检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：刘爱梅潘源虎陈冬梅陶燕飞程古月刘振利袁宗辉王旭国家兽药残留基准实验室(华中农业大学) 农业部兽药残留检测重点实验室农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室(武汉) 华中农业大学动物医学院

[目的]四环素类抗生素多西环素与大环内酯类抗生素阿奇霉素联合应用是为了提高疗效和延缓细菌耐药性的产生,临床上常用于治疗支原体感染以及呼吸系感染。然而,一些报道表明,这两种药物联合导致肝脏损伤,且致肝损害的分子机制尚不清楚,因... 详细信息

[目的]四环素类抗生素多西环素与大环内酯类抗生素阿奇霉素联合应用是为了提高疗效和延缓细菌耐药性的产生,临床上常用于治疗支原体感染以及呼吸系感染。然而,一些报道表明,这两种药物联合导致肝脏损伤,且致肝损害的分子机制尚不清楚,因此,本研究的目的是探索多西环素和阿奇霉素致肝损害的潜在分子机制,为预防和治疗这两种药物联合使用导致的肝损伤提供重要的参考价值。[方法]本研究以L02细胞为研究模型模型,单一和联合药物孵育细胞后,通过探索qPCR、Western blot检测代谢酶CYP1A1和CYP1B1,以及氧化应激基因HSP70、HO-1、NQO1、GCLC、AHR、ARNT、PXR和Nrf2的表达;用氧化应激指标检测试剂盒(8-OHdG、MDA、GSH、SOD、LDH和ROS)的变化;并且超表达和干扰CYP1A1和CYP1B1后加入药物,检测代谢酶在药物诱导的氧化应激中的作用。[结果]实验结果表明,多西环素和阿奇霉素以及联合使用可增加代谢酶CYP1A1和CYP1B1的表达,且氧化应激基因和指标也增加。同时,通过超表达或干扰CYP1A1和CYP1B1后加药,更加重了细胞的损伤,表明CYP1A1和CYP1B1介导了多西环素和阿奇霉素的氧化损伤。[结论]综上所述,本研究发现多西环素和阿奇霉素以及联合使用可通过CYP1A1和CYP1B1表达水平的增加而引起药物的氧化损伤,这将为多西环素和阿奇霉素以及联合用药时引起的药物性氧化肝损伤的治疗和预防提供参考价值。

关键词：多西环素阿奇霉素氧化损伤 CYP450酶

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PGC-1α在T-2毒素引起的氧化应激中的作用研究

PGC-1α在T-2毒素引起的氧化应激中的作用研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会

作者：郭璞彭大鹏刘振利谢长清袁宗辉王旭国家兽药残留基准实验室(华中农业大学) 农业部兽药残留检测重点实验室农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室(武汉) 华中农业大学动物医学院

[目的]T-2毒素是单端孢霉烯族毒素中毒性最强的毒素,长期威胁畜禽动物和人类的健康。其毒素作用主要包括诱导机体产生氧化应激,诱导细胞凋亡等。目前T-2毒素细胞凋亡通路的研究比较充分,然而T-2毒素引起的氧化应激的机制尚未得到较好的... 详细信息

[目的]T-2毒素是单端孢霉烯族毒素中毒性最强的毒素,长期威胁畜禽动物和人类的健康。其毒素作用主要包括诱导机体产生氧化应激,诱导细胞凋亡等。目前T-2毒素细胞凋亡通路的研究比较充分,然而T-2毒素引起的氧化应激的机制尚未得到较好的阐释。PGC-1α作为转录共激活因子,与线粒体生物合成与代谢及抗氧化应激密切相关。但该基因在T-2毒素引起的氧化应激中发挥的作用尚不明确。[方法]本研究以大鼠脑垂体瘤细胞(GH3细胞)为模型,验证PGC-1α是否在T-2毒素作用下参与氧化应激的调控。通过RNAi和过表达试验进一步验证其相互作用方式。[结果]在T-2毒素作用GH3细胞后10,40 nMT-2毒素处理GH3细胞24小时后,PGC-1α的表达水平分别达到了1.60±0.07和12.35±0.59倍,Tfam的表达水平分别达到了1.34±0.18和2.98±0.15倍,说明10,40 nM T-2毒素显著增加了GH3细胞中PGC-1α和Tfam基因表达水平。同时western blot试验结果显示,10,40 nM T-2毒素处明显增加了GH3细胞中PGC-1α和TFAM蛋白表达水平。RNAi试验显示,GH3细胞在不干扰PGC-1α时,Tfam的基因水平显著增加。但是在干扰了PGC-1α后,Tfam的基因水平显著降低。Western blot结果与基因表达结果相似。此外,干扰了PGC-1α后,检测到抗氧化因子SOD和GSH-Px的活力都上升。[结论]PGC-1α在T-2毒素处理的GH3细胞中高表达,其在调控GH3细胞中线粒体转录因子Tfam的表达起着关键性作用,是细胞抵抗氧化应激的一个重要的因子,为后期进行以PGC-1α为靶点的抗氧化应激靶向研究奠定了基础。

关键词： PGC-1α 氧化应激 T-2毒素

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T-2毒素的垂体毒性机制研究

T-2毒素的垂体毒性机制研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会

作者：王旭黄玲利程古月袁宗辉国家兽药残留基准实验室(华中农业大学)、农业部兽药残留检测重点实验室农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室(武汉) 华中农业大学动物医学院

T-2毒素是镰刀菌(Fusarium)产生的次级代谢产物,也是A类单端孢霉烯族毒素中毒性最强的一种。其在自然界中分布非常广泛,大麦、小麦、燕麦、黑麦和玉米,以及储存的谷物均为T-2毒素的污染对象。T-2毒素对食品动物的一个重要毒性作用是生... 详细信息

T-2毒素是镰刀菌(Fusarium)产生的次级代谢产物,也是A类单端孢霉烯族毒素中毒性最强的一种。其在自然界中分布非常广泛,大麦、小麦、燕麦、黑麦和玉米,以及储存的谷物均为T-2毒素的污染对象。T-2毒素对食品动物的一个重要毒性作用是生长抑制,微量T-2毒素即可导致动物体重显著下降,经济损失严重,然而其毒性机制尚待深入开展。本研究发现微量T-2毒素能进入大脑,引起垂体病理损伤,导致垂体合成和分泌的生长激素(GH)水平明显下降。以GH3细胞和小鼠为模型,从炎性因子、氧化应激、信号通路角度,结合体内和体外试验揭示T-2毒素对垂体的损伤作用及其机制。研究表明,T-2毒素可下调GH合成中关键上游转录因子Pit-1基因表达和降低GH基因mRNA含量,导致GH释放异常。细胞内一氧化氮合酶(NOS)活性升高,细胞内NO大量释放,破坏线粒体膜,激活caspase信号通路,引起GH合成与分泌异常。基于基因组和蛋白组的研究表明,T-2毒素作用于GH3细胞后激活PKR和HCK激酶,诱发核糖体应激反应,激活JNK通路,同时发现氨酰-tRNA合酶降低、蛋白二硫键异构酶,从而抑制GH合成;激活内质网应激晚期反应,内质网分子伴侣下调表达,导致GH生成量降低;干扰囊泡转运过程,降低GH分泌。基于基因组学结果,研究转录因子AKNA介导的T-2毒素所致生长抑制机理,发现T-2毒素可以诱导PKA/CREB和NF-κB/p65信号通路中关键蛋白CREB和p65蛋白的磷酸化,促使磷酸化p65进入细胞核,核内磷酸化的CREB和p65通过直接与AKNA启动子结合抑制AKNA的转录活性,使AKNA基因表达下调,引起GH和炎性因子表达水平显著下调,表明AKNA参与调控GH和炎性因子的表达,为T-2毒素介导的GH缺乏症提供了新的下游分子靶标。为揭示T-2毒素所致氧化应激的机制,从线粒体氧化应激、线粒体结构和功能变化、呼吸链核心铁硫蛋白亚基Ndufs3和线粒体生物合成调控因子NRF-2在T-2毒素引起的线粒体功能变化中的作用、线粒体自噬的角度揭示活性氧、线粒体损伤及自保护机制。综上所述,炎性因子高表达及线粒体损伤是T-2毒素所致垂体毒性的重要机制,该研究将为拮抗T-2毒素所致动物生长提供依据。

关键词： T-2毒素线粒体垂体毒性氧化应激

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胞内劳森菌检测方法研究进展

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中兽医医药杂志 2019年第2期38卷 93-96页

作者：罗万和程会娟李振霞李超周凯翔谢书宇华中农业大学国家兽药残留基准实验室(HZAU)国家兽药安全评价实验室农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室湖北武汉430070 郑州师范学院河南郑州450044

胞内劳森菌感染给畜牧业造成了巨大损失,其早期的检测与诊断显得尤为重要。本文对胞内劳森菌现有的检测方法组织病理学、血清免疫学和分子生物学等方法进行阐述,分析了各种方法的优势与不足,为临床胞内劳森菌感染的有效鉴定提供指导。

关键词：胞内劳森菌检测组织病理学血清免疫学

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基于活性-结构的解热镇痛药物先导化合物的研究

基于活性-结构的解热镇痛药物先导化合物的研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会

作者：陆启荣潘源虎陈冬梅陶燕飞程古月刘振利袁宗辉王旭国家兽药残留基准实验室(华中农业大学)、农业部兽药残留检测重点实验室农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室(武汉) 华中农业大学动物医学院

[目的]畜禽的炎症、疼痛与发热给畜牧业带来了巨大的损失,但目前中国兽医药典批准使用的非甾体类抗炎药很少,且均存在一定程度的胃肠道毒性以及部分的心血管风险。因此本研究拟从扎托布洛芬(ZPF)及其主要代谢物与COX-1和COX-2酶活性以及... 详细信息

[目的]畜禽的炎症、疼痛与发热给畜牧业带来了巨大的损失,但目前中国兽医药典批准使用的非甾体类抗炎药很少,且均存在一定程度的胃肠道毒性以及部分的心血管风险。因此本研究拟从扎托布洛芬(ZPF)及其主要代谢物与COX-1和COX-2酶活性以及与COX-2相互作用的活性位点的角度,诠释ZPF和代谢物活性差异的原因,以期能够从活性位点的角度提高非甾体抗炎药的活性并减少毒副作用,进而设计新型先导化合物,为高效、低毒兽用解热镇痛药的开发奠定坚实基础。[方法]本实验以ZPF为研究对象,合成并鉴定其主要代谢物M-2,M-3和M-5。应用COX-1和COX-2抑制筛选试剂盒对ZPF及其主要代谢物进行活性抑制实验;SYBYL软件研究ZPF及其主要代谢物对COX-2关键性活性位点的分析,依据SIFT和Polyphen网站对活性位点的突变位点进行分析并构建其COX-2的野生型,突变型真核表达载体。利用中国仓鼠卵巢细胞(CHO)建立COX-2野生型和突变型抑制剂筛选模型,以花生四烯酸为底物,PGE2放免试剂盒测定COX-2野生型和突变型产生的PGE2的活性,进一步确定其主要的活性位点,并应用SYBYL软件设计并模拟新型的解热镇痛先导化合物。[结果]结果显示,以ZPF为原料,成功合成出其主要代谢物M-2,M-3和M-5。ZPF及其主要代谢物对COX-2抑制活性大小为ZPF>M-2>M-5>M-3,COX-1抑制活性大小为ZPF>M-5>M-3>M-2。SYBYL联合SIFT和Polyphen分析出ZPF及主要代谢物对COX-2的关键性活性位点为ARG120,TYR355和SER530。CHO模型进一步证明TYR355和SER530为COX-2的关键性位点。综合分析显示母核的硫氧化与SER530形成的氢键有助于进一步抑制COX-2的酶活性,而羰基还原形成的羟基与SER530形成的氢键,丧失了抑制COX-2的酶活性功能。推测在硫氧化的对位更换成比其极性弱的基团有助于提高活性,并应用SYBYL进行了先导化合物设计。[结论]综上所述,TYR355和SER530为ZPF和M-2抑制COX-2的关键性位点,M-2母核的硫氧化以及其对位更换成极性弱的基团有助于提高COX-2抑制活性,因此新型解热镇痛先导化合物的研发可基于SYBYL软件并依据关键活性位点进行设计。

关键词：扎托布洛芬代谢物活性位点结构先导化合物

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DNA甲基化在T-2毒素致炎性细胞因子表达中的作用

DNA甲基化在T-2毒素致炎性细胞因子表达中的作用

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会

作者：刘爱梅吴庆华潘源虎陈冬梅陶燕飞程古月刘振利袁宗辉王旭国家兽药残留基准实验室(华中农业大学) 农业部兽药残留检测重点实验室农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室(武汉) 华中农业大学动物医学院

[目的]T-2毒素是由镰刀菌产生的一种毒性很强的单端孢霉烯族毒素,对人类和动物的生命健康造成很大的损伤与危害。本实验旨在从DNA甲基化和炎症角度诠释T-2所致肝细胞损伤的分子机制,以期为T-2毒素新型解毒剂的研制和开发提供一定的理论... 详细信息

[目的]T-2毒素是由镰刀菌产生的一种毒性很强的单端孢霉烯族毒素,对人类和动物的生命健康造成很大的损伤与危害。本实验旨在从DNA甲基化和炎症角度诠释T-2所致肝细胞损伤的分子机制,以期为T-2毒素新型解毒剂的研制和开发提供一定的理论依据。[方法]本研究一方面以大鼠为实验动物模型,开展T-2毒素(2 mg/kg bw) 7天毒性试验,检测T-2毒素对大鼠肝中炎性细胞因子的表达以及炎性因子启动子区甲基化的变化,探索T-2毒素下DNA甲基化和炎性细胞因子的关系;另一方面以BRL细胞为模型,应用qPCR、Western blot、亚硫酸氢盐测序(BSP)和流式细胞术在分子水平检测细胞损伤。此外,用DNA甲基化抑制剂和T-2毒素的联合孵育细胞,来更进一步证明DNA甲基化参与T-2毒素所致的炎性细胞因子的表达。[结果]实验结果表明,T-2毒素导致大鼠肝炎性增生,且炎性细胞因子(IL-6、IL-1β、IL-11、IL-1α和TNF-α)大量表达;同时T-2毒素显著提高全基因组5-甲基胞嘧啶(5-mc)水平和肝损伤部位的DNA甲基转移酶(DNMT1,DNMT3a)水平。值得注意的是,在T-2毒素作用下,DNA去甲基化直接增加了炎性细胞因子IL-11、IL-6、IL-α和TNF-α的表达。DNA甲基化抑制剂联合T-2毒素直接或间接诱导炎症细胞因子的产生,加重细胞凋亡。[结论]综上所述,本研究发现DNA甲基化介导了T-2毒素诱导的肝损伤中炎症细胞因子的表达,表明DNA甲基化是T-2毒素诱导肝毒性的一个潜在机制,这为后期进一步诠释T-2毒素所致的细胞损伤机制以及拮抗T-2毒素炎性的新型药物的研发奠定科学基础。

关键词： DNA甲基化 T-2毒素炎性拮抗

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基于lncRNA的T-2毒素致细胞损伤的机制初步探究

基于lncRNA的T-2毒素致细胞损伤的机制初步探究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会

作者：陆启荣彭大鹏陶燕飞陈冬梅程古月刘振利谢长清袁宗辉王旭国家兽药残留基准实验室(华中农业大学) 农业部兽药残留检测重点实验室农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室(武汉) 华中农业大学动物医学院

[目的]T-2毒素是由镰刀菌产生的一种毒性很强的单端孢霉烯族毒素,对人类和动物的生命健康造成很大的损伤与危害。本实验旨在从长链非编码RNA (lncRNA)角度诠释T-2所致的细胞损伤的机制研究,以期为T-2毒素新型解毒剂的研制和开发提供一... 详细信息

[目的]T-2毒素是由镰刀菌产生的一种毒性很强的单端孢霉烯族毒素,对人类和动物的生命健康造成很大的损伤与危害。本实验旨在从长链非编码RNA (lncRNA)角度诠释T-2所致的细胞损伤的机制研究,以期为T-2毒素新型解毒剂的研制和开发提供一定的理论依据。[方法]本研究一方面以大鼠为实验动物模型,开展T-2毒素(2mg/kg bw)7天毒性试验,检测T-2毒素对大鼠体重、生长激素、血常规指标和血生化指标的变化以及脑垂体基因芯片检测,寻找与T-2毒素所致的细胞损伤相关的lncRNA;另一方面以GH3细胞为模型,应用cDNA末端快速扩增技术扩增细胞损伤相关的lncRNA全长,并应用生物学软件对其分子特征和编码能力进行分析。此外,采用核质分离实验研究其细胞内分布情况。构建lncRNA的过表达载体并联合10 nM和40 nM T-2毒素研究其对细胞损伤相关基因(CYP450,线粒体呼吸链,凋亡,炎症)的影响,并应用流式细胞仪分析其对活性氧和凋亡的影响。[结果]实验结果表明,T-2毒素能明显导致大鼠体重和生长激素降低,谷草转氨酶和血糖浓度升高,尿素和甘油三酯降低。lncRNA-mRNA基因芯片联合分析显示lncRNA靶基因主要富集于线粒体分裂、代谢进程调控、个体和器官发育、应激反应调控等生物学进程。通过对细胞损伤相关的基因MSTRG10078全长和分子特征分析显示MSTRG10078全长为1964 bp,主要位于大鼠的1号染色体且不具有蛋白编码能力,命名为lncMSTRG10078。lncMSTRG10078在细胞核和细胞质均有分布,其胞核和胞质的分布比大约为5.5:4.5。lncMSTRG10078过表达能够在一定程度的拮抗10 nM和40 nM T-2毒素所引起的细胞损伤,集中体现在逆转40 nMT-2毒素所引起的细胞凋亡、线粒体功能改变、炎性因子释放、活性氧的产生以及线粒体相关代谢酶的变化,以此来拮抗T-2毒素对细胞的损伤作用。[结论]本研究发现lncMSTRG10078在T-2毒素所致的细胞损伤中的潜在机制,对T-2毒素产生的细胞损伤作用具有一定拮抗作用,为后期进一步诠释T-2毒素所致的细胞损伤机制以及新型T-2毒素核酸药物拮抗剂的研发奠定科学基础。

关键词： lncRNA T-2毒素细胞损伤拮抗

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鸡毒支原体对大环内酯类抗生素的耐药判定标准研究现状

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中国兽医学报 2018年第12期38卷 2414-2423,2431页

作者：黄安雄王淑歌李俊黄玲利王旭刘振利郝海红袁宗辉华中农业大学国家兽药残留基准实验室农业部兽药残留检测重点实验室国家兽药安全评价实验室农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室

鸡的慢性呼吸道疾病是鸡常发的一种传染病,对家禽养殖业有非常大的危害,其致病菌主要是鸡毒支原体。大环内酯类抗生素是治疗鸡毒支原体病的常用药物之一,但由于不规范用药的问题,致使鸡毒支原体对大环内酯类抗生素产生了一定的耐药性,... 详细信息

鸡的慢性呼吸道疾病是鸡常发的一种传染病,对家禽养殖业有非常大的危害,其致病菌主要是鸡毒支原体。大环内酯类抗生素是治疗鸡毒支原体病的常用药物之一,但由于不规范用药的问题,致使鸡毒支原体对大环内酯类抗生素产生了一定的耐药性,而且呈现越来越严重的趋势。为了指导临床合理用药,进而有效控制耐药性问题,制定耐药判定标准是必要条件。现综述了鸡毒支原体对大环内酯类抗生素耐药判定标准的研究现状,根据美国和欧盟耐药判定标准制定程序,为我国制定鸡毒支原体对大环内酯类抗生素的耐药判定标准奠定基础。

关键词：鸡毒支原体大环内酯类耐药判定标准

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土拉霉素对离体恒化器模型中人肠道菌群的影响

土拉霉素对离体恒化器模型中人肠道菌群的影响

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会

作者：刘春贝周生喜程古月王玉莲郝海红袁宗辉国家兽药残留基准实验室(华中农业大学)/农业部食品兽药残留检测重点实验室/华中农业大学农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室(武汉) 湖北省武汉市洪山区华中农业大学动物医学院

[背景]土拉霉素作为新一代大环内酯类动物专用抗生素具有众多优点,然而其微生物安全性评价尚有不足,因此有必要进行土拉霉素残留对人肠道菌群影响的系统全面的研究,从而为制定更合理的ADI提供参考数据。[材料方法]采用体外连续培养的恒... 详细信息

[背景]土拉霉素作为新一代大环内酯类动物专用抗生素具有众多优点,然而其微生物安全性评价尚有不足,因此有必要进行土拉霉素残留对人肠道菌群影响的系统全面的研究,从而为制定更合理的ADI提供参考数据。[材料方法]采用体外连续培养的恒化模型来评估土拉霉素对人肠道菌群的影响。模型中添加不同浓度土拉霉素(0,0.1,1,10和100μg/mL),对给药前后两个重要的微生物学端点(定植屏障功能和耐药性变化)进行考察。通过监测四种优势菌数量变化、代谢产物短链脂肪酸的变化和致病菌沙门氏菌的

关键词：土拉霉素大环内酯类耐药性屏障功能离体恒化器模型人肠道菌群

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鸡毒支原体对达氟沙星的耐药判定标准研究

鸡毒支原体对达氟沙星的耐药判定标准研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会

作者：王淑歌谷宇锋黄安雄黄玲利谢书宇陶燕飞陈冬梅袁宗辉郝海红国家兽药残留基准实验室(华中农业大学)/农业部食品兽药残留检测重点实验室/华中农业大学农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室(武汉) 湖北省武汉市洪山区华中农业大学动物医学院

[背景]为合理应用达氟沙星治疗鸡毒支原体（MG）感染并减缓其耐药性产生,本课题系统研究了达氟沙星对鸡毒支原体的野生型临界值CO、药效学临界值CO和临床临界值CO,并制定了鸡毒支原体对达氟沙星的耐药判定标准。[材料方法]微量肉汤稀释... 详细信息

[背景]为合理应用达氟沙星治疗鸡毒支原体（MG）感染并减缓其耐药性产生,本课题系统研究了达氟沙星对鸡毒支原体的野生型临界值CO、药效学临界值CO和临床临界值CO,并制定了鸡毒支原体对达氟沙星的耐药判定标准。[材料方法]微量肉汤稀释法测定了达氟沙星对111株临床分离鸡毒支原体的最小抑菌浓度,ECOFFinder分析其MIC分布,非线性回归分析得到不同置信区间下野生型临界值CO。鸡胚毒力实验筛选出强致病株MG19。应用HPLC方法和Winnolin软件等分析了在体内和半体内环境中达氟沙星对

关键词：鸡毒支原体氟沙星判定标准

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