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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会

作者：郭金丽 Muhammad AB Shabbir 黄玲利潘源虎袁宗辉郝海红国家兽药残留基准实验室(华中农业大学)/农业部食品兽药残留检测重点实验室/华中农业大学农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室(武汉) 湖北省武汉市洪山区华中农业大学动物医学院

[背景]为了监测空肠弯曲杆菌耐药性产生,指导临床用药和新药的开发,本课题分析了空肠弯曲杆菌NCTC11168 cas9基因与抗菌素耐药性的关系。[材料方法]微量肉汤二倍稀释法检测了临床分离的17株空肠弯曲杆菌的MIC,MBC以及MPC。测序分析临床... 详细信息

[背景]为了监测空肠弯曲杆菌耐药性产生,指导临床用药和新药的开发,本课题分析了空肠弯曲杆菌NCTC11168 cas9基因与抗菌素耐药性的关系。[材料方法]微量肉汤二倍稀释法检测了临床分离的17株空肠弯曲杆菌的MIC,MBC以及MPC。测序分析临床分离株中CRISPR间隔序列。使用qRT-PCR检测细菌暴露于抗生素后,CRISPR基因表达量的变化。成功构建cas9基因缺失载体,以及补体突变菌株;肉汤稀释法检测cas9突变菌株对抗生素的敏感性以及其在含药和不含药的条件下,体外耐药性的产生和转移力差异。[结果与讨论]临床分离株(除AB172,AB173,AB191和AB192外)均显示对四环素耐药;所

关键词：空肠弯曲杆菌 CRISPR-cas 耐药性

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副猪嗜血杆菌对达氟沙星的耐药判定标准研究

副猪嗜血杆菌对达氟沙星的耐药判定标准研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会

作者：黄啸徐紫慧黄玲利谢书宇陶燕飞陈冬梅袁宗辉郝海红国家兽药残留基准实验室(华中农业大学)/农业部食品兽药残留检测重点实验室/华中农业大学农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室(武汉) 湖北省武汉市洪山区华中农业大学动物医学院

[背景]为更科学指导临床用药和有效监测副猪嗜血杆菌耐药性,本课题研究了副猪嗜血杆菌对达氟沙星的野生型临界值CO、药效学临界值CO和临床临界值CO,并制定了副猪嗜血杆菌对达氟沙星的耐药判定标准。[材料方法]琼脂稀释法对临床分离及其... 详细信息

[背景]为更科学指导临床用药和有效监测副猪嗜血杆菌耐药性,本课题研究了副猪嗜血杆菌对达氟沙星的野生型临界值CO、药效学临界值CO和临床临界值CO,并制定了副猪嗜血杆菌对达氟沙星的耐药判定标准。[材料方法]琼脂稀释法对临床分离及其它实验室赠送的143株副猪嗜血杆菌进行MIC测定,利用统计学分析软件对测得的MIC数据进行非线性回归分析确定其野生型折点CO。测定了体外和半体内环境中达氟沙星对副猪嗜血杆菌H80株药效学指标PD,特别是杀菌曲线。建立血浆药动模型和肺部

关键词：副猪嗜血杆菌氟沙星判定标准

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亚抑菌浓度抗生素对细菌耐药性和毒力影响的研究进展

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中国抗生素杂志 2018年第11期43卷 1321-1331页

作者：谷宇锋王淑歌郝海红戴梦红王旭程古月袁宗辉华中农业大学农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室武汉430070 国家兽药残留基准实验室(HZAU)/农业部兽药残留检测重点实验室武汉430070

细菌的耐药性和毒力是决定抗生素治疗成败的关键。近年来研究表明亚抑菌浓度抗生素可以诱导细菌耐药并影响细菌的毒力。本文介绍了亚抑菌浓度抗生素产生的来源;阐述了亚抑菌浓度抗生素对细菌耐药性和毒力的影响。亚抑菌浓度抗生素对细... 详细信息

细菌的耐药性和毒力是决定抗生素治疗成败的关键。近年来研究表明亚抑菌浓度抗生素可以诱导细菌耐药并影响细菌的毒力。本文介绍了亚抑菌浓度抗生素产生的来源;阐述了亚抑菌浓度抗生素对细菌耐药性和毒力的影响。亚抑菌浓度抗生素对细菌耐药性的影响涉及了细菌的耐药选择性、生物被膜和持留菌的形成、基因突变、水平基因转移和基因表达;对细菌毒力的影响主要包括细菌的黏附性、运动性和其它毒力因子。以期为畜牧生产中减少和避免亚抑菌浓度抗菌药的产生,减缓和克服细菌耐药性,降低致病菌的毒力提供参考。

关键词：亚抑菌浓度抗生素耐药性毒力

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氨基糖苷类对禽肠道细菌的耐药判定标准研究进展

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中国抗生素杂志 2018年第11期43卷 1332-1337页

作者：戴新予郝海红黄玲利谢书宇王旭刘振利彭大鹏袁宗辉国家兽药残留基准实验室(华中农业大学)农业部兽药残留检测重点实验室(华中农业大学)国家兽药安全评价实验室(华中农业大学)农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室(武汉) 武汉430070

禽消化道细菌病是危害养禽业的主要问题之一,沙门菌病、大肠埃希菌病等家禽肠道细菌病的流行日趋复杂,越来越难以控制,且不断出现新的流行与致病特点,不仅会造成严重肠道疾病而且会产生死亡。氨基糖苷类抗生素是高效、广谱抗生素,在临... 详细信息

禽消化道细菌病是危害养禽业的主要问题之一,沙门菌病、大肠埃希菌病等家禽肠道细菌病的流行日趋复杂,越来越难以控制,且不断出现新的流行与致病特点,不仅会造成严重肠道疾病而且会产生死亡。氨基糖苷类抗生素是高效、广谱抗生素,在临床上广泛应用,但是养殖业用药的不合理导致细菌的氨基糖苷耐药性日趋严重,这在很大程度上降低了其临床应用的潜力。而耐药监测需要判定标准,目前我国并没有相关标准,主要参考美国临床和实验室标准化协会(CLSI)和欧盟抗菌药物敏感性试验委员会(EUCAST)中的折点。当前CLSI和欧盟EUCAST标准中氨基糖苷类抗生素对禽消化道细菌病折点的制定并不完全,所以要全面建立符合我国国情的流行病学临界值和药效学临界值,为折点的制定工作提供科学数据,以监测耐药性的产生,分析耐药现状和发展规律,更科学地指导临床用药和新药开发。

关键词：消化道细菌氨基糖苷类抗生素耐药判定标准

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喹噁啉-1,4-N-二氧化物的抗微生物活性的研究进展

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中国新药杂志 2017年第2期26卷 179-186页

作者：程古月王旭潘源虎戴梦红郝海红袁宗辉华中农业大学农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室(武汉) 华中农业大学国家兽药残留基准实验室(HZAU)农业部食品兽药残留检测重点实验室

喹噁啉-1,4-N-氧化物(quinoxaline 1,4-di-N-oxides,Qd NOs)有多种生物活性,包括抗微生物、抗肿瘤、抗原虫和抗炎症/氧化等生物活性,此类化合物的多种活性使其在医药和农业领域有着广泛的用途和应用前景。本文将对Qd NOs的抗微生物活性... 详细信息

喹噁啉-1,4-N-氧化物(quinoxaline 1,4-di-N-oxides,Qd NOs)有多种生物活性,包括抗微生物、抗肿瘤、抗原虫和抗炎症/氧化等生物活性,此类化合物的多种活性使其在医药和农业领域有着广泛的用途和应用前景。本文将对Qd NOs的抗微生物活性研究进行综述,包括抗菌、抗分枝杆菌、抗真菌和抗支原体活性,并对其构效关系和作用机制进行讨论,为此类药物的研发提供理论依据。

关键词：喹噁啉-1,4-N-二氧化物抗菌抗结核抗念珠菌作用机制

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世界卫生组织、欧盟和中国抗生素耐药性监测现状

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中国抗生素杂志 2018年第6期43卷 665-674页

作者：程古月李俊谷宇锋贾思凡郝海红王旭刘振利戴梦红袁宗辉华中农业大学农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室(武汉) 武汉430070 华中农业大学动物医学院武汉430070 华中农业大学国家兽药残留基准实验室(HZAU)/农业部食品兽药残留检测重点实验室武汉430070

随着抗生素在人类和动物中的使用,抗生素耐药性已经成为一个危害健康的全球性问题。人类、动物和食品之间的活动,加强了耐药细菌及耐药基因的传播。本文综述了世界卫生组织、欧盟国家和我国近年来对来源于人医和兽医上的耐药细菌的监测... 详细信息

随着抗生素在人类和动物中的使用,抗生素耐药性已经成为一个危害健康的全球性问题。人类、动物和食品之间的活动,加强了耐药细菌及耐药基因的传播。本文综述了世界卫生组织、欧盟国家和我国近年来对来源于人医和兽医上的耐药细菌的监测现状。

关键词：抗生素耐药性监测

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乙酰甲喹破坏小鼠睾丸屏障的机制研究

乙酰甲喹破坏小鼠睾丸屏障的机制研究

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中国毒理学会第七次全国会员代表大会暨中国毒理学会第六次中青年学者科技论坛

作者：刘倩莹雷志鑫黄安雄王旭陆启荣 Khan Seead Ihsan Awais 袁宗辉国家兽药残留基准实验室(HZAU)/农业部兽药残留检测重点实验室/农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室(武汉) 华中农业大学动物医学院

【研究目的】乙酰甲喹又名"痢菌净",属于喹噁啉类合成药物,具有广谱抗菌促生长作用,因此被广泛应用于畜禽养殖业。近年来,越来越多的研究关注喹噁啉类的代谢与其毒性之间的关系,发现喹噁啉类N-O基团是其发挥抗菌活性的主要功... 详细信息

【研究目的】乙酰甲喹又名"痢菌净",属于喹噁啉类合成药物,具有广谱抗菌促生长作用,因此被广泛应用于畜禽养殖业。近年来,越来越多的研究关注喹噁啉类的代谢与其毒性之间的关系,发现喹噁啉类N-O基团是其发挥抗菌活性的主要功能基团,而喹噁啉类代谢物则是毒性产生的主导因素。研究表明,乙酰甲喹可以引起氧化应激,干扰性激素水平,造成大鼠睾丸损伤。乙酰甲喹在急性毒性、遗传毒性、亚慢性毒性、喂养致畸、繁殖毒性和致癌性等试验中均表现出较强的毒性,且被判定为遗传毒性致癌物。本实验的目的是通过观测MEQ对小鼠睾丸,精子和血睾屏障的损伤作用,鉴定乙酰甲喹代谢物在血液和睾丸中的分布,揭示乙酰甲喹穿透血睾屏障(BTB)和造成生精细胞破坏的分子机制。【方法】乙酰甲喹通过混饲给药,在日粮中添加浓度分别为25、55和110mg/kg,持续喂养11个月。采集血液和睾丸组织,通过HE染色和透射电镜观察睾丸的病理学变化;利用8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)和丙二醛(MDA)试剂盒检测血清氧化应激水平;采用液相与离子阱飞行时间质谱(LC/MS-ITTOF)联用技术,鉴定和比较乙酰甲喹在血液和睾丸组织中的代谢物;采用实时荧光定量PCR检测BTB结构基因(N-cadherin, a-catenin,β-catenin, Connexin-43, F11R, Occludin, ZO-1, CAR)的表达水平。【结果】乙酰甲喹引起8-OHdG和MDA显著增加,造成BTB结构损伤,线粒体空泡化,精子数目减少和形态异常。在血液内检测到乙酰甲喹的代谢物M4和M8,在睾丸组织内检测到M4。二级质谱鉴定M4和M8的结构式分别为N1-脱氧乙酰甲喹和N4-脱氧乙酰甲喹。另外,荧光定量PCR结果显示,乙酰甲喹引起BTB相关基因(N-cadherin, a-catenin,β-catenin, Connexin-43,F11R, Occludin, ZO-1, CAR)发生不同程度的改变。【结论】乙酰甲喹所致小鼠睾丸毒性与氧化应激和代谢物M4穿过BTB密切相关。M4可以穿过BTB,干扰BTB连接的相关基因,其中以紧密连接TJs和基底膜连接ESs为主要靶标。精子的生成需要大量线粒体供能,乙酰甲喹所致线粒体损伤是其导致精子异常的一个重要方面。另外,相对于M8,M4表现出较高的生殖毒性,这与M4所形成的具有较高稳定性的药物自由基密切相关。因此,本研究表明药物自由基的稳定性是喹噁啉类代谢与毒性的重要因素。

关键词：乙酰甲喹氧化应激生殖毒性遗传毒性血睾屏障代谢物

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乙酰甲喹对小鼠的遗传毒性和致癌性研究

乙酰甲喹对小鼠的遗传毒性和致癌性研究

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中国毒理学会第七次全国会员代表大会暨中国毒理学会第六次中青年学者科技论坛

作者：刘倩莹雷志鑫吴芹王旭袁宗辉国家兽药残留基准实验室(HZAU)/农业部兽药残留检测重点实验室/农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室(武汉)华中农业大学动物医学院

目的喹噁啉类药物是一类具有喹噁啉-1,4-二氧化物基本结构的化合物,主要品种有卡巴氧、喹乙醇、乙酰甲喹、喹烯酮和喹赛多。卡巴氧和喹乙醇由于具有潜在的遗传毒性和致癌性,已被欧盟禁用于饲料添加剂。前期对乙酰甲喹的毒理进行了研究,... 详细信息

目的喹噁啉类药物是一类具有喹噁啉-1,4-二氧化物基本结构的化合物,主要品种有卡巴氧、喹乙醇、乙酰甲喹、喹烯酮和喹赛多。卡巴氧和喹乙醇由于具有潜在的遗传毒性和致癌性,已被欧盟禁用于饲料添加剂。前期对乙酰甲喹的毒理进行了研究,包括急性毒性、遗传毒性、亚慢性毒性、喂养致畸、繁殖毒性和长期毒性等试验,结果表明乙酰甲喹具有较强的毒性和潜在的致癌性,在临床使用中存在一定的安全隐患。乙酰甲喹的原型及其代谢物的遗传毒性均高于卡巴氧的原型及其代谢产物。因此,本课题进行了乙酰甲喹的遗传毒性和致癌性的研究。方法本研究采用昆明小鼠400只,随机分为4组,每组雌雄各50只,混饲给药,乙酰甲喹在日粮中添加浓度分别为0、25、55和110mg/kg,持续喂养78周。观察小鼠日常表现,检测体重、摄食量、血常规指标、血清生化指标等并进行大体剖检和组织病理学观察,计算脏器重量、脏器系数,骨髓细胞微核和肿瘤发生率。结果病理解剖和HE染色结果表明,给药组的肝脏,肾脏,肾上腺,睾丸和子宫均出现明显的病理学损伤变化。乙酰甲喹能够引起骨髓细胞微核的增加,致癌的潜伏期为49周,且第一例出现在低剂量雌性小鼠,确诊为恶性乳腺癌。低剂量组出现肿瘤块的小鼠数目明显高于中剂量和高剂量组。肿瘤的类型包括乳腺癌,血管癌,甲状腺癌,肾上腺皮质瘤和皮下纤维腺瘤等。结论乙酰甲喹为遗传毒性致癌物,长期暴露于乙酰甲喹可引起肝毒性,肾毒性和生殖毒性。

关键词：乙酰甲喹卡巴氧

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喹噁啉类原型及其主要代谢物的遗传毒性研究

喹噁啉类原型及其主要代谢物的遗传毒性研究

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中国毒理学会第七次全国会员代表大会暨中国毒理学会第六次中青年学者科技论坛

作者：刘倩莹雷志鑫罗讯 Ihsan Awais 刘相莲戴梦红郝海红王旭袁宗辉国家兽药残留基准实验室(HZAU)/农业部兽药残留检测重点实验室/农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室(武汉)华中农业大学动物医学院

目的喹噁啉类药物是一类具有广谱抗菌促生长作用的化合物,主要品种有卡巴氧,喹乙醇,乙酰甲喹,喹烯酮和喹赛多。喹噁啉类化合物母环结构中的氮氧基团还原是该类化合物的只要代谢方式。尽管其遗传毒性的研究已开展多年,但研究的关注点主... 详细信息

目的喹噁啉类药物是一类具有广谱抗菌促生长作用的化合物,主要品种有卡巴氧,喹乙醇,乙酰甲喹,喹烯酮和喹赛多。喹噁啉类化合物母环结构中的氮氧基团还原是该类化合物的只要代谢方式。尽管其遗传毒性的研究已开展多年,但研究的关注点主要在原型药物上,无法证实遗传毒性与原型和代谢物之间的关系。另外,对于喹噁啉类代谢物的遗传毒性机制也尚不甚清楚。基于此,我们依据农业部《新兽药特殊毒性试验方法》和美国FDA要求,开展了喹噁啉类原型及其主要N-O基团还原代谢物的遗传毒性研究。方法采用四项遗传毒性组合实验,即小鼠淋巴瘤细胞基因突变实验,鼠伤寒沙门氏菌基因突变试验,体外染色体畸变实验,体内小鼠骨髓微核试验,对喹噁啉类的主要6个N-O基团还原的代谢物进行了遗传毒性研究。采用小鼠淋巴瘤细胞基因突变实验对喹噁啉类的5个原型进行了遗传毒性评价。结果 N1脱氧乙酰甲喹,脱二氧乙酰甲喹和脱二氧卡巴氧除在鼠伤寒沙门氏菌基因突变试验中为阴性外,在其余的三个遗传毒性实验中均为阳性,且其遗传毒性大小与原型一致,即为N1脱氧乙酰甲喹>脱二氧乙酰甲喹>脱二氧卡巴氧。脱二氧喹乙醇,N1脱氧喹烯酮,N4脱氧喹烯酮在四项遗传毒性试验中均为阴性。喹噁啉类原型在小鼠淋巴瘤细胞基因突变实验均为阴性。结论喹赛多不具有致突变作用。乙酰甲喹和卡巴氧的遗传毒性是由原形及其代谢物共同引起,表明了喹噁啉类的代谢物在其遗传毒性中发挥了重要作用。因此,对其代谢物的遗传毒性应高度关注。鉴于喹噁啉类具有相同的母环结构,推测侧链的差异是该类化合物的遗传毒性产生的主导因素。本研究从代谢物的角度阐释了喹噁啉类的遗传毒性机制,表明了喹噁啉类的代谢物在其遗传毒性中发挥了重要作用,因此需谨慎对待喹噁啉类药物临床使用的安全问题。

关键词：喹噁啉类代谢物毒性机制基因突变喹噁啉类药物乙酰甲喹

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抗菌药物主要作用靶点的研究进展

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中国抗生素杂志 2017年第1期42卷 13-19页

作者：张鹤营潘源虎谢书宇黄玲利袁宗辉国家兽药残留基准实验室(HZAU) 华中农业大学国家兽药安全评价实验室农业部兽药残留检测重点实验室农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室武汉430070

抗菌药对预防和治疗细菌感染性疾病发挥了重要作用,细菌耐药性的出现并且在病原微生物中的传播和升级,使得抗感染治疗面临严峻的挑战。研发新型高效的抗菌药对于抵抗日益严重的耐药性具有重要意义,而基于新的作用靶点是新型抗菌药研发... 详细信息

抗菌药对预防和治疗细菌感染性疾病发挥了重要作用,细菌耐药性的出现并且在病原微生物中的传播和升级,使得抗感染治疗面临严峻的挑战。研发新型高效的抗菌药对于抵抗日益严重的耐药性具有重要意义,而基于新的作用靶点是新型抗菌药研发的重要途径。本文将近年抗菌药靶点研究方面的新进展进行综述,以期对我国新型抗菌药的研发提供借鉴。

关键词：抗菌药耐药性作用靶点

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