星是治疗鸡沙门氏菌感染的重要药物,本实验旨在采用不同剂量恩诺沙星治疗鸡沙门氏菌感染,研究治疗过程中鸡肠道微生物菌群组成、结构和功能随给药的变化。[方法]本实验选用20只4日龄SPF健康雏鸡人工感染攻毒沙门氏菌CVCC541,疾病模型构建成功后,将雏鸡随机分为四组,每组5只,包括一个空白对照组和三个给药组。雏鸡8日龄时开始经口灌服高,中,低剂量恩诺沙星进行治疗。

关键词：恩诺沙星 16SrDNA测序肠道微生物多样性

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T-2毒素对GH3细胞的毒性研究

T-2毒素对GH3细胞的毒性研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十四次学术讨论会

作者：郭璞刘爱梅黄德玉戴梦红程古月袁宗辉王旭国家兽药残留基准实验室(华中农业大学)、农业部兽药残留检测重点实验室湖北武汉 430070 农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室(武汉)湖北武汉 430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉 430070

目的：为揭示T-2毒素引起动物生长迟缓、体重下降的原因,在GH3细胞上开展T-2毒素对该细胞的毒性研究. 方法：以GH3细胞为模型,MTT试验检测GH3细胞活力,实时荧光定量PCR检测T-2毒素处理GH3细胞后,抗氧化酶SOD、CAT和Gpx1的表达,LC-MS... 详细信息

目的：为揭示T-2毒素引起动物生长迟缓、体重下降的原因,在GH3细胞上开展T-2毒素对该细胞的毒性研究. 方法：以GH3细胞为模型,MTT试验检测GH3细胞活力,实时荧光定量PCR检测T-2毒素处理GH3细胞后,抗氧化酶SOD、CAT和Gpx1的表达,LC-MS/MS检测细胞内外T-2毒素的含量. 结果：细胞活力随T-2毒素的浓度和作用时间而降低.T-2毒素处理GH3细胞后,抗氧化酶SOD和Gpx1的表达极显著上升(p＜0.01).LC-MS/MS结果显示,细胞内T-2毒素的含量随着T-2毒素浓度的增加而增加,同时进入细胞内T-2毒素的比例也在增加. 结论：T-2毒素可能通过进入GH3细胞,并引起细胞的氧化应激而对细胞发挥毒性作用.

关键词：动物医学 T-2毒素细胞活力毒性评价

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不同剂量恩诺沙星对鸡沙门氏菌感染的临床疗效与耐药选择研究

不同剂量恩诺沙星对鸡沙门氏菌感染的临床疗效与耐药选择研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十四次学术讨论会

作者：李俊戴梦红程古月黄伶俐王旭郝海红袁宗辉国家兽药残留基准实验室(HZAU)/农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室华中农业大学湖北武汉430070

目的：考察恩诺沙星不同给药剂量对鸡沙门氏菌病的防治效果、鸡肠道共生菌大肠杆菌和致病菌沙门氏菌的耐药发生情况,探索氟喹诺酮类防治鸡沙门氏菌病并避免共生菌和致病菌产生耐药的方法. 方法：本实验首先采用药动/药效学(PK/PD)同... 详细信息

目的：考察恩诺沙星不同给药剂量对鸡沙门氏菌病的防治效果、鸡肠道共生菌大肠杆菌和致病菌沙门氏菌的耐药发生情况,探索氟喹诺酮类防治鸡沙门氏菌病并避免共生菌和致病菌产生耐药的方法. 方法：本实验首先采用药动/药效学(PK/PD)同步模型优化恩诺沙星治疗鸡沙门氏菌感染的给药方案,然后考察高(100mg/kg)、中(由PK/PD同步模型制定)、低(0.1mg/kg)剂量下恩诺沙星对人工感染鸡沙门氏菌疾病模型的临床疗效,同时对治疗过程中鸡肠道内沙门氏菌与大肠菌群对氟喹诺酮类药物的耐药发生进行观测. 结果：结果表明对于最小抑菌浓度(MICENR)为0.06μg/mL的沙门氏菌感染,为达到使病原菌减少3Log10CFU/mL的效果,推荐恩诺沙星给药剂量为4.04mg/kg,一天一次,口服给药5～7天.临床疗效试验结果表明高剂量恩诺沙星快速将沙门氏菌完全根除,但长期多次给药后引起鸡肠道共生大肠菌群高水平耐药(60.8％).PKPD剂量(4mg/kg)恩诺沙星给药7天可有效抑制沙门氏菌,但停药后出现沙门氏菌的继发感染,且实验后期对环丙沙星的敏感性有所下降,实验末期(39～42天)出现少量对恩诺沙星耐药的大肠菌株(5～9.5％). 结论：恩诺沙星低剂量给药对沙门氏菌无任何治疗作用,长期使用引起大肠菌群敏感性下降.因此,推荐恩诺沙星高剂量短期给药以达到有效治疗鸡沙门氏菌感染并防止细菌耐药发生目的.

关键词：鸡沙门氏菌感染恩诺沙星药效分析临床疗效

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艾地普林的急性毒性和亚慢性毒性研究

艾地普林的急性毒性和亚慢性毒性研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十四次学术讨论会

作者：王旭谈自强戴梦红程古月郝海红刘振利袁宗辉国家兽药残留基准实验室(华中农业大学)、农业部兽药残留检测重点实验室湖北武汉 430070 农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室(武汉)湖北武汉 430070 华中农业大学动物医学院湖北武汉 430070

[目的]通过急性经口毒性试验和亚慢性毒性试验评估该药的临床前毒理学，以期为艾地普林在临床中的应用提供依据。[方法]选用SPF 级Wistar 大鼠和昆明小鼠雌雄若干，经口灌喂艾地普林混悬液染毒，存活动物观察14天决定上下剂量顺序，记...

[目的]通过急性经口毒性试验和亚慢性毒性试验评估该药的临床前毒理学，以期为艾地普林在临床中的应用提供依据。[方法]选用SPF 级Wistar 大鼠和昆明小鼠雌雄若干，经口灌喂艾地普林混悬液染毒，存活动物观察14天决定上下剂量顺序，记录中毒反应及死亡情况，最终利用AOT425软件计算结果。亚慢性毒性试验选用5-6 周龄SPF 级Wistar 大鼠，混饲染毒13 周，最高剂量组2 周恢复期，剂量设置分别为ADP0、20、100和1000 mg/kg饲料。空白对照组和艾地普林1000 mg/kg饲料组每组雌雄各20 只;艾地普林20 和100 mg/kg 饲料组每组雌雄各15 只。每周固定时间称量大鼠体重及饲料剩余，计算摄食量及饲料利用率。

关键词：

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头孢喹肟对猪链球菌体外药效学及MSW研究

头孢喹肟对猪链球菌体外药效学及MSW研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十四次学术讨论会

作者：李梅黄玲利米坤孙达罗迅徐紫慧王玉莲袁宗辉农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室(武汉) 国家兽药残留基准实验室(HZAU)/农业部兽药残留检测重点实验室华中农业大学动物医学院430070

[目的]猪链球菌是一种呈现世界范围分布的人畜共患病原菌，传统治疗猪链球菌病的抗生素有大环内酯类、四环素类药物，但耐药性问题日益严重。头孢喹肟是动物专用第四代头孢菌素类抗生素，是治疗猪链球菌感染的首选药物。本研究开展头孢... 详细信息

[目的]猪链球菌是一种呈现世界范围分布的人畜共患病原菌，传统治疗猪链球菌病的抗生素有大环内酯类、四环素类药物，但耐药性问题日益严重。头孢喹肟是动物专用第四代头孢菌素类抗生素，是治疗猪链球菌感染的首选药物。本研究开展头孢喹肟对猪链球菌体外药效学和MSW的相关研究，建立野生型临床菌株体外耐药监测标准，为猪链球菌感染治疗和耐药菌株防控提供数据依据。

关键词：猪链球菌头孢喹肟体外药效学突变选择窗

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新基因CyaR在喹赛多促生长作用中的机制研究

新基因CyaR在喹赛多促生长作用中的机制研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十四次学术讨论会

作者：陆启荣郭菊黄爱新王旭王玉莲刘振利戴梦红袁宗辉国家兽药残留基准实验室(HZAU)/农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室华中农业大学湖北武汉430070

[目的]CyaR是一个与喹赛多作用相关的新基因，其在喹赛多的抗菌促生长作用中发挥怎样的作用尚未阐明。本研究通过分析喹赛多对CyaR基因的信号通路调控机制及该基因的功能，旨在为喹赛多的抗菌促生长作用提供分子生物学依据。[方法]以猪P... 详细信息

[目的]CyaR是一个与喹赛多作用相关的新基因，其在喹赛多的抗菌促生长作用中发挥怎样的作用尚未阐明。本研究通过分析喹赛多对CyaR基因的信号通路调控机制及该基因的功能，旨在为喹赛多的抗菌促生长作用提供分子生物学依据。[方法]以猪PK-15 细胞为细胞模型，研究喹赛多作用相关的新基因CyaR表达的时效关系;信号通路抑制剂分别抑制JAK、P38、PI3K、JNK、TGF-β、NF-κB和ERK信号通路，检测2 μM喹赛多处理细胞4 h后新基因CyaR的mRNA表达水平，研究喹赛多对CyaR基因表达进行调控的相关信号通路;构建新基因CyaR稳定表达和空载体克隆的PK-15细胞株，经2 μM喹赛多处理4 h后，应用微阵列筛选可能受CyaR调控的差异基因，同时用GO功能分析这些差异基因的功能并分析这些差异基因可能参与的信号通路。

关键词：喹赛多新基因CyaR 信号通路差异基因 GO功能分析

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